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1、生物化学习题 2第1部分 蛋白质一、填空题1.除半胱氨酸和胱氨酸外，含硫的氨基酸还有_，除苏氨酸和酪氨酸外，含羟基的氨基酸还有_，在蛋白质中常见的20种氨基酸中，_是一种亚氨基酸，_不含手性碳原子。2.氨基酸在等电点时，主要以_离子形式存在，在pHpI的溶液中，大部分以_离子形式存在，在pHpI的溶液中，大部分以_离子形式存在。3.组氨酸的pK1(-COOH)值是1.82，pK2 (咪唑基)值是6.00， pK3(-NH3+)值是9.17，其等电点是_。4.Asp的pK1=2.09，pK2= 3.86，pK3=9.82，其pI等于_。5.在近紫外区能吸收紫外光的氨基酸有_、_和_。其中_的摩尔
2、吸光系数最大。6 .蛋白质分子中氮的平均含量为_，故样品中的蛋白质含量常以所测氮量乘以_。7.蛋白质的氨基酸残基是由_键连接成链状结构的，其氨基酸残基的_称蛋白质的一级结构。8.在螺旋中C=O和NH之间形成的氢键与_基本平行，每圈螺旋包含_个氨基酸残基，高度为_，每个氨基酸残基使螺旋轴上升_，并沿轴旋转_度。9.-折叠片结构的维持主要依靠两条肽键之间的肽键形成_来维持。10.用凝胶过滤法分离蛋白质，相对分子质量较小的蛋白质在柱中滞留的时间较_，因此最先流出凝胶柱的蛋白质，其相对分子质量最_。11.血红蛋白的辅基是_，当其中的1个亚基与氧结合后，其余亚基与氧的亲合力_，这种现象称_。当CO2或H
3、+浓度增高时，血红蛋白与氧的亲合力_，这种现象称_。12.稳定蛋白质胶体溶液的因素是_和_。13 .一般说来，球状蛋白质在其分子内部含有_性氨基酸残基，而在分子外表面含_性氨基酸残基。14蛋白质变性时空间结构_，而一级结构_。变性后，蛋白质的溶解度一般会_，生物学功能_。15.胰蛋白酶专一性地切断_和_的羧基端肽键。二、选择题（在备选答案中选出1个正确答案）1.一个生物样品的含氮量为5%，它的蛋白质含量为A .12.50% B. 16.00% C. 38.00% D. 31.25%2.下列蛋白质组分中，哪一种在280nm具有最大的光吸收？A. 色氨酸的吲哚环 B. 酪氨酸的酚环 C. 苯丙氨酸
4、的苯环 D. 半胱氨酸的硫原子3.关于氨基酸的叙述哪一项是错误的？A. 酪氨酸和丝氨酸含羟基 B.酪氨酸和苯丙氨酸含苯环 C. 谷氨酸和天冬氨酸含两个氨基 D.赖氨酸和精氨酸是碱性氨基酸4.在pH7时，其R基带有电荷的氨基酸是A. 缬氨酸 B. 甘氨酸 C. 半胱氨酸 D. 赖氨酸5.用6mol/L HCl水解某种蛋白质时能检出的氨基酸种类是A. 20种 B. 19种 C. 18种 D. 17种或更少6.每个蛋白质分子必定具有的结构是什么A. -螺旋 B. -折叠 C. 三级结构 D. 四级结构7.下列哪一种氨基酸侧链基团的pKa值最接近于生理pH值？A. 半胱氨酸 B. 谷氨酸 C. 谷氨酰
5、胺 D. 组氨酸8. Arg的pK1=2.17，pK2=9.04， pK3=12.48 其pI等于A .5.613 B. 7.332 C. 7.903 D. 10.769.典型的螺旋是A. 2.610 B. 310 C. 3.613 D. 4.41610.维持蛋白质分子中的螺旋主要靠A. 盐键 B. 范德华键 C. 共价键 D. 氢键11.维系蛋白质三级结构稳定的最重要的键或作用力是A盐键 B.二硫键 C.氢键 D.疏水作用力12.血红蛋白质的氧合曲线是 A.双曲线 B.抛物线 C. S形曲线 D.钟罩形13.维持蛋白质二级结构的主要化学键是A.肽键 B.二硫键 C.氢键 D.疏水键14.关于
6、蛋白质三级结构的描述错误的是A.有三级结构的蛋白质均有酶活性 B.球蛋白均有三级结构C.三级结构的稳定性由多种次级键维系 D.亲水基团多分布在三级结构的表面15.某蛋白质的等电点为7.5，在pH6.0的条件下进行电泳，它的泳动方向是A.在原点不动 B.向正极移动 C.向负极移动 D.无法预测16.用凝胶过滤层析柱分离蛋白质时，下列哪项是正确的A.分子体积最大的蛋白质最先洗脱下来 B.分子体积最小的蛋白质最先洗脱下来C.不带电荷的蛋白质最先洗脱来来 D.带电荷的蛋白质最先洗脱来来17.有一蛋白质水解产物在pH6用阳离子交换柱层析时，第一个被洗脱下来的氨基酸是A. Val（pI为5.96） B.
