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1、限时训练(十七)微生物的实验室培养和利用一、单项选择题(每小题4分，共24分。每小题给出的四个选项中，只有一个选项符合题目要求。多选、错选均不得分)1在培养基的配制过程中，具有如下步骤，其正确顺序为()溶化调pH加棉塞包扎培养基的分装称量ABC D答案：B解析：以上过程仅仅是培养基配制过程中的几个步骤，后面还有灭菌等操作。2下列操作与灭菌、消毒无关的是()A接种前用火焰烧灼接种环B接种前用酒精擦拭双手C培养基在50时搁置斜面D接种在酒精灯的火焰旁完成答案：C解析：A属于灭菌，B属于消毒，C属于培养基的分装，酒精灯的火焰灼烧空气，可以灭菌。3要将从土壤中提取的自生固氮菌与其他细菌分离开来，应将它
2、们接种在()A含五大类营养物质的培养基上B加入某种指示剂的鉴别培养基上C含蛋白胨等营养物质的培养基上D无氮的选择培养基上答案：D解析：要将从土壤中提取的自生固氮菌与其他细菌分离开来，必须接种在选择培养基上，B错；自生固氮菌可以利用空气中的N2，所以，培养基中即使没有氮源，它也可以生存，而A和C均包含了氮源，缺乏固氮能力的细菌也可生存，故不能达到分离目的。4在光亮处用同一种培养液分别培养单细胞绿藻和单细胞的酵母菌，其结果如下图所示(甲为绿藻，乙为酵母菌)。造成这种结果的原因是培养液中()A缺少无机盐 B氧气含量太高C缺少有机养分 D不含二氧化碳答案：C解析：本题考查单细胞绿藻和单细胞的酵母菌的营
3、养方式，前者可以进行光合作用，为自养型生物，而酵母菌是异养生物，必须依赖现存的有机物才能生存。5细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽灭菌、酒精、火焰灼烧的几种不同的处理，这些方法可依次用于杀灭哪些部位的杂菌()A接种环、手、培养基 B高压锅、手、接种环C培养基、手、接种环 D接种环、培养基、手答案：C解析：手部只能用酒精等消毒，培养基必须经高压蒸汽灭菌，接种环必须经火焰灼烧灭菌。6如下图是红色面包霉(一种真菌)通过一系列酶将原料合成它所需要的氨基酸。据图分析：以下叙述正确的是()A若基因A被破坏，则向培养基中加入鸟氨酸，面包霉仍能存活B若基因B被破坏，则向培养基中加入鸟氨酸，面包霉仍能存活C若基因
4、B不存在，则瓜氨酸仍可由鸟氨酸合成D基因C不能控制酶C的合成答案：A解析：由于题中的三种氨基酸都是红色面包霉必需的，缺少其中任何一种都不能存活。基因A被破坏，则不能将题中的原料合成鸟氨酸，基因B被破坏，则不能合成瓜氨酸，均可导致面包霉不能存活，依次类推。二、双项选择题(每小题6分，共12分。每小题给出的四个选项中，有两个选项符合题目要求。全选对得6分，只选1个且正确得3分，错选、不选得0分)7鉴别培养基是根据微生物的代谢特点在培养基中加入一些物质配制而成，这些物质可以是()A青霉素 B酚酞C尿素为唯一氮源 D伊红美蓝水溶液答案：BD解析：A和C分别在筛选真菌和分解尿素的微生物的时候起作用，可在
5、配制选择培养基时加入。8右图是微生物平板划线示意图。划线的顺序为12345。下列操作方法正确的是()A只在操作前对接种环进行灼烧灭菌B划线操作须在火焰旁边进行C在5区域中才可以得到所需菌落D在12345区域中划线前后都要对接种环灭菌答案：BD解析：A和C分别在筛选真菌和分解尿素的微生物的时候起作用，可在配制选择培养基时加入。三、非选择题：本大题共4小题。除说明外每空2分，共64分。9(22分)(2009宁夏卷，40)(1)在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑_、_和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、_、_等优点，因此常作为遗传学研究的实验材料。(2)在
6、微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养器皿进行_(消毒、灭菌)；操作者的双手需进行清洗和_；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能_。(3)若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的_。(4)通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的_。(5)培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_。(6)若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及培养物必须经过_处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。答案：(1)温度酸碱度
