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1、分析化学课件紫外可见光分光光度法 Still waters run deep.流静水深流静水深,人静心深人静心深 Where there is life,there is hope。有生命必有希望。有生命必有希望化学分析法总结化学分析法总结酸碱滴定法配位滴定法氧化-还原滴定法沉淀滴定法重量分析法2化学分析与仪器分析方法比较化学分析与仪器分析方法比较化学分析化学分析常量组分常量组分(1%),Er 0.1%0.2%依据化学反应依据化学反应,使用玻璃仪器使用玻璃仪器 仪器分析仪器分析微量组分微量组分(Ev(0.051eV)Er(0.0050.05eV)17电子能级的跃迁电子能级的跃迁 当用当用可见光
2、或紫外光可见光或紫外光照射分子时，价电子可以照射分子时，价电子可以跃迁产生吸收光谱，在电跃迁产生吸收光谱，在电子能级变化的同时，不可子能级变化的同时，不可避免地伴随分子振动和转避免地伴随分子振动和转动的能级变化。因此他包动的能级变化。因此他包含了大量谱线，并由于这含了大量谱线，并由于这些谱线的重叠而成为连续些谱线的重叠而成为连续的吸收带。的吸收带。18分子的激发分子的激发(Excitation)E=E2 -E1=h 分子结构的复杂性使其对不同波长光分子结构的复杂性使其对不同波长光的吸收程度不同的吸收程度不同；用不同波长的单色光照射，测吸收光用不同波长的单色光照射，测吸收光的程度随光波长的变化的
3、程度随光波长的变化 吸收曲线与最大吸收曲线与最大吸收波长吸收波长 max。M +h M*基态基态 激发态激发态 E1 E E219苯和甲苯在环己烷中的吸收光谱苯和甲苯在环己烷中的吸收光谱(Absorption spectra of benzene and toluene in cyclohexane)苯苯(254nm)甲苯甲苯(262nm)A 230 250 270 20第二节第二节 光吸收基本定律光吸收基本定律ItI0bdxI I-dIs1.朗伯定律朗伯定律2.比尔定律比尔定律 A=k2cA=lg(I0/It)=k1b光程213。朗伯。朗伯-比尔定律比尔定律A=lg(I0/It)=lg(1/
4、T)=k b c1)T透光率透光率A=k b cA 吸光度吸光度b 介质厚度介质厚度c 浓度浓度K 吸光系数吸光系数222）吸光系数）吸光系数a的单位的单位:Lg-1cm-1当当c的单位用的单位用gL-1表示时，用表示时，用a表示，表示，Aa b c的单位的单位:Lmol-1cm-1当当c的单位用的单位用molL-1表示时，用表示时，用表示表示.摩尔吸光系数摩尔吸光系数 A b c 当当c的单位用的单位用g(100mL)-1表示时，用表示时，用 表表示，示，A b c，叫做比消光系数叫做比消光系数233）吸光度）吸光度(A)、透光率、透光率(T)与浓度与浓度(c)的关的关系系ATcA=kbc线
5、性关系线性关系24吸光度与光程的关系吸光度与光程的关系 A=bc 检测器检测器b样品样品光源光源0.22吸光度吸光度光源光源检测器检测器0.00吸光度吸光度光源光源检测器检测器0.44吸光度吸光度b样品样品b样品样品25吸光度与浓度的关系吸光度与浓度的关系 A=bc 吸光度吸光度0.00光源光源检测器检测器 吸光度吸光度0.22光源光源检测器检测器b 吸光度吸光度0.44光源光源检测器检测器b264 4）摩尔吸光系数）摩尔吸光系数()的讨论的讨论（1）吸吸收收物物质质在在一一定定波波长长和和溶溶剂剂条条件件下下的的特特征征常数常数，可作为定性鉴定的参数；可作为定性鉴定的参数；（2）不不随随浓浓
