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1、食食品品毒毒理理学学Food Toxicology程程祥祥第六章第六章 外源化学物的毒作用机制外源化学物的毒作用机制二二.增毒及诱导终毒物形成的机制增毒及诱导终毒物形成的机制一一.一般毒作用机制一般毒作用机制三三.终毒物与靶分子结合的机制终毒物与靶分子结合的机制四四.诱发细胞功能障碍诱发细胞功能障碍一般毒作用机制一般毒作用机制毒作用机制的探讨内容：毒物如何进入机体？怎样与靶分子相互作用？怎样表现其有害作用？机体对损害作用的反应等。毒作用机制的探讨是评价化学毒物潜在危害的基础。一、干脆损伤一、干脆损伤毒作用毒作用是指化学物质进入机体经过生物转运和生物转化，化学物质本身或其代谢产物与生物大分子或者
2、靶部位相互作用，产生不良或有害的生物学效应，超过机体自身的解毒、修复功能。l化学物质对机体的损害作用主要取决于化学物质与机体的接触途径、与靶分子的相互作用和对机体损害作用的反应。l某些外源性物质，如强碱、强酸、尼古丁、重金属离子、氧化乙烯、一氧化碳等，它们能干脆发回毒作用，叫做干脆毒物。某些毒物质与机体接触或者进入机体后，干脆与机体的重要部位接触，产生毒性作用。二、化学物与受体的相互作用二、化学物与受体的相互作用1.化学物质对生物膜的损害化学物质对生物膜的损害细胞表面及各种细胞器的表面都覆盖着特殊的膜状结构，称细胞表面及各种细胞器的表面都覆盖着特殊的膜状结构，称为生物膜。如质膜、细胞膜、核膜、
3、内质网膜及线粒体膜等。为生物膜。如质膜、细胞膜、核膜、内质网膜及线粒体膜等。化学毒物在机体内的生物转运和生物转化过程均与生物膜有化学毒物在机体内的生物转运和生物转化过程均与生物膜有关，而生物膜的正常结构对维持细胞正常生理功能和信息传关，而生物膜的正常结构对维持细胞正常生理功能和信息传递又至关重要。递又至关重要。生物膜的化学组成生物膜的化学组成膜脂（膜脂（磷脂、少量的糖脂和胆固醇磷脂、少量的糖脂和胆固醇）蛋白质蛋白质糖、金属离子、水糖、金属离子、水二、化学物与受体的相互作用二、化学物与受体的相互作用（1 1）.对膜通透性的影响对膜通透性的影响 生物膜的通透性指生物膜与四周环境极性物质交换实力。生
4、物膜的通透性指生物膜与四周环境极性物质交换实力。膜通透性有选择性，不同物质在膜上有不同的通透率。膜通透性有选择性，不同物质在膜上有不同的通透率。生物膜是有高度选择性的通透屏障，并造成某些物质的细生物膜是有高度选择性的通透屏障，并造成某些物质的细胞内外浓度差；胞内外浓度差；可保持细胞内可保持细胞内pHpH和离子组成的相对稳定，并可以进行摄取和离子组成的相对稳定，并可以进行摄取和浓缩养分物，解除废物，产生神经、肌肉兴奋所必需的离和浓缩养分物，解除废物，产生神经、肌肉兴奋所必需的离子强度等重要生理功能。子强度等重要生理功能。二、化学物与受体的相互作用二、化学物与受体的相互作用l可利用生物膜的选择通透
5、性，探讨化学毒物对生物膜的影响，以通透性作为细胞毒性作用的视察指标。例如，细胞内重要离子，如K+浓度可作为评价通透性及膜完整性的指标。用胞内某些酶如乳酸脱氢酶、酸性磷酸酶的漏出，作为膜通透性损伤的指标。l膜的选择通透性与细胞的功能有亲密的联系。很多可以变更细胞膜或细胞器膜通透性的物质往往具有确定的毒性。l农药DDT，可作用于神经轴索膜，变更Na+、K+通透性；二、化学物与受体的相互作用二、化学物与受体的相互作用l在离体的神经纤维上，可视察到DDT使其动作电位持续时间延长和重复；在整体动物，则可视察到动物兴奋性增高、震颤和痉挛。因此，DDT中毒的症状与神经细胞膜离子通透性变更有关。l影响膜通透性
