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1、专题一 基因工程早期基础理论1859年达尔文提出生物进化论基础理论和技术发展催生了基因工程1953年沃森、克里克提出DNA的双螺旋结构模型1958年梅塞尔松、斯塔尔证明DNA的半保留复制1958年克里克等提出中心法则转录转录翻译翻译逆转录逆转录1963年尼伦伯格和马太破译编码氨基酸的 遗传密码，1966年霍拉纳用实验加以证明技术发明1967年基因转移载体的发现1970年工具酶的发现1965年氨基酸测序和1977年DNA测序技术的发明1972年DNA体外重组的实现1973年重组DNA表达实验的成功1980年第一例转基因动物和1983年第一例转基因 植物问世1988年PCR技术的发明 按照人们的愿
2、望，在DNA分子水平上进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。一、基因工程的概念DNA重组技术生物体外基因DNA分子水平人类需要的新生物类型和产品剪切 拼接 导入 表达基因重组一、基因工程的概念 1.1.什么叫基因？什么叫基因？思考讨论思考讨论3.3.遗传信息是如遗传信息是如何表达的？何表达的？2.2.基因、基因、DNADNA、染色体、染色体之间是怎样的关系？之间是怎样的关系？非编码区非编码区非编码区非编码区编码区编码区与与RNARNA聚合酶结聚合酶结合位点合位点不能转录为信不能转录为信使使RNARNA不能转录
3、为信不能转录为信使使RNARNA能转录为信使能转录为信使RNARNA原核细胞基因结构示意图非编码区非编码区编码区编码区非编码区非编码区与与RNARNA聚合酶聚合酶结合位点结合位点外显子外显子内含子内含子真核细胞基因结构示意图棉花细胞棉花细胞棉花细胞棉花细胞(不能抗虫不能抗虫)抗虫基因抗虫基因抗虫基因抗虫基因转基因抗虫棉转基因抗虫棉转基因抗虫棉转基因抗虫棉(能抗虫能抗虫)苏云金芽孢杆菌苏云金芽孢杆菌苏云金芽孢杆菌苏云金芽孢杆菌培育转基因抗虫棉的简要过程主要来源于原核生物属名头字母+种名头2字母现已从300微生物中分离出约4000种限制酶1.分子手术刀 限制酶识别双链识别双链DNADNA分子中分子
4、中特定核苷酸序列特定核苷酸序列切割特定序列中的切割特定序列中的特定位点特定位点专一性专一性限制酶作用的化学键E.coli DNA连接酶T4 DNA连接酶只作用于 末端主要作用于 末端，还可作用于 末端DNA片段磷酸二酯键黏性平黏性通过形成新的磷酸二酯键，形成重组DNA2.分子缝合针DNA连接酶DNA1CTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT DNA2GGCATCTTAAAATTCCGTAG 重组重组DNADNAGGCATCTTAAAATTCCGTAG 由于切割后的载体和目的基因具有相同的末端，故重组DNA存在3中可能连接。即 、。重组DNA一定是载体-目的基因
5、连接吗？载体-目的基因载体-载体目的基因-目的基因DNA连接酶连接重组DNA分子能够在宿主细胞中复制并稳定地保存；目的基因怎样才能在受体细胞分裂时不被丢失从而稳定地存在于子细胞内，同时获得更多所需要的产品呢？将外源基因送入受体细胞 具有特殊的标记基因，便于进行筛选；质粒、噬菌体和动植物病毒存在于细菌及酵母菌等微生物中，核DNA以外能自我复制的小型环状DNA分子对受体细胞无害具有多个限制酶切点，以便与外源基因插入其中；载体能对受体细胞有害吗？载体怎样才能具有能连接不同目的基因的潜能呢？目的基因是否进入受体细胞，你如何察觉？3.分子运输车载体载体三大工具三大工具分子手术刀分子手术刀限制性内切酶限制
