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1、一绪论临床检验技术技术分类：临床化学检验分析技术（包括自动生化分析、干化学分析、血气分析、电解质分析、电泳分析）临床免疫学检验分析技术临床血液学检验和尿液检验分析技术（血细胞分析、血液凝固分析、血液流变分析、流式细胞分析、血红细胞沉降分析和尿液分析）临床微生物学检验分析技术临床分子生物学检验分析技术二血细胞分析技术血液由血浆（55%）和血细胞（45%）组成。（填空题）所谓血细胞计数主要是指计数单位容积中红细胞、白细胞和血小板的个数。（填空题）白细胞被称为人体卫士，它可以防止外来微生物的侵害及其他感染。血细胞计数有变阻脉冲法（简称变阻法）、光电计数法和激光计数法。（大题）变阻法血细胞计数原理：血
2、细胞是电的不良导体，将血细胞置于电解液中，由于细胞很小，一般不会影响电解液的导通程度。但是如果构成电路的某一小段电解液截面很小，其尺度可与细胞直径相比拟，那么当有细胞浮游到此时，将明显增大整段电解液的等效电阻。如果该电解液外接恒流源(不论负载阻值如何改变，均提供恒定不变的电流)，则此时电解液中两极间的电压是增大的，产生的电压脉冲信号与血细胞的电阻率成正比。如果控制定量溶有血细胞的电解溶液，使其从小截面通过，也即使血细胞顺序通过小截面，则可得到一连串脉冲，对这些脉冲计数，就可求得血细胞数量。由于各种血细胞直径不同，所以其电阻率也不同，所测得的脉冲幅度也不同，根据这一特点就可以对各种血细胞进行分类
3、计数。这就是变阻脉冲法原理。（填空题）变阻脉冲法计数在大多数细胞计数器中是利用小孔管换能器装置实现的。（填空题）脉冲的个数与通过小孔的细胞个数相当，脉冲的幅度与细胞体积成正比。脉冲信号经过下列步骤得出细胞计数结果：放大，阈值调节，甄别，整形。（填空题）体积不同的红细胞、白细胞、血小板，其产生的脉冲幅度也不同，排列序列以白细胞最大，红细胞次之，血小板最小。（简答）什么叫细胞直方图：以体积为横坐标，以细胞的相对数量为纵坐标。把细胞在一个个很小的体积范围（小于2fld，又称通道，频道）内的数量分布情况表达出来，我们称之为直方图。红细胞直方图（显示范围从24360fl）血小板直方图（显示范围036fl
4、）白细胞直方图（显示范围是30450fl，在直方图上表现为3个白细胞亚群，3590fl范围的淋巴细胞群，可以包括淋巴细胞，91160fl范围的单个核细胞群，可以包括单核细胞、幼稚细胞，161450fl范围的粒细胞群，可以包括嗜酸性细胞、嗜碱性细胞、中性粒细胞。）白细胞直方图除显示分类外，还显示4个报警区域，如果某个报警区域里的计数值异常增多，就在此区域出现R报警，R1为直方图上淋巴峰左侧区域有异常，可能有血小板凝块、巨大血小板、有核红细胞、不溶性红细胞和冷凝集素等因素的影响，R2为直方图上淋巴峰和单和峰之间的区域有异常，可能有异型淋巴细胞、幼稚淋巴细胞、浆细胞、嗜酸性细胞或嗜碱性细胞等因素的影
5、响，R3为直方图上核峰和中性粒峰之间的区域有异常有不成熟粒细胞、嗜酸性粒细胞等因素的影响，R4为直方图上中性粒峰右侧区域有异常，粒细胞数量过多，Rm为以上区域2个或2个以上同时有异常。存在着2个以上的细胞同时通过细孔的现象称为重合现象。为了在物理上最大限度地减少重合现象，开发出了鞘流法，具体方法为：具体做法是用一毛细管对准小孔管,细胞混悬液从毛细管喷出,同时与四周流出的鞘液一起流过敏感区,保证细胞混悬液在中间形成单个排列的细胞液,四周被鞘液围绕.鞘流技术可应用于两种细胞计数原理:一为电阻抗原理,鞘流通过小孔的敏感区进行细胞计数,另一种为激光计数原理,细胞液流室较长,与激光垂直相交,激光光束对流