6、度度c和和光光程程长长度度b的的改改变变而而改改变变。在在温温度度和和波波长长等等条条件件一一定定时时，仅仅与与吸吸收收物物质质本本身身的的性质有关，与待测物浓度无关；性质有关，与待测物浓度无关；（3）同同一一吸吸收收物物质质在在不不同同波波长长下下的的值值是是不不同同的的。在在最最大大吸吸收收波波长长max处处的的摩摩尔尔吸吸光光系系数数，常常以以max表表示示。max表表明明了了该该吸吸收收物物质质最最大大限限度度的的吸吸光光能能力力，也也反反映映了了光光度度法法测测定定该该物物质质可可能能达达到到的的最最大大灵敏度。灵敏度。27（4）max越越大大表表明明该该物物质质的的吸吸光光能能力力
7、越越强强，用用光光度法测定该物质的灵敏度越高。度法测定该物质的灵敏度越高。105：超高灵敏；：超高灵敏；=(610）104：高灵敏；：高灵敏；104*选择性好，最好只与一种组分显色选择性好，最好只与一种组分显色*显色剂在测定波长处无明显吸收。显色剂在测定波长处无明显吸收。*对比度大对比度大,max60 nm.*反应生成的有色化合物组成恒定，稳定。反应生成的有色化合物组成恒定，稳定。*显色条件易于控制，重现性好。显色条件易于控制，重现性好。2.显色剂显色剂无机显色剂无机显色剂:Fe(SCN)2+，TiOH2O22+有机显色剂有机显色剂:一。一。显色反应显色反应611)生色团（发色团）生色团（发色
8、团）ONN，NO，OC=S,N （共轭双键）（共轭双键）e能吸收紫外能吸收紫外-可见光的基团可见光的基团 有有机机化化合合物物：具具有有不不饱饱和和键键和和未未成成对对电电子子的的基基团产生团产生n*跃迁和跃迁和*跃迁跃迁,跃迁跃迁E较低较低622)助色团助色团本本身身无无紫紫外外吸吸收收，但但可可以以使使生生色色团团吸吸收收峰加强同时使吸收峰长移的基团峰加强同时使吸收峰长移的基团有机物：有机物：连有杂原子的饱和基团连有杂原子的饱和基团例例：OH，OR，NH，NR2，X注注：当当出出现现几几个个发发色色团团共共轭轭，则则几几个个发发色色团团所所产产生生的的吸吸收收带带将将消消失失，代代之之出出
9、现现新新的的共共轭轭吸吸收收带带，其其波波长长将将比比单单个个发发色色团团的的吸吸收收波波长长长长，强强度度也也增强增强633)红移和蓝移红移和蓝移 由由于于化化合合物物结结构构变变化化（共共轭轭、引引入入助助色色团团取取代代基基）或或采采用用不不同同溶溶剂剂后后，吸吸收收峰峰位位置置向向长长波波方方向向的的移移动动，叫叫红红移移;吸吸收收峰峰位位置置向向短短波波方方向向移移动，叫动，叫蓝移蓝移.4)增色效应和减色效应增色效应和减色效应 增色效应：增色效应：吸收强度增强的效应吸收强度增强的效应 减色效应：减色效应：吸收强度减小的效应吸收强度减小的效应5)强带和弱带强带和弱带 max105 强带
10、强带(Strong band)min103 弱带弱带(Weak band)64有机显色剂有机显色剂CH3CCCH3 HON NOH NNOHCOOHSO3HOO型：型：NNNOH OHON型型：PARNH NHNSNS型型：双硫腙双硫腙NN型：型：丁二丁二酮肟酮肟邻二邻二氮菲氮菲磺基水杨酸磺基水杨酸65二。二。显色条件的选择显色条件的选择cRcRcR1.显色剂用量显色剂用量(cM、pH一定一定)Mo(SCN)32+浅红浅红Mo(SCN)5 橙红橙红Mo(SCN)6-浅红浅红Fe(SCN)n3-n662.显色反应酸度（显色反应酸度（cM、cR一定）一定）pH1pH81仪器测量误差仪器测量误差82
