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1、精选学习资料 - - - - - - - - - 选修 1 基础学问点背诵1-1 果酒和果醋和制作一、果酒制作1原理：菌种,属于核生物,新陈代谢类型；,有氧时,呼吸的反应式为：无氧时,呼吸的反应式为：,酒精发酵一般掌握在；2条件：繁衍最适温度3菌种来源：（1）自然发酵：；（2）人工发酵：分别获得的纯洁的酵母菌菌种；现在工厂化生产果酒, 为提高果酒的品质, 更好地抑制其它微生物的生长,实行的措施是；4试验设计流程图5依据教材 P4 操作提示设计试验步骤及装置；充气口作用；排气口作用；出料口作用；排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接,其目的是；使用该装置制酒时,应当关闭；制醋时,应将充气口；6
2、试验结果分析与评判：可通过嗅觉和品尝初步鉴定,并用 _检验酒精存在；可观看到的现象为；二、果醋的制作：1原理：菌种：_,属于 _核生物,新陈代谢类为 _；醋酸生成反应式是 _ _ _ ；2条件：最适合温度为 _,需要充分的 _；3菌种来源：到 _或_购买；4设计试验流程及操作步骤：果酒制成以后,在发酵液中加入_或醋曲,然后将装置转移至_ 0C条件下发酵,适时向发酵液中 _；假如没有充气装置,可以将瓶盖打开,在瓶盖上纱布,以削减空气中尘土污染；名师归纳总结 - - - - - - -第 1 页,共 23 页精选学习资料 - - - - - - - - - 三、操作过程应留意的问题（1）为防止发酵
3、液被污染,发酵瓶要用的空间；消毒；（2）葡萄汁装入发酵瓶时,要留出大约（3）制作葡萄酒时将温度严格掌握在,时间掌握在 d左右,可通过 对发酵的情形进行准时的监测；（ 4）制葡萄醋的过程中,将温度严格掌握在 d,并留意适时在 充气；【疑难点拨 】,时间掌握在1、 认为应当先冲洗葡萄仍是先除去枝梗？为什么？应当先冲洗, 然后再除去枝梗, 以防止除去枝梗时引起葡萄破旧,增加被杂 菌污染的机会；2、 认为应当从哪些方面防止发酵液被污染？需要从发酵制作的过程进行全面的考虑,由于操作的每一步都可能混入杂菌；例如：榨汁机、发酵装置要清洗洁净；每次排气时只需拧松瓶盖、不要完全 掀开瓶盖等；3. 制葡萄酒时,
4、为什么要将温度掌握在 度掌握在 3035 ？1825 ？制葡萄醋时, 为什么要将温答：温度是酵母菌生长和发酵的重要条件；20 左右最适合酵母菌繁衍；因此需要将温度掌握在其最适温度范畴内；而醋酸菌是嗜温菌, 最适生长温度为3035 ,因此要将温度掌握在 3035 ；4. 制葡萄醋时,为什么要适时通过充气口充气？答：醋酸菌是好氧菌, 在将酒精变为醋酸时需要氧的参加,因此要适时向发酵液中充气；1-2 腐乳的制作一、腐乳制作的原理1腐乳的发酵有多种微生物的协同作用,如、等,其中起主要作用的是；它是一种丝状,常见于、上；新陈代谢类型是；2等微生物产生的蛋白酶可以将豆腐中的 分解成小分子的 和；脂肪酶可以
5、将水解成 和；3现代的腐乳生产是在严格的 条件下,将优良菌种直接接种在豆腐上,这样可以防止,保证；名师归纳总结 - - - - - - -第 2 页,共 23 页精选学习资料 - - - - - - - - - 二、腐乳制作的试验流程：让豆腐长出毛霉密封腌制；三、试验材料 含水量 70%的豆腐,粽叶,盘子,盐,黄酒,米酒,糖,香辛料等,广口玻 璃瓶,高压锅；四、试验步骤 1将豆腐切实 3cm 3cm 1cm如干块2豆腐块放在铺有干粽叶的盘内,再用保鲜膜包裹；3将平盘放在温度为 腐表面丛生直立菌丝；每块豆腐等距离排放, 豆腐上再铺洁净粽叶,的地方,毛霉逐步生长, 大约 5d 后,豆4当毛霉生长旺
