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1、第二节第二节 培养基对微生物的选择培养基对微生物的选择(xunz)作用作用第一页，共46页。课程标准课程标准1研究培养基对微生物的选择作用。研究培养基对微生物的选择作用。2探讨微生物的利用。探讨微生物的利用。课标解读课标解读1掌握配制培养基的原则、方法和操作步骤。掌握配制培养基的原则、方法和操作步骤。2理解培养基对微生物的选择作用。理解培养基对微生物的选择作用。3利用选择培养基分离土壤利用选择培养基分离土壤(trng)中能分解纤维素的微生物，中能分解纤维素的微生物，了解其应用价值。了解其应用价值。第二页，共46页。有些微生物可以分泌有些微生物可以分泌_，使，使_分解，分解，为为生命生命活活动动
2、所提供需要所提供需要(xyo)的的_。在固体培养基中加入。在固体培养基中加入_作作为为_，可以分离出能分解，可以分离出能分解_的的微生物。微生物。(1)概念：概念：选择选择培养基是指能培养基是指能让让_的微生物生的微生物生长长，_其他微生物生其他微生物生长长，从而将所需要，从而将所需要(xyo)的微生物从的微生物从_中分离出来的培养基。中分离出来的培养基。培养基对微生物的选择培养基对微生物的选择(xunz)作用作用1纤维素分解纤维素分解(fnji)菌菌2选择培养基选择培养基纤维纤维素素酶酶纤维纤维素素碳源碳源纤维滤纸纤维滤纸唯一碳源唯一碳源纤维纤维素素特定特定抑制抑制混混杂杂的微生物的微生物群
3、体群体第三页，共46页。(2)配制方法配制方法配制配制选择选择培养基培养基时时，可以根据某一种或某一，可以根据某一种或某一类类微生物的微生物的_要求，加入要求，加入_或除去或除去_，_其他微其他微生物的生生物的生长长，从而，从而_某一某一类类群或某一种特定的微生物生群或某一种特定的微生物生长长。也可以根据某些微生物也可以根据某些微生物对对一些一些_因素的因素的_，在培，在培养基中加入某种养基中加入某种_，以，以_不需要的微生物的生不需要的微生物的生长长繁繁殖，造成有利于特定微生物种殖，造成有利于特定微生物种类类_的条件。的条件。(3)意意义义选择选择培养基分离法是培养基分离法是_的一种方法，在
4、所需微生物在的一种方法，在所需微生物在混合混合样样品中数量品中数量_，不适宜直接采用，不适宜直接采用(ciyng)_或或_进进行分离行分离时时，该该法仍然可用。通法仍然可用。通过这过这种方法，可以有种方法，可以有选择选择地地_和和_不同的微生物。不同的微生物。特殊特殊(tsh)某些某些(mu xi)物物质质某些某些营营养物养物质质抑制抑制有利于有利于物理、化学物理、化学抗性抗性化学物化学物质质抑制抑制优优先生先生长长营营养养分离微生物分离微生物很少很少平板稀平板稀释释法法划划线线法法分离分离培养培养第四页，共46页。(1)纤维纤维素的化学素的化学组组成成由由C、H、O三种元素三种元素组组成，成
5、，是一种多糖。是一种多糖。纤维纤维素的基本素的基本组组成成单单位是葡萄糖，人体内没有分解位是葡萄糖，人体内没有分解纤维纤维素的素的酶酶，所以人体不能直接，所以人体不能直接利用利用纤维纤维素作素作为为能源物能源物质质，但土壤中有分解，但土壤中有分解纤维纤维素的微生物，素的微生物，最最终终把把纤维纤维素分解成二氧化碳和水素分解成二氧化碳和水释释放到无机放到无机环环境中去。境中去。(2)纤维纤维素的分布素的分布棉花是自然界中棉花是自然界中纤维纤维素含量最高的天然素含量最高的天然产产物，此外，木材、作物，此外，木材、作物秸物秸秆秆等也富含等也富含纤维纤维素。素。纤维纤维素素产产生生(chnshng)于
6、植物的光合于植物的光合作用，地球上的植物每年作用，地球上的植物每年产产生生(chnshng)的的纤维纤维素超素超过过70 亿亿吨。吨。研研1纤维素与纤维素酶纤维素与纤维素酶第五页，共46页。究土壤中分解究土壤中分解纤维纤维素的微生物，将素的微生物，将给给我我们们的生活的生活带带来很大来很大变变化。化。(3)纤维纤维素素酶酶的的组组成及作用机理成及作用机理纤维纤维素素酶酶是一种复合是一种复合酶酶，一般，一般认为认为它至少包括它至少包括C1酶酶、Cx酶酶和葡萄和葡萄(p to)糖苷糖苷酶酶三种三种组组分。作用机理是：分。作用机理是：第六页，共46页。如何确如何确认认所制所制备备的的选择选择培养基的