11、浓度测量的相对误差与浓度测量的相对误差与T(或或A)的关系的关系1086420204060800.70.40.20.1AT%Er(36.8)0.434实际工作中，应控制实际工作中，应控制T在在1070,A在在0.150。8之间之间83例例1 邻二氮菲光度法测铁邻二氮菲光度法测铁，(Fe)=1.0 mg/L,b=2cm,A=0.38，计算，计算 和和解：解：cFe=1.0 mg/L=1.010-3/55.85 =1.810-5 mol/L c=1.0 mg/L=1.010-3 g/1000mL =1.010-4g/100mL84第五节第五节 光度分析法的应用光度分析法的应用一。一。单一组分测定单
12、一组分测定1)金属离子金属离子:Fe-phen,Ni-丁二酮肟丁二酮肟,Co-钴试钴试剂剂2)磷的测定磷的测定:DNA中含中含P9.2%,RNA中含中含P9.5%,可得核酸量可得核酸量.H3PO4+12(NH4)2MoO4+21HNO3=(NH4)3PO412MoO3+12NH4NO3+12H2O磷钼黄磷钼黄(小小)磷钼磷钼(V)蓝蓝(大大)Sn2+85多组分的测定多组分的测定 x 1,y 1,x 2,y 2由由x,y标液标液 在在 1,2处分别测得处分别测得a)在 1处测组分处测组分x,在 2处测组分处测组分yb)在 1处测组分处测组分x;在在 2处测总吸处测总吸收收,扣除扣除x吸收吸收,可
13、求可求yc)x,y组分不能直接测定组分不能直接测定A1=x 1bcx+y 1bcy(在 1处测得处测得A1)A2=x 2bcx+y 2bcy(在 2处测得处测得A2)86二。二。示差吸光光度法示差吸光光度法 普通分光光度法一般只适于测定微量组分，普通分光光度法一般只适于测定微量组分，当待测组分含量较高时，将产生较大的误差。需当待测组分含量较高时，将产生较大的误差。需采用采用示差法示差法。即提高入射光强度，。即提高入射光强度，并采用浓度稍并采用浓度稍低于待测溶液浓度的标准溶液作参比溶液低于待测溶液浓度的标准溶液作参比溶液。设：待测溶液浓度为设：待测溶液浓度为c cx x，标准溶液浓度为，标准溶液
14、浓度为c cs s(c cs s c cx x)。则：。则：Ax=b cx，As=b cs=x s=b(cx cs）=bc 测得的吸光度相当于普通法中待测溶液与标测得的吸光度相当于普通法中待测溶液与标准溶液的吸光度之差准溶液的吸光度之差。由标准曲线上查得相应。由标准曲线上查得相应的的c值，则待测溶液浓度值，则待测溶液浓度cx：cx=cs+c 87示差法标尺扩展原理：示差法标尺扩展原理：普通法：普通法：cs的的T=10%；cx的的T=5%示差法：示差法：cs 做参比，调做参比，调T=100%则：则：cx的的T=50%；标尺扩展；标尺扩展10倍倍88三。三。双波长分光光度法双波长分光光度法 不需空
15、白溶液作参比；但需要两个单色不需空白溶液作参比；但需要两个单色器获得两束单色光器获得两束单色光(1 1和和2 2)；以参比波；以参比波长长1 1处的吸光度处的吸光度A A11作为参比，来消除干作为参比，来消除干扰。扰。在分析浑浊或背景吸收较大的复杂试在分析浑浊或背景吸收较大的复杂试样时显示出很大的优越性。灵敏度、选择样时显示出很大的优越性。灵敏度、选择性、测量精密度等方面都比单波长法有所性、测量精密度等方面都比单波长法有所提高。提高。89双波长分光光度法双波长分光光度法A A A22 A A11 (22 11)b cb c 两波长处测得的吸光度差值两波长处测得的吸光度差值A与待测组分浓与待测组