6、的其他因素：l脂水安排系数是膜通透性的确定因素。l通过调整膜上原有通透途径而变更通透性。如汞、铅等重金属可抑制肾脏有机酸转运系统。l通过在原来膜上建立新的通透途径而变更通透性。二、化学物与受体的相互作用二、化学物与受体的相互作用（2 2）.对膜流淌性的影响对膜流淌性的影响 “流淌性流淌性”是生物膜的基本特征之一。其定义为膜成是生物膜的基本特征之一。其定义为膜成分的很多不同类型的运动，包括：脂质分子的旋转，沿分的很多不同类型的运动，包括：脂质分子的旋转，沿长轴的伸缩和振荡，侧向扩散运动及翻转运动；蛋白质长轴的伸缩和振荡，侧向扩散运动及翻转运动；蛋白质分子侧向扩散和旋转运动。还应包括膜整体结构的流
7、淌分子侧向扩散和旋转运动。还应包括膜整体结构的流淌性。膜流淌性具有重要的生理意义，例如，物质运输、性。膜流淌性具有重要的生理意义，例如，物质运输、细胞融合、细胞识别，细胞表面受体功能调整等均与膜细胞融合、细胞识别，细胞表面受体功能调整等均与膜流淌性有关。细胞可以通过代谢等方式调整限制膜流淌流淌性有关。细胞可以通过代谢等方式调整限制膜流淌性，使其保持相对稳定的水平。性，使其保持相对稳定的水平。二、化学物与受体的相互作用二、化学物与受体的相互作用侧向运动侧向运动分子的摇摆分子的摇摆旋转运动旋转运动翻翻转转运运动动侧向运动侧向运动旋转运动旋转运动二、化学物与受体的相互作用二、化学物与受体的相互作用相
8、变温度相变温度Tc脂脂质质凝固态凝固态液晶态液晶态二、化学物与受体的相互作用二、化学物与受体的相互作用l现已发觉不少化学毒物可以影响膜脂流淌性。溴氰菊酯对膜流淌性影响探讨发觉：溴氰菊酯可使人工膜的脂质流淌性上升。而用突触体膜，其易与脂质双层分子极性头部和膜蛋白分子极性基团相互作用，增加脂质双层极性基团活动程度，可能减弱了膜脂和膜蛋白相互作用，而导致膜脂流淌性降低。人工膜与生物膜流淌性表现有确定差异，所以体外探讨结果的外推应特别慎重。l有机化合物、无机化合物或重金属对膜流淌性均可产生影响，虽然影响剂量各有不同，有些至今尚不清晰，但是均可通过对膜脂流淌性的影响分析其对膜的毒性作用。二、化学物与受体
9、的相互作用二、化学物与受体的相互作用（3 3）.对膜表面电荷的影响对膜表面电荷的影响 膜表面糖脂、糖蛋白形成膜表面极性基团，组成表面膜表面糖脂、糖蛋白形成膜表面极性基团，组成表面电荷。细胞膜表面电荷的性质和密度可以反映细胞表面的电荷。细胞膜表面电荷的性质和密度可以反映细胞表面的结构和功能。因此，可通过测定细胞膜表面电荷来了解化结构和功能。因此，可通过测定细胞膜表面电荷来了解化学毒物与膜作用的途径和方式。学毒物与膜作用的途径和方式。SiO2SiO2在膜表面形成硅醇基，与膜上含胆碱基的磷脂结合，在膜表面形成硅醇基，与膜上含胆碱基的磷脂结合，正电荷削减。同时，可明显降低细胞膜水化度。表现为细正电荷削