7、易培养生活周期短(2)灭菌消毒损伤DNA的结构(3)比例合适(4)鉴定(或分类)(5)将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生(6)灭菌解析：解答本题需要识记微生物的培养条件、代谢特点，实验室微生物培养规范和主要步骤。微生物的培养条件有适宜的营养物质(碳源、氮源、无机盐等)、温度、pH、渗透压(控制培养液的浓度)等。细菌具有个体微小、结构简单、生长周期短、繁殖快、代谢旺盛、变异类型简单(主要是基因突变)等特点。在微生物实验操作中，防止杂菌污染是贯穿实验整个过程中的内容，因此，对环境、生物材料、操作者双手等进行消毒，对培养基、接种环和培养仪器进行灭菌等是微生物实验
8、中的常见操作。紫外线灭菌的原理是紫外线的高能量使蛋白质和DNA等生物分子变性，即空间结构改变。稀释涂布平板法是细菌分离纯化的常用方法，合适的稀释倍数是实验的关键。微生物在固体培养基表面生长，可以形成肉眼可见的菌落，依据菌落大小、形态、色泽等可以对细菌进行鉴定或分类。10(22分)某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察与计数。请回答与此实验相关的问题：(1)培养基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了_和_。除此之外，培养基还必须含有基本成分是_和_。(2)对培养基进行灭菌，应该采用的方法是_。(3)为了尽快观察到细菌培养的实验结果，
9、应将接种了湖水样品的平板置于_中培养，培养的温度设定在37。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种_作为对照进行实验。(4)培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，这说明湖水样品中有_种细菌。一般说来，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越_。(5)如果提高培养基中NaCl的浓度，可以用于筛选耐_细菌，这种培养基被称为_。答案：(1)氮源(碳源不作要求)碳源无机盐水(2)高压蒸汽灭菌(3)恒温培养箱无菌水(4)多高(5)盐(或NaCl)选择培养基解析：微生物生长繁殖过程中需要氮源、碳源、水分、无机盐等营养物质，有些微生物还需要特殊营养物质；培养基的灭菌一般采用高压蒸汽灭
10、菌，该过程一般在高压蒸汽灭菌锅中进行；影响微生物生长繁殖的因素主要是营养和温度；为排除无关变量的影响，该实验要设立空白对照，可以用无菌水代替样品来进行对照；在培养基中加入食盐可以选择耐盐菌，如金黄色葡萄球菌等，这种培养基叫做选择培养基。11(12分)(2009上海卷)氯苯化合物是重要的有机化工原料，因其不易降解，会污染环境。某研究小组依照下图所示的实验方案，筛选出能高效降解氯苯的微生物SP1菌。培养基配方如表。表培养基的组成液体培养基蛋白胨牛肉膏氯苯氯化钠硝酸铵无机盐(无碳)蒸馏水号10g5g5mg5g1L号50mg5g3g适 量1L号2080mg5g3g适量1L(1)配制号固体培养基时，除添
11、加号液体培养基成分外，还应添加1%的_。(2)培养基配制时，灭菌与调pH的先后顺序是_。(3)从用途上来说，号培养基和号培养基分别属于_培养基和_培养基。在号培养基中，为SP1菌提供氮源的成分是_。(4)在营养缺乏或环境恶劣时，SP1的菌体变成一个圆形的休眠体，这种休眠体被称为_。答案：(1)琼脂(2)先调pH，后灭菌(3)基本(通用)选择硝酸铵(4)芽孢解析：固体培养基中除添加营养成分外，还需要加入一定量的凝固剂，如琼脂；细菌培养的基本过程：配制培养基(称量溶化调pH分装加棉塞包扎)灭菌搁置斜面接种培养(25下57d或37下24h)。根据培养基的用途可分为基本培养基、选择培养基和鉴别培养基等
12、，题中号培养基属于基本培养基，由于号培养基中的碳源仅是氯苯，因此，培养基属于选择培养基。号培养基中仅硝酸铵含有氮元素，因此，它是该培养基中的氮源。细菌的休眠体是芽孢。12(2010广州月考)(8分)在农业生产研究上，常常需要进行微生物的培养和计数。(1)如图是利用_法进行微生物接种。(2)分析下面培养基的配方：NaNO3、KH2PO4、NaH2PO4、MgSO47H2O、KCl、H2O。若此培养基用于培养分解尿素的细菌，则应除去上述_成分，并加入尿素和葡萄糖。分解尿素的细菌在生态系统组成成分中属于_，你判断的理由是_。答案：(1)平板划线(2)NaNO3分解者该细菌需要依赖现成的有机物，营腐生生活。解析：由于操作时用到了接种环和平板，因此，图中接种方法是平板划线法；要培养分解尿素的细菌，而不能有其它的微生物生存，必须提供有利于分解尿素的细菌生存而不利于其它微生物生存的条件。