6、性内切酶分子缝合针分子缝合针DNADNA连接酶连接酶分子运输车分子运输车运载体运载体小节：基因工程的原理如图，就下列与核酸相关酶的作用机理填空：如图，就下列与核酸相关酶的作用机理填空：限制酶限制酶 解旋酶解旋酶 DNADNA连接酶连接酶 DNADNA聚合酶聚合酶 RNARNA聚合酶聚合酶baA.切断a处的酶为_B.连接a处的酶为_C.切断b处的酶为_D.连接b处的酶为_无练习：目的基因的获取目的基因的获取基因表达载体的构建基因表达载体的构建目的基因导入受体细胞目的基因导入受体细胞目的基因的检测与鉴定目的基因的检测与鉴定有了目的基因，我们才有了目的基因，我们才能赋予一种生物以另一能赋予一种生物以
7、另一种生物的遗传特性。种生物的遗传特性。使目的基因在受体细胞使目的基因在受体细胞中稳定存在，并可进行中稳定存在，并可进行遗传、表达和发挥作用遗传、表达和发挥作用 载体进入受体细胞稳定载体进入受体细胞稳定表达，才能实现一种生表达，才能实现一种生物的基因在另一种生物物的基因在另一种生物中的转化。中的转化。才能确定目的基因是否才能确定目的基因是否真正在受体细胞中稳定真正在受体细胞中稳定遗传和正确表达。遗传和正确表达。基因工程基本操作的四个步骤1 12 23 34 4（一）目的基因主要是（一）目的基因主要是_。编码蛋白质的结构基因编码蛋白质的结构基因（二）获取目的基因的常用方法有哪些（二）获取目的基因
8、的常用方法有哪些?1 1、从基因文库中获取、从基因文库中获取2 2、利用、利用PCRPCR技术扩增技术扩增3 3、人工合成、人工合成一、目的基因的获取1.1.基因文库：基因文库：概念见概念见P9P92.2.基因文库的分类基因文库的分类:按外源按外源DNADNA片段的来源分类片段的来源分类种种类类基因组基因组DNA文库：文库：含有一种生物的含有一种生物的全部全部基因基因部分基因文库：部分基因文库：只包含了一种生物的只包含了一种生物的部分部分基因，基因，如：如：cDNA文库文库3.3.基因文库的目的基因文库的目的为了在不知目的基因序列的情况下，便于获得所需的为了在不知目的基因序列的情况下，便于获得
9、所需的目的基因。目的基因。4.4.获取目的基因的根据：获取目的基因的根据：见课本见课本P9（一）从基因文库中直接获取提取某种生物的全部提取某种生物的全部DNADNA限制酶切限制酶切一定大小的一定大小的DNADNA片段片段与载体连接与载体连接导入受体菌中储存导入受体菌中储存基因组文库基因组文库5.5.基因文库的构建方法基因文库的构建方法（1 1）直接分离法）直接分离法(鸟枪法鸟枪法)基因组基因组基因组基因组DNADNADNADNA基因重组基因重组基因重组基因重组转化细菌转化细菌转化细菌转化细菌体外包装体外包装体外包装体外包装某种生物的单链某种生物的单链mRNAmRNA单链互补单链互补DNADNA