10、减。同时，可明显降低细胞膜水化度。表现为细胞电泳速度明显加快，胞电泳速度明显加快，zetazeta电位增加。这就可说明电位增加。这就可说明SiO2SiO2致致膜脂流淌性增加，以及膜通透性增加的缘由。二价金属离膜脂流淌性增加，以及膜通透性增加的缘由。二价金属离子在细胞四周浓度变更可以影响膜表面电荷密度，使子在细胞四周浓度变更可以影响膜表面电荷密度，使zetazeta电位削减，细胞电泳迁移率渐渐减慢。还可表现为膜脂流电位削减，细胞电泳迁移率渐渐减慢。还可表现为膜脂流淌性的变更。淌性的变更。二、化学物与受体的相互作用二、化学物与受体的相互作用2.2.化学物质对生物膜的组成成分的影响化学物质对生物膜的
11、组成成分的影响(1).(1).对膜蛋白质的影响对膜蛋白质的影响 膜蛋白依其在膜结构的位置可分为两类：一是在膜外侧，膜蛋白依其在膜结构的位置可分为两类：一是在膜外侧，其功能是作为特殊的受体位点或作为细胞的标记。例如，人其功能是作为特殊的受体位点或作为细胞的标记。例如，人类白细胞上组织相容性抗原类白细胞上组织相容性抗原(HLA)(HLA)，B B淋巴细胞表而的免疫球淋巴细胞表而的免疫球蛋白受体。二是在胞内，它又可分为细胞色素蛋白受体。二是在胞内，它又可分为细胞色素b5b5和跨膜大分和跨膜大分子，如子，如Na+Na+，K+-ATPaseK+-ATPase。膜蛋白按其功能又可分为：受体蛋。膜蛋白按其功
12、能又可分为：受体蛋白、载体蛋白和酶蛋白。目前已测出质膜上有白、载体蛋白和酶蛋白。目前已测出质膜上有3030多种酶。多种酶。二、化学物与受体的相互作用二、化学物与受体的相互作用l各种化学毒物作用的膜结合酶并不相同，且作用机制也不尽相同。农药DDT作用细胞膜上的Na+，K+-ATPase，是通过与膜脂结合，使膜流淌性增高，故影响Na+，K+-ATPase，表现为神经细胞膜Na+，K+离子通透性变更。有机磷化合物对红细胞膜乙酰胆碱酯酶(AchE)的抑制作用，是干脆作用于酶，通过有机磷分子中活化的磷原子与乙酰胆碱催化活性中心丝氨酸分子的-OH发生不行逆的结合，从而抑制AchE的催化活性。对膜结构破坏，
13、使膜结合酶变更，如Cd2+对肾脏损伤，表现为丙氨酸氨肽酶活力下降，而碱性磷酸酶和-谷氨酰转移酶活性明显上升，Hg也有类似的作用，但膜结合酶变更不一样。化学毒物对膜结合酶作用，有的表现为活力下降；有的表现为活力增加；不能单独以活力变更来推断其作用。二、化学物与受体的相互作用二、化学物与受体的相互作用(2).(2).对膜脂质的影响对膜脂质的影响 膜脂质由磷脂与胆固醇及其他脂类组成。磷脂等组成双膜脂质由磷脂与胆固醇及其他脂类组成。磷脂等组成双层的脂质。其极性一端位于膜的内外两个表面，非极性的一层的脂质。其极性一端位于膜的内外两个表面，非极性的一端位于膜的内部，构成与外界隔离及特定的内环境。胆固醇端位
14、于膜的内部，构成与外界隔离及特定的内环境。胆固醇与磷脂相结合，调整磷脂分子脂肪链的流淌性。由于不同的与磷脂相结合，调整磷脂分子脂肪链的流淌性。由于不同的细胞及细胞器的功能不同，其所含磷脂种类与比例也不尽相细胞及细胞器的功能不同，其所含磷脂种类与比例也不尽相同。化学毒物对膜脂质影响的可能机制有：同。化学毒物对膜脂质影响的可能机制有：膜脂质组成变膜脂质组成变更，主要因为影响脂质代谢合成的过程。例如，四氯化碳可更，主要因为影响脂质代谢合成的过程。例如，四氯化碳可对肝细胞膜作用，使磷脂总量削减对肝细胞膜作用，使磷脂总量削减6060，但胆固醇含量没有，但胆固醇含量没有变更。农药对硫磷，可影响大肠杆菌，主
