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1、生物制品分析生物制品分析一、疫苗类药物一、疫苗类药物用用病毒病毒或或立克次体立克次体接种于动物、鸡胚，或经接种于动物、鸡胚，或经组织培养后加以处理制造而成。组织培养后加以处理制造而成。第一节第一节 生物制品的分类生物制品的分类1、细菌类疫苗、细菌类疫苗 由由有有关关细细菌菌、螺螺旋旋体体或或其其衍衍生生物物制制成成的的减减毒毒活活疫疫苗、灭活疫苗、重组苗、灭活疫苗、重组DNA疫苗、亚单位疫苗。疫苗、亚单位疫苗。皮皮内内注注射射用用卡卡介介苗苗、伤伤寒寒Vi多多糖糖疫疫苗苗、吸吸附附破破伤伤风风疫疫苗苗、乙乙型型脑脑炎炎灭灭活活疫疫苗苗、乙乙型型脑脑炎炎减减毒毒活活疫疫苗苗、人用狂犬疫苗等。人用
2、狂犬疫苗等。2、病毒类疫苗、病毒类疫苗 由由病病毒毒、衣衣原原体体、立立克克次次体体或或其其衍衍生生物物制制成成的的减减毒毒活疫苗、灭活疫苗、重组活疫苗、灭活疫苗、重组DNA疫苗、亚单位疫苗。疫苗、亚单位疫苗。口口服服脊脊髓髓灰灰质质炎炎减减毒毒活活疫疫苗苗、麻麻疹疹减减毒毒活活疫疫苗苗、风风疹减毒活疫苗、腮腺炎减毒活疫苗等。疹减毒活疫苗、腮腺炎减毒活疫苗等。3、联合疫苗、联合疫苗 两两种种或或两两种种以以上上疫疫苗苗原原液液按按特特定定比比例例配配制制成成的的具具有有多种免疫原性的多种免疫原性的灭活疫苗或活疫苗。灭活疫苗或活疫苗。伤伤寒寒副副伤伤寒寒甲甲乙乙联联合合疫疫苗苗、吸吸附附百百白白
3、破破联联合合疫疫苗苗、麻疹腮腺炎联合减毒疫苗等。麻疹腮腺炎联合减毒疫苗等。4、双价疫苗及多价疫苗、双价疫苗及多价疫苗 两两种种或或两两种种以以上上同同一一种种但但不不同同型型（或或群群）抗抗原原合合并组成的疫苗。并组成的疫苗。双价肾综合症出血热灭活疫苗等。双价肾综合症出血热灭活疫苗等。二、二、抗毒素及抗毒血清（抗毒素及抗毒血清（免疫血清类）免疫血清类）抗毒素（抗毒血清）：用细菌类毒素或毒素免抗毒素（抗毒血清）：用细菌类毒素或毒素免疫马或其他大动物所取得的疫马或其他大动物所取得的免疫血清免疫血清 破伤风抗毒素、白喉抗毒素和肉毒抗毒素等破伤风抗毒素、白喉抗毒素和肉毒抗毒素等 抗菌（抗病毒）血清：用
4、细菌、病毒本身免疫马抗菌（抗病毒）血清：用细菌、病毒本身免疫马或其他大动物所取得的免疫血清或其他大动物所取得的免疫血清 抗蝮蛇毒血清、抗五步蛇毒血清、抗银环蛇毒血抗蝮蛇毒血清、抗五步蛇毒血清、抗银环蛇毒血清、抗眼镜蛇毒血清、抗炭疽血清、抗狂犬病血清清、抗眼镜蛇毒血清、抗炭疽血清、抗狂犬病血清持续时间短，主要用治疗和紧急预防持续时间短，主要用治疗和紧急预防三、血液制品三、血液制品 由健康人的血浆或经特异免疫的人血浆由健康人的血浆或经特异免疫的人血浆 人血白蛋白、人免疫球蛋白、乙型肝炎人免疫球蛋人血白蛋白、人免疫球蛋白、乙型肝炎人免疫球蛋白等。白等。四、重组四、重组DNA蛋白制品蛋白制品 1、细胞
5、因子类：重组人干扰素等、细胞因子类：重组人干扰素等 2、生长因子类：重组人表皮生长因子等、生长因子类：重组人表皮生长因子等 3、激素类：重组人生长激素等、激素类：重组人生长激素等 4、酶类：注射用重组链激酶等、酶类：注射用重组链激酶等 5、疫苗：重组乙型肝炎疫苗等、疫苗：重组乙型肝炎疫苗等 6、单克隆抗体：注射用抗人、单克隆抗体：注射用抗人T细胞细胞CD3鼠单抗鼠单抗 7、生物类似药：一般指结构和功能明确的治、生物类似药：一般指结构和功能明确的治 疗用重组蛋白疗用重组蛋白五、诊断制品五、诊断制品 用于检测相应的抗原、抗体或机体免疫状态用于检测相应的抗原、抗体或机体免疫状态的制品。的制品。毒素、