7、Lys（pI为9.74） C. Asp（pI为2.77） D. Arg （pI为10.76）18.为获得不变性的蛋白质，常用的方法有A. A.用三氯醋酸沉淀 B.用苦味酸沉淀 C.用重金属盐沉淀 D.低温盐析19.SDS凝胶电泳分离蛋白质是根据各种蛋白质A.pI的差异 B.分子大小的差异 C.分子极性的差异 D.溶解度的差异20.如果要测定一个小肽的氨基酸顺序，下列试剂中你认为最合适使用哪一个 A .茚三酮 B.CNBr C.胰蛋白酶 D.异硫氰酸苯酯三、判断题1.当溶液的pH等于某一可解离基团的pKa时，该基团一半被解离。2.氨基酸为氨基取代的羧酸，可直接用酸碱滴定法进行定量测定。3.当溶液
8、的pH小于某蛋白质的pI时，该蛋白质在电场中向阳极移动。4.溴化氰可以断裂甲硫氨酸的氨基参与形成的肽键。5.在-螺旋中，每3.6个氨基酸绕一圈，并形成1个氢键。6.体内肽链合成方向是从N端向C端，而在体外固相肽的化学法合成时，通常是从C端向N端合成。7.核磁共振可以研究溶液中的蛋白质三维结构，并能提供有关的动态信息。8.在水溶液中，蛋白质折叠形成疏水核心，会使水的熵增加。9.球蛋白的三维折叠多采取亲水侧基在外，疏水侧基藏于分子内部的结构模式。10.胶原蛋白的原胶原分子是3股右手螺旋扭曲成的左手螺旋。11.血红蛋白与氧的结合能力随pH降低而增高。12.胎儿血红蛋白与2，3-二磷酸甘油（2,3DP
9、G）的结合力较弱。13.测定别构酶的相对分子质量可以用SDS-PAGE。14.用凝胶过滤分离蛋白质，小分子蛋白由于所受的阻力小首先被洗脱出来。15.若蛋白质与阴离子交换剂结合较牢，可用增加NaCI浓度或降低pH的方法将其从层析柱洗脱出来。四、名词解释1.兼性离子（zwitterion）； 2.等电点（isoelectric point,pI）；3.构象(conformation）； 4.盐溶与盐析(salting in and salting out）；5.Edman 降解法； 6.超二级结构(super-secondary structure）；7.结构域（domain）； 8.蛋白质的三级
10、结构；9.Bohr 效应（Bohr effect）； 10.蛋白质的变性作用五、分析和计算题1.试述蛋白质二级结构的三种基本类型。2.在下述pH条件下，下列蛋白质在电场中向哪个方向移动？人血清蛋白（pI=4.64）：pH5.5，pH3.5；血红蛋白（pI=7.07）：pH7.07，pH9.0。3.简述蛋白质溶液的稳定因素以及实验室沉淀蛋白质的常用方法。4.已知牛血清白蛋白含色氨酸0.58%（按质量计），色氨酸相对分子质量为204。（1）计算牛血清白蛋白的最低相对分子质量（2）用凝胶过滤测得牛血清白蛋白相对分子质量大约为7万，问牛血清白蛋白分子中含几个色氨酸残基？5.简要叙述蛋白质形成寡聚体的生
11、物学意义。6.蛋白质变性后，其性质有哪些变化？ 7.在体外，用下列方法处理，对血红蛋白与氧的亲和力有何影响？（1）pH值从7.0增加到7.4；(2) CO2分压从1000 Pa增加到4 000 Pa；(3) O2分压从6000 Pa下降到2000 Pa； (4)2,3-二磷酸甘油酸的浓度从810-4mol/L下降到210-4mol/L；（5）22解聚成单个亚基。8.胎儿血红蛋白（Hb F）在相当于成年人血红蛋白（Hb A）链143残基位置含有Ser，而成年人链的这个位置是具阳离子的His残基。残基143面向亚基之间的中央空隙。（1）为什么2,3-二磷酸甘油酸（2,3-BPG）同脱氧Hb A的结