15、要使磷脂总含量增变更。农药对硫磷，可影响大肠杆菌，主要使磷脂总含量增加，即菌膜的磷脂和膜蛋白的比值发生变更。加，即菌膜的磷脂和膜蛋白的比值发生变更。二、化学物与受体的相互作用二、化学物与受体的相互作用膜脂质与化学毒物结合，变更膜结构的性质。例如，二氧化硅(SiO2)与巨噬细胞一起培育，可见巨噬细胞负电性增加，经清洗变更不大。说明二氧化硅与膜固有结构的某基团发生结合。膜脂质过氧化，指由自由基作用于膜脂质，引起膜脂质中多不饱和脂肪酸的过氧化反应，即多不饱和脂肪酸的氧化破坏。(3).对膜糖的影响 膜糖不是单独存在，往往与脂质和蛋白质组成蛋白质组成糖脂和糖蛋白，蛋白质组成糖脂和糖蛋白，分布于质膜的外表
16、面。外来刺激如激素、生物因子或其他细胞等，通过跨膜蛋白传入细胞，引起细胞的应答反应，即细胞的识别过程。自由基概述自由基概述l概念：一般指含有一个或多个未配对电子的离子、原子或分子。l性质：具有顺磁性；化学反应性极强；生物半减期极短。l类型：活性氧族（reactiveoxygenspecies,ROS）：A.氧自由基：O2-、OH；LO、LOO；B.含氧的非自由基衍生物：单线态氧（1O2）、氢过氧化物、次氯酸、过氧化物、内源性脂质和外源化合物的环氧代谢产物。自由基概述自由基概述其他自由基：碳中心自由基（CCl3），硫中心自由基（烷硫自由基R-S），氮中心自由基（苯基二肼自由基C6H5N=N）；l
17、此外，过渡金属离子Cu+/Cu2+、Fe2+/Fe3+、Ti3+/Ti4+可作为自由基反应的催化剂，在自由基的损伤作用中起重要作用。自由基概述自由基概述自由基来源：外源化学物代谢产生；细胞正常生理过程产生。l机体抗氧化系统机体抗氧化系统：非酶类非酶类抗氧化系统抗氧化系统GSH、Vc、VE、VA、尿酸、尿酸、牛磺酸和次牛磺酸等；牛磺酸和次牛磺酸等；酶类酶类抗氧化系统抗氧化系统超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化酶、谷胱甘肽谷胱甘肽过氧化酶、谷胱甘肽还原酶等。还原酶等。对脂质过氧化作用及其损害对脂质过氧化作用及其损害l脂质过氧化损伤：脂质过氧化损伤：在O2存在下，
18、自由基或其活性衍生物引发脂质过氧化及其链式反应。l生物膜是生物体内最易发生脂质过氧化的场所。因为它具备脂质过氧化的两个必要条件必要条件：氧气和多不饱和脂肪酸（PUFA，polyunsaturatedfattyacid）。对脂质过氧化作用及其损害对脂质过氧化作用及其损害膜脂质的结构：膜脂质的结构：lX=-OH 磷脂酸磷脂酸lX=-OCH2CH2N+(CH3)3 磷脂酰胆碱磷脂酰胆碱 lX=-OCH2CH2NH3+磷脂酰乙醇胺磷脂酰乙醇胺lX=-OCH2CHCOO 磷脂酰丝氨酸磷脂酰丝氨酸H3N+R1、R2：脂酰基的烃基，：脂酰基的烃基，R1多为饱和烃基，多为饱和烃基，R2常为不饱和烃基。常为不饱
19、和烃基。H2CO C-R1R2-C-OCHH2CO P-X甘油磷脂通式甘油磷脂通式OOHOO脂质过氧化反应过程脂质过氧化反应过程膜脂质（膜脂质（LH）脂质自由基（脂质自由基（L）O2抽氢作用抽氢作用脂质过氧自由基（脂质过氧自由基（LOO）氢过氧化物氢过氧化物（LOOH）脂质氧自由基脂质氧自由基（LO）Fe3+Fe2+Fenton反应反应环过氧化物自由基环过氧化物自由基环环内内过氧化物自由基过氧化物自由基丙二醛（丙二醛（MDA）+短链的酮、羧酸或烃类短链的酮、羧酸或烃类HOH2O分子内双键加成分子内双键加成过氧化作用过氧化作用LHLLH+L链启动链启动链扩展链扩展脂质脂质（花生四烯酸）（花生四烯
