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1、南京大学医学院附属鼓楼医院南京大学医学院附属鼓楼医院顾光煜顾光煜1一、自动生化分析仪的分类 w根据反应装置：连续流动式、离心式和分立式w根据反应介质：液相化学、干式化学w根据反应通道：单通道、多通道w根据自动化程度：全自动、半自动 w根据仪器的复杂程度：小型、中型和大型w根据分析系统试剂开放程度：封闭系统、开放系统21.连续流动式生化分析仪w比例泵w空气分段w透析器w管道式，携带污染342.离心式全自动生化分析仪w几乎几乎“同步分析”w随机任选式（早期的早期的必须按项目顺序）w比色杯人工清洗？（一次性一次性）53.分立式生化分析仪w目前使用生化分析仪主要此种类型。w比色杯 袋式仪器可以自动制作
2、比色杯 比色杯可以兼作反应杯 比色杯不能作流动比色池（半自动半自动）64.干式生化分析仪 w干片分：扩散层、试剂层、指示剂和支持层。w利用“反射光度法”和“差式电位法”检测。w以液体样品中的“水”为溶剂。w理论基础：KubelkaMunk理论。75.半自动生化分析仪w光源（石英卤素灯）w常用“干涉滤光片”分光w微量流动比色池。w终点法项目通常在“仪器”外孵育，时间和温度的准确性常影响测定结果。8w例例1w临床上所指的封闭式全自动生化分析仪主要是wA 质控物封闭wB 试剂封闭wC 环境封闭wD 仪器封闭wE 技术人员封闭9w例例2w全自动生化分析仪可分为小型、中型、大型，其依据是：wA 单通道和
3、多通道数量wB 仪器可测定项目的多少wC 测定程序可否改变wD 仪器的复杂程度、功能和单位时间测试数量wE 是否可以同步分析10w例例3w全自动与半自动生化分析仪共同之处为wA 取样wB 加试剂混合wC 检测波长wD 孵育反应wE 清洗系统11w例例4w干化学式自动生化分析仪所用的光学系统为wA 分光光度计wB 原子吸光仪wC 反射比色计wD 固定闪烁计数器wE 免疫比浊计12w例例5w关于分立式全自动生化分析仪的比色杯的阐述，错误的错误的是：wA 比色杯可以是反应杯wB 比色杯可以自动制作wC 比色杯可以是流动比色池wD 比色杯可以是石英玻璃wE 比色杯可以是硬质塑料13二、自动生化分析仪的
4、安装与准备w1.工作环境 空间、电源（UPS)、避免直射阳光、环境温度和湿度、电磁辐射、化学品。w2.水 蒸馏水、去离子水、反渗透水。w3.纯水等级：一般二级 二级纯水微生物含量：最大每毫升菌落数103。14w例例6w临床生化实验室一般采用NCCLS所规定的二级纯水，其微生物菌落（CFU/ml)应低于wA 1wB 10wC 100wD 1000wE 10000015w例例7w临床生化实验室用水一般采用：wA 一级水wB 二级水wC 三级水wD 次级水wE 自来水16三、全自动生化分析仪 基本结构及工作原理w1.样品系统 w专用样品杯和直接用采血试管w凝块和气泡检出功能w自动冲洗功能w样品预稀释
5、、后稀释、加倍、标准原液系列稀释等不同的稀释方式。17w2.试剂系统w冷藏功能w液面感应及气泡检出w双试剂与多试剂w试剂瓶的防蒸发与死体积w试剂条码18w3.条形码系统w三组成部分：扫描系统、信号整形、译码器w黑条白空相间的条码符号w光电转换元件w常用条码类型：Code39,Code128等19w4.反应系统w4.1 反应盘w4.2 混合装置 多用特氟隆不沾涂层的搅拌棒w4.3 温控装置 w理想的温度波动应小于0.1w3种方式：空气浴、水浴、恒温液间接加热w强生干化学仪用空气浴恒温20w5.清洗系统 一般先用碱性液冲洗、再用酸性液冲洗、最后用去离子水冲洗。w6.管路系统 管路系统的老化或长期使
