自身免疫性疾病的实验室检测教程文件.ppt

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1、自身免疫性疾病的实验室检测常见自身抗体的检测常见自身抗体的检测抗核抗体的检测与应用抗核抗体的检测与应用抗核抗体的检测与应用抗核抗体的检测与应用抗抗抗抗ENAENA抗体谱的检测与应用抗体谱的检测与应用抗体谱的检测与应用抗体谱的检测与应用与小血管炎相关的自身抗体检测与应用与小血管炎相关的自身抗体检测与应用与小血管炎相关的自身抗体检测与应用与小血管炎相关的自身抗体检测与应用与与与与RARA相关自身抗体的检测与应用相关自身抗体的检测与应用相关自身抗体的检测与应用相关自身抗体的检测与应用与自身免疫性肝病相关自身抗体的检测与应用与自身免疫性肝病相关自身抗体的检测与应用与自身免疫性肝病相关自身抗体的检测与应

2、用与自身免疫性肝病相关自身抗体的检测与应用与桥本甲状腺炎相关自身抗体的检测与应用与桥本甲状腺炎相关自身抗体的检测与应用与桥本甲状腺炎相关自身抗体的检测与应用与桥本甲状腺炎相关自身抗体的检测与应用 抗核抗体的检测与应用抗核抗体的检测与应用 抗核抗体(antinuclear antibody,)是一组将自身各种细胞核成分作为靶抗原的自身抗体总称。主要是,也有lgM、lgA和lgD,无器官特异性。抗核抗体的命名抗核抗体的命名检测方法:检测方法:灵长类肝组织冷冻灵长类肝组织冷冻切片,与血清中结切片,与血清中结合,再加入酶标抗人合,再加入酶标抗人,复合物在荧光显微镜,复合物在荧光显微镜下观察。下观察。常

3、见荧光染色模型常见荧光染色模型均质型(均质型(H H):高滴度均质型主要见于):高滴度均质型主要见于SLESLE患者。患者。颗粒型(颗粒型(S S):高滴度的颗粒型常见于):高滴度的颗粒型常见于MCTDMCTD,同时,同时也见于也见于SLESLE,硬化症、,硬化症、SSSS等。等。核膜型(核膜型(MM):主要见于原发性胆汁性肝硬化。):主要见于原发性胆汁性肝硬化。核仁型(核仁型(N N):高滴度对诊断硬皮病具有一定特异):高滴度对诊断硬皮病具有一定特异性。性。常见自免的检出率常见自免的检出率抗抗体的检测与应用抗抗体的检测与应用抗抗体的检测与应用抗抗体的检测与应用 检测:绿蝇短膜虫为基质的法,高

4、度特异性:虫体检测:绿蝇短膜虫为基质的法,高度特异性:虫体动基体有环状,不含其他核抗原。动基体有环状,不含其他核抗原。意义:患者的特征性标志抗体,的重要诊断意义:患者的特征性标志抗体,的重要诊断标准之一,该抗体参与的发病:形成多种冷沉淀而标准之一,该抗体参与的发病:形成多种冷沉淀而致血管炎,肾炎及典型的蝶形红斑均与该抗体有关,致血管炎,肾炎及典型的蝶形红斑均与该抗体有关,从而该抗体的滴度的动态测定可监控治疗。但从而该抗体的滴度的动态测定可监控治疗。但抗体对的敏感性仅为,抗体对的敏感性仅为,抗体阴性不能排除的诊断。抗体阴性不能排除的诊断。抗核小体抗体(抗核小体抗体(,)的检测与应用)的检测与应用