10、双链双链cDNAcDNA片段片段导入受体菌中储存导入受体菌中储存与载体连接与载体连接cDNAcDNA文库文库逆转录酶逆转录酶DNADNA聚合酶聚合酶（2 2）反转录法：）反转录法：cDNAcDNA的合成的合成mRNA基因重组基因重组反转录酶反转录酶cDNA 1.1.概念：概念：PCRPCR全称为全称为_，是一项，是一项 在生物在生物_复制复制_的核酸合成技术。的核酸合成技术。聚合酶链式反应聚合酶链式反应体外体外特定特定DNADNA片段片段2.2.原理：原理：DNADNA复制复制（二）利用PCR技术扩增目的基因四种脱氧核苷酸四种脱氧核苷酸(dNTP)(dNTP)一对引物：一对引物：热稳定热稳定D
11、NADNA聚合酶聚合酶(Taq(Taq酶）酶）模板模板DNA(DNA(含有目的基因含有目的基因 )3.3.条件：条件：条件：条件：一对寡核苷酸序列：与目的基因一对寡核苷酸序列：与目的基因的起始段互补的起始段互补一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成引物。一序列合成引物。4.4.前提：前提：前提：前提：5.5.过程过程过程过程a a、变性、变性（90-9590-95）：双链）：双链DNADNA模板模板 在热作用下，在热作用下，_断裂，形成断裂，形成_b b、退火、退火（复性复性55-6555-65）：系统温度降低，引）：系统温度降低，引 物与物
12、与DNADNA模板结合，形成局部模板结合，形成局部_。c c、延伸、延伸（70-7570-75）：在）：在TaqTaq酶的作用下，酶的作用下，合成与模板互补的合成与模板互补的_。氢键氢键单链单链DNADNA双链双链DNADNA链链PCR技术扩增与DNA复制的比较碱基互补配对碱基互补配对四种脱氧核苷酸四种脱氧核苷酸模板、能量、酶模板、能量、酶DNA在高温下变性解旋在高温下变性解旋解旋酶催化解旋酶催化体外复制体外复制细胞核内细胞核内热稳定的热稳定的DNA聚合酶聚合酶细胞内的细胞内的DNA聚合酶聚合酶大量的大量的DNA片段片段形成整个形成整个DNA分子分子目的基因的目的基因的目的基因的目的基因的mR
13、NAmRNAmRNAmRNA单链单链单链单链DNADNADNADNA(cDNA(cDNA）双链双链双链双链DNADNADNADNA(即目的基因即目的基因即目的基因即目的基因)反转录反转录反转录反转录合成合成合成合成1.反转录法：反转录法：以目的基因转录成的信以目的基因转录成的信使使RNARNA为模板，反转录成互为模板，反转录成互补的单链补的单链DNADNA，然后在酶的，然后在酶的作用下合成双链作用下合成双链DNADNA，从而，从而获得所需的基因。获得所需的基因。蛋白质蛋白质的氨基的氨基酸序列酸序列mRNAmRNA的的核苷酸核苷酸序列序列结构基因结构基因的核苷酸的核苷酸序列序列目的目的基因基因推
14、测推测推测推测化学化学合成合成2.根据已知的氨基酸序列合成根据已知的氨基酸序列合成DNA法法：（三）人工合成的目的基因1.目的：目的：所需物质：所需物质：使目的基因在受体细胞中稳定存在，使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时使目的并且可以遗传给下一代，同时使目的基因能够表达和发挥作用。基因能够表达和发挥作用。二、基因表达载体的构建2.基因表达载体的组成：基因表达载体的组成：复制原点复制原点+目的基因目的基因+启动子启动子+终止子终止子+标记基因标记基因（一）转化：（一）转化：（二）方法（二）方法将目的基因导入将目的基因导入植物细胞植物细胞将目的基因导入将目的基因导入动物细胞