12、合比同脱氧Hb F更牢固？（2）Hb F对2,3-BPG低亲和力如何影响到Hb F对氧的亲和力？这种差别对于氧从母体血液向胎儿血液的运输有何意义。9.凝胶过滤和SDS-PAGE均是利用凝胶，按照分子大小分离蛋白质的，为什么凝胶过滤时，蛋白质分子越小，洗脱速度越慢，而在SDS-PAGE中，蛋白质分子越小，迁移速度越快？参考答案一、填空题1. 甲硫氨酸，丝氨酸，脯氨酸，甘氨酸2. 两性，负，正3. 7.594. 2.975. 苯丙氨酸，酪氨酸，色氨酸，色氨酸6. 16%，6.257. 肽，排列顺序8. 螺旋轴，3.6，0.54，0.15，1009. 氢键10. 长，大11. 血红素，增加，正协同效
13、应，下降，Bohr效应12. 水化层，双电层13. 疏水，亲水14. 破坏，不变，下降，丧失15. 赖氨酸，精氨酸二、选择题1. (D) 2.（A） 3.（C） 4.（D） 5. (D) 6.（C） 7.（D） 8.（D） 9.（C） 10.（D）11.（D） 12.（C） 13.（C） 14.（A） 15.（C）16.（A） 17.（C) 18.（D） 19.（B） 20. (D)三、判断题1.对。2.错。不能用酸碱滴定法直接进行滴定，只能用甲醛滴定法滴定氨基。3.错。当溶液的pH小于某蛋白质的pI时，该蛋白质带净正电荷，向阴极移动。4.错。溴化氰断裂甲硫氨酸的羧基参与形成的肽键。5.错。-
14、螺旋每3.6个氨基酸绕一圈，但螺旋一端的4个-NH和另一端的4个-C=0不参与形成氢键。6.对。 7.对。 8.对。9.对。10.错。原胶原分子是由3股左手螺旋扭曲成的右手螺旋。 11.错。随着pH的降低，血红蛋白与氧的结合力降低，这有利于血红蛋白在CO2含量较高的组织释放氧。12.对。13.错。别构酶一般由多个亚基构成，SDS-PAGE只能测定亚基的相对分子质量。14.错。用凝胶过滤法分离蛋白质时，相对分子质量大的蛋白质先流出层析柱。 15.对。四、名词解释1氨基酸、蛋白质等分子在某一pH水溶液中，酸性基团脱去质子带负电荷，碱性基团结合质子带正电荷，这种既带负电荷，又带正电荷的离子称兼性离子
15、或两性离子。2.调节两性离子溶液的pH，使该两性离子所带的净电荷为零，在电场中既不向正极、也不向负极移动，此时，溶液的pH称该两性离子的等电点（pI）。不同结构的两性离子有不同的pI值。3.具有相同构型的分子在空间里可能的多种形态，构象形态间的改变不涉及共价键的破裂。一个给定的蛋白质理论上可采取多种构象，但在生理条件下，只有一种或很少几种在能量上是有利的。4.低浓度的中性盐可以增加蛋白质的溶解度，这种现象称为盐溶。盐溶作用是由于蛋白质分子吸附某种盐类离子后，带电层使蛋白质分子彼此排斥，因而溶解度增高。当离子强度增加到足够高时，蛋白质从溶液中沉淀出来，这种现象称为盐析。盐析作用是由于大量中性盐的
16、加入使水的活度降低，原来溶液中的大部分甚至全部的自由水转变为盐离子的结合水。5.为肽链氨基酸测序的方法。苯异硫氰酸酯与肽段N-末端的游离-氨基作用，生成苯异硫氰酸酯衍生物，并从肽链上脱落下来，用层析的方法可鉴定为何种氨基酸衍生物。残留的肽链可继续与苯异硫氰酸酯作用，逐个鉴定出氨基酸的排列顺序。6.在蛋白质中，若干相邻的二级结构单元组合在一起，形成有规则、在空间上能辩认的二级结构组合体，充当三级结构的构件，称为超二级结构。常见的超二级结构有，-发夹，-曲折等。7.在二级或超二级结构基础上进一步盘旋、折叠，形成较为紧密的球状实体，称为结构域。8.在二级结构、超二级结构或结构域（对分子较大，由多个结