16、分浓度度c c成正比。成正比。11和和22分别表示待测组分在分别表示待测组分在1 1和和2 2处的摩尔吸光系数。处的摩尔吸光系数。测量波长测量波长2 2和参比波长和参比波长1 1的选择与组合的选择与组合90基本要求：基本要求：在选定的两个波长在选定的两个波长1 1和和2 2处待测组分的吸光处待测组分的吸光度应具有足够大的差值。度应具有足够大的差值。选定的波长选定的波长1 1和和2 2处干扰组分应具有相同吸处干扰组分应具有相同吸光度，光度，即：即：Ay=y=A y y22 A y y11=0=0故：故：Ax+y=x+y=A x=(x=(x2x2x1x1)bcbcx x此时：测得的吸光度差此时：测
17、得的吸光度差A只与待测组分只与待测组分x x的浓度的浓度呈线性关系，而与干扰组分呈线性关系，而与干扰组分y y无关。若无关。若x x为干扰组为干扰组分，则也可用同样的方法测定分，则也可用同样的方法测定y y组分。组分。91双波长分光光度法消除干扰双波长分光光度法消除干扰在 2，A 2=Ax2+Ay2在在 1，A 1=Ax1+Ay1 A=A 2-A 1 =Ax2+Ay2(Ax1+Ay1)=Ax2 Ax1 =AxAy2 Ay1 Ax=(x2 x1)bcx消除了消除了y的干扰的干扰X被测被测Y干扰干扰211Ay1AX1Ay2AX2A/nm92双波长分光光度法消除浑浊背景干扰双波长分光光度法消除浑浊背
18、景干扰 1 2AA 1-A 2=A Ac例例 牛奶中微量牛奶中微量Fe的测定的测定93四。四。导数分光光度法导数分光光度法 导数分光光度法在多组分同时测定、浑浊样品导数分光光度法在多组分同时测定、浑浊样品分析、消除背景干扰、加强光谱的精细结构以及分析、消除背景干扰、加强光谱的精细结构以及复杂光谱的辨析等方面，显示了很大的优越性。复杂光谱的辨析等方面，显示了很大的优越性。利用吸光度利用吸光度(或透光度或透光度)对波长的导数曲线来进对波长的导数曲线来进行分析：行分析：0 0 e e-bcbc假定入射光强度假定入射光强度0 0 在整个波长范围内保持恒定：在整个波长范围内保持恒定：d dI I 0 0
19、/d/d0 0则则：d dI I/d/d0 0 bcbc e e-bc-bc d d/d/d 0 0 bcbc d d/d/d 94导数分光光度法导数分光光度法d dI I/d/d 0 0 bcbc d d/d/d 一阶导数信号与试样浓度呈一阶导数信号与试样浓度呈线性关系；线性关系；测定灵敏度依赖于摩尔吸光测定灵敏度依赖于摩尔吸光系数对波长的变化率系数对波长的变化率d d/d/d。吸收曲线的拐点处。吸收曲线的拐点处d d/d/d最大，故其灵敏度最高。最大，故其灵敏度最高。同理可以导出其二阶和三阶导数同理可以导出其二阶和三阶导数光谱光谱 95导数分光光度法导数分光光度法混合物导数光谱混合物导数光
20、谱A 图图0123496中药降压片中氢氯噻嗪含量的测定中药降压片中氢氯噻嗪含量的测定1.氢氯噻嗪氢氯噻嗪.2.硫酸双肼肽硫酸双肼肽嗪嗪3.盐酸可乐定盐酸可乐定4.中药降压片中药降压片 250 290 330 412312A97肝中茚满二酮类抗凝血杀鼠剂的固相萃取肝中茚满二酮类抗凝血杀鼠剂的固相萃取方法：方法：肝匀浆用乙腈浸提，浸提液用肝匀浆用乙腈浸提，浸提液用6的的HClO4稀释，然后用稀释，然后用GDX100大孔树大孔树脂萃取，用二氯甲烷脂萃取，用二氯甲烷5mL洗脱杀鼠剂，洗脱杀鼠剂，40挥干，剩余物用挥干，剩余物用0.1molL-1NaOH4mL溶解后，紫外导数光谱测定。溶解后，紫外导数光
