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1、第十三章第十三章基因治疗原理与探讨进展基因治疗原理与探讨进展10/31/20221基因治疗的概念基因治疗的概念 将将某某个个遗遗传传物物质质转转移移到到患患者者细细胞胞内内，使使其其在在体体内内发发挥挥作作用用，以以达达到治疗疾病目的的方法。到治疗疾病目的的方法。10/31/20222基因治疗分类基因治疗分类体细胞体细胞(somatic cell)somatic cell)基基因治疗因治疗生殖细胞(germlinegermline)基因治疗v只限于某一体细胞的基因的变更v只限于某个体的当代v对缺陷的生殖细胞进行矫正v当代及子代10/31/20223 内容提要内容提要l第一节第一节 基因治疗的策
2、略基因治疗的策略l其次节其次节 基因转移技术基因转移技术l第三节第三节 基因干预基因干预l第四节第四节 治疗基因的受控表达治疗基因的受控表达l第五节第五节 基因治疗的应用探讨基因治疗的应用探讨l第六节第六节 基因治疗的问题与展望基因治疗的问题与展望10/31/20224 第一节 基因治疗的策略一、基因置换一、基因置换二、基因添加二、基因添加三、基因干预三、基因干预四、自杀基因治疗四、自杀基因治疗五、基因免疫治疗五、基因免疫治疗10/31/20225一、基因置换（一、基因置换（gene replacement）定定义义：指指将将特特定定的的目目的的基基因因导导入入特特定定细细胞胞，通通过过定定位
3、位重重组组，导导入入的的正正常常基基因因，以以置置换换基基因因组组内原有的缺陷基因。内原有的缺陷基因。目的：将缺陷基因的异样序列进行校正。目的：将缺陷基因的异样序列进行校正。特特点点：对对缺缺陷陷基基因因的的缺缺陷陷部部位位进进行行精精确确的的原原位修复，不涉及基因组的任何变更。位修复，不涉及基因组的任何变更。10/31/20226l定定向向整整合合的的条条件件:转转导导基基因因的的载载体体与与基基因因组组DNA具具有有相相同同的的序序列列。带带有有目目的的基基因因的的载载体体就就能能找找到到同同源源重重组组的的位位点点，进进行行部部分分基基因因序序列列的的交交换换，使使基基因因置置换换这这一
4、一治治疗疗策策略略得以实现。得以实现。l基基因因同同源源重重组组技技术术又又称称为为基基因因打打靶靶(gene targeting）基因同源重组技术基因同源重组技术10/31/20227基因同源重组技术基因同源重组技术重组载体重组载体染色体染色体校正后的染色体校正后的染色体10/31/20228二、基因添加二、基因添加 (gene augmentation)定定义义：通通过过导导入入外外源源基基因因使使靶靶细细胞胞表表达达其其本本身身不表达的基因。不表达的基因。类型：类型：在在基基因因缺缺陷陷的的细细胞胞中中导导入入相相应应的的正正常常基基因因，补补偿偿缺缺陷陷基基因因的的功功能能，细细胞胞内
5、内的的缺缺陷陷基基因因并并未除去；未除去；向向靶靶细细胞胞中中导导入入其其原原来来不不表表达达的的基基因因，利利用用其其表达产物达到治疗疾病的目的。表达产物达到治疗疾病的目的。10/31/20229定义：接受特定的方式抑制某个基因的表达，定义：接受特定的方式抑制某个基因的表达，或者通过破坏某个基因的结构而使或者通过破坏某个基因的结构而使 之不能表达，以达到治疗疾病的目的。之不能表达，以达到治疗疾病的目的。例如反义核酸、核酶或干扰例如反义核酸、核酶或干扰RNA技术等。技术等。三、基因干预（三、基因干预（gene interference）10/31/202210 原原理理：将将“自自杀杀”基基因
