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1、临床检验学基础讲授课教师熊立凡 Still waters run deep.流静水深流静水深,人静心深人静心深 Where there is life,there is hope。有生命必有希望。有生命必有希望粪便检验粪便检验消化系统消化系统 粪便（粪便（feces，stool）检查主要用于：检查主要用于：肠道感染性疾病肠道感染性疾病了解消化道有无炎症了解消化道有无炎症肠道寄生虫感染肠道寄生虫感染消化道出血鉴别与肿瘤筛检消化道出血鉴别与肿瘤筛检了解胃肠道消化、吸收功能了解胃肠道消化、吸收功能黄疸的鉴别诊断黄疸的鉴别诊断l l 粪便标本采集和处理粪便标本采集和处理标本容器标本容器清洁、干燥、有盖
2、，无吸水和渗漏。清洁、干燥、有盖，无吸水和渗漏。标本采集标本采集1.1.常规检查标本常规检查标本 选取新鲜标本异常成分粪便：含粘液、选取新鲜标本异常成分粪便：含粘液、脓、血等病变成分的标本。脓、血等病变成分的标本。粪便标本应避免混有尿液、消毒剂及粪便标本应避免混有尿液、消毒剂及污水等杂物。污水等杂物。2 2寄生虫检查标本寄生虫检查标本（1 1）血吸虫孵化毛蚴）血吸虫孵化毛蚴（2 2）连续送检：）连续送检：3 3天天（3 3）检查蛲虫卵）检查蛲虫卵（4 4）检查痢疾阿米巴滋养体：从脓血）检查痢疾阿米巴滋养体：从脓血和稀软部分取材。保温。和稀软部分取材。保温。3 3隐血试验隐血试验4.4.粪胆原定
3、量试验粪胆原定量试验l l粪便理学检查粪便理学检查粪便量粪便量外观性状外观性状1粘液便（粘液便（mucousstool）2脓血便（脓血便（stoolwithbloodandpus）常见于下消化道病变：常见于下消化道病变：肠炎、细菌性痢疾、阿米巴痢疾、急性血吸肠炎、细菌性痢疾、阿米巴痢疾、急性血吸虫病、结肠癌、慢性溃疡性结肠炎、肠结核虫病、结肠癌、慢性溃疡性结肠炎、肠结核3鲜血便（鲜血便（bloodystool）结肠癌、直肠息肉、肛裂、痔疮结肠癌、直肠息肉、肛裂、痔疮4.稀糊状稀汁样便稀糊状稀汁样便伪膜性肠炎、艾滋病伴发肠道隐孢子虫伪膜性肠炎、艾滋病伴发肠道隐孢子虫（cryptosporidiu
4、m）5米泔样便米泔样便霍乱、副霍乱霍乱、副霍乱6干结便：习惯性便秘干结便：习惯性便秘7乳凝块：婴儿消化不良、婴儿腹泻。乳凝块：婴儿消化不良、婴儿腹泻。颜色颜色成人呈黄褐色（粪胆素）。成人呈黄褐色（粪胆素）。婴儿粪便：黄绿色或金黄色糊状。婴儿粪便：黄绿色或金黄色糊状。粪便颜色常受食物、药物等因素影响。粪便颜色常受食物、药物等因素影响。1 1淡黄色淡黄色 乳儿便、服用大黄、山道年等。乳儿便、服用大黄、山道年等。在病理情况，可因粪便中胆红素未被氧化在病理情况，可因粪便中胆红素未被氧化而呈现黄色。而呈现黄色。2 2绿色绿色 乳儿肠炎乳儿肠炎3 3白色或灰白色白色或灰白色 胃肠检查服用硫酸钡、胆道阻塞胃
5、肠检查服用硫酸钡、胆道阻塞4 4红色红色 因下消化道出血所致。因下消化道出血所致。直肠癌、肛裂、痔疮直肠癌、肛裂、痔疮5 5果酱色果酱色 阿米巴痢疾、肠套叠阿米巴痢疾、肠套叠6 6黑色或柏油色（黑色或柏油色（tarry colortarry color）上消化道出血柏油样便，持续上消化道出血柏油样便，持续2 23 3天，天，说明出血量不少于说明出血量不少于500500m1m1。黑色但无光泽的粪便：铁剂、活性炭等黑色但无光泽的粪便：铁剂、活性炭等药物，进食动物血、肝脏药物，进食动物血、肝脏寄生虫寄生虫蛔虫、蛲虫、绦虫、钩虫等虫体。蛔虫、蛲虫、绦虫、钩虫等虫体。结石结石胆石、粪石、胰石胆石、粪石、