6、盛,呈淡黄色时,去除保鲜膜及粽叶,散热及水分,同时散去 霉味约 36h；5豆腐凉透后,将豆腐间的菌丝拉断,整齐排在容器内,预备腌制；6长满毛霉的豆腐块（以下称毛坯）分层摆放,分层加盐,并随层高而增加,在瓶口表面铺盐,以防止,约腌制 8d；7将黄酒、米酒和糖、香辛料等混合制成卤汤；卤汤酒精含量掌握在 为宜；8广口玻璃瓶刷洗洁净, 用高压锅在 100 0C蒸汽灭菌 30min,将腐乳成坯摆入瓶 中,加入卤汤和辅料后,将瓶口用酒精灯加热灭菌,用胶条密封,常温下,六个 月即可以成熟；【疑难点拨】1王致和为什么要撒很多盐,将长毛的豆腐腌起来？盐在该过程中起什么作 用？盐能防止杂菌污染,防止豆腐腐败；盐能
7、抑制多种微生物的生长；2配制卤汤时,一般将酒精含量掌握在12%左右,过高过低都不行,为什么？酒精含量的高低与腐乳后期发酵时间的长短有很大关系；酒精含量越高,对 蛋白酶的抑制作用也越大, 使腐乳成熟期延长； 酒精含量过低, 蛋白酶的活性高,加快蛋白质的水解,杂菌繁衍快,豆腐易腐败,难以成块；3. 豆腐坯用食盐腌制,其作用是什么？渗透盐分,析出水分 防止毛霉连续生长和污染的杂菌繁衍给腐乳以必要的咸味 浸提毛霉菌丝上的蛋白酶4. 腐乳在酿造后期发酵中添加多量酒液的目的是什么？防止杂菌污染以防腐 与有机酸结合形成酯, 由于酒中特殊是黄酒中含有酵母茼, 经发酵可产生醇,名师归纳总结 - - - - -
8、- -第 3 页,共 23 页精选学习资料 - - - - - - - - - 并与有机酸结合形成酯,给予腐乳风味 利于后期发酵 5. 卤汤中香辛料的作用是什么？调味促进发酵杀菌防腐说明：（香辛料如花椒、大蒜、茴香中含有花椒酰胺、蒜辣素、茴香醚及茴香醛 等,有极强的杀菌力；又有良好的调味功能；香辛料成分参加发酵过程,合成复 杂的酯类,使腐乳形成特有色、香、味； ）6. 你能利用所学的生物学学问,说明豆腐长白毛是怎么一回事？答：豆腐上生长的白毛是毛霉的白色菌丝；匍匐菌丝；严格地说是直立菌丝, 在豆腐中仍有7. 我们平常吃的豆腐,哪种适合用来做腐乳？答：含水量为 70%左右的豆腐适于作腐乳；用含水
9、量过高的豆腐制腐乳,不易成形；8. 吃腐乳时,你会发觉腐乳外部有一层致密的“ 皮” ；这层“ 皮” 是怎样形成的呢？它对人体有害吗？它的作用是什么？答：“ 皮” 是前期发酵时在豆腐表面上生长的菌丝（匍匐菌丝）,它能形成腐乳的“ 体” ,使腐乳成形；“ 皮” 对人体无害；3-3 制作泡菜一、泡菜制作的原理1、制作泡菜所用微生物是,其代谢类型是；在无氧条件下,将糖分解为；分裂方式是2、反应式为：3、含抗生素牛奶不能生产酸奶的缘由是；4、常见的乳酸菌有和常用于生产酸奶；二、而亚硝酸盐概况1、亚硝酸盐为,易溶于,在食品生产中用作；2、膳食中的亚硝酸盐一般不会危害人体健康,国家规定肉制品中不超过mg/k
10、g,酱腌菜中不超过 mg/kg,婴儿奶粉中不超过 mg/kg；亚硝酸盐被吸取后随 排出体外,但在相宜、和作用下形成致癌物质亚硝胺；3、一般在腌制天后亚硝酸盐含量开头降低,故在天之后食用最好4、测定亚硝酸盐含量的原理是在酸化条件下,亚硝酸盐与发生重氮化反应后, 与 N-1- 萘基乙二胺盐酸盐结合形成 染料,与已知浓度的标准显色液,估算泡菜中亚硝酸盐含量；名师归纳总结 - - - - - - -第 4 页,共 23 页精选学习资料 - - - - - - - - - 2-1 微生物的试验室培育一、培育基概况1、概念：培育基人们依据微生物对的不同需求,配制出供其 的养分基质,是进行微生物培育的物质基
11、础；2、种类（1）、培育基依据物理性质可分为、和；在液体培育基中加入凝固剂 配制培育基中用作凝固剂）后,制成（是从红藻中提取的一种多糖,在 培育基；微生物在固体培育基表面生长,可以形成肉眼可见的菌落；依据菌落的特点可以判定是哪一种菌；培育基应用于工业或生活生产,培育基应用于微生物的分别和鉴定,培育基就常用于观看微生物的运动及菌种保藏等；（2）、依据成分培育基可分为 培育基和 培育基；（3）、依据培育基的用途, 可将培育基分为 培育基和 培育基；培育基是指在培育基中加入某种化学物质,以抑制不需要的微生物生长,促进所需要的微生物的生长；培育基是依据微生物的特点,在培育基中加入某种指示剂或化学药品配
