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1、三植物细胞骨架的光学显微镜观察三三.实验用品实验用品 1.1.材料：洋葱材料：洋葱 2.2.器材：器材：显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、滴管、擦镜纸、显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、滴管、擦镜纸、50ml50ml烧杯烧杯药药品品：pH6.8pH6.8的磷酸缓冲液的磷酸缓冲液；M-缓冲液缓冲液：50mmolL-1(PH6.7)咪唑咪唑、50mmolL-1KCl、0.5mmolL-1MgC12、1mmolL-1EGTA、0.1mmolL-1EDTA、1mmolL-1巯基乙醇巯基乙醇、4mmolL-1甘油甘油、1mmolL-1HCl调调pH至至7.2；1%Triton-X1001%Triton-X100
2、:用用M-缓冲液缓冲液配配制；制；3%戊二醛戊二醛：用：用pH6.8pH6.8的磷酸缓冲配制；的磷酸缓冲配制；0.2%0.2%考马斯亮蓝考马斯亮蓝 R250 R250染液染液：0.8g0.8g考马斯亮蓝考马斯亮蓝R250R250、46.5ml46.5ml甲醇、甲醇、7ml7ml冰醋酸冰醋酸、46.5ml 46.5ml蒸馏水。蒸馏水。四四.实验方法步骤实验方法步骤 1.1.撕取洋葱鳞茎内表皮撕取洋葱鳞茎内表皮1cm2若干片，置于小烧杯中。若干片，置于小烧杯中。2.2.用磷酸缓冲液（用磷酸缓冲液（pH6.8）提前浸泡）提前浸泡2小时左右。小时左右。3.3.吸去磷酸缓冲液，用吸去磷酸缓冲液，用1%T
3、ritonX100处理处理20分钟。抽提细胞骨架以外的蛋白质，从而使分钟。抽提细胞骨架以外的蛋白质，从而使骨架图像更加清晰。骨架图像更加清晰。4.4.吸去吸去TritonX-100TritonX-100，用，用M-缓冲液洗缓冲液洗2次，每次次，每次5分钟。分钟。M-缓冲液有稳定细胞骨架的作用。缓冲液有稳定细胞骨架的作用。5.5.用用3%戊二醛固定戊二醛固定0.51h。6.6.用磷酸缓冲液（用磷酸缓冲液（pH6.8）洗）洗2 2次，每次次，每次5 5分钟。分钟。7.7.考马斯亮蓝考马斯亮蓝R250染色染色30分钟。分钟。8.8.蒸馏水洗蒸馏水洗2次。次。9.9.置于载玻片上，盖上盖玻片，在光学显微镜下观察。置于载玻片上，盖上盖玻片，在光学显微镜下观察。五五.实验报告实验报告 1.1.绘出洋葱鳞叶内表皮细胞内细胞质骨架的分布图。绘出洋葱鳞叶内表皮细胞内细胞质骨架的分布图。2.2.说明实验过程中各步骤处理的作用。说明实验过程中各步骤处理的作用。细胞骨架细胞骨架此课件下载可自行编辑修改，仅供参考！此课件下载可自行编辑修改，仅供参考！感谢您的支持，我们努力做得更好！谢谢感谢您的支持，我们努力做得更好！谢谢