6、胰石肠砂：肠道受损后形成固化粘液颗粒。肠砂：肠道受损后形成固化粘液颗粒。气味气味生理性气味生理性气味病理性气味病理性气味 恶臭主要见于：胰腺疾病、慢性肠炎、消恶臭主要见于：胰腺疾病、慢性肠炎、消化道大出血、结肠或直肠癌溃烂等化道大出血、结肠或直肠癌溃烂等鱼腥臭味：阿米巴性肠炎鱼腥臭味：阿米巴性肠炎酸臭味：脂肪及糖类消化或吸收不良酸臭味：脂肪及糖类消化或吸收不良l l化学检查化学检查酸碱度测定酸碱度测定正常：中性、弱酸或弱碱性（正常：中性、弱酸或弱碱性（pH6.97.2）。）。隐血试验隐血试验隐血：指消化道出血量很少隐血：指消化道出血量很少每日出血量每日出血量5 5mlml），），肉眼见不到、粪
7、便涂片显微镜检肉眼见不到、粪便涂片显微镜检查也未能发现红细胞查也未能发现红细胞,而需要用其他间接的而需要用其他间接的方法才能证实的出血。方法才能证实的出血。隐血试验隐血试验(OBT)OBT)即指用化学或免疫学的方法证实微量血液即指用化学或免疫学的方法证实微量血液的试验。的试验。l l OBT OBT检测原理检测原理1.1.化学法化学法 血红蛋白含铁血红素有过氧化物酶活性。血红蛋白含铁血红素有过氧化物酶活性。2.2.免疫胶体金（免疫胶体金（immunological immunological colloidal goldcolloidal gold）法法 抗人血红蛋白抗人血红蛋白抗人红细胞基质
8、单克隆抗体抗人红细胞基质单克隆抗体l l OBT OBT方法学评价方法学评价1 1化学法化学法 邻联甲苯胺法邻联甲苯胺法还原酚酞法还原酚酞法联苯胺法联苯胺法匹拉米洞法匹拉米洞法无色孔雀绿法无色孔雀绿法愈创木酯法愈创木酯法（1 1）灵敏度）灵敏度 1)1)邻联甲苯胺法、邻甲苯胺法、还原酚酞邻联甲苯胺法、邻甲苯胺法、还原酚酞法：最灵敏。法：最灵敏。2)2)联苯胺法、匹拉米洞法、无色孔雀绿法：联苯胺法、匹拉米洞法、无色孔雀绿法：为中度灵敏的试验为中度灵敏的试验3 3）愈创木酯法：灵敏度差，假阳性很少）愈创木酯法：灵敏度差，假阳性很少4 4）无色孔雀绿法）无色孔雀绿法5)5)还原酚酞法还原酚酞法6)6
9、)试带法：四甲基联苯胺和愈创木酯为显试带法：四甲基联苯胺和愈创木酯为显色基质检测隐血色基质检测隐血（2 2）特异性和准确度）特异性和准确度l l 干扰因素干扰因素（1 1）动物性食物和生食蔬菜影响）动物性食物和生食蔬菜影响（2 2）药物影响）药物影响（3 3）细菌分解血红蛋白引起假阴性）细菌分解血红蛋白引起假阴性（4 4）其他因素：）其他因素：取材部位不同取材部位不同标本反应时间标本反应时间显色判断标准不同显色判断标准不同2.2.免疫胶体法免疫胶体法 国内、外检查隐血多采用免疫胶体金技术。国内、外检查隐血多采用免疫胶体金技术。（1 1）灵敏度：高。血红蛋白为）灵敏度：高。血红蛋白为0.20.2
10、g/ml g/ml(0.03mg Hb/g(0.03mg Hb/g粪便粪便)（2 2）特异性：）特异性：不受动物血干扰不受动物血干扰胶体金性质比较稳定。胶体金性质比较稳定。（3 3）后带）后带(postzone)postzone)现象：现象：抗原（血红蛋白）过剩，外观明显呈柏油抗原（血红蛋白）过剩，外观明显呈柏油样，隐血试验却为阴性反应，即假阴性。样，隐血试验却为阴性反应，即假阴性。（4 4）灵敏过高造成假阳性。）灵敏过高造成假阳性。生理情况下胃肠道排血液生理情况下胃肠道排血液0.50.51.51.5mL/dmL/d。马拉松运动员出血平均可达马拉松运动员出血平均可达4 4mL/dmL/d。服阿