12、制而成的,用以鉴别不同类别的微生物；3、化学成分包括、等；（1）、：能为微生物的代谢供应碳元素的物质；如 CO2、NaHCO 3 等为；糖类、石油、花生粉饼等为；异养微生物只能利用；（2）、：能为微生物的代谢供应氮元素的物质；如 N2、NH3、NO3-、NH4 +为；蛋白质、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白胨为；只有、微生物才能利用 N2；的要求；4、培育基仍要满意微生物生长对以及例如,培育乳酸杆菌时需要在培育基中添加,培育霉菌时须将培养基的 pH调至性,培育细菌是需要将pH调至性或性,培育厌氧型微生物是就需要供应的条件二、无菌技术1、获得纯洁培育物的关键是防止外来杂菌的入侵,要留意以下几个方面：对
13、试验操作的空间、操作者的衣着和手,进行清洁和；将用于微生物培育的器皿、接种用具和培育基等器具进行；为防止四周环境中微生物的污染,试验操作应在酒精灯 邻近进行；试验操作时应防止已经灭菌处理的材料用具与四周的物品相接触；2、无菌技术除了用来防止试验室的培育物被其他外来微生物污染外,仍有什么目的？名师归纳总结 - - - - - - -第 5 页,共 23 页精选学习资料 - - - - - - - - - 答：无菌技术仍能有效防止操作者自身被微生物感染；3、消毒与灭菌的区分（1）消毒指使用较为的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部对人体有害的微生物（不包括）；消毒方法常用 消毒法,消毒法（对于一些不
14、耐高温的液体） 仍有化学药剂（如、石炭酸等）消毒、消毒；（2）灭菌就是指使用 的理化因素杀死物体内外 的微生物,包括；灭菌方法有、；比较项 理化作用强度 毁灭微生物的数量 芽孢和孢子能否被毁灭消毒灭菌（3）灭菌方法：接种环、接种针、试管口等使用灭菌法；灭菌箱 ；玻璃器皿、金属用具等使用灭菌法,所用器械是培育基、无菌水等使用灭菌法,所用器械是灭菌锅 ；表面灭菌和空气灭菌等使用灭菌法,所用器械是；三、制作牛肉膏蛋白胨固体培育基1、方法步骤：、；2、倒平板操作的步骤：将灭过菌的培育皿放在火焰旁的桌面上,右手拿装有培育基的锥形瓶,左手拔出棉塞；右手拿锥形瓶,将瓶口快速通过；用左手的拇指和食指将培育皿打
15、开一条稍大于瓶口的缝隙,右手将锥形瓶中的培育基（约 mL）倒入培育皿,左手立刻盖上培育皿的皿盖；板等待平板,大约需 min；然后,将平,使培育皿盖在下、皿底在上；【疑难点拨】倒平板操作的争论1. 培育基灭菌后,需要冷却到 估量培育基的温度？50左右时,才能用来倒平板；你用什么方法来提示：可以用手触摸盛有培育基的锥形瓶,感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不 烫手时,就可以进行倒平板了；2. 为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？答：通过灼烧灭菌,防止瓶口的微生物污染培育基；3. 平板冷凝后,为什么要将平板倒置？答：平板冷凝后, 皿盖上会凝聚水珠, 凝固后的培育基表面的湿度也比较高,名师归纳总结 - - -
16、- - - -第 6 页,共 23 页精选学习资料 - - - - - - - - - 将平板倒置, 既可以使培育基表面的水分更好地挥发,落入培育基,造成污染；又可以防止皿盖上的水珠4. 在倒平板的过程中,假如不当心将培育基溅在皿盖与皿底之间的部位,这个平板仍能用来培育微生物吗？为什么？答：空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培育基上滋生,因此最好不要用这个平板培育微生物；四、纯化大肠杆菌1、微生物接种的方法最常用的是 和；2、是通过接种环在琼脂固体培育基表面连续划线的操作；将集合的菌种 分散到培育基的表面；在数次划线后培育,可以分别到由繁衍而来的肉眼可见的子细胞群体,这就是；3、是将菌液进行
