《(6.1.1)--6.1血清总蛋白的检测-临床生化徐绍锐.pdf》由会员分享，可在线阅读，更多相关《(6.1.1)--6.1血清总蛋白的检测-临床生化徐绍锐.pdf（14页珍藏版）》请在taowenge.com淘文阁网|工程机械CAD图纸|机械工程制图|CAD装配图下载|SolidWorks_CaTia_CAD_UG_PROE_设计图分享下载上搜索。
1、血清总蛋白的检测血清总蛋白的检测 一、什么是血清总蛋白一、什么是血清总蛋白 血清总蛋白（血清总蛋白（total protein，TP）是血清）是血清中所包含蛋白质的总称，种类可达一千种中所包含蛋白质的总称，种类可达一千种以上以上 总量约总量约6585 g/L，其中白蛋白占，其中白蛋白占50%以以上上 二、血清总蛋白检测有什么意义二、血清总蛋白检测有什么意义 血清总蛋白浓度增高（血清总蛋白浓度增高（85 g/L）血浆浓缩失水血浆浓缩失水 血清蛋白合成增加血清蛋白合成增加 二、血清总蛋白检测有什么意义二、血清总蛋白检测有什么意义 血清总蛋白浓度降低（血清总蛋白浓度降低（65 g/L）营养不良和消耗
2、增加营养不良和消耗增加 合成障碍合成障碍 蛋白漏出蛋白漏出 三、血清总蛋白有哪些检测方法三、血清总蛋白有哪些检测方法 凯氏定氮法：参考方法凯氏定氮法：参考方法 双缩脲法：首选常规方法双缩脲法：首选常规方法 酚试剂法酚试剂法 紫外吸收法紫外吸收法 染料结合法染料结合法 比浊法比浊法 测定测定原理原理 蛋白质蛋白质的两个相邻的两个相邻肽键（肽键（-CO-NH-）在碱）在碱性溶液性溶液中与中与Cu2+稳定产稳定产生紫红色络合物，在生紫红色络合物，在540nm有最大有最大光吸收光吸收 1.双双缩脲法（缩脲法（biuret method）参考区间参考区间 成人成人6585 g/L（国家卫生行业标准，（国
3、家卫生行业标准，2013）新生儿新生儿：4670 g/L 数月数月到到2岁：岁：5175 g/L 3岁及以上：岁及以上：6080 g/L 1.双双缩脲法（缩脲法（biuret method）方法方法评价评价 特异性高，特异性高，试剂单一、方法试剂单一、方法简便简便 对对各种蛋白质呈色基本相同，显色各种蛋白质呈色基本相同，显色稳定稳定 检测检测范围范围10120g/L 是是临床测定血清总蛋白首选的常规方法临床测定血清总蛋白首选的常规方法 1.双双缩脲法（缩脲法（biuret method）测定测定原理原理 是经典是经典的蛋白质测定方法。蛋白质中含氮量较为的蛋白质测定方法。蛋白质中含氮量较为恒定，
4、平均恒定，平均16，即，即1克氮相当于克氮相当于6.25克克蛋白质。测蛋白质。测定定样品中的含氮量，推算出蛋白质样品中的含氮量，推算出蛋白质含量含量 2.凯氏定氮法凯氏定氮法（Kjeldahl method）方法方法评价评价 该法定量准确，该法定量准确，精密度高，灵敏度高，精密度高，灵敏度高，回收率高，回收率高，适用于适用于一切形态（固、液）一切形态（固、液）样品样品 操作操作复杂、复杂、费时费力，费时费力，不不适合临床常规测定适合临床常规测定 是是公认的参考方法公认的参考方法，用于，用于标准蛋白质的定值和校正标准蛋白质的定值和校正其他方法等其他方法等 2.凯氏定氮法凯氏定氮法（Kjeldah
5、l method）测定测定原理原理 蛋白质中酪氨酸和色氨酸能还原磷钨酸蛋白质中酪氨酸和色氨酸能还原磷钨酸-磷钼酸试磷钼酸试剂起蓝色反应剂起蓝色反应 3.酚酚试剂法（试剂法（phenol reagent method）方法评价方法评价 呈呈色灵敏度高色灵敏度高，有利于检出微量蛋白质，有利于检出微量蛋白质 专一性专一性差，不适合测定混合差，不适合测定混合蛋白质蛋白质 易易受还原性化合物的受还原性化合物的干扰干扰 测定测定原理原理 蛋白质蛋白质浓度（浓度（g/L）1.45A2800.74A260 4.紫紫外吸收法外吸收法 方法评价方法评价 简便简便实用实用，保留样品生物活性，保留样品生物活性 准确性受影响大，不适合血清蛋白测定准确性受影响大，不适合血清蛋白测定 测定测定原理原理 蛋白分子蛋白分子可在酸性环境解离可在酸性环境解离带有带有-NH3+，与染料，与染料阴离子产生颜色反应阴离子产生颜色反应，如邻，如邻苯三酚红苯三酚红钼法等钼法等 某些酸能某些酸能与蛋白质结合而产生微细沉淀与蛋白质结合而产生微细沉淀，悬浮液，悬浮液浊度大小与浊度大小与蛋白浓度成正比蛋白浓度成正比，如苄乙氯铵比浊法，如苄乙氯铵比浊法 5.染料染料结合法和比浊法结合法和比浊法