7、确起到了培养基的确起到了选择选择作用？作用？提示欲确提示欲确认认所制所制备备的的选择选择培养基是否起到了培养基是否起到了选择选择作用，作用，应应同同时时(tngsh)对对对对照照组组的基本培养基的基本培养基进进行接种行接种若若对对照照组组培养基中菌培养基中菌落种落种类类明明显显多于多于实验组实验组，则则可确可确认选择认选择培养基的确起到了培养基的确起到了选择选择作作用。用。思维思维(swi)激活激活1第七页，共46页。2选择选择(xunz)培养基与鉴别培养基和基础培养基的比较培养基与鉴别培养基和基础培养基的比较类型类型用途用途制法制法原理原理举例举例基础培基础培养基养基生产、培生产、培养等养等
8、依微生物依微生物生长需要生长需要配制配制依据培养基依据培养基配制原则配配制原则配制制生产谷氨酸用生产谷氨酸用的培养基的培养基选择培选择培养基养基分离菌种分离菌种加入某种加入某种化学物质化学物质促进所需微促进所需微生物的生长，生物的生长，抑制不需要抑制不需要微生物的生微生物的生长长培养基中加入培养基中加入高浓度的食盐，高浓度的食盐，选择金黄色葡选择金黄色葡萄球菌萄球菌鉴别培鉴别培养基养基鉴别菌种鉴别菌种加入指示加入指示剂或化学剂或化学药品药品依据微生物依据微生物的代谢特点的代谢特点鉴别是否有大鉴别是否有大肠杆菌的培养肠杆菌的培养基中加入伊红基中加入伊红和美蓝和美蓝第八页，共46页。纤维纤维素分解
9、菌的素分解菌的选择选择培养基中培养基中“选择选择因子因子”是什么？是什么？提示提示筛选纤维筛选纤维素分解菌素分解菌选择选择培养基中唯一培养基中唯一(wi y)的碳源是的碳源是“无菌无菌滤纸滤纸”，唯有能利用，唯有能利用纤维纤维素的微生物方可在素的微生物方可在该该培养基上生存，其他培养基上生存，其他微生物将因缺乏碳源而无法生存，据此可微生物将因缺乏碳源而无法生存，据此可筛选筛选到到纤维纤维素分解菌。素分解菌。思维思维(swi)激活激活2第九页，共46页。在微生物学中，将允在微生物学中，将允许许特定种特定种类类的微生物生的微生物生长长，同，同时时抑制或抑制或阻止其他种阻止其他种类类微生物生微生物生
10、长长的培养的培养(piyng)基称做基称做 ()。A鉴别鉴别培养培养(piyng)基基 B加富培养加富培养(piyng)基基C选择选择培养培养(piyng)基基 D基基础础培养培养(piyng)基基解析基解析基础础培养培养(piyng)基是含有一般微生物生基是含有一般微生物生长长繁殖所需的基本繁殖所需的基本营营养物养物质质的培养的培养(piyng)基，例如牛肉膏蛋白基，例如牛肉膏蛋白胨胨培养培养(piyng)基；基；加富培养加富培养(piyng)基一般用来培养基一般用来培养(piyng)营营养要求比养要求比较较苛刻的异苛刻的异养型微生物；养型微生物；鉴别鉴别培养培养(piyng)基是在培养基是
11、在培养(piyng)基中加入某种基中加入某种特殊化学物特殊化学物质质，微生物的代，微生物的代谢产谢产物与特殊化学物物与特殊化学物质发质发生特定化学反生特定化学反应应，产产生明生明显显特征特征变变化；化；选择选择培养培养(piyng)基是在培养基是在培养(piyng)基基中加入特殊中加入特殊营营养物养物质质或化学物或化学物质质，抑制不需要微生物的生，抑制不需要微生物的生长长，有利，有利于所需微生物的生于所需微生物的生长长。答案答案C【巩固【巩固(gngg)1】第十页，共46页。原料原料_、溶解、溶解 _ _、包扎、包扎 _。将将灭灭菌后的培养液倒入菌后的培养液倒入_中，待培养基冷却至中，待培养基