11、斯匹林服阿斯匹林2.52.5g g出血可达出血可达2 25 5mL/dmL/d。3.3.其他其他“隐血试验隐血试验”方法方法（1 1）转铁蛋白）转铁蛋白(Tf)Tf)测定测定抗原性好但不易降解。联检抗原性好但不易降解。联检TfTf和和HbHb有助于有助于大肠癌筛检。大肠癌筛检。（2 2）血红蛋白荧光测定）血红蛋白荧光测定 采用卟啉荧光定量血红蛋白试验采用卟啉荧光定量血红蛋白试验(Hemo-Hemo-Quant testQuant test，HQT)HQT)可测定粪便中未降解血可测定粪便中未降解血红蛋白和血红素衍化物卟啉，对上、下消红蛋白和血红素衍化物卟啉，对上、下消化道出血同样敏感。化道出血同
12、样敏感。质量控制质量控制1 1化学法化学法 禁食禁食2.2.免疫学胶体金法免疫学胶体金法防止出现后带现象；必要时再稀释粪便防止出现后带现象；必要时再稀释粪便5050lO0lO0倍后试验。特别要防止假阳性。倍后试验。特别要防止假阳性。3.3.及时送检（及时送检（lhlh内）内）4.4.保证试剂质量保证试剂质量 5.5.应做阴性和阳性对照试验应做阴性和阳性对照试验参考值：阴性参考值：阴性 临床意义临床意义1 1隐血试验阳性隐血试验阳性消化道出血、消化道出血、药物致胃粘膜损伤药物致胃粘膜损伤肠结核肠结核克罗恩克罗恩(Crohn)Crohn)病病胃病（胃溃疡、各种胃炎）胃病（胃溃疡、各种胃炎）溃疡性结
13、肠炎溃疡性结肠炎结肠息肉结肠息肉钩虫病钩虫病肾综合征出血热肾综合征出血热消化道恶性肿瘤消化道恶性肿瘤2 2消化性溃疡与肿瘤出血鉴别消化性溃疡与肿瘤出血鉴别 消化道溃疡的阳性诊断率：消化道溃疡的阳性诊断率：40407070，间断性阳性。间断性阳性。消化道恶性肿瘤阳性诊断率：可达消化道恶性肿瘤阳性诊断率：可达9595，持续性阳性。持续性阳性。3.3.消化道恶性肿瘤诊断筛检指标消化道恶性肿瘤诊断筛检指标 （1 1）大肠癌：早期诊断大肠癌唯一可查出）大肠癌：早期诊断大肠癌唯一可查出的异常指标。的异常指标。（2 2）胃癌：早期诊断符合率）胃癌：早期诊断符合率20%20%，晚期符，晚期符合率达合率达95%
14、95%。（3 3）假阳性问题。）假阳性问题。脂肪检查脂肪检查检测原理检测原理1 1显微镜筛检法显微镜筛检法2.2.称量法称量法 3.3.滴定法滴定法 参考值参考值：成人或儿童：成人或儿童：95%95%临床意义临床意义主要了解人体的消化或吸收功能，间接为主要了解人体的消化或吸收功能，间接为消化道疾病的诊断提供依据。消化道疾病的诊断提供依据。粪便脂肪增高：粪便脂肪增高：胰腺疾病胰腺疾病肝胆疾病：梗阻性黄疸、胆汁分泌不足、肝胆疾病：梗阻性黄疸、胆汁分泌不足、病毒性肝炎、肝硬化等。病毒性肝炎、肝硬化等。小肠病变：乳糜泻小肠病变：乳糜泻其他：胃、十二指肠瘘、消化性溃疡等其他：胃、十二指肠瘘、消化性溃疡等