6、因导导入入宿宿主主细细胞胞中中，这这种种基基因因编编码码的的酶酶能能使使无无毒毒性性的的药药物物前前体体转转化化为为细细胞胞毒毒性性代代谢谢物物，诱诱导导靶靶细细胞胞产产生生“自自杀杀”效效应应，从从而而达达到到清清除除肿肿瘤瘤细细胞的目的。胞的目的。为恶性肿瘤基因治疗的主要方法之一。为恶性肿瘤基因治疗的主要方法之一。四、自杀基因治疗四、自杀基因治疗10/31/202211 自杀基因的作用机制自杀基因的作用机制10/31/202212lTK/GCV：单单纯纯疱疱疹疹病病毒毒（herps simplex virus,HSV）型型胸胸苷苷激激酶酶（thymidine kinase,tk）基基因因编
7、编码码胸胸苷苷激激酶酶，特特异异性性地地将将无无毒毒的的核核苷苷类类似似物物丙丙氧氧鸟鸟苷苷（ganciclovir,GCV）转转变变成成毒毒性性GCV三三磷磷酸酸核核苷苷，后后者者能能抑抑制制DNA聚聚合合酶活性，导致细胞死亡。酶活性，导致细胞死亡。（一）自杀基因系统（一）自杀基因系统lCD/5-FC：大大肠肠杆杆菌菌胞胞嘧嘧啶啶脱脱氨氨酶酶（cytosine deaminase,CD）基基因因，在在细细胞胞内内将将无无毒毒性性5-氟氟胞胞嘧嘧啶啶（5-FC）转转变变成成毒毒性性产产物物5-氟氟尿尿嘧嘧啶啶（5-FU）。）。10/31/202213 旁旁观观者者效效应应(bystander(
8、bystander effect)effect)：“自自杀杀基基因因”导导入入后后，不不仅仅使使导导入入了了“自自杀杀基基因因”的的肿肿瘤瘤细细胞胞在在用用药药后后被被杀杀死死，而而且且与与其其相相邻邻或或远远处的未转导处的未转导“自杀基因自杀基因”的肿瘤细胞也被杀死。的肿瘤细胞也被杀死。明显增加了自杀基因的肿瘤杀伤作用。明显增加了自杀基因的肿瘤杀伤作用。（二）旁观者效应（二）旁观者效应10/31/202214五、基因免疫治疗五、基因免疫治疗 通通过过将将抗抗癌癌免免疫疫增增加加的的细细胞胞因因子子或或MHC基基因因导导入入肿肿瘤瘤组组织织，以以增增加加肿肿瘤瘤微微环境中的抗癌免疫反应。环境中
9、的抗癌免疫反应。10/31/202215其次节 基因转移技术 一、病毒介导的基因转移系统一、病毒介导的基因转移系统二、非病毒介导的基因转移系统二、非病毒介导的基因转移系统10/31/2022161.ex vivo（经活体）（经活体）是是指指在在体体外外将将目目的的基基因因导导入入靶靶细细胞胞，经经过过筛筛选选和和增增殖殖后后将将细细胞胞回回输输给给患患者者，使使该该基基因因在在体体内内有有效效地地表表达达相相应应产产物物，以以达达到到治治疗的目的。疗的目的。2.in vivo（活体内）（活体内）是指将目的基因干脆应用于患者体内。是指将目的基因干脆应用于患者体内。依据基因转移的途径不同，基因治疗
10、分为：依据基因转移的途径不同，基因治疗分为：10/31/202217基因转移的两种途径基因转移的两种途径载体载体目的基因目的基因in vivoex vivo靶细胞靶细胞将目的基因干将目的基因干脆输入体内脆输入体内将目的基因导入患将目的基因导入患者靶细胞者靶细胞,体外培育体外培育将重组靶细将重组靶细胞回输体内胞回输体内10/31/202218 一、病毒介导的基因转移系统一、病毒介导的基因转移系统 病病毒毒载载体体介介导导的的基基因因转转移移效效率率较较高高，因因此此它它也也是是运运用用最最多多的的基基因因治治疗疗载载体体。据据统统计计，有有72%的的临临床床试试验验支支配配和和71%的的病病例例
