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1、精品_精品资料_1、高效液相色谱是如何实现高效、快速、灵敏的.解：气相色谱 理论和 技术上的成就为 液相色谱 的进展制造条件, 从它的高效、 高速和高灵敏渡得到启示,采纳5 一 10 四微粒出定相以提高柱效,采纳高压泵加快液体流淌相的流速; 设计高灵敏度、死体积小的紫外、荧光等检测 器,提高检测灵敏度,克服经典液相色谱曲缺点,从而到达高效、快速、灵敏.2、与气相色谱法相比高效液相色谱有哪些优点和不足.解：气相色谱的 分析 对象是在校温下具有肯定的挥发性、对热稳固购物质. 因此它只限于分析气体和沸点低的化合物或挥发性的衍生物.而高效液相色谱由于以液体作为流淌相,只要被分析的物质在选用的流淌相中有
2、肯定的按解度,便可以分析, 所以适用性广, 不受样品挥发性和热稳固性的限制,特殊适合于那些沸点高、 极性强、 热稳固性差的化合物,例如, 生化物质和药物、离子型化合物、热稳固性差的自然产物等.在目前已知的有机化台物中,只有 20%样品可不经 化学 处理而能中意的用气相色谱别离,80%的有机化合物要用高效液相色谱分析.气相色谱中流淌相是惰性的,它对组分没有作用力, 仅起运载作用、 而高效液相色谱的流淌相不仅起运载作用, 而且流淌相对组分有肯定亲合力,可以通过转变流淌相种类和组成提高别离的挑选性,另外可作流淌相的化合物多,挑选余的广.与气相色谱相比, 高效液相色谱的另一个优点是样品的回收比较简洁,
3、 只要开口容器放在柱子末端, 就可以很简洁的将所别离的各组分收集. 回收是定量的, 可以用来提纯和制备具有足够纯度的单一物质.高效液相色谱不足的是,日前检测器的灵敏度不及气相色谱.必需特殊留意“柱外效应”对柱效率及色谱别离的影响.3、试比较气相色谱与液相色谱的H-u 曲线,分析产生不同的缘由.解：从图可看出,气相色谱和液相色谱得到的H-u 曲线, 外形迥然不同, 流淌相的流速对柱效的影响也不一样,在气相色谱的H-u 曲线上,塔板高度H随 u 变化呈双曲线 . 曲线有一最低点,这时柱效最高,板高最小,流速最正确.而液相色谱H-u 曲线,未显现流速降低板高增加的现象,由于最正确流速趋近于零,一般观
4、看不到最低板高相对应的最正确流速.在正常的情形下,流速降低,板高H总是降低的, 这与气相色谱明显不同.在气相色谱中流淌相流速增大,柱效呈直线降低,而在液相色谱中,流淌相流速增大,柱效平缓降低.其主要缘由是液相色谱的流淌相为液体,液相的扩散系数Dm很小,通常仅为气相扩散系数的可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_104105 分之一,所以分子扩散项在低u 时也不起多大作用、因此液相色谱H-u 曲线未能显现流速降低,板高增加现象.到高速时,虽然柱内线速提高,但固定相和流淌相的传质都能 很快进行,故H-u 曲线上升缓慢.4、简述液相色谱中引起色谱峰扩展的主要因素,如何削减谙带扩张、提高柱效
5、.解：液相色谱中引起色诺峰扩展的主要因素为涡流扩散、流淌相传质、 停留流淌相传质及柱外效应.在液相色谱中要减小谱带扩张,提高柱效,要削减续料颗粒直径,减小境料孔穴深度,提高装填的匀称性, 采纳低粘度溶剂作流淌相,流速尽可能低, 同时要尽可能采纳死体积较小的进样器、检测器、接头和传输管线等.5、为什么要提出折合参数.有何特点 .解：我们知道色谱操作条件对板高是有影响的.Giddings发觉, 固定相相同, 填充良好, 共是粒度 dp 不同,因而 H-u 曲线不同,在液相色谱中,培板高度是粒度的函数,为了比较不向色谱条件下的板高H. 提出折合参数,包括折合板高、折合流速、折合柱长.其特点是对于不同