12、冷却至_左左右右时时，在，在_旁拔出棉塞。手拿旁拔出棉塞。手拿锥锥形瓶，瓶口形瓶，瓶口(pn ku)通通过过_，灼，灼烧灭烧灭菌。菌。_持培养皿，打开皿盖。持培养皿，打开皿盖。_将将锥锥形瓶中的形瓶中的约约15 mL培养液倒入培养皿。立即盖上皿培养液倒入培养皿。立即盖上皿盖，待盖，待_后后备备用。用。用唯一用唯一(wi y)碳源培养基分离微生物碳源培养基分离微生物1配制配制(pizh)培养基培养基2倒平板倒平板称量称量调调pH分装分装灭灭菌菌培养皿培养皿50 酒精灯火焰酒精灯火焰火焰火焰左手左手右手右手平板冷却平板冷却第十一页，共46页。采用采用_进进行接种，用行接种，用_吸取吸取0.05 m
13、L的土的土壤稀壤稀释释液滴于平板液滴于平板(pngbn)上，再用上，再用_涂布。涂布涂布。涂布时时可可_，使涂布均匀。用，使涂布均匀。用_取取_覆盖覆盖于培养基上，并用涂布器于培养基上，并用涂布器压压平。平。先向干燥器中加入适量无菌蒸先向干燥器中加入适量无菌蒸馏馏水，再将培养皿置于干燥器隔水，再将培养皿置于干燥器隔板上，于板上，于_条件下条件下_培养培养_左右。左右。3接种接种(jizhng)4培养培养(piyng)稀稀释释涂布平板法涂布平板法无菌吸管无菌吸管无菌涂布器无菌涂布器转动转动培养皿培养皿无菌无菌镊镊子子无菌无菌滤纸滤纸2830 恒温恒温10 d第十二页，共46页。(1)配制培养基的
14、基本原配制培养基的基本原则则目的要明确：根据所培养的微生物的种目的要明确：根据所培养的微生物的种类类、培养的目的、培养的目的等，等，选择选择原料配制培养基。原料配制培养基。营营养要养要协调协调：配制培养基：配制培养基时时，必，必须须(bx)注意各种注意各种营营养养物物质质的的浓浓度和比例。度和比例。pH要适宜：各种微生物都有适宜生要适宜：各种微生物都有适宜生长长的的pH范范围围。(2)配制赫奇配制赫奇逊逊培养基的培养基的过过程程1配制配制(pizh)培养基培养基第十三页，共46页。配制配制(pizh)培养基的培养基的过程过程称量称量溶化溶化调节调节pH分装分装包扎包扎(boz)灭菌灭菌第十四页
15、，共46页。第十五页，共46页。第十六页，共46页。第十七页，共46页。2倒平板倒平板(pngbn)第十八页，共46页。(1)系列稀系列稀释释操作操作取盛有取盛有9 mL水的无菌水的无菌试试管管(shgun)6支，支，编编号号101、102、103、104、105、106。用移液管吸取用移液管吸取1 mL培养的菌液，注入培养的菌液，注入101倍稀倍稀释释的的试试管管(shgun)中。用手指中。用手指轻压轻压移液管上的橡皮移液管上的橡皮头头，并吹吸，并吹吸3次，使菌液与水充分次，使菌液与水充分混匀。混匀。从从101倍稀倍稀释释的的试试管管(shgun)中吸取中吸取1 mL稀稀释释液，注入液，注入
16、102试试管管(shgun)内吹吸均匀，内吹吸均匀，获获得得102倍液。依此倍液。依此类类推。推。(2)涂布平板操作涂布平板操作3接种接种(jizhng)稀释涂布平稀释涂布平板法板法第十九页，共46页。将涂布器浸在将涂布器浸在盛有酒精盛有酒精(jijng)的的烧烧杯中杯中取少量菌悬液（不超过取少量菌悬液（不超过(chogu)0.1 mL），滴加到培养基表面），滴加到培养基表面将沾有少量酒精将沾有少量酒精(jijng)的涂布器在火焰上的涂布器在火焰上引燃，待酒精引燃，待酒精(jijng)燃燃尽后，尽后，冷却冷却810 s用涂布器将菌用涂布器将菌悬悬液均液均匀地涂布在培养基表面，匀地涂布在培养基表
17、面，涂布涂布时时可可转动转动培养皿，培养皿，使涂布均匀使涂布均匀第二十页，共46页。(3)加盖加盖滤纸滤纸：用无菌：用无菌镊镊子取无菌子取无菌滤纸滤纸覆盖覆盖(fgi)于培养基上，于培养基上，并用涂布器并用涂布器压压平。平。(4)注意事注意事项项：稀：稀释释涂布平板的操作比涂布平板的操作比较较复复杂杂，且各个，且各个细节细节均均需保需保证证“无菌无菌”，应应特特别别注意：注意：酒精灯与培养皿的距离要合适；酒精灯与培养皿的距离要合适；吸管吸管头头不要接触任何其他物体；不要接触任何其他物体；吸管要在酒精灯火焰周吸管要在酒精灯火焰周围围使用。使用。第二十一页，共46页。特别提醒特别提醒 移液管需要经