17、一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培育基的表面,进行培育；分为 和两步；4、用平板划线法和稀释涂布平板法接种的目的是：使集合在一起的微生物成单个细胞,从而能在培育基表面形成单个的菌落,以便于 菌种；5、平板划线法操作步骤：将接种环放在上灼烧,直到接种环烧红；在火焰旁 接种环,并打开棉塞；将试管口通过；将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环菌液；将试管通过火焰,并塞上棉塞；左手将皿盖打开一条缝隙,右手将沾有菌种的接种环快速伸入平板内,划 培育皿；三至五条平行线,盖上皿盖；留意不要灼烧接种环,待其冷却后,从第一区域划线的开头往其次区域内划线；重复以上操作,在三、四、五区域内划线
18、；留意不要将最终一区的划线 与第一区；将平板 放入培育箱中培育；6、涂布平板操作的步骤：将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中；取少量菌液,滴加到培育基表面；将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃,待酒精燃尽后,冷却 810s；用涂布器将菌液匀称地涂布在培育基表面；【疑难点拨】（平板划线操作的争论）1. 为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作终止名师归纳总结 - - - - - - -第 7 页,共 23 页精选学习资料 - - - - - - - - - 时,仍旧需要灼烧接种环吗？为什么？答：操作的第一步灼烧接种环是为了防止接种环上可能存在的微生物污染培养物；每次划线前灼烧接种环是
19、为了杀死上次划线终止后,接种环上残留的菌种,使下一次划线时, 接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端,从而通过划线次数的增加, 使每次划线时菌种的数目逐步削减,以便得到菌落； 划线终止后灼烧接种环,能准时杀死接种环上残留的菌种,防止细菌污染环境和感染操作者；2. 在灼烧接种环之后,为什么要等其冷却后再进行划线？答：以免接种环温度太高,杀死菌种；3. 在作其次次以及其后的划线操作时,为什么总是从上一次划线的末端开头划 线？答：划线后, 线条末端细菌的数目比线条起始处要少,每次从上一次划线的 最终能得到由单个 末端开头, 能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步削减,细菌繁衍而来的菌落；（涂布平板操
20、作的争论）涂布平板的全部操作都应在火焰邻近进行；结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求,想一想,第2 步应如何进行无菌操作？提示：应从操作的各个细节保证“ 无菌” ；例如,酒精灯与培育皿的距离要 合适、吸管头不要接触任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰四周；等等；五、菌种的储存（1）对于频繁使用的菌种,可以采纳 的方法；暂时保藏方法 将菌种接种到试管的固体斜面培育基上,在合适的温度下培育；当菌落长成后,将试管放入的冰箱中保藏；以后每个月,都要重新将菌种从旧的培育基上转移到新奇的培育基上；缺点：这种方法储存的时间不长,菌种简洁或；（2）对于需要长期储存的菌种,可以采纳的方法；在 3mL的甘油瓶中,装入
