《2022年2019届人教版高考生物选修课本基础知识全册归纳 .pdf》由会员分享,可在线阅读,更多相关《2022年2019届人教版高考生物选修课本基础知识全册归纳 .pdf(26页珍藏版)》请在taowenge.com淘文阁网|工程机械CAD图纸|机械工程制图|CAD装配图下载|SolidWorks_CaTia_CAD_UG_PROE_设计图分享下载上搜索。
1、第 1 页 共 26 页课题 1 DNA 的粗提取与鉴定一、实验原理提取生物大分子的基本思路是选用一定的物理或化学方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。对于 DNA 的粗提取而言,就是要利用 DNA 与 RNA、蛋白质和脂质 等在物理和化学性质方面的差异,提取 DNA,去除其他成分。1DNA 的溶解性DNA 和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl 溶液中溶解度不同,利用这一特点,选择适当的盐浓度就能使DNA 充分溶解,而使杂质沉淀,或者相反,以达到分离目的。此外,DNA 不溶于 酒精溶液,但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原理,可以将DNA 与蛋白质进一步的分离。2DNA 对酶、
2、高温和洗涤剂的耐受性蛋白酶能水解 蛋白质,但是对 DNA 没有影响。大多数蛋白质不能忍受 6080oC 的高温,而 DNA 在 80oC 以上才会变性。洗涤剂能够瓦解 细胞膜,但对 DNA 没有影响。3DNA 的鉴定在沸水浴 条件下,DNA 遇二苯胺 会被染成 蓝色,因此二苯胺可以作为鉴定 DNA 的试剂。二、实验设计1实验材料的选取凡是含有 DNA 的生物材料都可以考虑,但是使用DNA 含量相第 2 页 共 26 页对较高 的生物组织,成功的可能性更大。2破碎细胞,获取含DNA 的滤液动物细胞的破碎比较容易,以鸡血细胞为例,在鸡血细胞液中加入一定量的 蒸馏水,同时用玻璃棒 搅拌,过滤后收集滤
3、液即可。如果实验材料是植物细胞,需要先用 洗涤剂 溶解细胞膜。例如,提取洋葱的 DNA 时,在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂 和食盐,进行充分的搅拌和研磨,过滤后收集研磨液。注意:为什么加入蒸馏水能使鸡血细胞破裂?蒸馏水对于鸡血细胞来说是一种低渗液体,水分可以大量进入血细胞内,使血细胞胀裂,再加上搅拌的机械作用,就加速了鸡血细胞的破裂(细胞膜和核膜的破裂),从而释放出 DNA。加入洗涤剂和食盐的作用分别是什么?洗涤剂是一些离子去污剂,能溶解细胞膜,有利于DNA 的释放;食盐的主要成分是NaCl,有利于 DNA 的溶解。如果研磨不充分,会对实验结果产生怎样的影响?研磨不充分会使细胞核内的DNA 释
4、放不完全,提取的 DNA 量变少,影响实验结果,导致看不到丝状沉淀物、用二苯胺鉴定不显示蓝色等。此步骤获得的滤液中可能含有哪些细胞成分?可能含有核蛋白、多糖和RNA 等杂质。3去除滤液中的杂质方案一的原理是DNA 在不同浓度NaCl 溶液中溶解度不同;方文档编码:CJ8P9F3G4U3 HI4B7A5O5F7 ZK10G7K6L3M1文档编码:CJ8P9F3G4U3 HI4B7A5O5F7 ZK10G7K6L3M1文档编码:CJ8P9F3G4U3 HI4B7A5O5F7 ZK10G7K6L3M1文档编码:CJ8P9F3G4U3 HI4B7A5O5F7 ZK10G7K6L3M1文档编码:CJ8P
5、9F3G4U3 HI4B7A5O5F7 ZK10G7K6L3M1文档编码:CJ8P9F3G4U3 HI4B7A5O5F7 ZK10G7K6L3M1文档编码:CJ8P9F3G4U3 HI4B7A5O5F7 ZK10G7K6L3M1文档编码:CJ8P9F3G4U3 HI4B7A5O5F7 ZK10G7K6L3M1文档编码:CJ8P9F3G4U3 HI4B7A5O5F7 ZK10G7K6L3M1文档编码:CJ8P9F3G4U3 HI4B7A5O5F7 ZK10G7K6L3M1文档编码:CJ8P9F3G4U3 HI4B7A5O5F7 ZK10G7K6L3M1文档编码:CJ8P9F3G4U3 HI4B7
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7、K6L3M1文档编码:CJ8P9F3G4U3 HI4B7A5O5F7 ZK10G7K6L3M1文档编码:CJ8P9F3G4U3 HI4B7A5O5F7 ZK10G7K6L3M1文档编码:CJ8P9F3G4U3 HI4B7A5O5F7 ZK10G7K6L3M1文档编码:CJ8P9F3G4U3 HI4B7A5O5F7 ZK10G7K6L3M1文档编码:CJ8P9F3G4U3 HI4B7A5O5F7 ZK10G7K6L3M1文档编码:CJ8P9F3G4U3 HI4B7A5O5F7 ZK10G7K6L3M1文档编码:CJ8P9F3G4U3 HI4B7A5O5F7 ZK10G7K6L3M1文档编码:CJ
8、8P9F3G4U3 HI4B7A5O5F7 ZK10G7K6L3M1文档编码:CJ8P9F3G4U3 HI4B7A5O5F7 ZK10G7K6L3M1文档编码:CJ8P9F3G4U3 HI4B7A5O5F7 ZK10G7K6L3M1文档编码:CJ8P9F3G4U3 HI4B7A5O5F7 ZK10G7K6L3M1文档编码:CJ8P9F3G4U3 HI4B7A5O5F7 ZK10G7K6L3M1文档编码:CJ8P9F3G4U3 HI4B7A5O5F7 ZK10G7K6L3M1文档编码:CJ8P9F3G4U3 HI4B7A5O5F7 ZK10G7K6L3M1文档编码:CJ8P9F3G4U3 HI4