15、动物细胞将目的基因导入将目的基因导入微生物细胞微生物细胞农杆菌转化法农杆菌转化法基因枪法基因枪法花粉管通道法花粉管通道法显微注射法显微注射法感受态细胞感受态细胞目的基因进入目的基因进入_内，并且在内，并且在 受体细胞内维持受体细胞内维持_和和_的过程的过程受体细胞受体细胞稳定稳定表达表达三、将目的基因导入受体细胞1 1、将目的基因导入植物细胞的方法：、将目的基因导入植物细胞的方法：（1）农杆菌转化法农杆菌转化法 农杆菌特点：农杆菌特点：易感染双子叶植物和裸子植物，对大多易感染双子叶植物和裸子植物，对大多数单子叶植物没有感染能力。数单子叶植物没有感染能力。原理：原理：Ti质粒上的质粒上的T-DN
16、A可以转移到受体细胞，可以转移到受体细胞，并整合到受体细胞染色体的并整合到受体细胞染色体的DNA上。上。过程：过程：优点优点（2）基因枪法基因枪法（3）花粉管通道法花粉管通道法2 2、将目的基因导入动物细胞、将目的基因导入动物细胞方法：显微注射法方法：显微注射法程序：程序：3 3、将目的基因导入微生物细胞、将目的基因导入微生物细胞原核生物特点：繁殖快、单细胞、遗传物质少原核生物特点：繁殖快、单细胞、遗传物质少方法：方法：用用Ca2+处理细胞处理细胞 感受态细胞感受态细胞表达载体与感受态细胞混合表达载体与感受态细胞混合感受态细胞吸收感受态细胞吸收DNA分子分子四、目的基因的检测与鉴定（一）检测（
17、一）检测1 1、检测转基因生物染色体的、检测转基因生物染色体的DNA上是否插入了上是否插入了目的基因目的基因首先取出转基因生物的基因组首先取出转基因生物的基因组DNA用含目的基因的用含目的基因的DNA片段用放射性同位素等片段用放射性同位素等作标记，以此做探针作标记，以此做探针使探针和转基因生物的基因组杂交使探针和转基因生物的基因组杂交,若显示出若显示出杂交带，表明染色体已插入染色体杂交带，表明染色体已插入染色体DNA中中（1）方法方法:DNA分子杂交分子杂交（2）过程）过程:2 2、检测目的基因是否转录出了、检测目的基因是否转录出了mRNAmRNA3 3、检测目的基因是否翻译成蛋白质、检测目的
18、基因是否翻译成蛋白质（1 1）方法）方法:分子杂交分子杂交方法方法:抗原抗体杂交抗原抗体杂交（2）过程）过程:用上述探针和转基因生物的用上述探针和转基因生物的mRNA杂交，若杂交，若出现杂交带出现杂交带,表明目的基因转录出了表明目的基因转录出了mRNA（二）鉴定（二）鉴定抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等1.1.获取目的基因获取目的基因u从基因文库从基因文库u利用利用PCRPCRu化学方法人工合成化学方法人工合成2.2.构建基因表达载体构建基因表达载体u目的基因、启动子、终止子、标记基因目的基因、启动子、终止子、标记基因3.3.将目的基因导入受体细胞将目的基因导入受体
19、细胞u农杆菌转化法、显微注射法农杆菌转化法、显微注射法4.4.目的基因的检测与鉴定目的基因的检测与鉴定u检测：是否插入、转录、翻译检测：是否插入、转录、翻译u鉴定：鉴定：小节:基因工程的基本操作程序 已知标记基因有抗四环素基因和抗氨苄青霉素的基因，现探讨某细菌的质粒中有无标记基因或标记基因是什么？请设计实验、预期实验结果，并得出相应的实验结论。不添加抗生素添加一定浓度的四环素添加一定浓度的氨苄青霉素添加一定浓度的两种抗生素A AB BC CD D练习：既既含有抗四环素基因含有抗四环素基因 也也含有抗氨苄青霉素基因含有抗氨苄青霉素基因只含有抗四环素基因只含有抗四环素基因只含有抗氨苄青霉素基因只含