6、诊断血清、分型血清和因子血清等。毒素、诊断血清、分型血清和因子血清等。分为：分为：1 1、体外诊断制品、体外诊断制品 2 2、体内诊断制品、体内诊断制品生物制品的质量标准有别于其他商品，生物制品的质量标准有别于其他商品，强调其特殊性：强调其特殊性：1、安全性：安全使用，副作用小、安全性：安全使用，副作用小2、有效性：使用后能产生相应的效力、有效性：使用后能产生相应的效力3、可接受性、可接受性第二节第二节 生物制品分析特点及质量要求生物制品分析特点及质量要求一、免疫双扩散法一、免疫双扩散法系在琼脂糖凝胶板上按一定距离打数个孔，在相邻两系在琼脂糖凝胶板上按一定距离打数个孔，在相邻两孔内分别加入抗原
7、与抗体，若抗原、抗体互相对应，孔内分别加入抗原与抗体，若抗原、抗体互相对应，浓度、比例适当，则一定时间后、在抗原与抗体孔浓度、比例适当，则一定时间后、在抗原与抗体孔之间形成免疫复合物的沉淀线，以此对供试品的特之间形成免疫复合物的沉淀线，以此对供试品的特异性进行检查。异性进行检查。第三节第三节 鉴别试验鉴别试验二、免疫电泳法二、免疫电泳法系将供试品通过电泳分离成区带的系将供试品通过电泳分离成区带的各抗原，然后与相应的抗体进行双各抗原，然后与相应的抗体进行双相免疫扩散，当两者比例合适时形相免疫扩散，当两者比例合适时形成可见的沉淀弧。将沉淀弧与已知成可见的沉淀弧。将沉淀弧与已知标准抗原、抗体生成的沉
8、淀弧的位标准抗原、抗体生成的沉淀弧的位置和性状进行比较，即可分析供试置和性状进行比较，即可分析供试品中的成分及其性质。品中的成分及其性质。三、免疫印迹法（三、免疫印迹法（Western blot）系以供试品与特异性抗体结合后，抗体再与酶系以供试品与特异性抗体结合后，抗体再与酶标抗体特异性结合，通过酶学反应的显色，对标抗体特异性结合，通过酶学反应的显色，对供试品的抗原特异性进行检查。供试品的抗原特异性进行检查。四、免疫斑点法四、免疫斑点法 原理同免疫印迹法原理同免疫印迹法 以供试品与特异性抗体结合后抗体再与酶以供试品与特异性抗体结合后抗体再与酶标抗体特异性结合，通过酶学反应的显色，标抗体特异性结
9、合，通过酶学反应的显色，对供试品的抗原特异性进行检查。对供试品的抗原特异性进行检查。五、酶联免疫法五、酶联免疫法:利利用用酶酶标标记记抗抗原原（抗抗体体），通通过过酶酶促促显显色色反反应应，可以直接观察特征颜色变化来测定抗体（抗原）。可以直接观察特征颜色变化来测定抗体（抗原）。一、理化性质的检查一、理化性质的检查1、外观、外观 涉及制品的安全和效力问题涉及制品的安全和效力问题 通过人工光源目测通过人工光源目测2、真空度及溶解速率、真空度及溶解速率 真空封口的冻干制品，真空封口的冻干制品，瓶内用出现蓝紫色辉光，溶解速度应在规瓶内用出现蓝紫色辉光，溶解速度应在规定时限以下。定时限以下。3、装量、装