6、粒度的填料能得到相同的H ur曲线,因此可以在相同的条件下比较不同填料的柱效.6、色谱柱 A 长度为 15cm,载体粒度为5m.另一 B 柱长为 30cm,载体粒度为 10m,两柱的柱效相等吗 .解：A 柱的折合柱长为 30000,B 柱的折合柱长也为30000,说明组分在两根柱内从柱人口到出口都经过 30000 个载体颗粒 . 两校的柱效相等.7、何谓梯度淋洗,适用于哪些样品的分析.与程序升温有什么不同.解：梯度淋洗就是在别离过程中. 让流淌相的组成、 极性、pH 值等按定程序连续变化.使样品中各组分能在最正确的k 下出峰. 使保留时间短、 拥挤不堪、甚至重叠的组分,保留时间过长而峰形扁平的
7、组分获得很好的别离,特殊适合样品中组分的k 值范畴很宽的复杂样品的分析. 梯度淋洗特别类似气相色谱的程序升温,两者的目的相同. 不同的是程序升温是通过程序转变柱温.而液相色谱是通过转变流淌相组成、极性、pH 值来到达转变 k 的目的.解：流淌相中溶解气体存在以下几个方面的害处,气泡进入检测器, 引起光吸取成电信号的变化,基线突然跳动,干扰检测; 溶解在溶剂中的气体进入色谱柱时,可能与流淌相或8、流淌相为什么要预先脱气.常用的脱气方法有哪几种.可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_因此,使用前必需进行脱气处理.常用的脱气法有以下几种：1加热脱气法 ; 2抽吸脱气法 ; 3吹氦脱气法 ;
8、 4超声波振荡脱气法.固定相发生化学反应 ; 溶解气体仍会引起某些样品的氧化降解. 对别离和分析结果带来误差.9、按固定相孔径大小分类,液相色谱固定相有哪几类.各有什么特性及适用范畴.解：从固定相的孔隙深度考虑,液相色谱固定相分为外表多孔型薄壳型和全多孔型全孔型两类.外表多孔型固定相多孔层厚度小. 孔浅,相对死体积小,出峰快速,柱效高,颗粒较大, 渗透性好,由于孔浅,梯度淋洗时,当流淌相成分转变后. 孔内外流淌相成分能快速到达平稳,机械强度高,装柱简洁,其不足的是由于多孔层厚度小,因而柱容量小,最大答应样品量受到限制,适用于比较简洁的样品分析及快速分析.全多孔型固定相,由于颗粒很细,孔仍旧很浅
9、. 传质速度较快,柱效高.梯度淋洗时孔内外流淌相成分的平稳速度仍旧较快. 其最大特点是柱容量大,最大答应样品量是外表多孔型的 5 倍,但装填的什于渗透性低,因而需要更高的操作压力. 制柱比外表多孔型的难.这种固定相特殊有利于痕量组分及多组分复杂混合物的别离分析.10、什么叫化学键合色谱. 与液液色谱相比有何优点.解：通过化学反应,将固定液键合到载体外表,此种固定相称为化学键合固定相; 采纳化学键合固定相的色谱法,称为化学键合色谱.与液液安排色谱相比,键合色谱法的主要优点：1化学键合固定相特别稳固,在 使用过程中不流失.2相宜用梯度淋洗.3适合于 k 范畴很宽的样品. 4由于键合到载体外表官能团
10、,既可是非极性的,也可是极性的,因此应用面广.11、挑选题在液相色谱中,常用作固定相合相基体的物质是A. 分子筛 B. 硅胶 c 氧化铝 D. 活性炭解： B. 硅胶.要形成化学键合固定相, 所用的基质材料应有某种化学反应活性,在四种固体固定相中只有硅胶合有硅醇基,是能进行键合的活性官能团.12、高效液相色谱柱有哪几种类型. 细径柱有什么优点 .解：高效液相色谱拄大致可分为三种类型：内径小于2mm的称为细管径或微管径柱; 内径在 25mm范畴内的是常规高效液相色谱柱; 内径大于 5mm的一般称为半制备柱或制备柱.可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_细管径柱的主要优点是：1别离效能高
11、.2流淌相最正确流速低,消耗量少.3可采纳多种检测器,便于联用CLC MS,CLC-FTIR. 4采纳细而短的毛细管柱可以提高分析速度,实现快速分析.比较正相和反相的区分.解：流淌相的极性比固定相的极性强的色谱体系叫反相色谱.例如以十八烷基硅胶键合13、什么叫反相色谱.试从固定相、流淌相、流出次序、流淌相极性的影响等几个方面相 ODS为固定相,以甲酵 / 水作流淌相,是典型的反相色谱.正相色谱和反相色谱这两种操作模式的主要区分见下表：正相和反相色谱的区分比较项目正相色谱反相色谱固定相流淌相流出次序流淌相极性的影响极性非弱极性极性组分 k 大极性增加, k 减小非弱极性极性极性组分 k 小极性增
