《GB∕T 41133-2022 番茄制品中番茄红素、叶黄素、胡萝卜素含量的测定 超高效液相色谱法.pdf》由会员分享，可在线阅读，更多相关《GB∕T 41133-2022 番茄制品中番茄红素、叶黄素、胡萝卜素含量的测定 超高效液相色谱法.pdf（11页珍藏版）》请在taowenge.com淘文阁网|工程机械CAD图纸|机械工程制图|CAD装配图下载|SolidWorks_CaTia_CAD_UG_PROE_设计图分享下载上搜索。
1、ICS 67.080CCS X 1 0中华人民共和国国家标准GB/T 411332022番茄制品中番茄红素、叶黄素、胡萝卜素含量的测定 超高效液相色谱法Determination of lycopene,lutein and carotene in tomato products一 Ultra performance liquid chromatography(UPLC)method2022-03-09 发布2022-10-01 实施*J5rxn国家市场监督管理总局 国家标准化管理委员会GB/T 41 1 332022-xz.-1刖 a本文件按照GB/T 1.12020标准化工作导则 第1部分
2、:标准化文件的结构和起草规则的规定 起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由全国质量监管重点产品检验方法标准化技术委员会（SAC/TC 374）提出并归口。本文件起草单位:上海市质量监督检验技术研究院、中检华纳（北京）质量技术中心有限公司、华纳 通标（北京）认证有限公司。本文件主要起草人:翁史昱、林琳、林毅侃、黄雨晴、张雯、郑翌、葛宇、陈羽菲、孟杰、郑存哲。IGB/T 41 1 332022番茄制品中番茄红素、叶黄素、胡萝卜素含量的测定 超高效液相色谱法1范围本文件规定了超高效液相色谱法测定番茄制品中番茄红素、叶黄素、胡萝卜素含量的原理、试剂和
3、材料、仪器设备、分析步骤、结果计算、精密度、检出限和定量限。本文件适用于番茄粉、番茄酱、番茄饮料、番茄干制品中番茄红素、叶黄素、r胡萝卜素和什胡萝卜 素的测定。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文 件，仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于 本文件。GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法3术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义。4原理试样加入水和乙醇后，用乙醛-正己烷-环己烷混合溶液提取其中的番茄红素、叶黄素、胡萝卜素，超 高效液相色谱法分离，紫外检测器或者二极管阵列检测
4、器检测，外标法定量。5试剂和材料除非另有规定，仅使用色谱纯试剂。5.1 水：GB/T 6682,一级。5.2 环己烷(C6Hl2)。5.3 乙醛(C2H5.4 正己烷(CeHG。5.5 无水乙醇(CzFhOH)：分析纯。5.6 二丁基羟基甲苯(CHz4O,BHT)：分析纯。5.7 甲醇(CH3OH)。5.8 二氯甲烷(CHzClz)。5.9 萃取溶剂：用分析天平(6.3)称取1.0 g BHT(5.6),以400 mL正己烷(5.4)溶解，加入200 mL环己 1GB/T 41 1 332022烷（5.2）和400 mL乙醛（5.3）,混匀。5.1 0 0.1%BHT和二氯甲烷溶液：用分析天平
5、（6.3）称取1.0 g BHT（5.6）,加入1 000 mL二氯甲烷（5.8）混匀。5.1 1 0.1%BHT、乙醇和二氯甲烷溶液：用分析天平（6.3）称取L0 g BHTC5.6）,以900 mL乙醇（5.5）溶解，力口 100 mL二氯甲烷（5.8）,混匀。5.1 2 番茄红素标准物质（QH56，CAS号：502-65-8）：纯度大于或等于98%。5.1 3 叶黄素标准物质（CmHssOz.CAS号：127-40-2）：纯度大于或等于98%。5.1 4 a-胡萝卜素标准物质CH56,CAS号：7488-99-5）：纯度大于或等于98%。5.1 6番茄红素储备液（50 Mg/mL）j东取