18、过灭菌。操作时，移液后用手指轻压上移液管需要经过灭菌。操作时，移液后用手指轻压上端的橡皮头，吹吸三次，使菌液与水充分混匀。端的橡皮头，吹吸三次，使菌液与水充分混匀。将涂布器末端浸在盛有体积分数将涂布器末端浸在盛有体积分数(fnsh)(fnsh)为为70%70%的酒精的烧杯中。的酒精的烧杯中。取出时，要让多余的酒精在烧杯中滴尽，然后将沾有少量酒精的取出时，要让多余的酒精在烧杯中滴尽，然后将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃。涂布器在火焰上引燃。操作中一定要注意防火！不要将过热的涂布器放在盛放酒精的操作中一定要注意防火！不要将过热的涂布器放在盛放酒精的烧杯中，以免引燃其中的酒精。烧杯中，以免引燃其中
19、的酒精。第二十二页，共46页。要将能分解要将能分解纤维纤维素的素的细细菌从土壤中分离出来，菌从土壤中分离出来，应应将它将它们们接接种在种在 ()。A加入伊加入伊红红美美蓝蓝的的鉴别鉴别培养基上培养基上B含有蛋白含有蛋白胨胨的固体培养基上的固体培养基上C只含只含纤维纤维素粉而无其他碳源的素粉而无其他碳源的选择选择培养基上培养基上D含四大含四大营营养要素的培养基上养要素的培养基上解析解析(ji x)要把要把纤维纤维素分解菌从土壤中分离出来，就要利用素分解菌从土壤中分离出来，就要利用使使纤维纤维素分解菌能生存，但其他微生物不能生存的素分解菌能生存，但其他微生物不能生存的选择选择培养基培养基进进行培养
20、，其行培养，其选择选择条件是以条件是以纤维纤维素粉作素粉作为为唯一碳源，在唯一碳源，在该该培养培养基上，只有能分解基上，只有能分解纤维纤维素的素的细细菌能菌能够够生存，其他微生物因不能生存，其他微生物因不能利用利用纤维纤维素而不能生存。素而不能生存。答案答案C【巩固【巩固(gngg)2】第二十三页，共46页。下列培养基配方中能作下列培养基配方中能作为选择为选择培养基、培养基、鉴别鉴别(jinbi)培养培养基的依次是基的依次是 ()。【例例1】示例示例一一选择培养基与鉴别培养基选择培养基与鉴别培养基原料原料蛋白胨蛋白胨/g10101010乳糖乳糖/g5555蔗糖蔗糖/g5555KH2PO4/g2
21、222伊红伊红/g0.4美蓝美蓝/g0.065琼脂琼脂/g1020NaCl/g20蒸馏水蒸馏水/mL1 0001 0001 0001 000第二十四页，共46页。A B C D思思维维(swi)导图导图：深度深度(shnd)(shnd)剖析高浓度的食盐可以抑制多种细菌的生长，但剖析高浓度的食盐可以抑制多种细菌的生长，但不影响金黄色葡萄球菌的生长，从而可以将金黄色葡萄球菌分离不影响金黄色葡萄球菌的生长，从而可以将金黄色葡萄球菌分离出来，有高浓度食盐的培养基为选择培养基。在培养基中加入伊出来，有高浓度食盐的培养基为选择培养基。在培养基中加入伊红和美蓝，可以用来鉴别饮用水和乳制品中是否存在大肠杆菌，
22、红和美蓝，可以用来鉴别饮用水和乳制品中是否存在大肠杆菌，有伊红和美蓝的培养基为鉴别培养基。有伊红和美蓝的培养基为鉴别培养基。答案答案D D第二十五页，共46页。归纳归纳(gun)(gun)提升提升 选择培养基与鉴别培养基的比较：选择培养基与鉴别培养基的比较：种类种类特点特点用途用途选择选择培养培养基基培养基中加入某种培养基中加入某种化学物质，以抑制化学物质，以抑制不需要的微生物的不需要的微生物的生长，促进所需要生长，促进所需要的微生物的生长的微生物的生长培养、分离出特定的微生物培养、分离出特定的微生物(如培养酵母菌和霉菌，可在如培养酵母菌和霉菌，可在培养基中加入青霉素；培养培养基中加入青霉素；