17、构域的蛋白质而言）基础上形成的完整空间结构，一个三级结构单位通常由一条肽链组成，但也有一些三级结构单位是由二硫键连接的多条肽链组成的，如胰岛素就是由两条肽链折叠成的1个三级结构单位。9.H+和CO2浓度增加，会降低氧和血红蛋白的亲和力，使得血红蛋白的氧合曲线向右移动，提高了O2从血红蛋白的释放量，这种作用称作Bohy效应。10.天然蛋白质因受物理或化学因素影响，其空间结构发生变化，致使蛋白质的理化性质和生物学性质都有所改变，但并不导致蛋白质一级结构的破坏，这种现象称变性作用。五、分析、计算题1.（1）-螺旋：多肽主链围绕一中心轴形成的右手螺旋， 3.6个氨基酸残基上升一圈，螺距0.54nm；一
18、个氨基酸残基的羰基氧与其后第四个氨基酸残基的亚氨基形成氢键，氢键与螺旋轴基本平行，氢键封闭的原子为13个，称作3.613。（2）-折叠：两条或以上几乎完全伸展的多肽链平行或反平行排列而成，各肽键平面之间折叠成锯齿状，侧链R基团交错位于锯齿状结构的上下方；靠肽键羰基氧和亚氨基氢形成氢键维系。(3）-转角：在球状蛋白质分子中，多肽主链常常会出现180回折，回折部分成为转角，在转角中第一个残基的C=O与第四个残基的N-H形成氢键，使转角成为比较稳定的结构。2.人血清蛋白的pI=4.64，在pH5.5的电场中带负电荷，向阳极移动；在pH3.5的电场中带正电荷，向负极移动。血红蛋白的pI=7.07，在p
19、H7.07不带净电荷，在电场中不移动；在pH9.0时带负电荷，向阳极移动。3.维持蛋白质溶液稳定的因素有两个：（1）水化膜：蛋白质颗粒表面的亲水基团吸引水分子，使表面形成水化膜，从而阻断蛋白质颗粒的聚集，防止蛋白质沉淀。（2）同种电荷：在pHpI的溶液中，蛋白质带有同种电荷。同种电荷相互排斥，阻止蛋白质颗粒相互聚集而发生沉淀。常用的沉淀蛋白质方法有：（1）盐析法：在蛋白质溶液中加入大量的硫酸铵、硫酸钠或氯化钠等中性盐，去除蛋白质的水化膜，中和蛋白质表面的电荷，使蛋白质颗粒相互聚集，发生沉淀。用不同浓度的盐可以沉淀不同的蛋白质，称分段盐析。（2）有机溶剂沉淀法：使用丙酮沉淀时，必须在04低温下进
20、行，丙酮用量一般10倍于蛋白质溶液的体积，蛋白质被丙酮沉淀时，应立即分离，否则蛋白质会变性。除了丙酮以外，也可用乙醇沉淀。此外，还可用重金属盐、某些有机酸等方法将样品中的蛋白质变性沉淀。4.（1）设最低相对分子质量为X，根据题意可列出： 或 （2）用凝胶过滤测得牛血清白蛋白相对分子质量大约为SDS-PAGE的两倍，说明该蛋白质含有2个色氨酸残基，若色氨酸百分含量的测定值准确，则牛血清蛋白较准确的相对分子质量为3517270344 5.（1）能提高蛋白质的稳定性。亚基结合可以减少蛋白质的表面积/体积比，使蛋白质的稳定性增高。（2）提高遗传物质的经济性和有效性。编码一个能装配成同聚体的单位所需的基