12、加, k 增大14、对液相色谱流淌相有何要求.解：用作液相色谱流淌相的溶剂,其纯度和化学特性必需满意色谱过程中稳固性和重复 性的要求. 对样品要有肯定的溶解才能,粘度小, 化学稳固性好, 防止发生不行逆的化学吸附.溶剂应与检测器相匹配,不干预所使用检测器的工作,制备色谱的溶剂应不干扰对别离各组分的回收. 除此以外,挑选的溶剂对所给定的样品组分具有合适的极性和良好的挑选性.可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_15、在 1502mm硅胶柱流淌相为已烷 / 甲醇 150： 2,紫外检测器色谱条件下别离丙烯酰胺,判定以下组分的出峰次序,为什么.解：在给定的色谱条件下,组分B 先出峰,组分A
13、 后出峰.以硅胶为固定相,己烷/ 甲醇 150： 2为流淌相,该体系为正相色谱,样品的极性AB,在正相色谱体系极性小的组 分先出峰,极性大的组分后出峰,所以出峰次序为B 先出, A 后出.16、在硅胶往上,用甲苯为流淌相,某组分的保留时间为30min ,假如改用四氯化碳或乙醚为流淌相,试指出选用哪一种溶剂能削减该组分的保留时间. 为什么 .解：该体系为正向色谱体系.在该体系中流淌相的极性增大保留值减小.流淌相甲苯、 四氯化碳及乙醚的溶剂强度参数分别是、,因此选用溶剂强度参数大于甲苯的乙醚,可缩短该化合物的保留时间.17、在高效液相色谱中,组分和溶剂分子之间存在哪几种作用力.解：存在色散力、偶极
14、作用、氢键作用和介电作用等四种作用力.18、什么是溶剂极性参数与溶剂强度. 它们之间的关系如何.解：溶剂分子与溶质分子以色散力、偶极作用力、 氢键作用力及介电作用力四种方式进行相互作用的才能称为分子的“极性”,溶剂的这种才能以溶剂极性参数P表示, P值越大,溶剂的极性越强.溶剂强度指用作流淌相的溶剂,将组分从色谱柱上洗脱下来的才能.溶剂强度直接与溶剂的极性有关,而且随不同色谱体系而变,在正相色谱体系中, 溶剂极性增加,使组分从柱上洗脱下来的才能增加,即P越大的溶剂,溶剂强度越大.在反相 色谱中,溶剂极性减小,使组分从柱上洗脱下来的才能增加,即P越小的溶剂,溶剂强度越大.19、猜测在正相色谱与反
15、相色谱体系中,组分的出峰次序.解：在正相色谱体系中组分的出峰次序为：极性弱的组分,在流淌相中溶解度较大,因 此 k 值小,先出峰.极性强的组分,在固定相中的溶解度较大,因此k 值大,后出峰.在反相色谱中组分的出峰次序为：极性弱的组分在固定相上的溶解度大,k 值大,后出峰,相反极性强的组分在流淌相中溶解度大,k 值小,所以先出峰.20、在 ODS固定相上,以甲醇为流淌相,某组分的安排容量,如以乙腈为流淌相,其k增加仍是削减 . 为什么 .可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_解：据题意为反相色谱体系.k 值增加, 在反相色谱体系中, 流淌相由甲醇变为乙腈, 溶剂极性参数由变为, 增加了
16、, 但组分在流淌相中的溶解度反而减小,所以k 值增大.由增大为.21、在反相色谱中,流淌相从40%V/V甲醇水转变为60%V/V 甲醇水,问组分的调整保留值将转变多少. 为什么 . P 甲醇, P 水 =5.1 提示：对于由溶剂A 和 B 组成的二元混合溶剂,其极性可表示为Pab =a P a + b P b式中 a 和 b 分别为溶剂 A 和 B 在混合溶剂中的分数.解：在 40%配比时,混合溶剂的极性为P1在 60%配比时,混合溶剂的极性为P2P2= P2 -P2依据反相色谱体系在反相色谱中,流淌相的极性变弱 P由变为7.14 ,溶剂强度增加,洗脱才能增加,因而使组分的调整保留时间削减到原