5、。常用法 凋亡细胞产生核小体,患者的吞噬细胞清凋亡细胞产生核小体,患者的吞噬细胞清除能力受损,导致核小体大量积聚,产生抗核小除能力受损,导致核小体大量积聚,产生抗核小体抗体。更早出现,临床资料显示,有体抗体。更早出现,临床资料显示,有的抗抗体阴性的的抗抗体阴性的中阳性。中阳性。抗抗ENA抗体谱的检测与应用抗体谱的检测与应用抗抗ENAENA抗体谱:可提取核抗原抗体的总称。临床常检测的主要包括:抗体谱:可提取核抗原抗体的总称。临床常检测的主要包括:抗抗SmSm抗体:抗体:SLESLE标记性抗体(标记性抗体(30%-40%30%-40%阳性检出率)阳性检出率)抗抗nRNPnRNP抗体:抗体:MCTD

6、 95%MCTD 95%阳性检出率(高滴度)阳性检出率(高滴度)抗抗SSA/RoSSA/Ro、抗、抗SSB/LaSSB/La抗体:抗体:SS SS 阳性检出率分别为:阳性检出率分别为:70-80%70-80%和和40%40%,抗,抗SSBSSB的特异性高于抗的特异性高于抗SSASSA。可达。可达50-60%50-60%。抗。抗Sc1-70Sc1-70抗体:几乎仅在抗体:几乎仅在PSSPSS患者检出,在患者检出,在PSSPSS的阳性检出率的阳性检出率40%-60%40%-60%抗抗Jo-1Jo-1抗体:常见于多发性肌炎抗体:常见于多发性肌炎DMDM,检出率,检出率40-50%40-50%,在,在

7、PM/DMPM/DM检出率检出率25%25%,单独皮肌炎检出率不足,单独皮肌炎检出率不足10%10%抗抗ACAACA抗体:与局限性系统性硬化症有关,亦可见于原发性胆汁性肝硬抗体:与局限性系统性硬化症有关,亦可见于原发性胆汁性肝硬化(化(PBCPBC)免疫印迹技术:固相载体常为吸附有抗原的硝酸纤维膜。原理:免疫印迹技术:固相载体常为吸附有抗原的硝酸纤维膜。原理:ENAENA抗抗原经原经SDS-SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,按分子量大小形成区带,经标准参照物聚丙烯酰胺凝胶电泳,按分子量大小形成区带,经标准参照物确定每一抗原区带的分子量。然后转印至硝酸纤维薄膜上制成抗原吸附确定每一抗原区带的分子量。然

8、后转印至硝酸纤维薄膜上制成抗原吸附载体膜。载体膜。血管炎相关的自身抗体检测与应用血管炎相关的自身抗体检测与应用 抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)是一组以 人中性粒细胞胞浆成分为靶抗原的自身抗 体。是系统性血管炎的标志抗体。ANCA荧光染色型与靶抗原ANCA的临床应用类风湿性关节炎相关自身抗体的检测与应用类风湿性关节炎相关自身抗体的检测与应用 RF RF:以变性:以变性lgGlgG的的FcFc段为靶抗原。常见的段为靶抗原。常见的RFRF有有lgMlgM型、型、lgGlgG、lgAlgA和和lgElgE型,除型,除RARA之外的疾病中之外的疾病中RFRF滴度较低滴度较低40IU/ml40IU/ml

9、。1 1、lgMlgM型型80IU/ml80IU/ml并伴有并伴有严重关节功能障碍时通常提示患者预后不良。严重关节功能障碍时通常提示患者预后不良。2 2、lgGlgG型与型与RARA患者的滑膜炎、血管炎和关节症状密切患者的滑膜炎、血管炎和关节症状密切相关,常伴随相关,常伴随lgMlgM型型同时出现,在正常人及非同时出现,在正常人及非RARA患者中很难检出。患者中很难检出。3 3、lgAlgA型与型与RARA患者关节症状的患者关节症状的严重程度及骨质破坏有显著相关性。严重程度及骨质破坏有显著相关性。几种疾病几种疾病RF的检出率的检出率抗角蛋白抗体AKA 主要见于RA患者,阳性率为30-55%,特