11、运运用用了了病病毒毒载载体体，其其中中用用得得最最多多的的是是逆逆转录病毒载体。转录病毒载体。10/31/202219（一）逆转录病毒（一）逆转录病毒（Retrovirus）载体载体+ssRNA逆转录酶逆转录酶核心蛋白核心蛋白膜蛋白膜蛋白人类免疫缺陷病毒人类免疫缺陷病毒（HIV）10/31/202220逆转录病毒的生活周期逆转录病毒的生活周期10/31/202221两端各有一长末端重复序列两端各有一长末端重复序列LTRLTR。LTRLTR由由U3U3、R R和和U5U5三三部部分分组组成成，内内含含增增加加子子、启启动动子子、poly(A)poly(A)加加尾尾信信号号及及病病毒毒整整合合序序
12、列列(IS)(IS)。病病毒毒有有三三个个结结构构基基因因：gaggag、polpol和和envenv基基因因（编码包装蛋白）。（编码包装蛋白）。55端端LTRLTR下下游游有有一一段段病病毒毒包包装装所所必必需需的的序序列列（）等。等。1.1.逆转录病毒前病毒的结构特点逆转录病毒前病毒的结构特点10/31/2022222.逆转录病毒介导的基因转移系统逆转录病毒介导的基因转移系统l逆转录病毒载体逆转录病毒载体 保保留留病病毒毒颗颗粒粒的的包包装装信信号号，而而缺缺失失病病毒毒颗颗粒粒包包装装蛋蛋白白基基因因；它它可可以以克克隆隆并并表表达达外外源源基基因因，但但不不能能自自我我包包装装成成有有
13、增增殖殖实实力力的病毒颗粒。的病毒颗粒。LTR therapeutic gene LTR10/31/202223 2.逆转录病毒介导的基因转移系统逆转录病毒介导的基因转移系统l帮助细胞株帮助细胞株l 它由另一种缺陷型逆转录病毒感它由另一种缺陷型逆转录病毒感染构建而成。该细胞株能合成包装蛋白，染构建而成。该细胞株能合成包装蛋白，用于逆转录病毒载体包装。由于缺乏包装用于逆转录病毒载体包装。由于缺乏包装型号，本身不能被包装成病毒颗粒。型号，本身不能被包装成病毒颗粒。gag pol env10/31/202224逆转录病毒包装系统逆转录病毒包装系统10/31/202225逆逆转转录录病病毒毒携携带带的
14、的遗遗传传物物质质高高效效地地进进入入靶靶细胞。细胞。逆逆转转录录病病毒毒结结构构基基因因缺缺失失，但但不不影影响响其其他他部分的活性。部分的活性。前前病病毒毒通通过过LTR高高效效整整合合至至靶靶细细胞胞基基因因组组中中，有有利利于于外外源源基基因因在在靶靶细细胞胞中中的的永永久久表表达。达。包装好的假病毒颗粒易于分别制备。包装好的假病毒颗粒易于分别制备。3.逆转录病毒载体的特点逆转录病毒载体的特点 10/31/202226 4.逆转录病毒载体的主要缺点逆转录病毒载体的主要缺点 随随机机整整合合，有有插插入入突突变变、激激活活癌癌基基因因的潜在紧急；的潜在紧急；逆逆转转录录病病毒毒载载体体的
