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1、实验一实验基本知识及溶液的配实验一实验基本知识及溶液的配制制1111v实验目的v了解生化实验室的实验操作规则；v掌握溶液的配制方法三三缓冲溶液的配制缓冲溶液的配制 1概念概念：由一定物质组成的溶液，在加入一定量的酸或碱时，其氢离子浓度改变甚微或基本不变，此种溶液称为缓冲溶液缓冲溶液；这种作用称为缓冲作用缓冲作用；其溶液内所含物质称为缓冲剂缓冲剂，调节缓冲剂的比例可以配置成各种pH的缓冲液。缓冲剂的组成，多为弱酸及这种弱酸与强碱所组成的盐，或弱碱及这种弱碱与强酸所组成的盐。调节二者的比例可以配制成各种pH的缓冲液。例如：某一缓冲液由弱酸（HA）及其盐(BA)所组成，它的解离方程式如下：HA H
2、A BA B A 若向缓冲液中加入碱（NaOH）,则 HA NaOH NaA+H2O 弱酸盐 若向缓冲液中加入酸（HCl）,则 BA HCl BCl HA 弱酸 由此可见，向缓冲液中加酸或碱，主要的变化就是溶液内弱酸（HA）的增加或减少。由于弱酸（HA）的解离度很小，所以它的增加或减少对溶液内氢离子浓度改变不大，因而起到缓冲作用。实例：磷酸氢二钠实例：磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液磷酸二氢钠缓冲液 原理原理：加入盐酸溶液，其缓冲作用：NaH2PO4+Na2HPO4+HCl 2 NaH2PO4+NaCl 加入氢氧化钠溶液，其缓冲作用：NaH2PO4+Na2HPO4+NaOH 2 Na2HPO4+H
3、2O 缓冲溶液：缓冲溶液：磷酸氢二钠-磷酸二氢钠溶液 缓冲剂：缓冲剂：磷酸氢二钠和磷酸二氢钠 2 配制100 ml 0.2 mol/l Na2HPO4溶液，100 ml 0.2 mol/l NaH2PO4溶液和100 ml 0.2 mol/l Na2HPO4-NaH2PO4缓冲液：(1)计算 NaH2PO42H2O:156.030.10.2=3.1206(g)Na2HPO412H2O:358.220.10.2=7.1644(g)(2)分别配制0.2 mol/l Na2HPO4和0.2 mol/lNaH2PO4各100ml，定容于容量瓶之后。注意：在容量瓶上帖标签。(3)按照一定的比例分别量取按
4、照一定的比例分别量取0.2 mol/l Na2HPO4和和0.2 mol/lNaH2PO4溶液，混合后溶液，混合后装入试剂瓶，贴上标签，标签应注明以下内容：装入试剂瓶，贴上标签，标签应注明以下内容：pH值，药品浓度，名称，配制值，药品浓度，名称，配制人和日期等。人和日期等。(4)磷酸氢二钠磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液（磷酸二氢钠缓冲液（0.2 mol/l）的检验：）的检验：取一滴所配置的缓冲溶液于精密取一滴所配置的缓冲溶液于精密pH试纸上，检测其试纸上，检测其pH值。值。v小组一（A):v10%NaOH溶液 500ml;（戴手套）v1%CuSO4溶液 100mlv0.5%甘氨酸溶液 250ml
5、v1mol/l 醋酸溶液 250mlv（醋酸：物质的量浓度17.5mol/l）v小组二（B)v0.1mol/l 醋酸溶液 250mlv3%硝酸银溶液 100mL（戴手套）v5%三氯乙酸溶液 250mLv0.05mol/L 碳酸钠溶液 250mLv小组三v0.01mol/l 醋酸溶液 250mlv饱和硫酸铵溶液 250mLv0.1茚三酮水溶液茚三酮水溶液250毫升毫升v酪蛋白的醋酸钠溶液酪蛋白的醋酸钠溶液500毫升；毫升；v(2克酪蛋白，加少量水在研钵里仔细研磨，将所得到的悬浊液移入到克酪蛋白，加少量水在研钵里仔细研磨，将所得到的悬浊液移入到200毫升锥毫升锥形瓶中，加形瓶中，加50的温水洗涤研
6、钵，转入到锥形瓶内。在锥形瓶内加入的温水洗涤研钵，转入到锥形瓶内。在锥形瓶内加入50毫升的毫升的1.0mol/L醋酸钠溶液，并且置于醋酸钠溶液，并且置于50的温水浴，小心晃动锥形瓶，充分溶解。最的温水浴，小心晃动锥形瓶，充分溶解。最好定容到好定容到500毫升。毫升。)v（醋酸：物质的量浓度17.5mol/l）v小组四v塞氏试剂 500毫升v0.25克间苯二酚溶解到150毫升浓盐酸，加水定容到500毫升v本尼迪特试剂本尼迪特试剂 500毫升v甲 柠檬酸钠86.5克,碳酸钠50克，加300毫升水中加热溶解，定容到425毫升；v乙 8.65克硫酸铜，溶解到50毫升热水，定容到75毫升；v将乙 缓慢加入到甲中，边加边搅拌，混匀，如果有沉淀，过滤，可以长期保存；v费林试剂费林试剂v甲 17.25克硫酸铜，溶解到250毫升水中毫升水中；v乙 62.5克氢氧化钠，68.5克酒石酸钾钠，溶解到250毫升中毫升中；小组五v莫氏试剂 100毫升v1%葡萄糖溶液 500毫升v1%蔗糖溶液 500毫升v1%淀粉溶液 500毫升结束语结束语谢谢大家聆听！谢谢大家聆听！19