21、因长度比编码一个与同聚体相同相对分子质量的超长肽链所需的基因长度要小得多。（3）形成功能部位。不少寡聚蛋白的单体相互聚集可以形成新的功能部位。（4）形成协同效应。寡聚蛋白与配体相互作用时，有可能形成类似血红蛋白或别构酶那样的协同效应，使其功能更加完善。有些寡聚蛋白的不同亚基可以执行不同的功能，如一些酶的亚基可分为催化亚基和调节亚基。6.蛋白质变性后，氢键等次级键被破坏，蛋白质分子就从原来有秩序的紧密结构变为无秩序的松散伸展状结构。即二、三级以上的高级结构发生改变或破坏，但一级结构没有破坏。变性后，蛋白质的溶解度降低，是由于高级结构受到破坏，使分子表面结构发生变化，亲水基团相对减少，容易引起分子
22、间相互碰撞发生聚集沉淀，蛋白质的生物学功能丧失，由于一些化学键的外露，使蛋白质的分解更加容易。7.（1）pH值增加，Hb与氧的亲和力增加。（2）CO2分压增加，Hb与氧的亲和力下降。（3）O2分压下降，Hb与氧的亲和力下降。（4）2,3-BPG浓度下降，Hb与氧的亲和力增加。（5）22解聚成单个亚基，Hb与氧的亲和力增加。8.（1）由于2,3-BPG是与脱氧Hb A中心空隙带正电荷的侧链结合，而脱氧Hb F缺少带正电荷的侧链（链143位的His残基），因此2,3-BPG同脱氧Hb A的结合比同脱氧Hb F的结合更紧。（2）2,3-BPG稳定血红蛋白的脱氧形式，降低血红蛋白的氧饱和度。由于Hb
23、F与 2,3-BPG亲和力比Hb A低，HbF受血液中2,3-BPG影响小，因此Hb F在任何氧分压下对氧的亲和力都比Hb A大。亲和力的这种差别允许氧从母亲血向胎儿有效转移。9.凝胶过滤时，凝胶颗粒排阻Mr较大的蛋白质，仅允许Mr较小的蛋白质进入颗粒内部，所以Mr较大的蛋白质只能在凝胶颗粒之间的空隙中通过，可以先从层析柱中洗脱出来，而Mr小的蛋白质后从层析柱中洗脱出来。SDS- PAGE分离蛋白质时，所有的蛋白质均要从凝胶的网孔中穿过，蛋白质的相对分子质量越小，受到的阻力也越小，移动速度就越快。 第2部分 酶和辅酶一、填空题1.酶催化反应的实质在于降低反应的_，使底物分子在较低的能量状态下达
24、到_态，从而使反应速度_。2.对于符合米氏方程的酶，v-S曲线的双倒数作图得到的直线，在横轴的截距为_，纵轴上的截距为_。3.若同一种酶有n个底物就有_个Km值，其中Km值最_的底物，一般为该酶的最适底物。4.当底物浓度等于0.25Km时，反应速率与最大反应速率的比值是_。5.别构酶除活性中心外还有_。当以v对S作图时，它表现出_型曲线，而不是典型的米氏酶所具有的_曲线。6.蛋白质磷酸化时，需要_酶，而蛋白质去磷酸化需要_酶。7._抑制剂不改变酶促反应Vmax，_抑制剂不改变酶促反应Km。8.含有腺苷酸的辅酶主要有 、 和 。9.维生素A缺乏可引起 症；儿童缺乏维生素D引起 ；成人缺乏维生素D
25、引起 ；维生素C缺乏引起 ；维生素PP缺乏引起 ；脚气病是由于缺乏 引起的；口角炎是由于缺乏 引起的；维生素B12缺乏引起 ；叶酸缺乏引起 。10.维生素B1的活性形式是 ，维生素B2的活性形式是 和 。维生素PP可形成 和 两种辅酶。维生素B6是以 和 形式作为转氨酶的辅酶。叶酸的活性形式是 。生物素在体内是 的辅酶。泛酸的活性形式有 和 。二、选择题（在备选答案中选出1个正确答案）1.酶催化作用对能量的影响在于A增加产物能量水平 B降低活化能 C降低反应物能量水平 D降低反应的自由能2.米氏方程在推导过程中引入了哪项假设A. 酶浓度为底物浓度一半 B. 由于酶浓度很大，所以E基本不变C.