15、的容容量量较较小小，只只能能容容纳纳7 kb以下的外源基因。以下的外源基因。10/31/202227 （二）腺病毒（二）腺病毒(adenovirus，AV)载体载体10/31/202228 腺腺病病毒毒是是一一种种大大分分子子(36 kb)双双链链无无包包膜膜DNA病病毒毒。它它通通过过受受体体介介导导的的内内吞吞作作用用进进入入细细胞胞内内，然然后后腺腺病病毒毒基基因因组组转转移移至至细细胞胞核核内内，保保持持在在染染色色体体外外，不不整整合合进进入宿主细胞基因组中。入宿主细胞基因组中。10/31/2022291.1.腺病毒载体的优点腺病毒载体的优点基因导入效率高；基因导入效率高；宿主范围广
16、；宿主范围广；基因转导与细胞分裂无关；基因转导与细胞分裂无关；重组腺病毒可通过口服经肠道吸取、或喷重组腺病毒可通过口服经肠道吸取、或喷雾吸入或气管内滴注；雾吸入或气管内滴注；腺病毒载体容量较大，可插入腺病毒载体容量较大，可插入7.5 kb外源基外源基因。因。10/31/202230 2.腺病毒载体缺点腺病毒载体缺点不能整合到靶细胞的基因组不能整合到靶细胞的基因组DNADNA中。治疗中。治疗基因表达时间相对较短。基因表达时间相对较短。宿主的免疫反应导致腺病毒载体表达短宿主的免疫反应导致腺病毒载体表达短暂。暂。部分环节可能产生复制型腺病毒。部分环节可能产生复制型腺病毒。靶向性差。靶向性差。10/3
17、1/202231（三三）腺腺相相关关病病毒毒（adeno-associated virus,AAV）载体载体 AAV是是一一类类单单链链线线状状DNA缺缺陷陷型型病病毒毒。其其基基因因组组DNA小小于于5 kb，无无包包膜膜。AAV不不能能独独立立复复制制，只只有有在在帮帮助助病病毒毒存存在在时时，才才能能进进行行复复制制和和溶溶细细胞胞性性感感染染，否否则则只只能能建建立溶源性潜藏感染。立溶源性潜藏感染。10/31/202232腺相关病毒基因组的结构腺相关病毒基因组的结构：包装信号序列；：包装信号序列；REP:REP:病毒复制基因；病毒复制基因；CAP:CAP:编码衣壳蛋白的基因；编码衣壳蛋
18、白的基因；ITRITR：反向末端重复序列：反向末端重复序列10/31/2022331.AAV的特点的特点以潜藏感染为主；以潜藏感染为主；高效定点整合至人染色体中，避开随机高效定点整合至人染色体中，避开随机整合可能带来的抑癌基因失活和原癌基整合可能带来的抑癌基因失活和原癌基因激活的潜在紧急性。因激活的潜在紧急性。10/31/202234 2.AAV载体的缺陷：载体的缺陷：AAV载体容量小，最多只能容纳载体容量小，最多只能容纳5 kb外外源源DNA片段。片段。感染效率比逆转录病毒载体低。感染效率比逆转录病毒载体低。在在40%80%的成人中存在过感染，可的成人中存在过感染，可能会引起免疫排斥。能会引
19、起免疫排斥。10/31/202235二、非病毒载体介导的基因转移系统二、非病毒载体介导的基因转移系统 （一）脂质体介导的基因转移技术（一）脂质体介导的基因转移技术 基基本本原原理理：利利用用阳阳离离子子脂脂质质体体单单体体与与DNA混混合合后后，可可以以自自动动形形成成包包埋埋外外源源DNA的的脂脂质质体体，然然后后与与细细胞胞一一起起孵孵育育，即即可可通通过过细细胞胞内内吞吞作作用用将将外外源源DNA（即即目目的的基基因因）转转移至细胞内，并进行表达。移至细胞内，并进行表达。10/31/202236 脂质体介导的基因转移示意图脂质体介导的基因转移示意图10/31/202237（二）受体介导转