20、酸）过氧化的总过程过氧化的总过程 LHLOOH链终止链终止LOOLO2，水解或热裂，水解或热裂 其他产物其他产物环化作用环化作用环内过氧自由基环内过氧自由基对脂质过氧化作用及其损害对脂质过氧化作用及其损害 脂质过氧化中间产物L、LOO、LO可作为引发剂通过抽氢使蛋白质变成自由基，后者可以引起链式反应，导致蛋白质聚合，使蛋白质的运动和功能受到限制。-CO-NH-C-CO-NH-CO-NH-C-C-NH-CO-NH-C-C-NH-CO-NH-C-CO-NH-R1R2R1R2自由基自由基蛋白蛋白A蛋白蛋白BHOOH交联物交联物对脂质过氧化作用及其损害对脂质过氧化作用及其损害终产物丙二醛（MDA）可与
21、蛋白质分子中的NH2作用导致多肽链的链内交联或链间交联。此外，醛类产物也能与蛋白质中Cys的-SH反应，使蛋白质失去活性。丙二醛与蛋白质分子的交联丙二醛与蛋白质分子的交联链链内内交联：交联：CH2C-H C-HOOH2NH2NPCH-NHCH=NPCH链链间间交联：交联：CH2C-H C-HOO2 P NH2CH NH P1CH=N P2CH丙二醛丙二醛 蛋白质蛋白质 交联产物交联产物 对脂质过氧化作用及其损害对脂质过氧化作用及其损害脂质的过氧化损伤小结：l干脆结果是使膜PUFA削减，膜脂流淌性降低和膜骨架损伤；l过氧化中间产物和终产物引起的膜蛋白共价交联与聚合，影响膜蛋白的构象及其运动性，必
22、定导致膜功能的异样。蛋白质的氧化损伤蛋白质的氧化损伤l对蛋白质的氧化损伤，主要是自由基对氨基酸的作用。l例如，全部氨基酸残基均可被OH损伤，其中以含硫氨基酸和芳香氨基酸最为敏感。1.含硫氨基酸的损伤含硫氨基酸的损伤OH可使甲硫氨酸氧化为甲硫氨酸亚砜；使半胱氨酸（Cys）氧化成Cy-S-S-Cy、Cy-SOH及Cy-SO2H。蛋白质的氧化损伤蛋白质的氧化损伤-NH3+CH3SCH2CH-COOCH2甲硫氨酸甲硫氨酸CH3SCH2CH-NH R2R1-C=OCH2含甲硫氨酸的蛋白质含甲硫氨酸的蛋白质OHO含甲硫氨酸含甲硫氨酸亚砜亚砜的蛋白质的蛋白质CH3SCH2CH-NH R2CH2R1-C=O聚
23、合聚合蛋白质的氧化损伤蛋白质的氧化损伤2.芳香族与杂环氨基酸残基的损伤芳香族与杂环氨基酸残基的损伤 如色氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸与组氨酸。经活性氧作用：Trp的氧化产物为2-、4-、5-、6-或7-羟基色氨酸，甲酰基犬尿氨酸，3-羟基犬尿氨酸或硝基色氨酸。Tyr转变为3-、4-二羟基苯丙氨酸，二酪氨酸交联产物或3-硝基酪氨酸。Phe转变为2-、3-或4-羧基苯丙氨酸，2-、3-二羟基苯丙氨酸。His转变为2-氧组氨酸。蛋白质的氧化损伤蛋白质的氧化损伤3.脂肪族氨基酸残基的损伤脂肪族氨基酸残基的损伤 如，Asp、Glu、Pro、Lys、Arg、Leu、Val与Thr。可能的损伤机制：在-C原子上除