20、有抗氨苄青霉素基因既既不含有不含有抗四环素基因抗四环素基因 也也不含有不含有抗氨苄青霉素基因抗氨苄青霉素基因不添加抗不添加抗生素生素添加一定浓添加一定浓度的度的四环素四环素添加一定浓度添加一定浓度的的氨苄青霉素氨苄青霉素添加一定浓度添加一定浓度的的两种抗生素两种抗生素A AB BC CD D一、植物基因工程硕果累累转基因工程技术主要用于转基因工程技术主要用于提高农作物的抗逆能力提高农作物的抗逆能力,以及以及改良农作物的品质改良农作物的品质和和利用植物生产药物利用植物生产药物等方面。等方面。二、动物基因工程前景广阔1.用于提高动物生长速度2.用于改善畜产品的品质3.用转基因的动物生产药物乳腺生物
21、乳腺生物反应器反应器获取目的基因获取目的基因（例如血清蛋白基因）（例如血清蛋白基因）构建基因表达载体构建基因表达载体（在血清白蛋白基因前加特异表达的启动子在血清白蛋白基因前加特异表达的启动子）显微注射导入哺乳动物受精卵中显微注射导入哺乳动物受精卵中形成胚胎形成胚胎将胚胎送入母体动物将胚胎送入母体动物发育成转基因动物（发育成转基因动物（只有在产下的雌性动物只有在产下的雌性动物个体中，转入的基因才能表达个体中，转入的基因才能表达）1、乳腺是一个外分泌器官，乳汁不进入体内循环，不会影响转基因动物本身的生理代谢反应。2、从乳汁中获取目的基因产物，产量高，易提纯，表达的蛋白质已经过充分的修饰加工，具有稳
22、定的生物活性。3、从乳汁中源源不断获得目的基因的产物的同时，转基因动物又可无限繁殖。为什么乳腺能成为基因药物最理想的表达场所呢？4.用转基因的动物作器官移植的供体1、供体动物：、供体动物：2、存在的难题：、存在的难题：3、解决方法：、解决方法：将供体基因组导入某种基因调将供体基因组导入某种基因调节因子，以抑制抗原决定基因节因子，以抑制抗原决定基因的表达，或设法除去抗原决定的表达，或设法除去抗原决定基因，再结合克隆技术，培育基因，再结合克隆技术，培育出没有免疫排斥反应的转基因出没有免疫排斥反应的转基因克隆猪器官。克隆猪器官。猪猪免疫排斥免疫排斥 三.基因工程药品异军突起 利用基因工程方法制造利用
23、基因工程方法制造“工程菌工程菌”，可，可高效率地生产出各种高质量、低成本的药品。高效率地生产出各种高质量、低成本的药品。我国已生产的产品我国已生产的产品白细胞介素白细胞介素-2、干扰素、干扰素、乙肝疫苗等乙肝疫苗等近近20种，年产值达种，年产值达30亿亿工程菌：工程菌：用基因工程的方法，使外源基因得用基因工程的方法，使外源基因得到高效率表达的菌类细胞株系到高效率表达的菌类细胞株系。作用：胰岛素是治疗糖尿病的特效药。作用：胰岛素是治疗糖尿病的特效药。传统生产方法：传统生产方法：主要从猪、牛等家畜主要从猪、牛等家畜的胰腺中提取，每的胰腺中提取，每100kg100kg胰腺只能提取胰腺只能提取45g4
24、5g胰岛素。产量低，价格昂贵。胰岛素。产量低，价格昂贵。基因工程方法：基因工程方法：19791979年，科学家将动物年，科学家将动物体内的胰岛素基因与大肠杆菌体内的胰岛素基因与大肠杆菌DNADNA分子重组，分子重组，并在大肠杆菌内实现了表达。并在大肠杆菌内实现了表达。19821982年，美国一家基因公司用基因工程年，美国一家基因公司用基因工程方法生产的胰岛素投入市场，售价降低了方法生产的胰岛素投入市场，售价降低了30%50%30%50%。基因工程药品 胰岛素基因工程药品 干扰素 化学本质：是病毒侵入动物或人体细胞后化学本质：是病毒侵入动物或人体细胞后产生的一种糖蛋白。产生的一种糖蛋白。作用：干