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10、G7K6L3M1文档编码:CJ8P9F3G4U3 HI4B7A5O5F7 ZK10G7K6L3M1文档编码:CJ8P9F3G4U3 HI4B7A5O5F7 ZK10G7K6L3M1文档编码:CJ8P9F3G4U3 HI4B7A5O5F7 ZK10G7K6L3M1文档编码:CJ8P9F3G4U3 HI4B7A5O5F7 ZK10G7K6L3M1文档编码:CJ8P9F3G4U3 HI4B7A5O5F7 ZK10G7K6L3M1文档编码:CJ8P9F3G4U3 HI4B7A5O5F7 ZK10G7K6L3M1文档编码:CJ8P9F3G4U3 HI4B7A5O5F7 ZK10G7K6L3M1第 3 页
11、 共 26 页案二的原理是蛋白酶分解蛋白质,不分解DNA;方案三的原理是蛋白质和 DNA 的变性温度不同。注意:为什么反复地溶解与析出DNA,能够去除杂质?用高盐浓度的溶液溶解DNA,能除去在高盐中不能溶解的杂质;用低盐浓度使 DNA 析出,能除去溶解在低盐溶液中的杂质。因此,通过反复溶解与析出DNA,就能够除去与DNA 溶解度不同的多种杂质。方案二与方案三的原理有什么不同?方案二是利用蛋白酶分解杂质蛋白,从而使提取的DNA与蛋白质分开;方案三利用的是 DNA 和蛋白质对高温耐受性的不同,从而使蛋白质变性,与 DNA 分离。4DNA 的析出与鉴定将处理后的溶液过滤,加入与滤液体积 相等、冷却的
12、 酒精溶液,静置 23min,溶液中会出现 白色丝状物,这就是粗提取的DNA。用玻璃棒 沿一个方向 搅拌,卷起丝状物,并用滤纸吸取上面的水分。取两支 20ml 的试管,各加入物质的量浓度为2mol/L 的 NaCl 溶液 5ml,将丝状物放入其中一支试管中,用玻璃棒搅拌,使丝状物溶解。然后,向两支试管中各加入4ml 的二苯胺试剂。混合均匀后,将试管置于 沸水中加热 5min,待试管冷却后,比较两支试管溶液颜色的变化,看看溶解有DNA 的溶液是否变 蓝。三、实验步骤以洋葱为实验材料1称取 30 克已切碎的洋葱,放入研钵中,加入少量石英砂助研,倒入 10mL 2mol/L 的氯化钠溶液,充分研磨。
13、文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T
14、4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1
15、T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I
16、1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5
17、I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W
18、5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8
19、W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4第 4 页 共 26 页洋葱含有挥发性刺激物,有效减少刺激,才能使实验顺
20、利进行。上课前,教师可先将洋葱放入冰箱冷冻一会儿,使其凉透但又不能结冰;或将洋葱切成几大块,放入清水泡一会儿,让其挥发性刺激物溶于水,可以减轻刺激。然后将洋葱切碎备用。研磨的目的主要是使洋葱细胞破裂,使 DNA 溶于 2mol/L 的氯化钠溶液,没必要将洋葱研成粥糊状,后者既浪费时间又影响实验效果。研磨时,切忌使用搅拌器(榨汁机)。使用搅拌器虽可以提高研磨效率,但搅拌器将洋葱切成极细小的颗粒,无法通过过滤将洋葱颗粒剔除。只能将酒精直接倒入滤液中,许多洋葱小颗粒因为轻会漂浮起来,DNA 藏在其中,无法分辨。学生看不到白色纤维状粘稠物的DNA。2研磨后,用漏斗和纱布将汁液过滤到小烧杯中,得到滤液。
21、3向滤液中加入95%的酒精溶液 20mL,沿烧杯壁缓缓倒入,不要震动或搅拌。此时,烧杯中的液体分为上、下两层,下层较浑浊,上层澄清,很快上层溶液中就会有白色纤维状粘稠物析出,用玻璃棒可将其轻轻卷起。这就是记录生命遗传信息的重要物质DNA。DNA析出的过程中,切忌震动和搅拌(不震动易于分层,我们就能很容易观察到上清液中的丝状物;搅拌会使非常柔软的DNA 断裂成小段,不易取出)。如果用玻璃棒 DNA 不易卷起,可改用表面打毛的牙签,DNA 提取物就缠绕在牙签上了。4鉴定:取两支试管,编为1、2 号,各加入 2mol/L 的氯化钠溶液2mL,向 1 号试管中加入一些白色纤维状物,振荡使其溶解,然后向
22、文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T
23、4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1
24、T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I
25、1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5
26、I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W
27、5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8
28、W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4第 5 页 共 26 页两支试管中各加入2mL二苯胺试剂,沸水浴加热5