6、5 mg（精确至0.01 mg）番茄红素6仪器设备(5.1 4),以 于一20 校正。5.1 9 火(5.1 5),I5.1 5历胡萝卜素标准物质（QHs6,CAS号：7235-40-7）：纯度大于或等于98%。定容至1液(5.1 0)广月。番加红示准要容解?100用前月附效期、叶相备液（5.1 8）mL溶液于为胡萝卜素 氮避光置 A的规定1冰箱中-胡雪卜400作液：分:液（5.1瓶素储备液（下的冰校4至.%以液（5.1 2）,以 0.1%BHT 和二于一20 C或以下的冰箱5.1 7 叶黄素储备）0.1%BHT 和二:用分析天平（6.3）准确称取5 mg下的冰箱中保离有5.1 8 a-胡萝，
7、素于一20电或C 校正。5.20混分标 和0-胡萝。该标准储备液应充氮避光置 前应按附录A的规定校正。（5.1 0）溶解并定容至100 mL。该标准储备;6个月。叶黄素标准储备液使用前应按附录A的液（50 ug/mL）：用分析天平（6.3）准确称取5 mg（精确BHT5个25 mL橇,色 0.1 00 Mg/mE.2O 前配制。5.21 中性氧化5.22 0.22/nm 滤膜:g/mL、0.400 ug/mL0.800 ttg/mL,2.00 ug/mL 的系歹、柱：500 mg/3 mL,使用前用5 mL萃取之1 mg）叶黄素（5.1 3）,以 光置于一20 C或以0.0、mg）a-胡萝卜素
8、 备流应充氮避光置 按曜录A的规定度，察到质量浓度为 工作液。临用洗，保持柱体湿润。6.1 超高效液相色谱仪:配有二元及以上梯度泵，带二极管阵列检测器或紫外检测器。6.2 紫外分光光度计。6.3 分析天平:感量为0.01 mg和0.01 g。6.4 组织捣碎机。6.5 涡旋振荡器。6.6 减压浓缩装置。6.7 固相萃取装置。6.8 离心机:转速不低于5 000 r/min。2GB/T 41 1 3320227试验步骤7.1 通则除非另行说明，所有试验操作应在500 nm以下紫外光的黄色光源或红色光源环境中进行;提取过 程应在通风柜中操作。7.2 样品前处理7.2.1 试样制备取一定数量的有代表
9、性的样品戢颗粒状样品用组织品充分混匀后，储存于样品7）粉碎，粉末状、糊状或液体样 以下的冰箱中保存。7.2.2试样提取用分析天平笋）驾乃g（精确到0.01 g）试样（7.2.1）于50 mL聚丙烯（5.1）,混匀，加，0/五水乙醇（5.5）,15 mL萃取溶剂（5.9）于避光条件下施3 min后，用离机（费）5判&加入1。mL水 旋飞器（6.5）提取 心、中，在原离心管中加入1 5AL 浓缩至近干晶格版溶剂（国 振荡器（6）在室温下7.2.3 试净化于固升 小柱（5.21）|近千，在涡i置（6.771 L萃取小鼠6.5）上手的流为中性 t（6.6）l 辘残d固相萃取|下浓缩至.22 ptm 滤
10、膜（5.22）,待中。7.3 超高效力超高效液相型仪Xd的色谱条件如下:色谱柱:招芭 流动相人：近眩.丹 规定；%色谱柱，1.8 pim,1 00 mmX2.1 mm（氯甲烷（5.8）（97：3）；流动相B/j/梯度应符合表1的c）柱温：30 ；d）流速：0.4 mL/min；e）进样量：2 fiL；f）检测波长：450 nm。注：由于测试设备的多样性，色谱条件可依超高效液相色谱仪的型号作相应调整。表1多环芳煌分析用C”色谱柱-超高效液相色谱法洗脱梯度条件时间 min流速 mL/min流动相A%流动相B%0.00.49283.00.49283GB/T 41 1 332022表1多环芳焰分析用G