26、由于P0，所以不考虑反应E+PES的存在 D. 忽略反应ESE+S的存在3.酶原激活的实质是A. 激活剂与酶结合使酶激活 B. 酶蛋白的变构效应C. 酶原分子一级结构发生改变从而形成或暴露出酶的活性中心D. 酶原分子的空间构象发生了变化而一级结构不变4.乳酸脱氢酶是一个由两种不同的亚基组成的四聚体。假定这些亚基随机结合成四聚体，这种酶有多少种同工酶？ A. 六种 B. 三种 C. 四种 D. 五种5.同工酶的特点是A. 催化相同的反应，但分子结构和理化性质不同的一类酶B. 催化相同反应，分子组成相同，但辅酶不同的一类酶C. 催化同一底物起不同反应的酶的总称D. 催化作用，分子组成及理化性质相同
27、，但组织分布不同的酶6.酶的比活力是指A. 以某种酶的活力作为1来表示其他酶的相对活力 B. 每毫克蛋白的酶活力单位数C. 任何纯酶的活力与其粗酶的活力比 D. 一种酶与另一种酶的活力比7.下列哪一项叙述是正确的?A.所有的辅酶都是维生素 B.所有的水溶性维生素都可作为辅酶或辅酶的前体C.所有的辅酶都含有维生素 D.前列腺素是由脂溶性维生素衍生而来三、判断题1.当SKm时，v趋向于Vmax，此时只有通过增加E来增加v。2.酶的最适温度与酶的作用时间有关，作用时间愈长，则最适温度愈高。3.在酶的催化反应中，组氨酸残基的咪唑基既可以起碱化作用，也可以起酸化作用。4.别构酶的速度-底物关系曲线均呈S
28、形曲线。5.测定酶活力时，底物浓度不必大于酶浓度。6.酶的过渡态底物类似物与底物类似物相比较，是更有效的竞争性抑制剂。7.维生素对人体有益，所以摄入的越多越好。8.摄入的维生素C越多，在体内储存的维生素C就越多。 9.能催化蛋白质磷酸化反应的酶，称为磷酸化酶。四、名词解释1米氏常数； 2活性中心（active center）；3. 酶活力（enzyme activity）； 4别构酶（allosteric enzyme）；5. 酶原的激活； 6同工酶（isozyme）；7. 抗体酶（abzyme）； 8. 不可逆抑制作用（irreversible inhibition）；9. 可逆抑制作用；
29、10.竞争性抑制作用（competitive inhibition）；11. 反竞争性抑制作用； 12. 共价修饰调节（covalent modification regulation）五、分析和计算题1.何谓酶的专一性？酶的专一性有哪几类？如何解释酶作用的专一性？2.影响酶反应效率的因素有哪些?它们是如何起作用的?3.试述研究酶活性中心的方法。4.称取25mg蛋白酶配成25mL溶液，取2mL溶液测得含蛋白氮0.2mg，另取0.1mL溶液测酶活力，结果每小时可以水解酪蛋白产生1500g酪氨酸，假定1个酶活力单位定义为每分钟产生1g酪氨酸的酶量，请计算：（1）酶溶液的蛋白浓度及比活。（2）每克纯
30、酶制剂的总蛋白含量及总活力。5.哪些因素影响酶的活性？酶制剂宜如何保存？参考答案一、填空题1. 活化能， 活化， 加快2. -1/Km， 1/Vmax3. n， 小4. 1:55.别构中心， S， 直角双6. 蛋白激； 蛋白磷酸酯7. 竞争性， 非竞争性8. FAD， NAD+， NADP+9. 夜盲，佝偻病，软骨病，坏血病，糙皮病，维生素B1，维生素B2，恶性贫血，巨幼红细胞性贫血10. TPP，FMN，FAD，NAD+，NADP+，磷酸吡哆醛，磷酸吡哆胺，四氢叶酸，羧化酶的辅酶，ACP，CoA二、选择题1.（B） 2.（C） 3.（C） 4.（D）5.（A） 6.（B） 7.（B）三、判断