29、分钟。四、注意事项1以血液为实验材料时,每 100ml 血液中需要加入3g 柠檬酸钠防止血液凝固。2加入洗涤剂后,动作要轻缓、柔和,否则容易产生大量的泡沫,不利于后续步骤地操作。加入酒精和用玻璃棒搅拌时,动作要轻缓,以免 DNA 分子的断裂,导致 DNA 分子不能形成絮状沉淀。3二苯胺试剂要 现配现用,否则会影响鉴定的效果。4DNA 的溶解度与 NaCl 溶液浓度的关系:当 NaCl 溶液浓度低于 0.14mol/L 时,随浓度的升高,DNA 的溶解度降低;当 NaCl 溶液浓度高于 0.14mol/L 时,随浓度升高,DNA的溶解度升高。5盛放鸡血细胞液的容器,最好是塑料容器。鸡血细胞破碎以
30、后释放出的DNA,容易被玻璃容器吸附,由于细胞内 DNA 的含量本来就比较少,再被玻璃容器吸附去一部分,提取到的 DNA 就会更少。因此,实验过程中最好使用塑料高中生物选修 3一、基因工程1、(a)基因工程的诞生(一)基因工程的概念文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3
31、C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P
32、3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2
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36、6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:C
37、I6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4第 6 页 共 26 页基因工程是指按照人们的愿望,进行严格的设计,通过体外 DNA 重组和转基因技术,赋予生物以 新的遗传特性,创造出 更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在 DNA 分子水平 上进行设计和施工的,又叫做DNA 重组技术。2、(a)基因工程的原理及技术原理:基因重组技术:(一)基因工程的基本工具1.“分子手术刀”限制性核酸内切酶(限制酶)(1)来源:主要是从 原核生物 中分离纯化出来的。(2)功能:能够识
38、别双链DNA 分子的某种 特定的核苷酸序列,并且使每一条链中 特定部位的两个核苷酸之间的 磷酸二酯键 断开,因此具有专一性。(3)结果:经限制酶切割产生的DNA 片段末端通常有两种形式:黏性末端 和平末端。2.“分子缝合针”DNA 连接酶(1)两种 DNA 连接酶(EcoliDNA 连接酶和 T4DNA 连接酶)的比较:相同点:都缝合 磷酸二酯 键。区别:EcoliDNA 连接酶来源于 T4噬菌体,只能将双链 DNA 片段互补的 黏性末端 之间的磷酸二酯键连接起来;而T4DNA 连接酶能缝合两种末端,但连接平末端的之间的效率较低。文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3
39、ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3
40、 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J
41、3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2
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45、7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4第 7 页 共 26 页(2)与 DNA 聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将 单个核苷酸 加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯键。
46、DNA 连接酶是连接 两个 DNA片段的末端,形成磷酸二酯键。3.“分子运输车”载体(1)载体具备的条件:能在受体细胞中复制并稳定保存。具有一至多个限制酶切点,供外源DNA 片段插入。具有标记基因,供重组 DNA 的鉴定和选择。(2)最常用的载体是 质粒,它是一种 裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外,并具有自我复制能力的双链环状DNA 分子。(3)其它载体:噬菌体的衍生物、动植物病毒(二)基因工程的基本操作程序第一步:目的基因的获取1.目的基因是指:编码蛋白质的结构基因。2.原核基因采取 直接分离 获得,真核基因是 人工合成。人工合成目的基因的常用方法有 反转录法 _和化学合成法 _。3
47、.PCR技术扩增目的基因(1)原理:DNA 双链复制(2)过程:第一步:加热至9095DNA 解链;第二步:冷却到5560,引物结合到互补DNA 链;第三步:加热至 7075,热稳定 DNA 聚合酶从引物起始互补链的合成。第二步:基因表达载体的构建文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码
48、:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编
49、码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档编码:CI6X2P3C10I8 HM10W10F7F2J3 ZR7F8W5I1T4文档
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