17、先的.22、某色谱体系采纳25%三氯甲烷 / 正己烷为流淌相,发觉组分别离不特别抱负,想通过转变流淌相的挑选性来改善别离挑选性,选用乙醚/ 正己烷为流淌相,问乙醚/ 正己烷的比例为多少, P乙醚 =5.1 提示： 流淌相挑选性的转变是通过保持溶剂强度不变时转变流淌相组成来实现的,转变前流淌相 A/B 和转变后的流淌相A/C 的组成有以下关系：解：25%的 CHCl3/ 正己烷与 37%乙醚 / 正己烷的溶剂强度相等, 但对样品的别离选锋性不同.23、什么叫离子色谱 .解：在低交换容量的别离柱上,别离样品离子,而在高交换容量的抑制柱上,通过化学反应,把具有高电导的流淌相转变为低电导的流淌相,这样
18、就可以在电导检测器上对被别离可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_样品离子进行高灵敏度的检测.这种采纳别离柱、 抑制柱和电导检测器相结合的离子交换色谱称为离子色谱.24、为什么凝胶色谱中任何组分的安排系数必需符合0K1.假如 Kl 说明什么问题 .解：由于组分的安排系数为 K=Cs/Cm , C s 与 Cm分别为组分在固定相和流淌相中的浓度,当分子直径大于固定相孔径时,此时 Cm=0, K=0.当分子直径小于孔径时,组分向孔隙内流淌相扩散,到达平稳时,一半组分在孔隙内,一半在孔隙外,此时,假设分子直径介于以上两种极限情形之间,K 肯定介于 0 与 1 之间. 可见在凝胶色谱中,任何
19、组分的安排系数为 0K1,假如 K1,这说明此时的别离方式已不是纯粹的凝胶色谱,其别离过程受到其他作用力如吸附的支配.25、某人用凝胶色谱别离一高聚物样品,别离情形很差,他转变流淌相的组成后,别离情形大为改良,这种说法对吗. 为什么 .解：这种说法不对. 在凝胶色谱中流淌相只起运载的作用,不能依靠转变流淌相的性质 和组成来改善色谱体系的挑选性.凝胶色谱的挑选性只能通过挑选合适的固定相,依据固定相孔隙的大小以及孔径分布范畴的最正确化来实现.题目中“转变流淌相组成后,别离情形大为改良”是不行能的.26、挑选题液相色谱中通用型检测器是A. 紫外吸取检测器 B. 示差折光检测器 C 热导池检测器 D.
20、 荧光检测器解： B. 示差折光检测器.A、D为挑选性检测器, C为气相色谱中通用检测器.27、为了测定邻氨基苯酚中微量杂质苯氨,现有以下固定相：硅胶、ODS键合相,以下流淌相：水甲醇、异丙醚己烷,应选用哪种固定相、流淌相. 为什么 .解：邻氨基苯酚中微量杂质苯氨测定,为了良好别离,应让苯氨先出峰,由于苯氨的极性小于邻氨基苯酚,因此应采纳正相色谱法,应选硅胶为固定相,异丙醚己烷为流淌相.28、在 ODS键合固定相,甲醇水为流淌相时试判定四种苯并二氮杂苯的出峰次序.为什么 .解：色谱条件为反相键合色谱体系,在反相色谱体系中极性大的组分k 小,第一出峰, 按四种苯并二氮杂苯的结构,出蜂次序为4 3
21、 2 1.可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_29、用多孔凝胶为固定相,流淌相为四氢呋喃,别离以下各组分,试判定各组分的出蜂次序.为什么 .解：凝胶色谱组分的出峰次序是依据分子尺寸大小,大的先出峰 . 故出峰次数为n=9、8、7.30、别离含胺类和季铵接的样品,以HClO4 溶液为固定相,以丁醇二氯甲烷己烷为流淌相, 已知组分 A 的保留时间为, 死时间为 1.0min. 在另一根柱上 . 其他条件均不转变,只将 HClO4 的浓度增加一倍,间组分A 在其次根柱上的移动速率,是在第一根柱上的几倍.解：从题意分析知,该题别离类型是正相离子对色谱,因此K 与 KBP的关系为： A 在其次根柱上的移动速率是第一根柱的倍.可编辑资料 - - - 欢迎下载