21、 1mL甘油后灭菌；将 1mL培育的菌液转移到甘油瓶中,与甘油充分混匀后,放在的冷冻箱中储存；2-2 土壤中分解尿素的细菌的分别与计数 尿素 是一种重要的农业氮肥,尿素并不能直接被农作物吸取；只有当土壤中的细菌将尿素分解成氨之后,解尿素,是由于他们能合成脲酶尿素最初是从人的尿液中发觉的 选择菌株才能被植物利用； 土壤中的细菌之所以能分名师归纳总结 - - - - - - -第 8 页,共 23 页精选学习资料 - - - - - - - - - （1）试验室中微生物的选择应用的原理 人为供应有利于目的菌株生长的条件（包括养分、温度、pH 等）,同时抑制 或阻挡其他微生物生长；（2）选择性培育基
22、 在微生物学中,将答应特定种类的微生物生长,同时抑制或阻挡其他种类微 生物生长的培育基,称作 选择培育基 ；（3）配制选择培育基的依据 依据选择培育的菌种的生理代谢特点加入某种物质以达到选择的目的；例如,培育基中不加入有机物可以选择培育自养微生物；培育基中不加入氮元素,可以选择培育能固氮的微生物；加入高浓度的食盐可选择培育金黄色葡萄球菌 等；统计菌落数目（1）测定微生物数量的常用方法有稀释涂布平板法 和显微镜直接计数 ；（2）稀释涂布平板法统计样品中活菌的数目的原理 当样品的稀释度足够高时,培育基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液 中的一个活菌； 通过统计平板上的菌落数, 就能估量出样品中大
23、约含有多少活细菌；为了保证结果精确,一般设置35 个平板,选择菌落数在30300 的平板进行计数,并 取平均值 ；统计的菌落数往往比活菌的实际数目低,因此,统计结果一般用菌落数而不是活菌数来表示；采纳此方法的留意事项： 1. 一般选取菌落数在30300之间的平板进行计数2. 为了防止菌落扩散,影响计数,可在培育基中加入 微生物 设置对比TTC 3. 本法仅限于形成菌落的设置对比的主要目的是排除试验组中非测试因素对试验结果的影响,提高试验结果的可信度； 对比试验是指除了被测试的条件以外,其他条件都相同的试验, 其作用是比照试验组, 排除任何其他可能缘由的干扰, 证明的确是所测试的条件引 起相应的
24、结果；试验设计 试验设计包括试验方案,所需仪器、材料、用具和药品,详细的实施步骤以 准时间支配等的综合考虑和支配；（1）土壤取样：同其他生物环境相比,土壤中的微生物,数量最大,种类最多；在富含有机质的土壤表层,有更多的微生物生长；从富含有机物、潮湿、pH7的土壤中取样；铲去表层土,在距地表约38cm的土壤层取样；（2）样品的稀释：样品的稀释程度将直接影响平板上生长的菌落数目；在实际操作中,通常选用肯定稀释范畴的样品液进行培育,以保证获得菌落数在30300之间、适于计数的平板；名师归纳总结 - - - - - - -第 9 页,共 23 页精选学习资料 - - - - - - - - - 测定土
25、壤中细菌的数量,一般选用10 4 105 10 6 测定放线菌的数量,一般选用 测定真菌的数量,一般选用10 3 104 10 5 10 2 103 10 4（3）微生物的培育与观看 不同种类的微生物,往往需要不同的培育温度和培育时间；细菌 3037 12 天 放线菌 2528 57 天 霉菌 2528 34 天 每隔 24 小时统计一次菌落数目,选取菌落数目稳固时的记录作为结果,这样可以防止因培育时间不足而导致一楼菌落的数目；一般来说,在肯定的培育条件下（相同的培育基、 唯独及培育时间）,同种微生物表现出稳固的菌落特点；外形、大小、隆起程度、颜色 疑难解答（1）如何从平板上的菌落数估量出每克
26、样品中的菌落数？统计某一稀释度下平板上的菌落数,最好能统计 数的平均值3 个平板,运算出平板菌落每克样品中的菌落数 =（C/V）*M 其中,C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数, V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（ml）,M代表稀释倍数课题三 分解纤维素的微生物的分别纤维素,一种由葡萄糖首尾相连而成的高分子化合物,糖类物质；纤维素与纤维素酶是地球上含量最丰富的多（1）棉花是自然界中纤维素含量最高的自然产物,木材、作物秸秆等也富含纤 维素；（2）纤维素酶是一种复合酶,一般认为它至少包括三种组分,即 C1酶、 CX酶和葡萄糖苷酶, 前两种酶使纤维素分解成纤维二糖,第三种酶将纤维二糖分解成葡萄