20、移技术（二）受体介导转移技术 将将DNA与与细细胞胞或或组组织织亲亲和和性性的的配配体偶联，可使体偶联，可使DNA具有靶向性。具有靶向性。10/31/202238受体介导转移技术示意图受体介导转移技术示意图10/31/202239 （三）基因干脆注射技术（三）基因干脆注射技术 如如：肌肌内内注注射射携携带带凝凝血血因因子子 基基因因的的重重组组AAV注注射射液液，可可产产生生血血友病所需的凝血因子友病所需的凝血因子。10/31/202240第三节 基因干预一、反义一、反义RNA二、二、RNA干扰干扰三、核酶三、核酶10/31/202241一、反义一、反义RNA（一）反义（一）反义RNA与基因表
21、达调控与基因表达调控 指能与特定基因指能与特定基因mRNA互补结合的一类互补结合的一类RNA,可抑制一些有害基因的翻译可抑制一些有害基因的翻译。关键技术问题：关键技术问题：1.专一性转移问题专一性转移问题 2.反义反义RNA进入靶细胞前的降解问题进入靶细胞前的降解问题10/31/202242（二）受体介导反义（二）受体介导反义RNA转移技术转移技术受体介导反义受体介导反义RNA转移技术可以实现转移技术可以实现:受体介导的受体介导的RNA转移特殊专一，而且效率高；转移特殊专一，而且效率高；被被转转移移的的RNA是是被被疼疼惜惜的的，与与四四周周环环境境之之间间存存在在多多聚聚赖赖氨氨酸酸的的疼疼
22、惜惜层层,可可以以抗抗拒拒环环境境中的核酸酶的降解作用。中的核酸酶的降解作用。10/31/202243（三）（三）反义反义RNA的应用前景的应用前景 （1）平安性高）平安性高 （2）反义）反义RNA设计和制备便利设计和制备便利 （3）具有剂量调整效应）具有剂量调整效应 （4）能干脆作用于一些）能干脆作用于一些RNA病毒病毒10/31/202244二、RNA干扰（RNA interference，RNAi）由双链由双链RNA诱发的基因缄默现象：与诱发的基因缄默现象：与其有同源序列的其有同源序列的mRNA被降解，从而抑制被降解，从而抑制了该基因的表达。了该基因的表达。10/31/202245（一）
23、（一）RNA干扰的机制干扰的机制10/31/202246（二）（二）RNA干扰的应用前景干扰的应用前景 1.1.探讨基因功能的新工具探讨基因功能的新工具 2.2.肿瘤的基因治疗肿瘤的基因治疗3.3.病毒性疾病的基因治疗病毒性疾病的基因治疗10/31/202247三、核酶三、核酶(ribozyme)具具有有酶酶活活性性的的RNA，可可降降解解特特异的异的mRNA序列。序列。核酶核酶靶靶RNA10/31/202248核酶的作用机制核酶的作用机制10/31/202249 （一）核酶的设计（一）核酶的设计 用用于于基基因因治治疗疗的的核核酶酶分分子子由由三三个个部部分分组组成成，中中间间是是保保守守序
24、序列列（能能够够组组成成酶酶活活性性结结构构域域），两两端端是是引引导导序序列列（guide sequences）。）。引导序列引导序列10/31/202250 （二）核酶的应用（二）核酶的应用 与一般的反义与一般的反义RNA相比，核酶具有较稳定相比，核酶具有较稳定的空间结构，不易受到的空间结构，不易受到RNA酶的攻击。更重要酶的攻击。更重要的是，核酶在切断的是，核酶在切断mRNA后，又可从杂交链上后，又可从杂交链上解脱下来，重新结合和切割其它的解脱下来，重新结合和切割其它的mRNA分子。分子。10/31/202251 第四节第四节 治疗基因的受控表达治疗基因的受控表达 治疗基因的受控表达包括