6、经的每一个细胞照射后产生光散射,利用此原理进行细胞计数。（大题）为控制细胞通过小孔时的精密度，除采用鞘流技术外，各厂家还采用了一系列相关技术：脉冲编辑，高精度体积分析，扫流技术，防反流装置VonBehrens感应器，延时计数。定量装置中的特殊部件主要有负压泵、压力调节器、废液瓶等。（大题）白细胞分类技术：1.容量、电导、光散射法(VCS)体积（V）：测量使用的是电阻抗原理。电导法（C）：根据细胞壁能产生高频电流的性能采用高频电磁探针，测量细胞内部结构、细胞核和细胞浆的比例以及细胞内质粒的大小和密度。光散射（S）：是根据细胞表面光散射的特点提供了注重细胞类型的鉴别方式，来自激光光源的单色光束直接
7、进入计数池的敏感区，在1070时对每一个细胞进行扫描分析，提供了细胞结构，形态的光散射信息。2.阻抗与射频联合法：此类仪器白细胞分类通过三个不同检测系统完成.a嗜酸性细胞检测系统b嗜碱性细胞检测系统c淋巴、单核、粒细胞（中性、嗜碱性、嗜酸性）检测系统3.光散射与细胞化学技术联合法4.多角度偏振光散射技术。测量正常标本时，可以从这4个角度（0、10、90垂直光散射对白细胞进行测量。同一种特定的程序自动存储和分析数据，将白细胞分为嗜酸性粒、中性粒、嗜碱性粒、淋巴和单核五种。（大题）血红蛋白测量原理：血红蛋白的单位是g100m1(新制是gL)，临床检验时因难以从血液中将其分离出来而采用相对比色法进行
8、间接测量。用溶血剂将经过稀释的血液中的红细胞破坏，血红蛋白便溶解出来，再加入转化试剂进而转化为颜色稳定的氰化血红蛋白。血红蛋白含量越高，它的颜色就越深，透光性就越差(或吸光性越强)。用光电器件检测透射光强度，并与已定标的血红蛋白值相比较，即可得出血红蛋白含量。常用的光路系统为了防止光散射和外来光干扰，均采用双波长法测量。在血液样品中加入氰化钾，将生成氰化血红蛋白，这是一种颜色很稳定的物质。它的光密度曲线在540nm处有一个吸收峰。（填空）血样分析一般包括吸样、稀释、送样等过程。三流式细胞分析技术（简答题）流式细胞仪（FCM）：主要功能：可进行细胞多参量分析，包括细胞大小、形状、蛋白荧光、氧化还
9、原状态、膜的结构、流动性、微黏性、膜电位、酶活性、钙离子含量、pH、染色质结构、DNA合成、碱基比例等；进行细胞表型分析；细胞分选、DNA含量分析以及细胞分化周期分析等。FCM工作原理：将待测细胞染色后制成单细胞悬液。用一定压力将待测样品压入流动室，不含细胞的磷酸缓冲液在高压下从鞘液管喷出，鞘液管入口方向与待测样品流成一定角度，这样，鞘液就能够包围着样品高速流动，组成一个圆形的流束，待测细胞在鞘液的包被下单行排列，依次通过监测区域。流式细胞仪通常以激光作为激发光源。经过聚焦整形后的光束，垂直照射在样品流上，被荧光染色的细胞在激光束的照射下产生散射光和激光荧光。光散射信号在前向小角度进行检测，这
10、种信号基本上反映了细胞体积的大小。这些荧光信号的强度代表了所测细胞膜表面抗原的强度或其核内物质的浓度，经光电倍增管接收后可转换为电信号。细胞的分选是通过分离含有单细胞的液滴而实现的。流式细胞仪中所用的滤片有中性滤片、带通滤片、带阻滤片、长波通滤片、短波通滤片、长波通双色性反射片（填空题）影响流式细胞术分析的因素：细胞的荧光染色、激光光源的稳定性、细胞流速的稳定性、细胞悬液样品的影响（细胞黏连，团块常造成管道阻塞，重叠细胞可造成分析误差。）流式细胞仪的组成：光学系统，液流系统，电子系统，计算机系统和数据转换处理系统。（大题）流式细胞仪的临床应用：在免疫学中的应用（外周血T淋巴细胞亚群的测定，T淋