21、谱测定。A0.0cdabDa.空白肝普通光谱空白肝普通光谱b.2.5 mg/L敌鼠溶液的普通光谱敌鼠溶液的普通光谱c.空白肝二阶导数光谱空白肝二阶导数光谱d.2.5 mg/L敌鼠溶液的二阶导数光谱敌鼠溶液的二阶导数光谱98五。五。一元弱酸离解常数的测定一元弱酸离解常数的测定HL HLKaH+L/HL高酸度下，几乎全部以高酸度下，几乎全部以HL存在，可测得存在，可测得AHLHLc(HL)；低酸度下，几乎全部以低酸度下，几乎全部以L存在，可测得存在，可测得AL Lc(HL).代入整理：代入整理：HLL或配制一系列配制一系列c相同相同,pH不同的溶液不同的溶液,测测A(设设b=1cm).99MO吸收
22、曲线吸收曲线Aa(HL)Ab(L)123456Ab654321Aa350400450500550600/nmA曲线曲线pHpH1 11.10,1.381.10,1.382 22.652.653 33.063.064 43.483.485 53.983.986 65.53,6.805.53,6.80由每份溶液的由每份溶液的一对一对pH、A，可求得一个可求得一个Ka,取平均值即可取平均值即可.100MO离解常数的测定离解常数的测定作图法作图法AHL3.32(pKa)123456ApH=pKapHAL0.60.40.20-0.2-0.4-0.63.04.0pH3.34101六。六。络合物组成的测定络
23、合物组成的测定(1)(1)摩尔比法摩尔比法:固定固定cM,改变改变c cR R 1:13:1c(R)/c(M)A1.0 2.0 3,0 102(2)(2)等摩尔连续变化法等摩尔连续变化法:M:R=1:10.50.33cM/ccM/cM:R=1:2103表观形成常数的测定表观形成常数的测定(设设M、R均无吸收均无吸收)0.5cM/cM:R=1:1A0AcM+cR=cMmRn型型?104 七。七。光度滴定光度滴定NaOH滴定滴定 对硝基苯酚对硝基苯酚 pKa=7.15 间硝基苯酚间硝基苯酚 pKa=8.39 pKa=1.24V1V2VNaOH/mL对硝基苯酚对硝基苯酚间硝基苯酚间硝基苯酚酸形酸形均
24、无均无色色.碱形碱形均黄均黄色色105典型的光度滴定曲线典型的光度滴定曲线依据滴定过程中溶液吸光度变化来确定终点的滴定分析方依据滴定过程中溶液吸光度变化来确定终点的滴定分析方法。法。Vsp滴定剂与待滴定剂与待测物均吸收测物均吸收Vsp滴定剂吸收滴定剂吸收Vsp被滴物吸收被滴物吸收Vsp产物吸收产物吸收106例：例：维维生生素素B12 的的水水溶溶液液在在361nm处处的的百百分分吸吸光光系系数数为为207，用用1cm比比色色池池测测得得某某维维生生素素B12溶溶液液的的吸吸光光度度是是0.414，求求该该溶溶液液的的浓度浓度解：解：107例例1：精精密密称称取取B12样样品品25.0mg，用用
25、水水溶溶液液配配成成100ml。精精密密吸吸取取10.00ml，又又置置100ml容容量量瓶瓶中中，加加水水至至刻刻度度。取取此此溶溶液液在在1cm的的吸吸收收池池中中，于于361nm处处测测定定吸吸光光度度为为0.507，求求B12的的百百分分含量？（百分吸光系数为含量？（百分吸光系数为207）解：解：108例例2：解：解：109思考题与习题思考题与习题习题习题1.朗伯朗伯-比耳定律的物理意义是什么？什比耳定律的物理意义是什么？什么叫吸收曲线？什么叫标准曲线？么叫吸收曲线？什么叫标准曲线？习题习题2.摩尔吸光系数的物理意义是什么？摩尔吸光系数的物理意义是什么？习题习题3.为什么目视比色法可采