10、量 容量法测试不得少于标示量容量法测试不得少于标示量第四节第四节 生物制品检查内容生物制品检查内容常用测定方法常用测定方法凯氏定氮法凯氏定氮法（钨酸沉淀法和三氯乙酸沉淀法）、（钨酸沉淀法和三氯乙酸沉淀法）、酚酚试剂法试剂法（LoeryLoery法）和法）和双缩脲法双缩脲法（紫外（紫外-可见分光光可见分光光度法）等。度法）等。二、蛋白质含量测定二、蛋白质含量测定三、防腐剂和灭活剂含量测定三、防腐剂和灭活剂含量测定生物制品在生产中为了生物制品在生产中为了脱毒、灭火和防止活菌污染脱毒、灭火和防止活菌污染，常加入适量本分、甲醛、氯仿和汞制剂等作为常加入适量本分、甲醛、氯仿和汞制剂等作为防腐防腐剂和灭活
11、剂剂和灭活剂。对这些非有效成分，对这些非有效成分，ChP2015ChP2015中规定其含量应控制在中规定其含量应控制在一定限度内。一定限度内。四、纯度检查四、纯度检查生物制品在经过精制后，要检查纯度是否达到规定要求，常生物制品在经过精制后，要检查纯度是否达到规定要求，常用电泳法和高效液相色谱法。用电泳法和高效液相色谱法。ChPChP重组人促红素注射液（重组人促红素注射液（CHOCHO细胞）纯度测定细胞）纯度测定 1 1）亲水硅胶体积排阻色谱柱：排阻极限）亲水硅胶体积排阻色谱柱：排阻极限300kD300kD，孔径，孔径24nm24nm，粒度，粒度1010m m，直径，直径7.5mm,7.5mm,
12、长长30cm30cm；2 2）流动相：）流动相：3.2mmol/L3.2mmol/L磷酸氢二钠磷酸氢二钠-1.5mmol/L-1.5mmol/L磷酸二氢钾磷酸二氢钾-400.4-400.4mmol/Lmmol/L氯化钠，氯化钠，pH7.3pH7.3；3 3）上样量：）上样量：20-10020-100g g；4 4）在波长）在波长280nm280nm处检测，以人促红素色谱峰计算旳理论板处检测，以人促红素色谱峰计算旳理论板数不低于数不低于15001500。按面积归一化法计算人促红素纯度，。按面积归一化法计算人促红素纯度，不低不低于于98.0%98.0%。五、相对分子质量或分子大小测定五、相对分子质
13、量或分子大小测定对对提纯的蛋白质制品提纯的蛋白质制品如白蛋白、丙种球蛋白或抗毒素，如白蛋白、丙种球蛋白或抗毒素，在必要时需测定其单体、聚合体或裂解片段的在必要时需测定其单体、聚合体或裂解片段的相对分相对分子质量及分子大小；子质量及分子大小；提纯的多糖疫苗提纯的多糖疫苗需测定需测定多糖的多糖的分子大小及其相对含量。分子大小及其相对含量。常用方法：凝胶层析法常用方法：凝胶层析法 SDS-PAGESDS-PAGE法法 超速离心分析法超速离心分析法六、其他六、其他水分含量测定、酸碱度和氯化钠测定等水分含量测定、酸碱度和氯化钠测定等 七、安全检查七、安全检查1.安全检查的对象安全检查的对象菌毒种和主要原
14、材料：菌毒种和主要原材料：1 1）用于生产的菌、病毒种，投产前必须）用于生产的菌、病毒种，投产前必须按药典或按药典或有关规定要求，进行毒力、特异性和培养特异性等试有关规定要求，进行毒力、特异性和培养特异性等试验，检查其生物学特性是否存在异常。验，检查其生物学特性是否存在异常。2 2）用于生产血液制品）用于生产血液制品的血液，采血前必须对献血者进行严格的体检和血样化验，采的血液，采血前必须对献血者进行严格的体检和血样化验，采集血后还应进行必要的复查。集血后还应进行必要的复查。半成品（包括原液）：半成品（包括原液）：在生产过程中，主要检查对活菌、活毒或在生产过程中，主要检查对活菌、活毒或毒素的处理