11、巴细胞亚群用于器官移植后排斥反应的监测，肺泡灌洗液中T淋巴细胞亚群的测定，在艾滋病监测中的应用，细胞内染色和细胞因子的测定）；在血液病学中的应用。四血凝分析技术生物学方法：凝固法，即将凝血因子激活剂加入到待检血浆中，使血浆发生体外凝固，凝血仪连续记录血浆凝固过程中的一系列变化，并将这些变化信号转变成数据，用计算机收集、处理数据后得出检测结果。（填空题）可分为三类：电流法、黏度法、光学法。（判断题）凝血仪根据这种由于血液凝固而导致光强度的变化来判断凝固终点的方法称之为光学法。（填空或判断题）散射比浊法：根据待检样品在凝固过程中散射光的变化来确定凝固终点的检测方法。透射比浊法：根据待检样品在凝固过
12、程中吸光度的变化来确定凝固终点的检测方法。黏度法：在待检样品中加入小铁珠，利用变化的磁场使小铁珠产生运动，随着血浆的凝固，血浆粘稠度增加，小铁珠的运动强度逐渐减弱，仪器根据小铁珠运动强度的变化来确定凝固终点。生物化学方法是以酶学方法为基础的直接定量法，其优点是用酶学方法直接定量；测定结果准确；重复性好；便于自动化；标准化；所需样品量小。五血液流变学分析技术影响血液流变特性因素：红细胞的特性、白细胞的变形性、血小板的聚集性、纤维蛋白原浓度等血液流变特性：红细胞聚集性，红细胞变形性，血液黏度（全血黏度、运动黏度、相对黏度、比黏度、还原黏度）。血液黏度的测量是其中最重要的指标。测量血液黏度的仪器目前
13、普遍应用的是毛细管黏度计及回转锥板式黏度计。毛细管法测血黏度的理论依据是泊肃叶定律。血液黏度的影响因素：血液中细胞因素的影响；血浆血清黏度对血液黏度的影响；温度对血液黏度的影响；酸碱度及渗透压对血液黏度的影响；血液流速对血液黏度的影响；血管对血液黏度的影响；其他如性别，新生儿，运动，时间，季节等。六尿液分析技术尿液分析仪是某些化学成分含量的专用自动化仪器，可分为湿式和干式化学系统两大类。自动尿液分析的原理和方法：（填空或选择题）按测试项目分类：8项尿液分析仪包括尿蛋白（PRO）、尿糖(GLU)、尿PH（PH）、尿酮体（KET）、尿胆红素(BIL)、尿胆原(URO,UBG)、尿潜血(ERY)、尿
14、亚硝酸盐(NTT)。9项尿液分析仪包括尿8项+尿白细胞（WBC或LUE）。10项尿液分析仪包括尿8项+尿白细胞、尿比重。11项尿液分析仪包括尿8项+尿白细胞、尿比重和颜色或维生素C。12项尿液分析仪包括尿8项+尿白细胞、尿比重、尿液颜色和浊度。（大题）尿液干化学分析仪的测试原理：多联试剂带的多层膜结构：1尼龙膜2绒制层3吸水层4塑料片空白块是为了消除尿液本身的颜色及试剂块分布的状态不均等所产生测试误差，提高测量准确度而设置的。原理：当把浸了尿液的试剂带放入分析仪的试剂带传送带槽内，传送系统将试剂带传送到检测器下面进行扫描时，实际带上已经产生化学反应的各种试剂块被光源照射，其反射光被检测器吸收。
15、试剂带中各试剂块与尿液中相应成分发生反应，显示不同颜色，颜色的深度与尿液中某些成分成比例关系，试剂带中还有另一个试剂块称为颜色补偿区，作为尿液本身颜色，以此对颜色尿液及仪器变化等产生的误差进行补偿。测定每种试剂带反射光的光量值，将其与空白块的反射光量值进行比较，通过计算机求出由反射率换算成的浓度值，便可由分析仪打印出半定量的数值。尿沉渣分析仪原理：应用了流式细胞和电阻抗的原理。当一个尿液标本被稀释并经染色液染色后，靠液压作用通过鞘液活动池。当反应样品从样品喷嘴出口进进鞘液活动室时，被一种无粒子颗粒的鞘液包围，使每个细胞以单个纵列的形式通过活动池的中心（竖直）轴线，在这里每个尿液细胞被氩激光光束