15、l l 胆色素检查胆色素检查检测原理检测原理1 1粪胆素粪胆素 2 2粪胆素原粪胆素原 粪胆原定性或定量均采用粪胆原定性或定量均采用EhrlichEhrlich方法。方法。参考值参考值粪胆素定性：阳性粪胆素定性：阳性粪胆原定量：粪胆原定量：7575350350mg/100gmg/100g粪粪临床意义临床意义多用于黄疸类型的鉴别。多用于黄疸类型的鉴别。1 1粪胆素粪胆素 阴性：总胆管结石、肿瘤时，如完全阻塞，阴性：总胆管结石、肿瘤时，如完全阻塞，粪便白陶土色粪便白陶土色阳性：溶血性黄疸粪胆素增高。阳性：溶血性黄疸粪胆素增高。2.2.粪胆原粪胆原 正常粪便呈阳性反应。正常粪便呈阳性反应。粪胆原测定
16、有助于黄疽的鉴别诊断粪胆原测定有助于黄疽的鉴别诊断l l 其他化学检查其他化学检查1.1.粪糜蛋白酶粪糜蛋白酶(fecal chymotrypsin)fecal chymotrypsin)测定方法：用测定方法：用N-N-乙酰乙酰-1-1氯酸乙基酯法。氯酸乙基酯法。胰腺外分泌功能的指标之一。胰腺外分泌功能的指标之一。减低：慢性胰腺炎和脂肪泻减低：慢性胰腺炎和脂肪泻2.2.粪胰蛋白酶（粪胰蛋白酶（fecal trypsinfecal trypsin）方法：用方法：用P P-甲苯磺酰甲苯磺酰-1-1-精氯酸甲基酯法。精氯酸甲基酯法。了解胰腺外分泌功能。了解胰腺外分泌功能。减低：胰腺疾病。减低：胰腺疾
17、病。3 3粪卟啉粪卟啉增高：见于骨髓卟啉代谢紊乱时引起红细增高：见于骨髓卟啉代谢紊乱时引起红细胞生成性卟啉病（胞生成性卟啉病（porphyrinopathyporphyrinopathy）和继和继发性卟啉病发性卟啉病(如肝脏性卟啉病如肝脏性卟啉病)显微镜检查显微镜检查临床常规检验项目临床常规检验项目细胞细胞白细胞（脓细胞）白细胞（脓细胞）正常粪便：无或偶见白细胞。正常粪便：无或偶见白细胞。肠炎：白细胞分散存在，一般较少肠炎：白细胞分散存在，一般较少细菌性痢疾、溃疡性结肠炎：大量白细胞或细菌性痢疾、溃疡性结肠炎：大量白细胞或成堆脓细胞，出现小吞噬细胞。成堆脓细胞，出现小吞噬细胞。肠易激综合征、肠
18、道寄生虫病肠易激综合征、肠道寄生虫病(尤其是钩虫尤其是钩虫病及阿米巴痢疾病及阿米巴痢疾)：嗜酸性粒细胞，可伴有：嗜酸性粒细胞，可伴有夏科夏科-莱登结晶。莱登结晶。红细胞红细胞 正常粪便：无红细胞。正常粪便：无红细胞。上消化道出血：粪便中难以见到上消化道出血：粪便中难以见到下消化道炎症或出血：痢疾、溃疡性结肠下消化道炎症或出血：痢疾、溃疡性结肠炎、结肠癌、直肠息肉、痔疮、急性血吸炎、结肠癌、直肠息肉、痔疮、急性血吸虫病等。虫病等。细菌性痢疾：白细胞多，红细胞少、分散、细菌性痢疾：白细胞多，红细胞少、分散、形态正常。形态正常。阿米巴痢疾：红细胞多，白细胞少、粘连阿米巴痢疾：红细胞多，白细胞少、粘连
19、成堆、残碎现象。成堆、残碎现象。大吞噬细胞大吞噬细胞大吞噬细胞，即巨噬细胞（大吞噬细胞，即巨噬细胞（macrophagemacrophage），），正常粪便：无大吞噬细胞。正常粪便：无大吞噬细胞。见于：急性细菌性痢疾、急性出血性肠炎，见于：急性细菌性痢疾、急性出血性肠炎，偶见于溃疡性肠炎。偶见于溃疡性肠炎。上皮细胞上皮细胞 正常粪便：甚少见。正常粪便：甚少见。增多：结肠炎症、伪膜性肠炎。增多：结肠炎症、伪膜性肠炎。10个高倍镜视野所见个高倍镜视野所见报告方式（细胞数报告方式（细胞数/HPF）只见只见1个个偶见偶见有的视野不见，有的视有的视野不见，有的视野最多可见野最多可见23个个03每个视野最
