无菌操作与细胞培养.docx

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1、1 .实验进行前,超净工作台以紫外灯照射1520分钟灭菌,以70 %ethanol擦拭无菌操作抬面, 并开启无菌操作台风扇运转10分钟后,才开始实验操作。实验完毕后,将实验物品带出工作台,以70%e thanol擦拭无菌操作台面,紫外灯照射15-20分钟。2 .无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞,必要物品,例如移液器、试管架、吸管吸取器或吸头盒等可 以放置,其它实验用品用完即应移出,以利于气流流通。实验用品以70 % ethanol擦拭后才带入无菌操 作台内。实验操作应在台面之中央无菌区域,勿在边缘之非无菌区域操作。3 .小心取用无菌之实验物品,避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口,亦不要

2、在打开之容器 正上方操作实验。容器打开后,以手夹住瓶盖并握住瓶身,倾斜约45。角取用,尽量勿将瓶盖盖口朝上放 置桌面。4 .工作人员应注意自身之安全,须穿戴实验衣及手套后才进行实验。对于来自人类或是病毒感染之细 胞株应特别小心操作,并选择适当等级的生物安全柜操作(至少Class ll)o注意事项:1 . 一次将所有的所需要试剂、工具放入工作台。不要做到一半,又出工作间拿东西,这样增加了污 染的机会。2 .整个操作要快、动作要轻、而且不要干其他的事情。比如手机响了,最好不要接。3 .培养的试剂一定要用自己的。既不要借别人的,也不要借给别人。由于每个人的操作行为、用途 是不一样的,相互之间串用,很容易造成交叉污染。4 .定期检查C02钢瓶的压力、C02培养箱C02浓度、温度、及水盘是否有水?(水盘的水用无菌 水,每周更换)5 .超净工作台应定期更换紫外线灯管及HEPA过滤膜。

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