16、照射。每个细胞有不同程度的荧光强度，从染色尿液细胞发出的荧光，主要反映细胞的定量特性，如细胞膜、核膜、线粒体和核酸）、前向散射光强度和电阻抗的大小（电阻抗电信号主要与细胞的体积成正比）。仪器正是将这种荧光、散射光等光信号转变成电信号，并对各种信号进行分析，最后得到每个尿液标本产生出的直方图和散射图。全自动尿沉渣分析仪主要由光学检测系统、液压系统、电阻抗检测系统和电路系统组成。七血气分析技术血气分析仪是通过对人体血液及呼出气的酸碱度（pH）、二氧化碳分压（PCO2）、氧分压（PO2）进行定量测定，来分析和评价人体血液酸碱平衡（紊乱）状态和输氧状态的仪器。利用各种活性膜直接测量溶液中特定离子浓度的
17、电极叫离子选择电极，简称ISE，遵循能斯特方程式。（简答题）离子选择性电极的分类：按电极膜材料的不同来划分，分为固体离子交换膜电极、液体离子交换膜电极（用浸有液体离子交换剂的惰性孔薄膜代替固体膜作为电极膜）、气敏电极和酶电极等类型。（简答题）固体离子交换膜电极分类：玻璃电极、压片膜电极、单晶膜膜电极、非均相膜电极。离子选择性电极的特点：直接测定、选择性强、响应快，测量迅速、适应性强，应用广泛、所需样品少、总体价格低廉、携带方便、易实现仪器微型化。（判断题）检测下限又称检测限度，它表明离子选择性电极能够检测被测离子的最低浓度。（填空题）参比电极：常用的有两种，甘汞电极，银-氯化银电极。甘汞电极由
18、水银、甘汞（Hg2CL2）和饱和氯化钾溶液组成。甘汞电极的电位只取决于氯离子的活度。银-氯化银电极的最大特点是在较高温度时，电极电位仍稳定，其最高工作温度达250C。血气分析仪的工作原理：（与电解质分析仪相同），pH系统使用pH值为7.383和6.840左右的两种标准缓冲液进行定标。八电解质分析技术电解质是指在溶液中能解离成带电离子而具有导电性能的一类物质。在临床化学领域中，其主要指体液中最常测定的Na+、K+、Cl-和HCO3-四种电解质，以及Ca2+、Mg2+无机P等电解质分析仪的工作原理及基本结构：电解质分析仪的工作原理和血气分析仪相同，采用一个毛细管测试管路，让待测液体同时和所有的测量
19、电极相接触。不同的电极和样品中相应的离子起作用而建立起各自相应的电位；电计部分将电极产生的电位放大后显示或打印出来。钠电极是一种含铅硅酸钠的玻璃电极。钾电极为采用缬氨霉素与聚氯乙烯的膜电极。氯电极的敏感膜由金属氯化物材料制成。九生化分析技术生化分析仪其结构不同主要分为以下三类：连续流动式生化分析仪、离心式生化分析仪、分离式生化分析仪。生化分析即利用光电比色法来分析样本中的生化指标。（填空题）光具有波动和微粒两种性质，通称光的波粒二象性。某两种颜色的光按照一定的比例混合，能够得到白色光的话，这两种颜色的光就叫做互补色。朗伯-比尔定律：A=KCL，A吸光度K吸光系数C溶液浓度L液层厚度，在入射光一
20、定时，溶液吸光度与溶液浓度及液层厚度成正比。利用光电池或光电管等光电转换元件作检测器来测量通过有色溶液的透射比或吸光度，从而求出被测物质含量的方法叫做光电比色法。光电比色计由光源、滤光片、比色皿、光电检测器、放大和显示等六部分组成。（填空题）分光光度计和光电比色计的最主要区别是用单色（光）器代替了滤光片。分光光度计中常用的色散元件是棱镜和光栅。（简答题）后分光技术的优点：不需移动仪器比色系统中的任何部件，可同时选用双波长或多波长进行测定，这样可降低比色的噪声，提高分析的精确度和减少故障率；通过双波长或多波长可有效的抑制浑浊、溶血、黄疸对实验测定的影响；双波长或多波长可有效的补偿由于电源变动造成
21、的影响。自动生化分析仪的常用分析方法：一点法（加入试剂后，在测定时间中指定一点，测定出相应吸光度值来求得待测物质浓度的方法。）；二点法；二点速率分析法；速率A法。（填空题）生化检测项目在疾病临床诊断中的应用：肝胆疾病、肾脏疾病、糖尿病及其他内分泌疾病、骨代谢标志物。十电泳技术分散介质中带电粒子在电场作用下，向着与其电性相反的电极移动的现象称为电泳。按电泳的原理有三种形式的电泳分离系统：移动界面电泳、区带电泳、稳态电泳（或置换电泳）。等电点IEP：在某一pH的溶液中，蛋白质分子所带的正电荷数可恰好等于负电荷数，所带净电荷为零，呈电中性，此时蛋白质质点在电场中不移动，溶液的pH称为该蛋白质的等电点