26、用复合光（日光）为什么目视比色法可采用复合光（日光），而吸光光度法则必须采用单色光？分光光度计，而吸光光度法则必须采用单色光？分光光度计是如何获得单色光的？是如何获得单色光的？习题习题4.符合朗伯符合朗伯比尔定律的有色溶液，当其比尔定律的有色溶液，当其浓度增大后，浓度增大后，max、T、A和和有无变化？有什么有无变化？有什么变化？变化？110习题习题5,6习题习题5.同吸收曲线的肩部波长相比，为什么在最同吸收曲线的肩部波长相比，为什么在最大吸收波长处测量能在较宽的浓度范围内使标准大吸收波长处测量能在较宽的浓度范围内使标准曲线呈线性关系？曲线呈线性关系？习题习题6.两种蓝色溶液，已知每种溶液仅含
27、有一种两种蓝色溶液，已知每种溶液仅含有一种吸光物质，同样条件下用吸光物质，同样条件下用1cm比色皿测得如下的比色皿测得如下的吸光度值。问这两种溶液是否是同一种吸光物质吸光度值。问这两种溶液是否是同一种吸光物质？试解释之。？试解释之。溶液溶液A770 A82010.6220.41720.3910.240111习题习题7,8,9,10习题习题7.什么是适宜的吸光度读数范围？此范围的什么是适宜的吸光度读数范围？此范围的大小取决于什么因素？测定时如何才能获得合理大小取决于什么因素？测定时如何才能获得合理的吸光度读数？的吸光度读数？习题习题8.显色剂的选择原则是什么？显色条件是指显色剂的选择原则是什么？
28、显色条件是指的哪些？如何确定适宜的显色条件？的哪些？如何确定适宜的显色条件？习题习题9.分光光度计由哪些部分组成？各部分有什分光光度计由哪些部分组成？各部分有什么作用？么作用？习题习题10.某试液用某试液用2cm比色皿测量时，比色皿测量时，T=100%。若用若用1cm或或3cm比色皿进行测量，比色皿进行测量，T及及A各是多少各是多少？（答：？（答：77.4%、0.111；46.5%、0.333）。）。112习题习题11,12习习题题12.以以MnO4-形形式式测测量量合合金金中中的的锰锰。液液解解0.500g合合金金试试样样并并将将锰锰全全部部氧氧化化为为MnO4-后后，将将溶溶液液稀稀释释至
29、至500mL，用用1cm比比色色皿皿在在525nm处处测测得得 该该 溶溶 液液 的的 吸吸 光光 度度 A=0.400；而而 1.00 10-4-4 molLmolL-1-1的的KMnOKMnO4 4在在相相同同条条件件下下测测得得的的A A=0.585=0.585。设设KMnOKMnO4 4溶溶液液在在此此范范围围内内服服从从光光的的吸吸收收定定律律。试试求求合合金试样中金试样中MnMn的质量分数。（答：的质量分数。（答：0.3760.376）习题习题11.含含Cu2+为为0.510mgL-1的溶液，用双环己的溶液，用双环己酮草酰二腙显色后，在酮草酰二腙显色后，在600nm处用处用2cm比
30、色皿测比色皿测得得A=0.300。求透光率。求透光率T、吸光系数、吸光系数a和摩尔吸光和摩尔吸光系数系数。（答（答:79.1%；2.9 102 Lg-1cm-1；1.9 104Lmol-1cm-1）113习题习题13.13.习题习题13.13.两种无色物质两种无色物质X X和和Y Y经反应生成一种在经反应生成一种在550nm550nm处处=450Lmolmol-1-1cmcm-1-1的有色配合物的有色配合物XYXY。该。该配合物的标准离解常数是配合物的标准离解常数是6.006.00 10-4-4。当等体积混。当等体积混合浓度均为合浓度均为0.00100 molL0.00100 molL-1-1