24、去一个氢原子，形成C中心自由基；其上再加O2，生成过氧基衍生物；后者分解成NH3和-酮酸，或是NH3、CO2与醛类或羧酸，从而破坏相应氨基酸的结构。蛋白质的氧化损伤蛋白质的氧化损伤4.肽的折断肽的折断-NH CH CONH CH CONH CH-CR3R1R2-NH CH CONH C CONH CH-CR3R1R2OHH2OO2过氧化物过氧化物肽的折断肽的折断蛋白质的氧化损伤蛋白质的氧化损伤5.蛋白质蛋白质-蛋白质的交联蛋白质的交联蛋白质之间的交联将形成分子量更大的“分子”，进而限制蛋白质的运动性及其功能。DNA的氧化损害的氧化损害1 碱基的损伤碱基的损伤CCNHNCHHCNNNH2C腺嘌呤
25、腺嘌呤CCNHNCHH2N-CHNNOC鸟嘌呤鸟嘌呤DNA的氧化损害的氧化损害CCHCNNHC嘧啶嘧啶CCNHNC-OHH2N-CHNNOC8-羟基羟基鸟嘌呤鸟嘌呤DNA的氧化损害的氧化损害2.对脱氧核糖的损伤对脱氧核糖的损伤脱氧核糖中的每一个C原子和-OH上的氢都能与OH反应；在C位置上抽氢、加氧，而破坏戊糖的结构。3.对对DNA链的损伤链的损伤HCCHHOH2CCCOHOHHOHH脱氧脱氧核糖核糖DNA的氧化损害的氧化损害DNA链断裂的后果：链断裂的后果：可能会造成部分碱基的缺失；修复的DNA可能存在碱基的错误掺入和错误编码；也可能引起原癌基因的活化或抑癌基因的失活等，从而导致细胞的突变或
26、癌变。DNA的氧化损害的氧化损害4.对多糖的氧化损伤对多糖的氧化损伤ROS中活性很强的自由基如OH可无选择地攻击糖类，抽提氢，使其变为碳中心自由基，后者与O2结合成为过氧化物，然后裂解。三、与生物大分子的结合三、与生物大分子的结合概念：共价结合是指化学毒物或其活性代谢产物与机体内概念：共价结合是指化学毒物或其活性代谢产物与机体内一些重要的生物大分子如核酸、蛋白质等发生共价结合，一些重要的生物大分子如核酸、蛋白质等发生共价结合，从而变更这些生物大分子结构或功能的过程。从而变更这些生物大分子结构或功能的过程。方式：一般为亲电子剂与大分子的亲核基团作用，同过共方式：一般为亲电子剂与大分子的亲核基团作
27、用，同过共价键形成稳定的复合物价键形成稳定的复合物 加合物，使外源化学物或其代加合物，使外源化学物或其代谢产物进入大分子内而成为其中的组成成分，一般用生化谢产物进入大分子内而成为其中的组成成分，一般用生化或化学手段处理不能使其解离。或化学手段处理不能使其解离。特点：永久性、不行逆地变更内源性物质的结构。特点：永久性、不行逆地变更内源性物质的结构。与蛋白质的共价结合与蛋白质的共价结合l蛋白质分子中可与外源化学物共价结合的功能基团功能基团：氨基和羧基；Ser和Thr的羟基；Cys的巯基；Arg的胍基；His的咪唑基；Tyr的酚羟基；Trp的吲哚基。1.与白蛋白的共价结合与白蛋白的共价结合l白蛋白是
28、血液和组织间质中的主要蛋白质，也是血液中重要的运输载体。l血清白蛋白由肝细胞合成，而肝脏正是外源化学物活化代谢的主要场所，因而白蛋白更易受到由肝细胞活化形成的亲电子剂的攻击。与蛋白质的共价结合与蛋白质的共价结合2.与血红蛋白的共价结合与血红蛋白的共价结合l外源化学物进入血液后，先与红细胞膜结合，继而进入细胞与血红蛋白共价结合。l血红蛋白中参与结合的基团主要有氨基、巯基和芳香胺基团。l应用：血红蛋白加合物可用于人群接触外源化学物的监测，具有样品简洁获得，寿命长的优点，便利检测。与蛋白质的共价结合与蛋白质的共价结合3.与组织细胞蛋白质的共价结合与组织细胞蛋白质的共价结合l与膜蛋白或胞浆蛋白共价结合