20、少见到每个视野最少见到5个，个，最多见到最多见到10个个510（+）每个视野都在每个视野都在20以上以上2040（+）每个视野中细胞满视野，每个视野中细胞满视野，难以计数难以计数满视野（满视野（+）报告方式报告方式表表11-1 11-1 粪便镜检细胞成分报告方式粪便镜检细胞成分报告方式l l食物残渣食物残渣脂肪脂肪用苏丹用苏丹染色（染色（Sudanstain）可可将粪便中的脂肪区分成将粪便中的脂肪区分成3种。种。1.中性脂肪：朱红色或橘红色。中性脂肪：朱红色或橘红色。2.游离脂肪酸游离脂肪酸呈片状的为橘黄色、针呈片状的为橘黄色、针束状结晶不染色。束状结晶不染色。3.结合脂肪酸结合脂肪酸呈黄色不
21、规则块状或片呈黄色不规则块状或片状，不被苏丹状，不被苏丹染色。染色。正常成人摄入的脂肪正常成人摄入的脂肪95%以上被吸收以上被吸收脂肪泻（脂肪排泄量脂肪泻（脂肪排泄量6g/d）：）：急、慢性急、慢性胰腺炎、胰头癌、吸收不良综合征、儿童胰腺炎、胰头癌、吸收不良综合征、儿童腹泻、阻塞性黄疸、蓝氏贾第鞭毛虫感染。腹泻、阻塞性黄疸、蓝氏贾第鞭毛虫感染。慢性胰腺炎。慢性胰腺炎。淀粉颗粒淀粉颗粒正常粪便：偶见淀粉颗粒（正常粪便：偶见淀粉颗粒（starchgranule）。）。消化功能不良、腹泻、慢性消化功能不良、腹泻、慢性胰腺炎、胰腺功能不全等。胰腺炎、胰腺功能不全等。肌肉纤维肌肉纤维增多：胰腺外分泌功能
22、减退。增多：胰腺外分泌功能减退。结缔组织与弹性纤维结缔组织与弹性纤维增多：胃蛋白酶缺乏症、腹泻等。增多：胃蛋白酶缺乏症、腹泻等。植物细胞及植物纤维植物细胞及植物纤维增多：胃蛋白酶缺乏症、肠蠕动亢进、腹泻增多：胃蛋白酶缺乏症、肠蠕动亢进、腹泻等。等。l l结晶结晶正常粪便可见少量磷酸盐、草酸钙、碳酸正常粪便可见少量磷酸盐、草酸钙、碳酸钙结晶，无夏科钙结晶，无夏科莱登结晶。莱登结晶。病理情况：夏科病理情况：夏科-莱登结晶，主要见于阿莱登结晶，主要见于阿米巴痢疾、钩虫病及过敏性肠炎。米巴痢疾、钩虫病及过敏性肠炎。微生物检查微生物检查体内正常菌群体内正常菌群粪便中干重的粪便中干重的1/3，大部分为正常
23、菌群。，大部分为正常菌群。成人：大肠埃希菌、厌氧杆菌、肠球菌等，成人：大肠埃希菌、厌氧杆菌、肠球菌等，约占约占80。产气杆菌、变形杆菌、绿脓杆。产气杆菌、变形杆菌、绿脓杆菌等多为过路菌，不超过菌等多为过路菌，不超过l0。婴儿：双歧杆菌、拟杆菌、葡萄球菌和肠婴儿：双歧杆菌、拟杆菌、葡萄球菌和肠杆菌等。杆菌等。正常粪便球菌正常粪便球菌(G+)和杆菌和杆菌(G-)比例大致为比例大致为1 10。肠道菌群失调症（肠道菌群失调症（dysbacteriosis）：）：长期使用广谱抗生素长期使用广谱抗生素免疫抑制剂免疫抑制剂慢性消耗性疾病慢性消耗性疾病霍乱弧菌霍乱弧菌鱼群穿梭样运动活泼的弧菌鱼群穿梭样运动活泼
24、的弧菌真菌真菌普通酵母菌普通酵母菌人体酵母菌人体酵母菌假丝酵母菌（念珠菌）：假丝酵母菌（念珠菌）：正常粪便中极少见正常粪便中极少见首先排除是否污染首先排除是否污染病理情况下以白色假丝酵母菌最为多见，病理情况下以白色假丝酵母菌最为多见，常见于长期使用广谱抗生素、激素、免疫常见于长期使用广谱抗生素、激素、免疫抑制剂和放、化疗之后及各种慢性消耗性抑制剂和放、化疗之后及各种慢性消耗性疾病。疾病。病毒病毒方法检测：商品化方法检测：商品化EIA、ELISA、胶乳法；胶乳法；电镜、培养或杂交等法。电镜、培养或杂交等法。轮状病毒、腺病毒：可引起腹泻、呕吐，轮状病毒、腺病毒：可引起腹泻、呕吐，发热等。尤其是婴幼
