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1、实验一斐林试剂置换法测定实验一斐林试剂置换法测定还原糖的含量还原糖的含量一、实验原理糖类包括多糖、双糖和单糖,其中单糖和某糖类包括多糖、双糖和单糖,其中单糖和某些双糖具有游离的羰基,称为些双糖具有游离的羰基,称为还原糖还原糖,多糖,多糖和蔗糖无还原性。利用糖的还原性,与斐林和蔗糖无还原性。利用糖的还原性,与斐林试剂(氧化剂)中的二价铜离子还原为一价试剂(氧化剂)中的二价铜离子还原为一价铜,进行氧化还原反应,而进行测定铜,进行氧化还原反应,而进行测定.非还原非还原糖必须转化为还原糖,再进行测定。糖必须转化为还原糖,再进行测定。3 3、样品中还原糖测定、样品中还原糖测定 同上法吸取斐林试剂加同上法
2、吸取斐林试剂加1010mlml样品液样品液(预预先稀释先稀释),补加(补加(V V0 0VV1 1)mlml水水,并从滴定管,并从滴定管中预先加入(中预先加入(V V1 1-1-1)ml 0.2%Gml 0.2%G,摇匀至电炉摇匀至电炉上加热至沸,上加热至沸,保持保持2 2minmin微沸微沸,加入,加入2 2滴滴1%1%次次甲基蓝,继续用甲基蓝,继续用G G滴定至蓝色消失。记录消滴定至蓝色消失。记录消耗的标准耗的标准G G体积为体积为V V毫升。毫升。四、结果计算还原糖含量还原糖含量(以以G G计计)(g/ml)g/ml)=(Vo-V)*0.002*1/10 *nVo-V)*0.002*1/
3、10 *n 式中式中Vo-Vo-斐林试剂标定值,斐林试剂标定值,ml ml V-V-样品糖液测定值,样品糖液测定值,ml ml 0.002-0.002-标准标准GSGS液浓度,液浓度,g/mlg/ml 10-10-样品糖液体积,样品糖液体积,ml ml n-n-样品稀释倍数样品稀释倍数 五、注意事项五、注意事项本方法测定的是一类具有还原性质的糖,包本方法测定的是一类具有还原性质的糖,包括葡萄糖、果糖、乳糖、麦芽糖等,只是结括葡萄糖、果糖、乳糖、麦芽糖等,只是结果用葡萄糖或其他转化糖的方式表示,所以果用葡萄糖或其他转化糖的方式表示,所以不能误解为还原糖不能误解为还原糖=葡萄糖或其他糖。但如葡萄糖
4、或其他糖。但如果已知样品中只含有某一种糖,如乳制品中果已知样品中只含有某一种糖,如乳制品中的乳糖,则可以认为还原糖的乳糖,则可以认为还原糖=某糖。某糖。分别用葡萄糖、果糖、乳糖、麦芽糖标准品配制分别用葡萄糖、果糖、乳糖、麦芽糖标准品配制标准溶液分别滴定等量已标定的费林氏液,所消标准溶液分别滴定等量已标定的费林氏液,所消耗标准溶液的体积有所不同。证明即便同是还原耗标准溶液的体积有所不同。证明即便同是还原糖,在物化性质上仍有所差别,所以还原糖的结糖,在物化性质上仍有所差别,所以还原糖的结果只是反映样品整体情况,并不完全等于各还原果只是反映样品整体情况,并不完全等于各还原糖含量之和。如果已知样品只含
5、有某种还原糖,糖含量之和。如果已知样品只含有某种还原糖,则应以该还原糖做标准品,结果为该还原糖的含则应以该还原糖做标准品,结果为该还原糖的含量。如果样品中还原糖的成分未知,或为多种还量。如果样品中还原糖的成分未知,或为多种还原糖的混合物,则以某种还原糖做标准品,结果原糖的混合物,则以某种还原糖做标准品,结果以该还原糖计,但不代表该糖的真实含量。以该还原糖计,但不代表该糖的真实含量。五、分析讨论五、分析讨论六、思考题:六、思考题:1、查阅资料还原糖测定检测方、查阅资料还原糖测定检测方法有哪些?其原理是什么?法有哪些?其原理是什么?2、总结本实验方法检测还原糖、总结本实验方法检测还原糖应注意哪些事项?应注意哪些事项?结束语结束语谢谢大家聆听!谢谢大家聆听!14