29、，将影响到细胞的正常代谢或信号传递过程；l而与核蛋白的共价结合将对细胞生长、增殖和分化等的调控产生影响。核蛋白核蛋白（nuclear protein）是指在细胞质内合成，然）是指在细胞质内合成，然后运输到核内起作用的一类蛋白质。后运输到核内起作用的一类蛋白质。与核酸的共价结合与核酸的共价结合l毒物类型：亲电性代谢产物为主，亲核性代谢产物和自由毒物类型：亲电性代谢产物为主，亲核性代谢产物和自由基也可。基也可。l结合部位：碱基、核糖或脱氧核糖、磷酸均可，但以碱基结合部位：碱基、核糖或脱氧核糖、磷酸均可，但以碱基损伤的毒理学意义最大。损伤的毒理学意义最大。l结合后果：细胞突变、癌变及其他一些细胞损伤
30、。结合后果：细胞突变、癌变及其他一些细胞损伤。l应用：一般，应用：一般，DNA加合物一旦形成，致癌过程即已启动。加合物一旦形成，致癌过程即已启动。因此，因此，DNA加合物是一类重要的生物标记物，可用于化学加合物是一类重要的生物标记物，可用于化学物致癌的早期检测。物致癌的早期检测。与谷胱甘肽结合与谷胱甘肽结合l谷胱甘肽（GSH）主要存在于胞液中，可以维持细胞膜的稳定性，保持细胞骨架的有序性，参与蛋白质和DNA的合成等，对机体有爱护作用。l谷胱甘肽（GSH）分子中的半胱氨酸残基段的巯基，使GSH成为一种强亲核物质。能为亲电子物质或其他氧化代谢物供应巯基，形成无毒的结合物，阻断亲电物质与生物大分子共
31、价结合，防止活性化学物对细胞的损害。共价结合的毒理学意义共价结合的毒理学意义加合物是一类重要的生物标记物，可用于反映机体对毒物的接触、损伤程度；有助于毒性损伤的早期诊断和防治；可用于说明某些化学毒物的中毒作用机制。增毒及诱导终毒物形成的机制增毒及诱导终毒物形成的机制l终毒物是指外源化学物可干脆与内源性靶分子反应并造成机体损害时的化学形态。终毒物类型亲电子反应物自由基亲核反应物氧化还原反应物亲电物的形成亲电物的形成l亲电子物质亲电子物质是指带有正电荷而缺乏电子的分子，它可以与负电子的亲核物质共享电子对而发生反应。阴离子类亲电子物质是由细胞色素P-450或其他酶系将母体化学物氧化而成。阳离子类亲电
32、子物质是由不同性质的基团或元素结合物的裂解所产生的。自由基的形成自由基的形成l自由基自由基是在原子的外轨道上含有一个或多个不成对电子的分子或基团，可因接受或失去电子或由性质相同的元素形成的共价键均裂产生。超氧阴离子自由基的形成亲核化学物形成自由基电子向分子转移引起的还原性键均裂过程也可形成自由基。亲核物的形成亲核物的形成l亲核物质亲核物质是指具有亲核性的化学物质，它的形成在化学物的活化过程是相对较少的。苦杏仁苷丙烯晴5-羟基伯胺喹啉l亲核功能基团被结合会导致亲核物质的灭活。羟基化合物酚、对苯二酚巯基、氨基、肼活性氧化还原反应物的形成活性氧化还原反应物的形成l活性氧化还原反应物的生成有特殊的机制
33、。活性氧化还原反应物的生成有特殊的机制。硝酸盐硝酸盐亚硝酸酯或硝酸酯亚硝酸酯或硝酸酯谷胱甘肽谷胱甘肽亚硝酸盐亚硝酸盐高铁血红蛋白高铁血红蛋白肠道细菌还原肠道细菌还原终毒物与靶分子结合的机制终毒物与靶分子结合的机制促发毒性效应须要考虑以下方面：促发毒性效应须要考虑以下方面：1.靶分子的属性；2.终毒物与靶分子之间反应的类型；3.毒物对靶分子的效应；4.一些由于生物学微环境变更所引起的而不是干脆由终毒物与靶分子反应所启动的毒性。共价结合共价结合l化学毒物与细胞大分子的共价结合指化学毒物或其具有活性的代谢产物与机体的一些重要大分子发生共价结合，从而变更核酸、蛋白质、酶、膜脂质等生物大分子的化学结构与