31、的的X X和和Y Y溶液时，用溶液时，用1cm1cm的比色皿在的比色皿在550nm550nm处测得的处测得的A A是多少？是多少？（答：（答：1.591.59）114重点：重点：光吸收定律、吸收曲线、工作曲线及其应光吸收定律、吸收曲线、工作曲线及其应用；提高吸光分析法选择性和准确度的主用；提高吸光分析法选择性和准确度的主要途径；吸光分析法的原理和实际应用要途径；吸光分析法的原理和实际应用 难点：难点：测量条件的选择，工作曲线的绘制测量条件的选择，工作曲线的绘制和使用和使用 教教学学内内容容：、概概述述：（吸吸光光光光度度法法的的意意义义和和应应用用；比比色色分分析析法法和和分分光光光光度度法法
32、的的特特点）。点）。115 、吸光光度法的基本原理。、吸光光度法的基本原理。光的性质和物光的性质和物质对光的吸收；质对光的吸收；溶液颜色和光吸收的关系溶液颜色和光吸收的关系,吸收吸收曲线；朗伯曲线；朗伯-比耳定律比耳定律(吸光度吸光度A A与透光度与透光度T T的关系的关系,吸光系数、摩尔吸光系数、灵敏度及其意义吸光系数、摩尔吸光系数、灵敏度及其意义)。、比色和分光光度法的方法和仪器：（光、比色和分光光度法的方法和仪器：（光度分析法的类型度分析法的类型-目视比色法、光电比色法、分光目视比色法、光电比色法、分光光度法的测定方法、仪器原理及构造，主要讲光度法的测定方法、仪器原理及构造，主要讲721
33、,722721,722型分光光度计）。型分光光度计）。重点：重点：116、显色反应及其影响因素：（吸光光度法对显、显色反应及其影响因素：（吸光光度法对显色反应的要求；影响显色反应的主要因素；多元色反应的要求；影响显色反应的主要因素；多元络合物显色体系简介和重要的显色剂）。络合物显色体系简介和重要的显色剂）。、光光度度法法测测量量误误差差及及测测量量条条件件的的选选择择：（偏偏离离朗朗伯伯比比耳耳定定律律的的原原因因；仪仪器器测测量量误误差差对对分分析析结结果果的的影影响响；适适宜宜吸吸光光度度范范围围的的控控制制；入入射射光光波波长长和和参比溶液的选择）。参比溶液的选择）。重点：重点：117
34、、吸吸光光光光度度法法的的应应用用：（工工作作曲曲线线法法，标标准准比比较较法法，差差示示法法，光光度度滴滴定定法法,络络合合物物组组成成的的确确定定,弱弱酸酸(碱碱)电电离离常常数数的的测测定定,其其它它方方面面的的应应用用简简介介-双双波波长长分分光光光光度度法法,微微分分分分光光光光度度法法,流流动注射光度法）。动注射光度法）。重点：重点：118了解光度法的意义和应用；巩固光的性质，溶液了解光度法的意义和应用；巩固光的性质，溶液颜色和光吸收的关系，熟记光的互补示意图。颜色和光吸收的关系，熟记光的互补示意图。掌掌握光度法的特点、测定方法、仪器使用；朗伯握光度法的特点、测定方法、仪器使用；朗
35、伯比耳定律及其应用；摩尔吸光系数（比耳定律及其应用；摩尔吸光系数（）、桑德）、桑德尔灵敏度（）及其意义；尔灵敏度（）及其意义；与的关系；光度与的关系；光度法对显色反应的要求；显色条件的确定和测量条法对显色反应的要求；显色条件的确定和测量条件的选择；工作曲线法、标准比较法的应用。学件的选择；工作曲线法、标准比较法的应用。学会标准曲线的制作方法，并能根据标准曲线计算会标准曲线的制作方法，并能根据标准曲线计算分析结果。通过自学了解差示光度滴定法、络合分析结果。通过自学了解差示光度滴定法、络合物组成的确定，弱酸（碱）电离常数的测定。物组成的确定，弱酸（碱）电离常数的测定。要求要求 119实验方案设计实验方案设计参与式讨论参与式讨论试设计用吸光光度法测定防晒霜中UV A含量的实验方案（包括测定原理、标准包括测定原理、标准物质、参比溶液、工作曲线，计算方法物质、参比溶液、工作曲线，计算方法）。120