《高三一轮复习生物课件：专题2课题3分解纤维素的微生物的分离.ppt》由会员分享，可在线阅读，更多相关《高三一轮复习生物课件：专题2课题3分解纤维素的微生物的分离.ppt（13页珍藏版）》请在taowenge.com淘文阁网|工程机械CAD图纸|机械工程制图|CAD装配图下载|SolidWorks_CaTia_CAD_UG_PROE_设计图分享下载上搜索。
1、课题3 分解纤维素的微生物的分离取二支20mL的试管，编号甲乙实验：证明纤维素酶分解纤维素的实验各加入一张滤纸条各加入pH4.8，物质的量浓度0.1mol/L的醋酸醋酸钠缓冲液11ml和10ml 甲 乙在乙试管中加入1mL纤维素酶两支试管固定在锥形瓶中，放在140r/min的摇床上振荡1h结果：乙试管的滤纸条消失讨论：乙试管的滤纸条为什么会消失？甲试管的作用是什么？一、基础知识一、基础知识1.纤维素2.纤维素酶纤维素纤维二糖葡萄糖C1酶Cx酶葡萄糖苷酶(三)、实验设计土壤取样选择培养梯度稀释将样品涂布到鉴别培养基挑选菌落在什么样的环境取样?根据：微生物对生存环境的要求，到相应环境中去找；实例：
2、树林中多年落叶形成的腐殖土，多年积累的枯枝败叶等。讨论:如果找不到合适的环境，可以将滤纸埋在土壤中，将滤纸埋在土壤中有什么作用？你认为滤纸应该埋在土壤中多深？将滤纸埋在土壤中能使纤维素分解菌相对集中。10cm左右的腐殖土壤中（二）纤维素分解菌的筛选1、方法2、原理(三)、实验设计土壤取样选择培养梯度稀释将样品涂布到鉴别培养基挑选菌落 培养的目的? 选择培养基的特点?目的：增加纤维素分解菌的浓度1、纤维素分解菌选择培养基属于_（固体、液体）培养基，原因是_【资料二】选择培养【资料二】选择培养阅读资料二“选择培养基”，回答以下几问题：液体没有添加琼脂2、该培养基对微生物_（具有/不具有）选择作用。
3、如果具有，其选择机制是_ 具有 以纤维素为主要碳源，能分解纤维素的微生物可以大量繁殖；培养基组成纤维素粉5gNaNO31gKCl Na2HPO47H2O KH2PO4 MgSO4 7H2O 0.5g 1.2g0.9g0.5g酵母膏0.5g水解酪素0.5g溶解后，蒸馏水定容至1000mL酵母膏：提供碳源、氮源、生长因子水解酪素：提供碳源、氮源其他微生物也能在该培养基中生长繁殖。起到“浓缩” 作用！3、你能否设计一个对照实验，说明选择培养基的作用？提示：自变量为培养基的种类，即普通培养基和选择培养基。可用牛肉膏蛋白胨培养基与之对照,或者将纤维素改为葡萄糖。( (三三) )、实验设计、实验设计土壤土
4、壤取样取样选择选择培养培养梯度梯度稀释稀释将样品涂将样品涂布到鉴别布到鉴别培养基培养基挑选挑选菌落菌落101102103104105106(三)、实验设计土壤取样选择培养梯度稀释将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上挑选菌落鉴别培养基的特点?如何鉴别?刚果红染色法培养基组成提供的主要营养物质CMC-Na 5-10g酵母膏 1gKH2PO4 0.25g土豆汁 100mL琼脂 15g上述物质溶解后，加蒸馏水定容至1000mL制备鉴别纤维素分解菌的培养基并涂布平板(水溶性羧甲基纤维素钠)碳源碳源、氮源、生长因子无机盐碳源、生长因子凝固剂水【资料三】刚果红染色法方法一：先培养微生物，再加入刚果红进行颜
5、色反应方法二：在倒平板时就加入刚果红两种方法均可出现明显的透明圈！染色法优点缺点方法一 方法二 颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用操作繁琐，刚果红会使菌落之间发生混杂操作简便，不存在菌落混杂问题产生淀粉酶的微生物也产生模糊透明圈，有些微生物能降解色素，形成明显的透明圈。(三)、实验设计挑选什么样的菌落? 挑取产生明显的透明圈的菌落，一般即为分解纤维素的菌落。 接种到纤维素分解菌的选择培养基上，在3037培养，可获得纯培养。土壤取样选择培养梯度稀释将样品涂布到鉴别培养基挑选菌落四、结果分析与评价四、结果分析与评价1.培养基的制作是否合格以及选择培养基是否筛选出菌落对照的培养基在培养过程中没有菌落
6、生长则说明培养基制作合格。如果观察到产生透明圈的菌落，则说明可能获得了分解纤维素的微生物。思考：本实验的流程与课题2中的实验流程有哪些异同？课题2是将土样制成的菌悬液直接涂布在以尿素为唯一氮源的选择性培养基上，直接分离得到菌落。本课题通过选择培养，使纤维素分解菌得到增殖后，再将菌液涂布在鉴别培养基上。其他步骤基本一致。 （1）纤维素酶是复合酶，由C1酶、Cx酶和 组成。（2）实验室中微生物筛选常应用选择培养基的方法，原理是 。为分离得到纤维素分解菌，使用的培养基应以_作为主要碳源。（3）梯度稀释前进行选择培养的目的是_，这一步一般选用_（填“固体”或“液体”）培养基。（4）梯度稀释后用 （仪器
7、）将菌种接种在培养基表面。（5）用_染色法鉴定纤维素分解菌时，培养基上的菌落周围会形成透明圈，其大小反映 。练习(黑龙江2017一模)土壤中的纤维素分解菌能合成纤维素酶，通过对这些微生物的研究与应用，使人们能够利用秸秆等废弃物生产酒精，用纤维素酶处理服装面料等。从土壤中分离纤维素分解菌的实验流程如下：土壤取样选择培养基梯度稀释鉴别培养基葡萄糖苷酶人为提供有利于于目的菌株生长的条件，同时抑制和阻止其他微生物生长纤维素增加纤维素分解菌的浓度 液体 涂布器 刚果红 产生纤维素酶的多少 1.某些土壤细菌可将尿素分解成CO2和NH3，供植物吸收和利用。回答下列问题：(1)有些细菌能分解尿素，有些细菌则不
8、能，原因是前者能产生 。能分解尿素的细菌不能以尿素的分解产物CO2作为碳源，原因是 ，但可用葡萄糖作为碳源，进入细菌体内的葡萄糖的主要作用是 (答出两点即可)。(2)为了筛选可分解尿素的细菌，在配制培养基时，应选择_(填“尿素”“NH4NO3”或“尿素+NH4NO3”)作为氮源，不选择其他两组的原因是 。(3)用来筛选分解尿素细菌的培养基含有用来筛选分解尿素细菌的培养基含有KH2PO4和和Na2HPO4，其作用有，其作用有 (答答出两点即可出两点即可)。脲酶分解尿素的细菌是异养型生物，不能利用CO2来合成有机物为细胞的生命活动提供能量，为其他有机物的合成提供原料尿素其他两组都含有NH4NO3，能分解尿素的细菌和不能分解尿素的细菌都能利用NH4NO3，不能起到筛选作用为细菌的生长提供无机营养，作为缓冲剂保持细胞生长过程中pH稳定