22、（IEP）。溶液的pH小于IEP，则蛋白质结合一部分H+而带正电荷，在电场中向负极移动，反之亦然。迁移率：粒子移动速度v/电场强度E表示单位电场强度下带电粒子的运动速度称为迁移率。影响电泳的因素：电场强度，溶液的pH值，溶液的离子强度，电渗，温度，其他如缓冲溶液黏度、缓冲溶液与带离子相互作用。(简答题）溶液离子强度：溶液的离子强度一般在0.02-0.2mol/kg之间时，电泳较合适.离子强度过高，则会降低颗粒的泳动速度离子强度过低,则缓冲能力差，往往会因溶液PH值变化而影响泳动的速率。醋酸纤维薄膜电泳比纸电泳的优势：较之纸电泳有电渗小、分离速度快、分离清晰以及血清用量少、操作简便等优点。毛细管
23、电泳（CE）是20世纪80年代初发展起来的一类高效快速的分离分析方法。十一.散射免疫分析技术散射免疫分析，是一种微量、快速、自动化检测体液中特定蛋白质成分的免疫化学分析技术。该技术是将免疫测定与散射比浊法的原理相结合而设计的一种快速免疫测定方法，主要用于对体液中单个蛋白成分的测定。浊度分析的基本方法分两大类：透射免疫比浊法、散射免疫比浊法（简答题）散射免疫比浊法基本原理：激光散射光系水平轴照射，通过溶液时，遇到抗原抗体复合物粒子，光线钡离子颗粒折射，发生偏转。偏转角度可以从0到90度，这种偏转的角度可因光线波长和粒子大小不同而有所不同。散射光的强度与抗原抗体复合物的含量成正比，同时也和散射夹角
24、成正比，和波长成反比。任何发荧光的物质都存在两个特征光谱，即激发光谱与荧光光谱。物质必须具备三个条件才能发出荧光：具有特征的吸收结构具有一定的荧光效率适宜的环境。（填空题）为了避免或减少荧光物质的光分解作用，应在测定时才打开激发光闸。（填空题）被测药物浓度与荧光偏振程度成反比。时间分辨荧光分析法与通常的FIA法不同，是用三价稀土离子（Eu3+）代替荧光物质、放射性核素或酶作为标记物，标记抗原或抗体，用时间分辨技术测量荧光强度，根据荧光强度或相对荧光强度比值，来判断反应体系被分析物的浓度。十三.酶免疫分析技术基本原理：是将酶催化的放大作用与抗原、抗体的免疫反应相结合的一种微量分析技术。酶标记抗体
25、或抗原后，既不影响抗体或抗原的免疫反应特异性，也不改变酶本身的催化活性，即在相应的反应底物参与下，标记的酶可以使底物基质水解而呈色，或使供氢体由无色还原型转变为有色的氧化型，这种有色产物可以通过肉眼、光学显微镜或电子显微镜进行观察，也可以用分光光度计加以测定。酶免疫分析方法中的主要组成部分：固相载体（塑料-聚苯乙烯或聚氯乙烯制成的微孔反应板48孔/96孔）包被蛋白 待测样品 酶标记物 各种缓冲液。（简答题）酶标仪与普通光电比色计的不同之处在于：1.盛装待测比色液的容器不再使用比色皿,而是使用塑料微孔板.微孔板常用透明的聚乙烯材料制成,对抗原抗体有较强的吸附作用,故用它作为固相载体. 2. 酶标
26、仪的光束是垂直通过待测溶液和微孔板的 3. 酶标仪通常不使用A,而是使用光密度OD来表示吸光度.十四.发光免疫分析技术（简答题）优点：灵敏度高、检测速度快、操作简便、所用试剂对人体无危害，成为非放射性免疫分析技术中最具有发展前景的方法之一。所用的标记物可分为三类，即发光反反应中所消耗掉的标记物、发光反应中起催化作用的标记物、酶标记物。十五.无创性实验诊断技术无创性实验诊断技术可分为两大类，第一类以光谱分析及相关技术分析各种血液与生化成分，第二类为核磁共振光谱学（MRS）。（填空题）血液中的各种无形成分如血红蛋白、葡萄糖、尿素氮、药物及血气分析等，在NIR区均有各自的特异性吸收光谱，这就是利用N
