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1、直观检查项目直观检查项目 射精量 色泽 气味 云雾状 PH值 美兰退色试验微观检查项目微观检查项目n精子活力估测n精子活力计数n密度测定:计数板计数、比色计测定n畸形率:形态畸形率、顶体畸形率(1)(1)射精量的测定方法 概念: 射精量是指每次射精的体积 测定: 以连续3次以上正常采集到的精液的平均值代表 测定方法:可用体积测量容器如刻度试管或量筒,也可用电子秤称重近似代表体积1射精量(2)(2)公畜的正常射精量影响射精量的因素影响射精量的因素:种类、睾丸大小质地、季节、健康状况种类、睾丸大小质地、季节、健康状况(3)射精量不正常的原因)射精量不正常的原因2. 色色 泽泽指精液的颜色及其浓厚程
2、度,它某种程度反应精液是否正常,精子的浓度高低。正常的精液: 猪:浅灰白至白色 牛羊:乳白色或乳黄色不正常精液原因分析不正常精液原因分析4. 云雾状云雾状是指新鲜精液在33-35 温度下,精子成群运动所产生的上下翻卷的现象。云雾状的明显程度代表高浓度的精液中精子活力的高低。云雾状分级标准n+ 翻明显而且较快n+ 翻明显但较慢n+ 仔细看才能看到精液的移动n- 无精液移动3. 气 味正常的精液:应没有很浓的气味,或略带动物特有的腥膻味腥味:有脓液臊味:有尿液或包皮液1.活力的估测活力的估测(1)概念:37下,精液中前进运动精子占总精子数的百分率(2)主要测定方法:估测法(二)微观项目检查(1)密
3、度的概念及表示方法密度的概念及表示方法 单位体积精液中所含的精子数 表示方法:个/ml 或亿/ml2.精子的密度检查 精子密度检查(估测法)取一小滴精液滴在清洁载玻片上,用另一载玻片轻推,使精液成一薄层,400镜下观察 密:视野中精子密度很大,彼此间隙很小,看不清楚各精子运动状况(约10亿/ml) 中:精子间空隙明显,彼此间约有一个精子长度的空隙(约2亿10亿/ml) 稀:精子间空隙超过1个精子长度(约2亿/ml)(2)各种家畜精液的精子密度各种家畜精液的精子密度(4)精子密度的测定方法精子密度的测定方法 精子密度计数板(器)简介 精液的稀释 精液注入计数室 精子计数 精子密度计算精子密度计数
4、板( (器) )简介 精子计数室长宽各1mm,面积1mm2高度0.1mm,体积0.1mm3 由双线或三线组成25个(5X5)中方格 每个中方格内有16个小方格(4X4) 共计400个小方格 精子计数室长宽各1mm,面积1mm2高度0.1mm,体积0.1mm3 由双线或三线组成25个(5X5)中方格 每个中方格内有16个小方格(4X4) 共计400个小方格返回 将精液注入计数室前必须对精液进行稀释,以便于计数 稀释的比例根据动物精液的密度范围确定 稀释方法:用5-25ul移液器和100-1000移液器,在小试管中进行组合不同的稀释.如牛精液稀释100倍,为5ul原精+500ul稀释液 稀释液:3
5、%氯化钠溶液,用以杀死精子,便于计数返回 将洁净的计数板放在载物台上固定好,盖上干净的盖玻片 取25ul稀释后的精液,将吸咀放于盖玻片与计数板的接缝处 缓慢注入精液,使精液依靠毛细作用吸入计数室注意:让稀释后的精液通过毛细作用自行吸入!用吸管稀释后精液注入计数室共有两个对称的计数室 将计数板固定在显微镜的推进器内,用100倍放大找到计数室,再用400倍找到计数室的第一个中方格。 计数左上角至右下角五个中方格的总精子数,以精子的头部为准,依数上不数下,数左不数右的原则进行计数格线上的精子。进行精子计数的中进行精子计数的中方格数可以是四角方格数可以是四角一中心共一中心共5个中方格个中方格也可以是从
6、左角到也可以是从左角到右下角五个中方格右下角五个中方格以图示次序计数,以图示次序计数,精子的头部为准,精子的头部为准,依数上不数下,数依数上不数下,数左不数右的原则进左不数右的原则进行计数格线上的精行计数格线上的精子。白色精子不计子。白色精子不计数数 精子密度= 5个中方格总精子数5101000 稀释倍数放计数板放计数板于载物台上于载物台上取样稀取样稀释精液释精液精液注入精液注入计数室计数室镜检镜检精子计数精子计数密度计算密度计算计数板和盖玻片一定计数板和盖玻片一定要清洁要清洁取取500ul 3%氯化钠氯化钠于小试管中于小试管中,加入加入5ul原精液原精液,混合均混合均匀匀取取25ul小心地从
7、计数板与盖玻片的小心地从计数板与盖玻片的接缝中加入接缝中加入,使其自行吸入计数室中使其自行吸入计数室中用用100倍和倍和400倍观察倍观察 计数五个中方格的总精子数计数五个中方格的总精子数,计计数以头部为准数以头部为准,在格线上的数上在格线上的数上不数下不数下,数左不数右数左不数右 精子密度精子密度= 5个中方格总精子数个中方格总精子数5101000 100结束结束精子畸形率检查精子畸形率:是指畸形精子占视野中总精子数的百分率。 精子畸形分为四类: 头部畸形:头部巨大、瘦小、细长、缺损、双头、皱缩等。 颈部畸形:颈部膨胀大、纤细、曲折、双颈等。 中段畸形:膨大、纤细、带有原生质滴等。 主段畸形:弯曲、曲折、回旋、双尾等。精子畸形率猪不超过18%,羊不超过14%,马不超过12%。如果畸形率超过20%,则视为精液品质不良,不能用做输精。精子畸形率检测过程 用细玻璃棒蘸取一滴精液,滴于玻片上,如是牛、羊精液加滴生理盐水。 用另一玻片抹片。 在空气中自然干燥。 固定:用蓝墨水染色3分钟,水洗、干燥。 检查。作业 简述精子活力检测方法 记录你所测定的精子密度及活力