27、糖；纤维素最终被水解成葡萄糖,为微生物的生长供应养分；纤维素分解菌的选择（1）选择方法：刚果红染色法；能够通过颜色反应直接对微生物进行选择；（2）刚果红染色法选择纤维素分解菌的原理 刚果红是一种染料,它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物,但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应；当我们在含有纤维素的培育基中加入刚果红时, 刚果红能与培育基中的纤维素形成红色复合物；当纤维素被纤维素酶分解后, 刚果红纤维素的复合物就无法形成,培育基中会显现以纤维素分解菌为中心的透亮圈； 这样,我们就可以通过是否产生透亮圈来选择纤维素分名师归纳总结 - - - - - - -第 10 页,共 23 页精
28、选学习资料 - - - - - - - - - 解菌；分别分解纤维素的微生物的试验流程 土壤取样选择培育（此步是否需要,应依据样品中目的菌株数量的多少来确定）梯度稀释将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培育基上选择产生透亮圈的 菌落（1）土壤采集 选择富含纤维素的环境；（2）刚果红染色法分别纤维素分解菌的步骤 平板（3）刚果红染色法种类倒平板操作、 制备菌悬液、 涂布一种是先培育微生物,再加入刚果红进行颜色反应,另一种是在倒平板时就 加入刚果红；课题延长 对分解纤维素的微生物进行了初步的选择后,只是分别纯化的第一步,为确 定得到的是纤维素分解菌, 仍需要进行发酵产纤维素酶的试验,纤维素酶的发酵 方法
29、有 液体发酵 和固体发酵 两种；纤维素酶的测定方法, 一般是对纤维素酶分解 滤纸等纤维素后所产生的葡萄糖进行定量的测定；疑难解答（1）为什么要在富含纤维素的环境中查找纤维素分解菌？由于生物与环境的相互依存关系,在富含纤维素的环境中,纤维素分解菌的 含量相对提高,因此从这种土样中获得目的微生物的几率要高于一般环境；（2）将滤纸埋在土壤中有什么作用？你认为滤纸应当埋进土壤多深？将滤纸埋在土壤中能使纤维素分解菌相对集合,实际上是人工设置纤维素分解菌生存的相宜环境；一般应将纸埋于深约 10cm左右腐殖土壤中；（3）两种刚果红染色法的比较 方法一是传统的方法,缺点是操作繁琐,加入刚果红溶液会使菌落之间发
30、生 混杂；其优点是这样显示出的颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用；方法二的 优点是操作简便, 不存在菌落混杂问题, 缺点是由于纤维素和琼脂、 土豆汁中都 但这种只产 含有淀粉类物质, 可以使能够产生淀粉酶的微生物显现假阳性反应；生淀粉酶的微生物产生的透亮圈较为模糊,由于培育基中纤维素占主要位置,因此可以与纤维素酶产生的透亮圈相区分；方法二的另一缺点是： 有些微生物具有降解色素的才能, 它们在长时间培育过程中会降解刚果红形成明显的透亮圈,与纤维素分解菌不易区分；（4）为什么选择培育能够“ 浓缩” 所需的微生物？在选择培育的条件下, 可以使那些能够适应这种养分条件的微生物得到快速繁衍,而那些不适应
31、这种养分条件的微生物的繁衍被抑制,的作用；因此可以起到“ 浓缩”名师归纳总结 - - - - - - -第 11 页,共 23 页精选学习资料 - - - - - - - - - 专题三 植物的组织培育技术 课题一 菊花的组织培育 植物组织培育的基本过程 细胞分化： 在生物个体发育过程中, 细胞在外形、 结构和生理功能上显现稳固性 差异的过程；离体的植物组织或细胞, 在培育了一段时间以后, 会通过细胞分裂, 形成愈伤组织,愈伤组织的细胞排列疏松而无规章,是一种高度液泡化的呈无定外形态的薄壁细胞；由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程,称为植物细胞的脱 分化,或者叫做去分化； 脱分化产生的