15、是否完善，半成品是否有杂菌或有害物质的污染，毒素的处理是否完善，半成品是否有杂菌或有害物质的污染，所加灭活剂、防腐剂是否过量等。所加灭活剂、防腐剂是否过量等。成品：成品：成品在分装或冻干后，必须进行出厂前的安全检查。逐批成品在分装或冻干后，必须进行出厂前的安全检查。逐批按药典三部或按药典三部或有关规定要求，进行无菌试验、纯菌试验、毒性有关规定要求，进行无菌试验、纯菌试验、毒性试验、热原试验和安全试验等检查，以确保制品的安全性。试验、热原试验和安全试验等检查，以确保制品的安全性。2.安全检查的内容安全检查的内容（1 1）过敏性物质的检查）过敏性物质的检查 1 1）过敏性试验过敏性试验采用采用异体
16、蛋白为原料异体蛋白为原料制成的治疗制剂，需制成的治疗制剂，需检查其中过敏源的去除是否达到允许限度。检查其中过敏源的去除是否达到允许限度。豚鼠试验豚鼠试验2）牛血清含量的测定牛血清含量的测定主要用于检查主要用于检查组织培养疫苗组织培养疫苗，要求其含量不，要求其含量不超过超过50ng/50ng/剂。剂。3）血型物质的检测血型物质的检测用人胎盘血或静脉血准备的白蛋白和丙种球用人胎盘血或静脉血准备的白蛋白和丙种球蛋白，常有少量蛋白，常有少量A A或或B B型物质，型物质，O O型血孕妇使用型血孕妇使用后，可能引起后，可能引起新生儿溶血症新生儿溶血症。（2 2）杀菌、灭活和脱毒检查）杀菌、灭活和脱毒检查
17、一些死菌苗、灭活疫苗以及类毒素等制品的毒一些死菌苗、灭活疫苗以及类毒素等制品的毒种多为致病性强的微生物，若为被杀死或解毒种多为致病性强的微生物，若为被杀死或解毒不完全，就会在使用时发生严重感染，故应做不完全，就会在使用时发生严重感染，故应做无菌试验无菌试验、活毒检查活毒检查和和解毒试验解毒试验。（3）残余毒力和毒性物质的检查残余毒力和毒性物质的检查1）残余毒力检查残余毒力检查2）残余毒力检查残余毒力检查3）毒性检查毒性检查4）防腐剂检查防腐剂检查（4）外源性污染的检查外源性污染的检查1）野毒检查野毒检查2）热原试验热原试验3）乙型肝炎表面抗原乙型肝炎表面抗原(HbsAg)(HbsAg)1.1.
18、免疫力试验免疫力试验 1 1）定量免疫定量攻击法）定量免疫定量攻击法 2 2）变量）变量免疫定量攻击法（免疫定量攻击法（50%50%有效免疫剂量测定法）有效免疫剂量测定法）3 3）定量免疫变量攻击法（免疫指数测定法）定量免疫变量攻击法（免疫指数测定法）4 4）被动保护力测定）被动保护力测定2.2.活菌数和或病毒滴度测定活菌数和或病毒滴度测定 1 1）活菌数（率）测定活菌数（率）测定 2 2）病毒滴度测定）病毒滴度测定3.3.血清学试验血清学试验 测定抗体水平或抗原活性测定抗体水平或抗原活性八、生物制品的效力测定八、生物制品的效力测定1.1.宿主细胞（菌）蛋白残留量的检查宿主细胞（菌）蛋白残留量的检查 ChP2015 ChP2015中均采用中均采用酶联免疫法酶联免疫法2.2.外源外源DNADNA残留量的检查残留量的检查 第一法第一法 DNADNA探针杂交法探针杂交法 第二法第二法 荧光染色法荧光染色法3.3.残余抗生素的检查残余抗生素的检查4.4.产品相关杂质的检查产品相关杂质的检查九、杂质与检查九、杂质与检查此课件下载可自行编辑修改，仅供参考！此课件下载可自行编辑修改，仅供参考！感谢您的支持，我们努力做得更好！谢谢感谢您的支持，我们努力做得更好！谢谢