23、培养金黄色葡萄球菌，可在培养金黄色葡萄球菌，可在培养基中加入高浓度的食盐基中加入高浓度的食盐)鉴别鉴别培养培养基基根据微生物的代谢根据微生物的代谢特点，在培养基中特点，在培养基中加入某种指示剂或加入某种指示剂或化学药品化学药品鉴别不同种类的微生物，如鉴别不同种类的微生物，如可用伊红可用伊红美蓝培养基鉴别美蓝培养基鉴别饮用水或乳制品中是否有大饮用水或乳制品中是否有大肠杆菌肠杆菌(若有，菌落呈深紫色，若有，菌落呈深紫色，并带有金属光泽并带有金属光泽)第二十六页，共46页。生物乙醇是以生物生物乙醇是以生物为为原料生原料生产产的可再生能源。我国利用的可再生能源。我国利用农农作物作物废废弃物弃物(秸秸秆
24、秆)生生产产乙醇，其技乙醇，其技术术流程流程为为：纤维纤维素素酶酶解解酵母酵母发发酵酵蒸蒸馏馏成品。成品。纤维纤维素素酶酶的成本能否下降，是能的成本能否下降，是能否否实现实现乙醇工乙醇工业业化生化生产产的关的关键键因素。因素。纤维纤维素素酶酶可以从能分解可以从能分解纤维纤维素的素的细细菌培养液中提取。某同学菌培养液中提取。某同学设计设计了如下分离土壤中了如下分离土壤中纤维纤维素分解菌的素分解菌的实验实验流程：流程：土壤取土壤取样样选择选择培养培养梯度稀梯度稀释释鉴别鉴别培养。培养。结结合所学知合所学知识识(zh shi)回答下列回答下列问题问题。【例例2】示例二示例二土壤中纤维素分解菌的分离与
25、检测土壤中纤维素分解菌的分离与检测第二十七页，共46页。(1)以下是一种培养基配方：以下是一种培养基配方：纤维纤维素粉素粉5 g、NaNO3 1 g、Na2HPO47H2O 1.2 g、KH2PO4 0.9 g、MgSO47H2O 0.5 g、KCl 0.5 g、酵母膏、酵母膏0.5 g、水解酪素、水解酪素0.5 g(蒸蒸馏馏水定容到水定容到1 000 mL)。该该培养基能培养基能够够增加增加样样品中品中纤维纤维素分解菌的素分解菌的浓浓度，其原理是度，其原理是_。(2)为为了了鉴别纤维鉴别纤维素分解菌和素分解菌和进进一步一步纯纯化菌种，可以在化菌种，可以在鉴别鉴别培养基上加培养基上加入入_染液
26、，将染液，将筛选获筛选获得的菌液稀得的菌液稀释释后用后用_的方法接种到的方法接种到鉴鉴别别培养基上，然后挑培养基上，然后挑选产选产生生_的菌落的菌落(jnlu)作作为为菌种菌种进进行行扩扩大大培养。培养。(3)纤维纤维素分解菌培养液中的素分解菌培养液中的纤维纤维素素酶酶产产量如何呢？量如何呢？请设计实验进请设计实验进行行检检测测。_。第二十八页，共46页。思维思维(swi)导图：导图：深度剖析本题考查土壤中纤维素分解菌的分离与鉴定的相关知深度剖析本题考查土壤中纤维素分解菌的分离与鉴定的相关知识。富含纤维素的土壤中，含有以纤维素为碳源的纤维素分解菌，识。富含纤维素的土壤中，含有以纤维素为碳源的纤
27、维素分解菌，且数量较多；题目中给出的培养基能够为产生纤维素酶的微生物且数量较多；题目中给出的培养基能够为产生纤维素酶的微生物提供碳源，不能分解纤维素的微生物由于提供碳源，不能分解纤维素的微生物由于(yuy)(yuy)缺乏碳源而不能缺乏碳源而不能正常生长繁殖，因此该培养基具有选择作用；纤维素量一定时，正常生长繁殖，因此该培养基具有选择作用；纤维素量一定时，在一定范围内，纤维素酶产量与分解产生的葡萄糖量成正比。在一定范围内，纤维素酶产量与分解产生的葡萄糖量成正比。第二十九页，共46页。答案答案(1)(1)培养基中纤维素是主要碳源，有利于纤维素分解菌生长，同时抑制其他微生物生长培养基中纤维素是主要碳
28、源，有利于纤维素分解菌生长，同时抑制其他微生物生长(2)(2)刚果红涂布平板透明圈刚果红涂布平板透明圈(3)(3)向定量向定量(dngling)(dngling)纤维素分解菌培养液中加入定量纤维素分解菌培养液中加入定量(dngling)(dngling)纤维素，定时测定葡萄糖产量纤维素，定时测定葡萄糖产量的变化的变化方法技巧方法技巧 (1)(1)经选择培养后，再经梯度稀释，才能将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上。经选择培养后，再经梯度稀释，才能将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上。(2)(2)最好进行富集培养。最好进行富集培养。(3)(3)经稀释培养后，用刚果红染色。经稀释培养后，用刚果