11、.色谱柱-超高效液相色谱法洗脱梯度条件(续)时间 min流速 mL/min流动相A%流动相B%4.50.41000220.4100022.50.4928250.49287.4 标准曲线的制作按照7.3测试条件，将混合标准工作液(5.20)注入超高效液相色谱仪(6.1)中进行测试，测定相应的 峰面积，以混合标准工作液(5.20)的浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。7.5 试样溶液的测定按照7.3测试条件，将待测样品溶液(7.2.3)注入超高效液相色谱仪(6.1)中进行测试。待测样品溶 液中目标物质的响应值应在仪器线性相应范围内，否则应适当稀释。混合标准工作液(5.20)与待测样 液等
12、体积进样。根据标准溶液色谱峰的保留时间和峰面积，对试样溶液的色谱峰根据保留时间进行定 性,外标法定量。番茄红素、叶黄素、a-胡萝卜素和仍胡萝卜素混合标准色谱图见附录B。8结果计算试样中组分(番茄红素、叶黄素、防胡萝卜素、仍胡萝卜素)的含量X,的计算按式(1)进行：X.=pjYL x 100.(1)m式中：X,试样中各组分的含量，单位为微克每百克g/1 00 g);Pi从标准工作曲线得到的试样溶液中各组分的质量浓度，单位为微克每毫升(fzg/mL)；V 样品定容体积，单位为毫升(mL)；f稀释倍数；m-一试样的取样量，单位为克(g);100换算系数。计算结果以重复性条件下获得的两次独立测定结果的
13、算术平均值表示，保留3位有效数字。9精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。10检出限和定量限本文件的检出限：当取样量为5 g、定容体积为2 mL时，叶黄素的检出限为1 Mg/1 00 g,番茄红素、4GB/T 41 1 332022a-胡萝卜素和仍胡萝卜素的检出限均为0.6 Mg/1 00 go本文件的定量限：当取样量为5 g、定容体积为2 mL时，叶黄素的定量限为3 Mg/1 00 g,番茄红素、a-胡萝卜素和次胡萝卜素的定量限均为2.0 Mg/1 00 g。5GB/T 41 1 332022附录A(规范性)标准溶液浓度的校正A.1试验步骤使用前，应
14、对番茄红素、叶黄素、-胡萝卜素和伊胡萝卜素标准溶液的浓度进行校正。分别取番茄红素、a-胡萝卜素和伊胡萝卜素标准储备液100 fiL于10 mL棕色容量瓶中，用正己烷(5.4)定容至刻度，混匀，用1 cm石英比色杯，以正己烷(5.4)为空白参比，用紫外分光光度计(6.2)按表 A.1的测定波长测定其吸光度。取叶黄素标准储备液100 mL于10 mL棕色容量瓶中，用乙醇(5.5)定容至刻度，混匀，用1 cm石英 比色杯，以乙醇(5.5)为空白参比，用紫外分光光度计(6.2)按表A.1的测定波长测定其吸光度。表A.1各类胡萝卜素测定波长及百分吸光系数目标物测定波长nm1%比色吸光系数E番茄红素470
15、3 450叶黄素4452 550a-胡萝卜素4462 725仍胡萝卜素4502 620A.2结果计算按式(A.1)计算标准溶液质量浓度：A p=X 10 000 X 100.(A.1)E式中：p 标准溶液质量浓度，单位为微克每毫升Rg/mL)；A 标准溶液吸光值；E 1%比色吸光系数(各类胡萝卜素相应的比色吸光系数见表A.1)；10 000 换算系数；100 稀释倍数。6GB/T 41 1 332022附录B（资料性）番茄红素、叶黄素、a-胡萝卜素和加胡萝卜素混合标准色谱图番茄红素、叶黄素、a-胡萝卜素和仍胡萝卜素混合标准溶液超高效液相色谱图见图B,1。28-26-124 20-0 2.5 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 17.5 20.0时间/min标引序号说明：1叶黄素；2-a-胡萝卜素；3 伊胡萝卜素；4 番茄红素。图B.1番茄红素、叶黄素、a-胡萝卜素和加胡萝卜素混合标准色谱图