31、题1.对。2.错。酶最适温度与酶的作用时间有关，作用时间越长，则最适温度低。3.对。4.错。别构酶的速度-底物关系曲线不一定均呈S形曲线，负协同效应为平坦的双曲线形式。5.错。底物应该过量才能更准确的测定酶的活力。6.对。7.错。8.错。9.错。能催化蛋白质磷酸化反应的酶称为蛋白激酶。四、名词解释1.米氏常数（Km值）：是米氏酶的一个重要参数。m值是酶反应速率（v）达到最大反应速率（Vmax）一半时底物的浓度。米氏常数是酶的特征常数，只与酶的性质有关，不受底物浓度和酶浓度的影响。2.活性中心：酶分子中由若干个在一级结构上相距很远，但在空间上彼此靠近的氨基酸残基集中在一起形成的区域，可直接与底物
32、结合，并催化底物发生反应。对于结合酶来说，辅酶或辅基往往是活性中心的组成成分。3.酶活力：酶催化一定化学反应的能力，可用在一定条件下它所催化的某一化学反应的速率表示。单位：浓度/单位时间。4.别构酶：或称变别构酶，一般具有多个亚基，除具有活性中心外，还具有可结合调节物的别构中心，活性中心负责酶对底物的结合与催化，别构中心负责调节酶反应速率。5.酶原的激活：有些酶在细胞内合成和初分泌时，并不表现出催化活性，这种无活性的酶的前身物称为酶原。在一定条件下，酶原分子的结构发生改变，无活性的酶原转化成有活性的酶称为酶原的激活。6.同工酶：催化同一种化学反应，但其酶蛋白本身的分子结构、组成及理化性质却不同
33、的一组酶。7.抗体酶：也叫催化性抗体，是抗体的高度选择性和酶的催化能力相结合的产物，本质上是一类具有催化能力的免疫球蛋白，在其可变区赋予了酶的属性。8.不可逆抑制作用：某些抑制剂以共价键与酶蛋白中的必需基团结合从而使酶失活，且不能用透析、超滤等物理方法除去，由这种不可逆抑制剂引起的抑制作用称不可逆抑制作用。9.可逆抑制作用：抑制剂以非共价键与酶蛋白中的必需基团结合，可用透析等物理方法除去抑制剂而使酶重新恢复活性。10.竞争性抑制作用：竞争性抑制剂具有与底物相似的结构，通常与正常的底物或配体竞争酶的结合部位。这种抑制使Km增大，而Vmax不变。通过增加底物浓度可逆转竞争性抑制。11.反竞争性抑制
34、作用：抑制剂与酶-底物复合物结合，而不与游离酶结合的一种抑制作用。这种抑制作用使得Vmax和Km都变小，但Vmax/Km比值不变。12.共价修饰调节：可在其他酶的作用下对某种酶的结构通过共价修饰（如磷酸化、腺苷酰化），使该酶在活性形式与非活性形式之间相互转变，这种调节称为共价修饰调节。五、分析和计算题1.酶的专一性是指酶选择性地催化一种或一类物质发生某种类型的化学反应。根据对底物的选择性，酶的专一性可以分为结构专一性和立体异构专一性。结构专一性指酶对底物的化学键或功能团等有选择，例如肽酶只能水解肽键， 酯酶只作用酯键。立体异构专一性指酶对底物的构型有选择。例如只作用于L构型或只作用于顺式构型。
35、根据过渡态互补假说，酶的专一性实质上是酶与底物分子在结构上互补。2. 影响酶催化效率的有关因素包括：（1）邻近效应与定向效应。邻近效应是指酶与底物结合后，使底物和底物之间、酶的催化基团与底物之间相互靠近而使有效浓度得以升高，从而使反应速率加快的一种效应；定向效应是指反应物的反应基团之间、酶的催化基团与底物的反应基团之间的正确取向产生的效应。（2）底物形变和诱导契合。当酶遇到底物时，可以使底物分子内敏感键中的某些基团的电子云密度增高或降低，产生“电子张力”，使底物分子发生形变比较接近它的过渡态，降低了反应活化能，使反应易于发生。（3）酸碱催化。酸碱催化是通过瞬时向反应物提供质子或从反应物接受质子