25、儿。发热等。尤其是婴幼儿。l l寄生虫卵和原虫检查寄生虫卵和原虫检查粪便检查是最直接和最可靠的方法粪便检查是最直接和最可靠的方法蠕虫卵：蠕虫卵：蛔虫卵蛔虫卵钩虫卵钩虫卵鞭虫卵鞭虫卵蛲虫卵蛲虫卵华枝睾吸虫卵华枝睾吸虫卵血吸虫卵血吸虫卵姜片虫卵姜片虫卵带绦虫卵带绦虫卵原虫：原虫：阿米巴原虫（阿米巴原虫（Amoeba）阿米巴原虫滋养体阿米巴原虫滋养体（trophozoite）阿米巴原虫包囊体（阿米巴原虫包囊体（cyst）隐孢子虫及包囊体隐孢子虫及包囊体鞭毛虫（鞭毛虫（flagellate）纤毛虫（纤毛虫（ciliate）及包囊体及包囊体方法学评价方法学评价1.蠕虫寄生虫卵的检查蠕虫寄生虫卵的检查直接
26、镜检法：简单、快捷，阳性率不高直接镜检法：简单、快捷，阳性率不高集卵法：检出率较高。集卵法：检出率较高。饱和盐水漂浮法：尤适合检出钩虫卵。饱和盐水漂浮法：尤适合检出钩虫卵。免疫学：间接血凝法、酶联免疫吸附试验免疫学：间接血凝法、酶联免疫吸附试验（ELISA）等方法检测虫体抗体等方法检测虫体抗体2肠寄生原虫肠寄生原虫（1）阿米巴检查）阿米巴检查滋养体：主要特征为内质含有被吞噬的红滋养体：主要特征为内质含有被吞噬的红细胞等。细胞等。包囊：用碘染色，被染成淡黄绿色、有折包囊：用碘染色，被染成淡黄绿色、有折光性囊壁薄而透明。光性囊壁薄而透明。（2）隐孢子虫：隐孢子虫病的诊断主要）隐孢子虫：隐孢子虫病的
27、诊断主要靠从粪便中查出该虫卵囊。靠从粪便中查出该虫卵囊。可用可用IFA、ELISA等方法作协助诊断。等方法作协助诊断。Cryptosporidium Control SlidesCryptosporidium sps.is now recognized as Cryptosporidium sps.is now recognized as an important intestinal pathogen in patients an important intestinal pathogen in patients with HIV infection.Routine parasitologi
28、cal with HIV infection.Routine parasitological techniques fail to demonstrate this techniques fail to demonstrate this protozoa.Modified Acid Fast staining protozoa.Modified Acid Fast staining techniques prove effective in staining this techniques prove effective in staining this organism.Cryptosporidium Control Slides organism.Cryptosporidium Control Slides have many typical organisms on each have many typical organisms on each slide.Each package contains 10 slides,slide.Each package contains 10 slides,each having a positive and negative well.each having a positive and negative well.