25、限制治疗基因表达的时间、空间和水平三个方面。其策略包括：基因内部调整机制、基因外部调整机制、利用病灶微环境使治疗基因特异性表达及治疗基因的诱导表达等。10/31/202252 利利用用特特定定基基因因的的转转录录调调控控元元件件来来限限制制治疗基因表达的细胞或组织特异性。治疗基因表达的细胞或组织特异性。一、基因内部的调整机制一、基因内部的调整机制1.运运用用正正常常细细胞胞的的组组织织特特异异性性启启动动子子、增增加加子子元元件件，例如酪氨酸酶基因的利用。例如酪氨酸酶基因的利用。2.运运用用病病变变细细胞胞的的组组织织特特异异性性启启动动子子、增增加加子子元元件件，例如甲胎蛋白例如甲胎蛋白(A
26、FP)基因的利用。基因的利用。10/31/202253二、基因外部的调整机制二、基因外部的调整机制 通过施加外部刺激，比如对病灶局部进通过施加外部刺激，比如对病灶局部进行热处理或电离辐射等，促进治疗基因在特行热处理或电离辐射等，促进治疗基因在特定细胞或组织中表达。定细胞或组织中表达。10/31/202254三、利用病灶微环境使治疗基因特异性表达三、利用病灶微环境使治疗基因特异性表达 利利用用病病灶灶特特异异的的微微环环境境及及其其特特异异表表达达的的基基因因来来限限制制治治疗疗基基因因的的表表达达。如如肿肿瘤瘤组组织织往往往往会会出出现现葡葡萄萄糖糖缺缺乏乏或或缺缺氧氧等等微微环环境境，其其中
27、中高高表表达达的的GRP78/Bip蛋蛋白白编编码码基基因因的的启启动动子子即即可可用用于于限制治疗基因的肿瘤组织的特异表达。限制治疗基因的肿瘤组织的特异表达。10/31/202255四、治疗基因的诱导表达四、治疗基因的诱导表达 可可诱诱导导性性基基因因表表达达系系统统能能防防止止治治疗基因表达不再受外界限制。疗基因表达不再受外界限制。这这种种系系统统的的必必要要成成分分：一一种种是是转转录录激激活活物物，它它与与DNA结结合合的的活活性性受受某某种种诱诱导导药药物物限限制制；另另一一种种则则是是特特异异性性基基因因表表达达调调控控元元件件，仅仅对对这这种种转转录录激激活物有所响应。活物有所响
28、应。10/31/202256四环素抗性操纵子系统四环素抗性操纵子系统 四四环环素素操操纵纵子子中中的的抗抗性性基基因因的的转转录录受受阻阻遏遏蛋蛋白白的的负负调调控控，而而阻阻遏遏蛋蛋白白的的活活性性又又受受到到四四环环素素药药物物的的调调控控，其其在在四四环环素素存存在在时时会会优优先先结结合合药药物物而而无无法法与与转转录录调调控控元元件件结结合合，即即不能发挥阻遏转录的作用。不能发挥阻遏转录的作用。（一）四环素操纵子中的转录负调控（一）四环素操纵子中的转录负调控10/31/202257（二）四环素操纵子在治疗基因诱导表达系（二）四环素操纵子在治疗基因诱导表达系 统中的应用统中的应用Tet
29、-Off系统系统：转录激活物保留了原阻遏蛋白：转录激活物保留了原阻遏蛋白的四环素结合特性，即与四环素结合时将的四环素结合特性，即与四环素结合时将不能与对应的表达调控元件结合，而无法不能与对应的表达调控元件结合，而无法发挥转录激活作用。发挥转录激活作用。Tet-On系统系统：转录激活物改造了原阻遏蛋白：转录激活物改造了原阻遏蛋白的四环素结合特性，即与四环素结合时才的四环素结合特性，即与四环素结合时才能与对应的表达调控元件结合，而发挥转能与对应的表达调控元件结合，而发挥转录激活作用。录激活作用。10/31/20225810/31/202259 第五节第五节 基因治疗的应用探讨基因治疗的应用探讨一、