34、其生物学功能。l加合物（adducts）指活性化学物与细胞大分子之间通过共价键形成的稳定复合物。为重要的生物标记物之一。共价加合物的形成常见于亲电毒物，如非离子和阳离子亲电物以及自由基阳离子。l如胺类、肼类与一种脱羧酶底物吡哆醛的共价反应。非共价结合非共价结合l非共价结合可能是通过非极性交互作用或氢键与离子键的形成，具有代表性的是毒物与膜受体、细胞内受体、离子通道以及某些酶等靶分子的交互作用。l如番木鳖碱结合于脊髓运动神经元上甘氨酸受体。酶促反应酶促反应l少数一些毒素通过酶促反应作用于特定靶蛋白上。l例如，蓖麻蛋白诱发核糖体的水解断裂，阻断蛋白质的合成。电子转移电子转移l化学物能将血红蛋白中的
35、Fe2氧化为Fe3，形成高铁血红蛋白血症。亚硝酸盐能氧化血红蛋白，而N-羟基芳胺、酚类化合物和肼类与氧合血红蛋白共氧化，形成高铁血红蛋白与过氧化氢。去氢反应去氢反应l自由基可快速从内源化合物去除氢原子，将这些化合物转变为自由基。从巯基化合物（R-SH）去除氢形成巯基自由基（R-S），这种自由基是其他巯基氧化产物如次磺酸和二硫化物的前身。从脂肪酸去除氢产生脂质自由基并启动脂质过氧化。诱发细胞功能障碍诱发细胞功能障碍细胞调整功能障碍细胞调整功能障碍基因表达功能障碍细胞瞬息活动的调整障碍细胞维持功能障碍细胞维持功能障碍细胞外部维持功能的损害细胞内部维持功能的损害基因表达功能障碍基因表达功能障碍l基因
36、表达调整障碍可发生于干脆负责转录的元件上，细胞内信号转导途径的成员以及细胞外信号分子的合成、贮存或释放的过程中。l转录调整障碍：遗传信息从DNA传递给mRNA主要受转录因子与基因的调整或启动区域间的相互作用所限制。外源化学物可与基因的启动子区域、转录因子或前起始复合物的其他元件交互作用。l信号转导调整障碍：生长因子、细胞因子、激素和神经递质等细胞外信号分子，通过细胞表面受体和细胞内信号通路激活转录因子，调整细胞周期进展。细胞瞬息活动的调整障碍细胞瞬息活动的调整障碍l特定细胞正常进行的限制是通过作用于膜受体的信号分子来实现的，这些受体通过调整Ca2+进入胞浆或刺激细胞内其次信使的酶促形成而传递信
37、号。l毒物可通过中断信号连接过程中的任何一个步骤而影响细胞的瞬息活动。l可兴奋细胞调整障碍l其他类型细胞调整障碍细胞内部维持功能的损害细胞内部维持功能的损害l外源化学物通常通过启动三中关键紊乱过程而引起细胞致死性损伤：ATP耗竭、Ca2+蓄积、活性氧簇（ROS）和活性氮簇（RNS）产生。lATP耗竭：干扰线粒体ATP合成的五类化学物l细胞内Ca2+的持续上升：细胞内的Ca2+水平是收到严格调控的，毒物通过促进Ca2+向细胞质内流或抑制Ca2+从细胞质外流而诱导胞浆Ca2+水平的上升。lROS与RNS的产生：细胞外部维持功能的损害细胞外部维持功能的损害l除了干扰细胞内部维持功能外，毒物也能损害其他细胞、组织或整个机体供应支持的细胞。l如肝细胞产生并释放多种蛋白质和养分素进入血液循环，从循环中清晰胆固醇和胆红素，将它们分别转化为胆汁酸和胆红素葡萄糖醛酸酯，这些过程的中断可能对机体和肝脏或同时对两者均有害。