25、扰素几乎能抵抗所有病毒引起的作用：干扰素几乎能抵抗所有病毒引起的感染，是一种抗病毒的特效药。此外干扰素对感染，是一种抗病毒的特效药。此外干扰素对治疗某些癌症和白血病也有一定疗效。治疗某些癌症和白血病也有一定疗效。传统生产方法：从人血液中的白细胞内提传统生产方法：从人血液中的白细胞内提取。取。基因工程方法：基因工程方法：1980198219801982年，科学家在大年，科学家在大肠杆菌及酵母菌细胞内获得了干扰素。肠杆菌及酵母菌细胞内获得了干扰素。中国生产（中国生产（19931993年）：重组人干扰素年）：重组人干扰素a-1b:a-1b:治疗乙型肝炎治疗乙型肝炎基因工程药品 生长激素 治疗侏儒症的
26、唯一方法：是向人体注射治疗侏儒症的唯一方法：是向人体注射生长激素。生长激素。传统生产方法：需解剖尸体，从大脑的传统生产方法：需解剖尸体，从大脑的底部摘取垂体，并从中提取生长激素。底部摘取垂体，并从中提取生长激素。基因工程方法，将人的生长激素基因导基因工程方法，将人的生长激素基因导入大肠杆菌中，使其生产生长激素。入大肠杆菌中，使其生产生长激素。人们从人们从 450 L450 L大肠杆菌培养液中提取的大肠杆菌培养液中提取的生长激素，相当于生长激素，相当于6 6万具尸体的全部产量。万具尸体的全部产量。四、基因治疗曙光初照1 1、基因诊断：、基因诊断：也称为也称为DNADNA诊断或基因探针技术，即在诊
27、断或基因探针技术，即在DNADNA水平分析检测某一基因，从而对特定的水平分析检测某一基因，从而对特定的疾病进行诊断。疾病进行诊断。基因探针：基因探针：基因探针就是一段与目的基因或被测基因探针就是一段与目的基因或被测DNADNA互互补的特异核苷酸序列。它包括整个基因，或基补的特异核苷酸序列。它包括整个基因，或基因的一部分。因的一部分。2 2、基因治疗、基因治疗1）原理：）原理：把正常基因把正常基因导入导入病人体内，使该病人体内，使该基因的表达产物发挥功能，达到基因的表达产物发挥功能，达到治疗疾病的目的。治疗疾病的目的。2）实例：）实例：复合型免疫缺陷症复合型免疫缺陷症3）基因治疗的方法）基因治疗
28、的方法体外基因治疗：体外基因治疗：体内基因治疗：体内基因治疗：知识回顾基因工程的实质是什么？基因工程的实质是什么？将将一种生物的基因一种生物的基因转移到转移到另一种生物体内另一种生物体内，后者可以产生它本来不能产生的蛋白质，进后者可以产生它本来不能产生的蛋白质，进而表现出新的性状而表现出新的性状。思考：思考：基因工程产生的蛋白质是否完全基因工程产生的蛋白质是否完全符合人类生产和生活的需要？符合人类生产和生活的需要？1 1基因工程的局限性：基因工程的局限性：a、基因工程在原则上只能生产自然、基因工程在原则上只能生产自然 界已存在的蛋白质界已存在的蛋白质b、天然蛋白质不一定完全符合人类、天然蛋白质