32、愈伤组织连续进行培育,又可以重新分化 成根或芽等器官,这个过程叫做再分化；再分化形成的试管苗,移栽到地里,可 以发育成完整的植物体；植物细胞工程 具有某种生物全套遗传信息的任何一个活细胞,都具有发育成完整个体的才能,即每个生物细胞都具有全能性； 但在生物体的生长发育过程中并不表现出来,这是由于在特定的时间和空间条件下,官；通过基因的选择性表达, 构成不同组织和器植物组织培育技术的应用有： 实现优良品种的快速繁衍； 培育脱毒作物； 制作人 工种子；培育作物新品种以及细胞产物的工厂化生产等； 细胞分化是一种长久性的变化,它有什么生理意义？使多细胞生物体中细胞结构和功能趋向特地化,有利于提高各种生理
33、功能的效 率；比较根尖分生组织和愈伤组织的异同组织类型细胞来源细胞外形细胞结构细胞排列细胞去向根尖受精卵正方形无液泡紧密分化成多种分生组织细胞组织愈伤组织高度分化细胞无定形高度液泡化疏松再分化成新个体影响植物组织培育的条件 相同点 都通过有丝分裂进行细胞增殖材料：不同的植物组织, 培育的难易程度差别很大； 植物材料的选择直接关系到 试验的成败；植物的种类、材料的年龄和储存时间的长短等都会影响试验结果；菊花组织培育一般选择未开花植物的茎上部新萌生的侧枝作材料；一般来说,容易进行无性繁衍的植物简洁进行组织培育；生理状态好,简洁诱导脱分化和再分化；选取生长旺盛嫩枝进行组培的是嫩枝养分：离体的植物组织
34、和细胞,对养分、环境等条件的要求相对特殊,需要配制名师归纳总结 - - - - - - -第 12 页,共 23 页精选学习资料 - - - - - - - - - 相宜的培育基； 常用的培育基是MS培育基, 其中含有的大量元素是N、P、S、K、Ca、Mg,微量元素是 Fe、Mn、B、Zn、Cu、Mo、I 、Co,有机物有甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等；激素：植物激素中 生长素 和细胞分裂素 是启动细胞分裂、 脱分化和再分化的关键 性激素；在生长素存在的情形下, 细胞分裂素的作用出现加强趋势；在培育基中需要添加生长素和细胞分裂素等植物激素,例等都影响结果；其浓度、 使用的先后次序、 用量的
35、比使用次序试验结果+ 生长素细胞分裂素比值与结果促根分化,先生长素,有利于分裂但不比值高时抑芽形成后细胞分裂素分化比值低时促芽分化,先细胞分裂细胞既分裂也分抑根形成素,化比值适中促进愈伤组织生长后生长素同时使用分化频率提高环境条件： PH、温度、光等环境条件；不同的植物对各种条件的要求往往不同；进行菊花的组织培育,一般将 pH掌握 在 5.8 左右,温度掌握在 1822,并且每日用日光灯照耀 12h. 4、操作流程 浓缩液（培 配制 MS固体培育基 ：配制各种母液： 将各种成分按配方比例配制成的 养基母液）； 使用时依据母液的浓缩倍数,运算用量,并加蒸馏水稀释； 配制培育基：应加入的物质有琼脂
36、、蔗糖、大量元素、微量元素、有机物和植 物激素的母液,并用蒸馏水定容到 1000 毫升； 在菊花组织培育中,可以不添加植物激素 缘由是菊花茎段组织培育比较简洁； 灭菌：实行的灭菌方法是高压蒸汽灭菌；MS培育基中各种养分物质的作用是什么？与肉汤培育基相比,MS培育基有哪些特点？大量元素和微量元素供应植物细胞所必需的无机盐；蔗糖供应碳源, 维护细胞渗透压；甘氨酸、维生素等物质主要是为了满意离体植物细胞在正常代谢途径受到肯定影响后所产生的特殊养分需求；微生物培育基以 有机养分 为主, MS培育基就需供应大量 无机养分 ；外植体的消毒 外植体：用于离体培育的植物器官或组织片段；选取菊花茎段时,要取生长