29、红染色。(4)(4)设置对照能证明经富集培养的确得设置对照能证明经富集培养的确得到了欲分离的微生物。到了欲分离的微生物。第三十页，共46页。实验实验原理：根据原理：根据纤维纤维素分解菌在培养基上素分解菌在培养基上产产生透明圈的大小，生透明圈的大小，测测定定产产生生纤维纤维素素酶酶的多少。的多少。实验过实验过程：先利用程：先利用选择选择培养基分离培养基分离纤维纤维素分解菌，再将菌株素分解菌，再将菌株进进行分离行分离纯纯化，最后化，最后进进行行鉴鉴定。定。注意：注意：设计实验过设计实验过程程时时要遵循相关的基本要遵循相关的基本(jbn)原原则则，如，如对对照原照原则则、单单一一变变量原量原则则等；
30、并且要注意探究性等；并且要注意探究性实验实验的的实验预实验预期或期或结结果不是唯一的，果不是唯一的，应对应对多种可能性多种可能性进进行分析行分析讨论讨论，得出，得出相相应应的的结论结论。探究探究(tnji)产生纤维素酶的产量产生纤维素酶的产量技法技法(jf)必备必备12第三十一页，共46页。有些微生物能合成有些微生物能合成纤维纤维素素酶酶，通，通过对这过对这些微生物的研究和些微生物的研究和应应用，用，使人使人们们能能够够利用秸利用秸秆秆等等废废弃物生弃物生产产酒精，用酒精，用纤维纤维素素酶酶处处理服装理服装面料等。面料等。纤维纤维素素酶酶可以通可以通过过微生物微生物发发酵生酵生产产，为为了提高
31、了提高酶酶的的产产量，量，请请你你设计设计一个一个实验实验，利用，利用诱变诱变育种的方法育种的方法(fngf)，获获得得产产生生较较多多纤维纤维素素酶酶的菌株。的菌株。(1)写出写出实验实验步步骤骤：将培养好的生将培养好的生产产菌株分成两菌株分成两组组，_。制制备备含有含有_的固体培养基。的固体培养基。_。能力能力(nngl)展示展示第三十二页，共46页。一段一段时间时间后，取培养基用后，取培养基用刚刚果果红红染色，染色，观观察察记录记录菌落周菌落周围围透明圈的透明圈的大小情况。大小情况。(2)预预期期实验结实验结果及果及结论结论(jiln)：诱变组诱变组中菌落周中菌落周围围的透明圈比的透明圈
32、比对对照照组组_，说说明明_。诱变组诱变组中菌落周中菌落周围围的透明圈与的透明圈与对对照照组组_，说说明明_。诱变组诱变组中菌落周中菌落周围围的透明圈比的透明圈比对对照照组组_，说说明明_。(3)若若获获得得纯净纯净的高的高产产菌株，菌株，还还需需进进行行_或或_操作。操作。第三十三页，共46页。解析解析(1)(1)设计实验要遵循对照原则和单一变量原则，且要设计实验要遵循对照原则和单一变量原则，且要得到纤维素酶的高产菌株，先进行诱变处理得到纤维素酶的高产菌株，先进行诱变处理(chl)(chl)，由于，由于突变是不定向的，所以要经过筛选。实验分两组，实验组用突变是不定向的，所以要经过筛选。实验分
33、两组，实验组用诱变剂处理诱变剂处理(chl)(chl)，对照组不进行处理，对照组不进行处理(chl)(chl)。要检测纤。要检测纤维素分解菌产生纤维素酶的能力，应用含纤维素的鉴别培养维素分解菌产生纤维素酶的能力，应用含纤维素的鉴别培养基，根据形成的透明圈的大小，来判断产酶能力的高低。整基，根据形成的透明圈的大小，来判断产酶能力的高低。整个过程中，注意对照组和实验组的其他条件完全相同。个过程中，注意对照组和实验组的其他条件完全相同。(2)(2)预期实验结果，诱变组和对照组相比，透明圈大小可能相同，预期实验结果，诱变组和对照组相比，透明圈大小可能相同，可能较大，可能较小，所以需要分情况讨论，当然，