10、异性可达95%-99%。其他疾病中检出率极低。AKA是判断RA预后的一个标志性抗体,高滴度常提示疾病较为严重,AKA与RF很少平行出现。抗环瓜氨酸肽抗体抗环瓜氨酸肽抗体CCP:ELISA法检测。对RA的特异性为96%。在RA早期阶段就可测出,其特异性明显高于RF,抗CCP阳性者更容易发生关节损害。自身免疫性肝病相关自身抗体的检测与应用自身免疫性肝病相关自身抗体的检测与应用常见自身免疫性肝病:常见自身免疫性肝病:自身免疫性肝炎、自身免疫性肝炎、原发性胆汁性肝硬化、原发性胆汁性肝硬化、原发性硬化性胆管炎。原发性硬化性胆管炎。1 1、抗平滑肌抗体抗平滑肌抗体抗平滑肌抗体抗平滑肌抗体ASMAASMA:

11、是自身免疫性肝炎:是自身免疫性肝炎AIHAIH的血清学的血清学标志抗体。阳性率标志抗体。阳性率90%90%。高滴度。高滴度1:10001:1000时对时对AIHAIH的特异性的特异性达达100%100%。AIHAIH患者主要为患者主要为lgGlgG型,而在型,而在PBCPBC与与AIHAIH重叠时,重叠时,常以常以lgGlgG和和lgMlgM同时出现。同时出现。2 2、抗肝肾微粒体抗体、抗肝肾微粒体抗体LKM-1LKM-1和抗肝细胞胞质抗体和抗肝细胞胞质抗体LC-1LC-1为为2 2型型AIHAIH的特异性标志。的特异性标志。3 3、抗可溶性肝抗原抗可溶性肝抗原/肝胰抗原抗体(肝胰抗原抗体(S

12、LA/LPSLA/LP)是)是AIHAIH的最特的最特异标志,但阳性检出率只有异标志,但阳性检出率只有10%-30%10%-30%。但阳性预测值几。但阳性预测值几乎为乎为100%100%。4 4、抗线粒体抗体、抗线粒体抗体AMAAMA:AMAAMA及其及其M2M2亚型是协助诊断亚型是协助诊断PBCPBC的的特异性抗体。特异性抗体。5 5、抗核点抗体、抗核点抗体:sp100sp100,抗核膜抗体:,抗核膜抗体:gp210gp210自身免疫性肝病的自身抗体 桥本甲状腺炎桥本甲状腺炎(HT):):甲状腺慢性炎性疾病,甲状腺内淋巴细胞、浆细胞及巨噬细胞浸润与组织损伤引起甲状腺功能低下的重要原因。HT患

13、者常出现:抗甲状腺球蛋白抗体ATGA、抗甲状腺微粒体抗体TMA。电化学发光法检测。联合检测对HT的诊断阳性率可达98%。自身免疫性疾病的相关实验检测自身免疫性疾病的相关实验检测自身免疫性疾病的相关实验检测自身免疫性疾病的相关实验检测1 1、免疫球蛋白检测:自身抗体、免疫球蛋白检测:自身抗体-免疫球蛋白免疫球蛋白2 2、补体检测:以、补体检测:以II II型、型、IIIIII型超敏反应机制发生的自身免疫型超敏反应机制发生的自身免疫性疾病中,补体参与反应,消耗大量补体。性疾病中,补体参与反应,消耗大量补体。3 3、淋巴细胞检测:淋巴细胞亚群的数量及功能反映免疫细、淋巴细胞检测:淋巴细胞亚群的数量及功能反映免疫细胞的状况。胞的状况。4 4、细胞因子的检测:介导免疫应答和免疫反应或应用治疗、细胞因子的检测:介导免疫应答和免疫反应或应用治疗(抗(抗IL-10IL-10单克隆抗体治疗单克隆抗体治疗SLESLE、抗、抗TNF-TNF-抗体治疗抗体治疗RARA)5 5、循环免疫复合物、循环免疫复合物CICCIC的检测:辅助诊断疾病。的检测:辅助诊断疾病。此课件下载可自行编辑修改,仅供参考!此课件下载可自行编辑修改,仅供参考!感谢您的支持,我们努力做得更好!谢谢感谢您的支持,我们努力做得更好!谢谢

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