30、遗传病的基因治疗探讨一、遗传病的基因治疗探讨 1腺苷脱氨酶腺苷脱氨酶(ADA)和嘌呤核苷磷酸化酶和嘌呤核苷磷酸化酶 (PNP)缺乏症缺乏症 2珠蛋白生成障碍性贫血和血红蛋白病珠蛋白生成障碍性贫血和血红蛋白病 3血友病和其他血浆蛋白缺乏症血友病和其他血浆蛋白缺乏症 4苯丙酮酸尿症和其他先天性代谢缺陷病苯丙酮酸尿症和其他先天性代谢缺陷病 5莱莱-纳纳(Lesch-Nyhan)综合征综合征 6家族性高胆固醇血症家族性高胆固醇血症 7囊性纤维化病囊性纤维化病 10/31/202260二、恶性肿瘤基因治疗探讨二、恶性肿瘤基因治疗探讨 常用基因治疗策略：常用基因治疗策略：基因增补基因增补基因干预技术基因干
31、预技术自杀基因治疗自杀基因治疗分子化疗分子化疗肿瘤的免疫基因治疗肿瘤的免疫基因治疗提高化疗效果的帮助基因治疗提高化疗效果的帮助基因治疗 （药物增敏基因治疗；耐药基因治疗）（药物增敏基因治疗；耐药基因治疗）10/31/202261第一例基因治疗 -腺苷脱氨酶缺乏症l生理：腺苷脱氨酶是一种细胞内酶，在核酸代生理：腺苷脱氨酶是一种细胞内酶，在核酸代谢中起重要作用，使淋巴细胞中的脱氧腺苷脱谢中起重要作用，使淋巴细胞中的脱氧腺苷脱氨成为脱氧肌苷，最终代谢为尿酸，排出体外。氨成为脱氧肌苷，最终代谢为尿酸，排出体外。l病理：腺苷脱氨酶缺乏病理：腺苷脱氨酶缺乏脱氧腺苷不能脱氨脱氧腺苷不能脱氨脱氧腺细胞内积累脱
32、氧腺细胞内积累淋巴细胞死亡淋巴细胞死亡机体免疫机体免疫功能缺乏。功能缺乏。10/31/202262l腺苷脱氨酶基因位于腺苷脱氨酶基因位于2020号染色体长臂号染色体长臂l19831983年腺苷脱氨酶基因被克隆年腺苷脱氨酶基因被克隆l应用逆转录病毒可将该基因送入缺乏腺苷脱应用逆转录病毒可将该基因送入缺乏腺苷脱氨酶基因的淋巴细胞氨酶基因的淋巴细胞l新输入的腺苷脱氨酶基因可在原来没有此基新输入的腺苷脱氨酶基因可在原来没有此基因的淋巴细胞中表达因的淋巴细胞中表达ADA缺乏症的基因治疗缺乏症的基因治疗ADA10/31/202263第一个成功接受基因治疗的人第一个成功接受基因治疗的人Ashanti de
33、SilvaAshanti de Silva 其其在在前前十十个个月月先先后后注注射射了了7次次，治治疗疗后后ADA蛋蛋白白水水平平由由最最初初的的1%水水平平上升到上升到25%。10/31/202264三、病毒性疾病的基因治疗探讨三、病毒性疾病的基因治疗探讨 可用基因治疗的策略可用基因治疗的策略 1 1调整机体免疫应答调整机体免疫应答 2.2.基因干预，抑制病毒复制基因干预，抑制病毒复制 10/31/202265 第六节第六节 基因治疗的问题与展望基因治疗的问题与展望1.1.平安性问题平安性问题 1999 1999年出现首例基因治疗失败事务。年出现首例基因治疗失败事务。目目前前只只限限于于体体细细胞胞，提提倡倡间间接接体体内内法法、主主要要用用于于单单基基因因遗遗传传病病治治疗疗、疗疗效效显显著著并并经过动物试验验证等。经过动物试验验证等。10/31/2022661.1.2.2.社会伦理问题社会伦理问题l禁止用于生殖细胞禁止用于生殖细胞l防止不当应用（如体育上）防止不当应用（如体育上）10/31/2022671.1.3.3.技术问题技术问题2.2.目的基因及调控元件选择；目的基因及调控元件选择；3.3.平安高效载体构建及转移技术；平安高效载体构建及转移技术；4.4.靶细胞选择靶细胞选择10/31/20226810/31/202269