6、用后反应废物的沉积阻塞常造成反应结果的重复性差。21w7.比色系统w7.1 光源 卤素灯波长300800nmw 氙灯 波长285750nmw使用寿命1000h左右，光源能量对340nm影响最大。w7.2 比色杯 常用石英、硬质玻璃、优质塑料w 光径0.50.7cm。22w7.3 单色器 朗伯比尔定律w 滤光片、棱镜、光栅分光w 多采用光栅分光w 多采用后分光测量技术w光源 比色杯 单色光器 检测器w7.4 检测器 发光二极管w8 程序控制系统23w9.携带污染w常规清洗不能完全消除携带污染w9.1 常见原因 共用系统w 保养不当（污垢、老化）w 清洗液使用不当w 排列顺序不合理w9.2 计算
7、小于0.3%为正常w9.3 常见组合24w例例8w自动生化分析仪比色分析常用的检测器是wA 固定闪烁计数器wB 硒电池wC 镍氢电池wD 二极管wE 光电倍增管25w例例9w自动生化分析仪的光源能量降低对单色光影响最大的波长是wA 340nmwB 405nmwC 450nmwD 500nmwE 630nm26w例10w自动生化分析仪清洗加样针主要为了wA 提高分析精密度wB 提高分析准确度wC 防止交叉污染wD 提高反应速度wE 提高分析的灵敏度27w例例11w大多数全自动生化分析仪比色杯的光径是wA 0.50.7cmwB 0.81.0cmwC 1.11.9cmwD 2.03.9cmwE 4.
8、0cm28w例例1229w例例1330w例14w全自动生化分析仪比色杯的材料常采用wA 光学玻璃或一般塑料wB 普通玻璃或硬质塑料wC 隔热玻璃或普通塑料wD 石英玻璃或优质塑料wE 优质塑料或普通玻璃31w例例15w目前全自动生化分析仪最常用的光栅分光方式为wA 前分光wB 中分光wC 后分光wD 前中后分光wE 前后分光32w例例16w干式生化分析仪保持恒温的方式是wA 空气式恒温器加热wB 水浴式循环直接加热wC 恒温液循环间接加热wD 金属直接加热wE 反应液直接加热33w例例17w全自动生化分析仪的试剂与样品的混合装置类型为wA 搅拌棒wB 加温wC 机械振荡wD 加样针wE 加混合
9、液34w例例18 某实验室全自动生化分析仪近两天发现部分结果明显不稳定，仪器自检正常，测定过程没有错误报警，如果是交叉污染因素，首先应考虑为wA 清洗剂的类型是否正确wB 清洗用水是否符合要求wC 管路冲洗是否彻底wD 反应杯是否需更新wE 用校准品对仪器进行重新校正。35w例例19 340nm波长属于wA 可见光 wB 紫外光wC 红外光wD 近红外光wE 远红外光36w例例2037w例例2138四、全自动生化分析仪常用分析技术w1.光谱分析技术w单波长、双波长甚至多波长w主波长，特有波长；副波长，为消除干扰而设w单波长易受溶血、黄疸、脂浊的干扰；双波长可消除上述干扰，减少杂散光、噪音干扰w
10、常用双波长 比浊 340/700nm；Hb 340/380；NADH 340/380、340/405；ALP 405/476；Trinder 520/600。39w1.1 波长选择的三个条件w待测物质的光吸收最大w吸收峰宽而钝w常见干扰物在该波长下光吸收最小w1.2 吸收光谱分析w Lambert-Beer定律40w1.3 散射光谱分析w散射光谱分析法 光线通过溶液混悬颗粒后的光吸收或光散射程度的定律方法。w透射比浊法w散射比浊法 目前，全自动生化分析仪主要采用透射比浊法。41w2.电化学分析技术w是利用物质的电化学性质，测定化学电池的电位、电流或电量的变化的分析方法。w基本公式：能斯特（Ne