36、以稳定过渡态，加速反应的一类催化机制。（4）共价催化。在催化时，亲核催化剂或亲电子催化剂能分别放出电子或接受电子并作用于底物的缺电子中心或负电中心，迅速形成不稳定的共价中间复合物，降低反应活化能，使反应加速。（5）微环境的作用。酶的活性部位形成的微环境通常是疏水的，由于介电常数较低，可以加强有关基团之间的静电相互作用，加快酶促反应的速率。在同一个酶促反应中，通常会有上述的3个左右的因素同时起作用，称作多元催化。3.酶的活力中心通常包括两部分：与底物结合的部位称为结合中心，决定酶的专一性；促进底物发生化学反应的部位称为催化中心，它决定酶所催化反应的性质以及催化的效率。有些酶的结合中心与催化中心是
37、同一部分。对ES和EI的X-射线晶体分析、NMR分析、对特定基团的化学修饰、使用特异性的抑制剂和对酶作用的动力学研究等方法可用于研究酶的活性中心。4.（1）蛋白浓度=0.26.25mg/2mL=0.625mg/mL；（2）比活力=（1500/601ml/0.1mL）0.625mg/mL=400U/mg；（3）总蛋白=0.625mg/mL1000mL=625mg；（4）总活力=625mg400U/mg=2.5105U。5.底物浓度、酶含量、温度、pH、产物等均影响酶的活性，激活剂或抑制剂也会强烈影响酶的活性。酶在细胞或组织中是受到细胞调控的。细胞对酶活性的控制主要是通过代谢反馈、可逆的共价修饰、
38、细胞区室化和酶原激活等控制。制备酶制剂时，要尽量避免高温、极端pH、抑制剂等的影响，酶制剂应尽可能制成固体，并在低温下保存。无法制成固体的酶，可在液态低温保存，但要注意某些液态酶在冰冻时会失去活性。第3部分 核酸一、填空题1核酸完全的水解产物是_、_和含氮碱。其中含氮碱又可分为_碱和_碱。2mRNA在细胞内的种类多，但只占RNA总量的_，它是以_为模板合成的，又是_合成的模板。3嘌呤环上的第_位氮原子与戊糖的第_位碳原子相连形成_键，通过这种键相连而成的化合物叫_。4体内两种主要的环核苷酸是_和_。5写出下列核苷酸符号的中文名称：ATP_，dCDP_。6核酸的基本结构单位是_。7tRNA的三叶
39、草型结构中有_环，_环，_环及_环，还有_。8tRNA的三叶草型结构中，其中氨基酸臂的功能是_，反密码环的功能是_。9真核细胞的mRNA帽子由_组成，其尾部由_组成，他们的功能分别是_，_。10DNA热变性之后，如果将溶液迅速冷却，则DNA保持_状态；若使溶液缓慢冷却，则DNA重新形成_。11脱氧核糖核酸在糖环_位置不带羟基。12核酸分子中的糖苷键均为_型糖苷键。糖环与碱基之间的连键为_键。核苷与核苷之间通过_键连接成多聚体。13核酸的特征元素_。14碱基与戊糖间是C-C连接的是_核苷。15tRNA的二级结构呈_形，三级结构呈_形，其3末端有一共同碱基序列_其功能是_。16常见的环化核苷酸有_
40、和_。其作用是_，他们核糖上的_位与_位磷酸-OH环化。17给动物食用3H标记的_，可使DNA带有放射性，而RNA不带放射性。18B型DNA双螺旋的螺距为_，每匝螺旋有_对碱基，每对碱基的转角是_。19一般来说DNA中G-C含量高时，比重_，Tm（熔解温度）_，分子比较稳定。20在_条件下，互补的单股核苷酸序列将缔结成双链分子。21_RNA指导蛋白质合成，_RNA用作蛋白质合成中活化氨基酸的载体。22维持DNA双螺旋结构稳定的主要因素是_，其次，大量存在于DNA分子中的弱作用力如_，_和_也起一定作用。23DNA变性后，紫外吸收_，粘度下降、浮力密度升高，生物活性将_。24DNA样品的均一性愈高，其熔解过程的温度范围愈_。25变性DNA 的复性与许多因素有关，包括样品的均一度，_，_，温度的影响，溶液离子强度等。二、选择题1自然界游离核苷酸中，磷酸最常见是位于：A戊糖的C-5上 B戊糖的C-2上 C戊糖的C-3上D戊糖的C-2和C-3上2可用于测量生物样品中核酸含量的元素是：A碳 B氢 C氧 D磷 3下列哪种碱基只存在于RNA而不存在于DNA：A尿嘧啶 B腺嘌呤 C胞嘧啶 D胸腺嘧啶4核酸中核苷酸之间的连接方式是：A2