34、真正想可能较大，可能较小，所以需要分情况讨论，当然，真正想得到的是透明圈较大的菌株，即产纤维素酶能力强的菌株。得到的是透明圈较大的菌株，即产纤维素酶能力强的菌株。(3)(3)一般初次分离得到的都不是纯净的细菌，需进一步纯化一般初次分离得到的都不是纯净的细菌，需进一步纯化培养，可通过平板划线法或稀释涂布平板法进行纯化培养。培养，可通过平板划线法或稀释涂布平板法进行纯化培养。第三十四页，共46页。答案答案(1)(1)一组用一定剂量的诱变剂处理，另一组不处理作为一组用一定剂量的诱变剂处理，另一组不处理作为(zuwi)(zuwi)对照对照纤维素纤维素把诱变组的大量菌株接种到多个把诱变组的大量菌株接种到
35、多个含有纤维素的固体培养基上，同时接种对照组含有纤维素的固体培养基上，同时接种对照组(未处理未处理)的菌株，的菌株，把它们置于相同的适宜条件下培养把它们置于相同的适宜条件下培养(2)(2)大诱变育种获得了高纤维素酶产量的菌株大诱变育种获得了高纤维素酶产量的菌株相同诱变育种没有使菌株发生变化相同诱变育种没有使菌株发生变化小小 诱变育种获得诱变育种获得了低纤维素酶产量的菌株了低纤维素酶产量的菌株(以上三组结果与结论对应即可以上三组结果与结论对应即可)(3)(3)平板划线稀释涂布平板平板划线稀释涂布平板第三十五页，共46页。从土壤从土壤(trng)中中筛选纤维筛选纤维素分解菌的素分解菌的实验设计实验
36、设计，正确的是，正确的是()。A土壤土壤(trng)取取样样梯度稀梯度稀释释稀稀释释涂布平板涂布平板挑挑选选菌菌落落B土壤土壤(trng)取取样样选择选择培养培养稀稀释释涂布平板涂布平板挑挑选选菌菌落落C土壤土壤(trng)取取样样梯度稀梯度稀释释选择选择培养培养挑挑选选菌落菌落D土壤土壤(trng)取取样样梯度稀梯度稀释释稀稀释释涂布平板涂布平板选择选择培培养养挑挑 选选菌落菌落1.第三十六页，共46页。解析本题考查纤维素分解菌的分离过程的有关知识。正解析本题考查纤维素分解菌的分离过程的有关知识。正确的流程是确的流程是“土壤取样土壤取样选择选择(xunz)(xunz)培养培养稀释涂布平稀释涂
37、布平板板挑取菌落挑取菌落”，其中选择，其中选择(xunz)(xunz)培养的目的是增加纤培养的目的是增加纤维素分解菌的浓度，因此需要在稀释涂布平板之前进行，维素分解菌的浓度，因此需要在稀释涂布平板之前进行，最后根据菌落的特征挑选纤维素分解菌。最后根据菌落的特征挑选纤维素分解菌。答案答案B B第三十七页，共46页。牛肉膏蛋白牛肉膏蛋白胨胨培养基中加入了培养基中加入了琼琼脂脂这这一理想的凝固一理想的凝固剂剂，下列关，下列关于于琼琼脂的脂的说说法不正确的是法不正确的是 ()。A不被所培养的微生物分解利用，不被所培养的微生物分解利用，对对所培养的微生物无所培养的微生物无 毒害作用毒害作用(zuyng)
38、B在微生物生在微生物生长长温度范温度范围围内保持固体状内保持固体状态态C琼琼脂凝固点低，利于微生物的生脂凝固点低，利于微生物的生长长D琼琼脂在脂在灭灭菌菌过过程中不会被破坏，透明度好，凝固力程中不会被破坏，透明度好，凝固力强强2第三十八页，共46页。解析在液体培养基中加入凝固剂如琼脂后，制成琼脂固体解析在液体培养基中加入凝固剂如琼脂后，制成琼脂固体培养基，它是实验室中最常用的培养基之一，固体培养基中培养基，它是实验室中最常用的培养基之一，固体培养基中可形成肉眼可见的单个细胞繁殖而来的子细胞群体，即菌落可形成肉眼可见的单个细胞繁殖而来的子细胞群体，即菌落，用于微生物的分离、计数和菌种鉴定等。琼脂
39、可作为一种，用于微生物的分离、计数和菌种鉴定等。琼脂可作为一种理想的凝固剂，是由其性质决定的，琼脂不会被微生物利用理想的凝固剂，是由其性质决定的，琼脂不会被微生物利用且对其无毒害作用，在灭菌过程中不会被破坏，透明度好，且对其无毒害作用，在灭菌过程中不会被破坏，透明度好，凝固力强。琼脂在凝固力强。琼脂在98 98 以上熔化，在以上熔化，在44 44 以下以下(yxi)(yxi)凝凝固，所以在微生物生长温度范围内保持固体状态。固，所以在微生物生长温度范围内保持固体状态。答案答案C C第三十九页，共46页。某化工厂的某化工厂的污污水池中，含有一种有害的、水池中，含有一种有害的、难难于降解的有机于降解