37、旺盛的嫩枝； 菊花茎段用流水冲洗后可加少许洗衣粉,用软刷轻轻刷洗,刷洗后在流水下冲洗 20min 左右；用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分,放入体积分数为 70%的酒精中摇动 23次,连续 67s,立刻将外植体取出, 在无菌水中名师归纳总结 - - - - - - -第 13 页,共 23 页精选学习资料 - - - - - - - - - 清洗；取出后仍用无菌吸水纸吸干外植体表面水分,放入质量分数为 0.1%的氯化汞溶液中 12min；取出后,在无菌水中至少清洗3 次,漂洗消毒液；留意：对外植体进行表面消毒时, 就要考虑药剂的消毒成效, 又要考虑植物的耐 受才能；接种： 接种过程中插入外植体时
38、外形学上端朝上,每个锥形瓶接种 78 个外植 体；外植体接种与细菌接种相像,操作步骤相同,而且都要求无菌操作；培育： 应当放在无菌箱中进行,并定期进行消毒,保持相宜的温度（1822）和光照（ 12h）移栽：栽前应先打开培育瓶的封口膜,让其在培育间生长几日, 然后用流水清洗根部培育基；然后将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍宝岩等环境中生活一段时间,进行壮苗；最终进行露天栽培；栽培外植体在培育过程中可能会被污染,缘由有外植体消毒不完全； 培育基灭菌不彻底；接种中被杂菌污染；锥形瓶密封性差等；专题二 月季的花药培育被子植物的花粉发育被子植物的雄蕊通常包含花丝、花药 两部分；花药为 囊状结构,内部含有很多花
39、粉；花粉是由 花粉母细胞 经过减数分裂而形成的,因此,花粉是 单倍体的生殖细胞 ；被子植物花粉的发育要经受小孢子四分体时期 、单核期和双核期 等阶段；在小孢子四分体时期,4 个单倍体细胞连在一起,进入单核期时,四分体的 4 个单倍体细胞彼此分别, 形成 4 个具有单细胞核的花粉粒； 这时的细胞含深厚的原生质, 核位于细胞的中心 （单核居中期 ）；随着细胞不断长大,细胞核由中心移向细胞一侧（单核靠边期 ）,并分裂成 1 个生殖细胞核和 1 个花粉管细胞核,进而形成两个细胞,一个是生殖细胞,一个是养分细胞；生殖细胞 将在分裂一次,形成两个精子；留意：成熟的花粉粒有两类, 一类是二核花粉粒, 其花粉
40、粒中只含花粉管细胞核和生殖细胞核,二核花粉粒的精子是在花粉管中形成的；另一类是三核花粉粒,花粉在成熟前, 生殖细胞就进行一次有丝分裂,形成两个精子, 此花粉粒中含有 两个精子核和一个花粉管核 （养分核）花粉发育过程中的四分体和动物细胞减 数分裂的四分体不同； 花粉发育过程中的四分体是花粉母细胞经减数分裂形成的 4 个连在一起的单倍体细胞； 而动物细胞减数分裂过程中的四分体是联会配对后 的一对同源染色体, 由于含有四条染色单体而称为四分体；同一生殖细胞形成 的两个精子,其基因组成完全相同；产生花粉植株的两种途径通过花药培育产生花粉植株（即单倍体植株） 一般有 两种途径 ,一种是花粉通过胚状体阶段
41、发育为植物,另一种是花粉在诱导培育基 上先形成愈伤组织, 再将其诱导分化成植株 ；这两种途径之间并没有肯定的界限,主要取决于培育基中 激素的种类 及其浓度配比 ；名师归纳总结 - - - - - - -第 14 页,共 23 页精选学习资料 - - - - - - - - - 留意：无论哪种产生方式,都要 先诱导生芽,再诱导生根 胚状体： 植物体细 胞组织培育过程中, 诱导产生的外形与受精卵发育成的胚特别类似的结构,其发 育也与受精卵发育成的胚类似, 有胚芽、胚根、胚轴等完整结构, 就像一粒种子,又称为细胞胚；影响花药培育的因素诱导花粉能否胜利及诱导胜利率的高低,受多种因素影响,其中 材料的选择 与培育基的组成 是主要的影响因素 选择 月季 亲本的生理状况： 花粉早期是的花药比后期的更简洁产生花粉植株,的初花期 ； 合适的花粉发育时期：一般来说,在 期,花药培育胜利率最高 花蕾：选择 完全未开放 的花蕾单核期 ,细胞核由中心移向细胞一侧的时 亲本植株的生长条件 、材料的低温预处理 以及接种密度 等对诱导胜利率都有一 定影响 材料的选取： 选择花药时,