27、IR开展无创性检验的理论基础。无创血气分析主要检测指标分两个方面。一方面是氧合作用的评估，包括氧饱和度，动脉氧分压等指标，其测定技术包括脉氧测定法，通过皮肤测定氧，间接热量测定法；另一方面是肺的换气功能评估，包括二氧化碳分压，二氧化碳含量等指标，其测定技术包括通过皮肤测定二氧化碳，末端潮汐二氧化碳测定。十六. 临床微生物学分析技术临床微生物学检验分析主要包括自动微生物培养，微生物鉴定和抗菌药物敏感试验等。自动化血培养检测系统的基础是检测细菌和真菌生长时所释放的二氧化碳，此作为血液中有无微生物存在的指标。血培养检测系统包括一个培养系统和一个检测系统，其中培养系统由培养瓶和真空采血器等组成，检测系
28、统则由恒温孵育系统，检测系统和计算机及其外围设备等组成。血培养检测系统应用的检测技术主要有;：放射性14C标记。二氧化碳感受器和均质荧光。微生物鉴定系统采用数码分类鉴定法的原理，即计算并比较数据库内每个细菌条目对系统中每个生化反应出现的频率总和。目前用于临床的药敏分析方法主要分为三类：抗生素纸片扩散系统、琼脂稀释试验系统和微量肉汤稀释试验系统，其中，以第三类应用最多。实时荧光定量PCR技术，是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线，对未知模板进行定量分析的方法。（简答题）与普通PCR模式相比，实时荧光PCR具备几个方面的优势：1.由于实时荧光PC
29、R采用封闭的检测模式，因此扩增产物导致的污染可能性比普通PCR小得多。2.由于扩增产物的检测在PCR扩增过程中同时进行，并且数据的采集、分析全部由仪器自动完成，因此整个检测所需的时间比普通PCR要节省许多。3.实时荧光PCR检测模式功能强大，具备定性、定量、突变、多项目等检测功能。而普通PCR要完成上述项目需采用不同的技术平台。4.实时荧光PCR进行定量检测时，其定量线性范围比普通PCR要宽得多。PCR技术的临床应用：广泛应用于遗传病的诊断、感染性疾病的早期诊断、肿瘤的早期诊断、器官移植以及分子生物学的各个领域。目前最常用的DNA检测方法是采用DNA合成时末端终止法（酶法）和化学降阶法。（论述
30、题）：XD600型电解质分析仪电极结构：钾电极对K+具有选择性响应的中性载体和聚氯乙烯（PVC）等组成。此敏感膜的一侧与电极电解液接触，另一方面与样品溶液接触，膜电位的变化与样品溶液中K+活度的对数成正比，钾电极与参考电极之间的电位差随样品溶液中K+活度的变化而变化。钠电极由对Na+具有选择性响应的特殊玻璃毛细管等组成。玻璃毛细管的外侧与电极电解液接触，内侧与样品溶液接触，毛细管膜电位的变化与样品溶液中Na+活度的对数成正比，钠电极与参考电极之间的电位差随样品溶液中Na+活度的变化而变化。氯电极对Cl-具有选择性响应的中性载体和聚氯乙烯（PVC）等组成。此敏感膜的一侧与电极电解液接触，另一方面与样品溶液接触，膜电位的变化与样品溶液中Cl-活度的对数成反比，氯电极与参考电极之间的电位差随样品溶液中Cl-活度的变化而变化。钙电极对iCa+具有选择性响应的中性载体和聚氯乙烯（PVC）等组成。此敏感膜的一侧与电极电解液接触，另一方面与样品溶液接触，膜电位的变化与样品溶液中iCa+活度的对数成正比，钙电极与参考电极之间的电位差随样品溶液中iCa+活度的变化而变化。PH电极由对H+具有选择性响应的特殊玻璃毛细管等组成。玻璃毛细管的外侧与电极电解液接触，内侧与样品溶液接触，毛细管膜电位的变化与样品溶液中H+活度的对数成正比，PH电极与参考电极之间的电位差随样品溶液中H+活度的变化而变化