29、不一定完全符合人类 生产和生活的需要生产和生活的需要2 2蛋白质工程的目的：蛋白质工程的目的：生产符合人们生活需要的并生产符合人们生活需要的并非自然界非自然界已存在已存在的蛋白质的蛋白质一、蛋白质工程崛起的缘由例如：改造改造干扰素（半胱氨酸）干扰素（半胱氨酸）体外很难保存体外很难保存干扰素（丝氨酸）干扰素（丝氨酸）体外可以保存半年体外可以保存半年玉米中赖氨酸含量比较低玉米中赖氨酸含量比较低天冬氨酸激酶天冬氨酸激酶（352位的苏氨酸）位的苏氨酸）二氢吡啶二羧酸合成酶二氢吡啶二羧酸合成酶（104位的天冬酰胺）位的天冬酰胺）改造改造改造改造天冬氨酸激酶天冬氨酸激酶（异亮氨酸）（异亮氨酸）二氢吡啶二羧
30、酸合成酶二氢吡啶二羧酸合成酶（异亮氨酸）（异亮氨酸）玉米中赖氨酸含量可提高数倍玉米中赖氨酸含量可提高数倍1 1蛋白质工程的概念：蛋白质工程的概念：如：与生物抗性相关的基因、与优良品质相关的基因、与生物药物和保健品相关的基因、与毒物降解相关的基因、与工业用酶相关的基因、具调控作用的因子等。2 2前提：前提：了解蛋白质的结构和功能了解蛋白质的结构和功能原理：原理：改造基因（基因修饰或基因合成）改造基因（基因修饰或基因合成）目的：目的：定向改造或制造蛋白质定向改造或制造蛋白质二、蛋白质工程的基本原理蛋白质工程流程图：预期预期功能功能DNA合成合成分子分子设计设计生物生物功能功能转录转录翻译翻译折叠折
31、叠1.从预期的蛋白质功能出发从预期的蛋白质功能出发2.设计预期的蛋白质结构设计预期的蛋白质结构3.推测应有的氨基酸序列推测应有的氨基酸序列4.找到相应的脱氧核苷酸序列找到相应的脱氧核苷酸序列蛋白质工程的主要步骤通常包括：（1）从生物体中分离纯化目的蛋白；）从生物体中分离纯化目的蛋白；（2）测定其氨基酸序列；）测定其氨基酸序列；（3）借助核磁共振和）借助核磁共振和X射线晶体衍射等手段，尽可能射线晶体衍射等手段，尽可能 地了解蛋白质的二维重组和三维晶体结构地了解蛋白质的二维重组和三维晶体结构;（4）设计各种处理条件，了解蛋白质的结构变化，包）设计各种处理条件，了解蛋白质的结构变化，包括折叠与去折叠
32、等对其活性与功能的影响；括折叠与去折叠等对其活性与功能的影响；（5）设计编码该蛋白的基因改造方案，如定点突变；）设计编码该蛋白的基因改造方案，如定点突变；（6）分离、纯化新蛋白，功能检测后投入实际使用。）分离、纯化新蛋白，功能检测后投入实际使用。某多肽链的一段氨基酸序列是：某多肽链的一段氨基酸序列是：-丙氨酸丙氨酸-色氨酸色氨酸-赖氨酸赖氨酸-甲硫氨酸甲硫氨酸-苯丙氨酸苯丙氨酸-丙氨酸：丙氨酸：GCUGCU、GCCGCC、GCAGCA、GCG GCG 色氨酸：色氨酸：UGG UGG 赖氨酸：赖氨酸：AAAAAA、AAG AAG 甲硫氨酸：甲硫氨酸：AUG AUG 苯丙氨酸：苯丙氨酸：UUUUU
33、U、UUC UUC 讨论：讨论：1、怎样得出决定这一段肽链的脱氧核苷酸序列？、怎样得出决定这一段肽链的脱氧核苷酸序列？请把相应的碱基序列写出来。请把相应的碱基序列写出来。2、确定目的基因的碱基序列后，怎样才能合成或改、确定目的基因的碱基序列后，怎样才能合成或改 造目的基因（造目的基因（DNA）？）？讨论 蛋白质工程目前的现状：蛋白质工程目前的现状：成功的例子不多，主要是因成功的例子不多，主要是因为蛋白质发挥其功能需要依为蛋白质发挥其功能需要依赖于正确的空间结构，而科赖于正确的空间结构，而科学家目前对大多数蛋白质的学家目前对大多数蛋白质的空间结构了解很少。空间结构了解很少。三、蛋白质工程的进展与前景比较基因工程和蛋白质工程：优秀课件 尽在海波飞更多精彩：优 秀 课 件尽 在 海 波 飞扬扬联系作者：