11、rnst)方程。w测量电极与参比电极wK+电极 颉氨霉素；Na+玻璃电极；Cl-银氯化银电极；CO2 气敏电极42w例例2243w例例2344w例例2445w例例2546w例例2647w例例2748w例例28w钠电极属于wA 晶体电极wB 气敏电极wC 玻璃电极wD 酶电极wE 膜电极49w例例29w很多分析仪都采用双波长或多波长的光路技术，是为了减少wA 试剂的干扰wB 样品中黄疸、溶血、脂血的干扰wC 仪器光源的波动wD 批间差异wE 批内差异50w例例3051w例例3152w例例3253五、全自动生化分析仪常用测定项目的反应原理w终点分析法w连续监测法w干化学分析法w电化学分析法54w1
12、.常用分析方法w 连续监测法的定义w 终点法定义w 零级反应期w 一级反应期55w2.NAD(P)H系统指示的反应w还原型NAD(P)H在340nm有吸收峰；氧化型NAD(P)则没有。56w2.1 利用NAD(P)HNAD，吸光度下降的：w ALTw ASTw LD-Pw UNw K+酶法w TCO2酶法57w2.2 利用NADNAD(P)H，吸光度升高的：wCKwCK-MBwTBAwLD-LwGlu-HKwTBA58w3.Trinder反应wGlu-GODw肌苷肌氨酸氧化酶法w尿酸wGPO-PAPwT-Ch,HDL/LDL-Ch59w4.苯衍生物指示反应wALPwGGTwNAG60w5.免疫
13、透射比浊法w型胶原wTnIwHs-CRP，LP(a)w尿微量白蛋白，前白蛋白w胱抑素Cw载脂蛋白61w6.离子选择电极法wK+wNa+wCl-wTCO262w7.常见受溶血影响较大的项目wK+wLDHwCKwASTwALTwMg63w8.终点法反应的项目wGlu-GOD，肌苷肌氨酸氧化酶法，尿酸，TG-GPO-PAP，T-Ch，w9.速率法反应的项目wALT，AST，ALP，GGT，TBA，CK,LD，wGlu-HK，UN，NAG，64w9.其他w9.1 反应底物 ALT L丙氨酸-酮戊二酸w ALP 磷酸苯二钠w9.2 用全血标本：糖化血红蛋白65w例例3366w例例3467w例例3568w
14、例例3669w例例3770w例例3871w例例3972w例例4073w例例4174w例例4275w例例4376w例例4477w例例4578w例例4679w例例47w关于ALT测定中，叙述正确的是wA L-丙氨酸与-酮戊二酸为反应底物wB NADH在氧化还原反应中起作用wC 第一步反应中的L-丙氨酸将进入下一步反应wD 在偶联反应中，生化仪将在455nm处检测吸光度下降速率wE LD主要作用于第一步反应80w例例48w若遇到溶血标本时，受影响较小的项目是wA LDL-CwB LDHwC CKwD ASTwE ALT81w例例49w在下列反应中，需要谷氨酸脱氢酶的是：wA 酶速率法测定尿素wB 葡
15、萄糖氧化酶法测定wC 肌苷酶法测定wD 尿酸酶法测定wE 胆固醇酶法测定82w例例50w血清前白蛋白测定，临床上常用的方法是wA 溴甲酚绿法wB 凯氏定氮法wC 双缩脲法wD 免疫比浊法wE 磺柳酸法83w例例51w酶法测定甘油三酯常用的方法是wA 终点法wB 速率法wC 免疫比浊法wD 化学修饰法wE 固定时间法84w例例52w自动生化分析仪中连续监测法的读数方式wA 在一定的时间范围内连续读各吸光度值wB 反应尚未开始和反应终点时各读取吸光度值wC 终点附近读两个检测点取均值wD 在终点附近读取两点，计算两点吸光度的差值wE 每经过比色窗口即读取一个吸光度85w例例53w全自动生化分析仪上测定血清（浆）载脂蛋白的方法为：wA 免疫扩散法wB 免疫火箭电泳法wC 免疫透射比浊法wD 酶法wE 免疫散射比浊法86w例例54w酶活性浓度测定不考虑下列哪些因素影响wA pH和离子强度wB 底物浓度wC 激活剂wD 反应温度wE 抑制剂抑制反应的类型8788