40、的有机(yuj)化合物化合物A。研究人。研究人员员用化合物用化合物A、磷酸、磷酸盐盐、镁盐镁盐以及微量以及微量元素配制的培养基，成功地元素配制的培养基，成功地筛选筛选到能高效降解化合物到能高效降解化合物A的的细细菌菌(目的菌目的菌)。实验实验的主要步的主要步骤骤如下如下图图所示。所示。请请分析回答分析回答问题问题。3第四十页，共46页。第四十一页，共46页。(1)接种前需要接种前需要对对培养基及培养皿等培养基及培养皿等进进行行灭灭菌，常用的菌，常用的灭灭菌方法菌方法是是_。培养基中加入化合物。培养基中加入化合物A的目的是的目的是筛选筛选(shixun)_。(2)实验实验需要振需要振荡荡培养，由
41、此推培养，由此推测测“目的菌目的菌”的代的代谢类谢类型是型是_。(3)培养若干天后，培养若干天后，应选择应选择培养瓶中化合物培养瓶中化合物A含量含量_的培的培养液，接入新的培养液中养液，接入新的培养液中连续连续培养，使培养，使“目的菌目的菌”的数量的数量_。(4)转为转为固体培养固体培养时时，为获为获得得单单菌落菌落进进行行继续筛选继续筛选(shixun)，常采用平板划常采用平板划线线法或法或_法，接种后，法，接种后，应应将培养皿将培养皿_(填填“正放正放”或或“倒置倒置”)。第四十二页，共46页。(5)下列有关平板划下列有关平板划线线操作的叙述，操作的叙述，错误错误的是的是 ()。A在操作的
42、第一步以及每次划在操作的第一步以及每次划线线之前都要将接种之前都要将接种环环放在放在 火焰上灼火焰上灼烧烧B将已冷却的接种将已冷却的接种环环伸入菌液中蘸取一伸入菌液中蘸取一环环液液C蘸取菌液和划蘸取菌液和划线线要在火焰旁要在火焰旁进进行行D划划线时线时要将最后一区的划要将最后一区的划线线与第一区的划与第一区的划线线相相连连(6)实验结实验结束束时时，使用，使用过过的培养基的培养基应该进应该进行行_处处理理(chl)后，才能倒掉。后，才能倒掉。第四十三页，共46页。解析本题借助生产实例考查微生物的实验室培养的基础知识。培解析本题借助生产实例考查微生物的实验室培养的基础知识。培养基及培养皿等常用的
43、灭菌方法是高压蒸汽灭菌法；培养基中加入养基及培养皿等常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌法；培养基中加入化合物化合物A A的目的是筛选到能降解化合物的目的是筛选到能降解化合物A A的目的菌；振荡培养可以增的目的菌；振荡培养可以增加培养液中的氧含量，再依据培养液中含有有机加培养液中的氧含量，再依据培养液中含有有机(yuj)(yuj)化合物可以化合物可以推出推出“目的菌目的菌”的代谢类型是异养需氧型；培养若干天后，应选择的代谢类型是异养需氧型；培养若干天后，应选择培养瓶中化合物培养瓶中化合物A A含量减少的培养液，接入新的培养液中连续培养，含量减少的培养液，接入新的培养液中连续培养，目的是使目的是使“目的
44、菌目的菌”的数量增加；转为固体培养时，为获得单菌落的数量增加；转为固体培养时，为获得单菌落进行继续筛选，常采用平板划线法或稀释涂布平板法，接种后，应进行继续筛选，常采用平板划线法或稀释涂布平板法，接种后，应将培养皿倒置，以防止培养皿盖上的水珠落入培养基，造成污染；将培养皿倒置，以防止培养皿盖上的水珠落入培养基，造成污染；利用平板划线法获得单菌落，划线时不能将最后一区的划线与第一利用平板划线法获得单菌落，划线时不能将最后一区的划线与第一区的划线相连，这样做不能得到单个菌落；实验结束时，使用过的区的划线相连，这样做不能得到单个菌落；实验结束时，使用过的培养基应该进行灭菌处理后，才能倒掉，以防止污染环境。培养基应该进行灭菌处理后，才能倒掉，以防止污染环境。第四十四页，共46页。答案答案(d n)(d n)(1)(1)高压蒸汽灭菌法目的菌高压蒸汽灭菌法目的菌(2)(2)异养需异养需氧型氧型(3)(3)减少增加减少增加(4)(4)稀释涂布平板倒置稀释涂布平板倒置(5)D(5)D(6)(6)灭菌灭菌第四十五页，共46页。课堂课堂(ktng)(ktng)小结小结第四十六页，共46页。