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1、 第十九节第十九节 消化道寄生虫的病原检查消化道寄生虫的病原检查主要是根据主要是根据 蠕虫的虫卵、幼虫、成虫或节片,蠕虫的虫卵、幼虫、成虫或节片,原原虫虫的的滋滋养养体体、包包囊囊、卵卵囊囊或或孢孢子子囊囊,某些节肢动物;某些节肢动物;可随粪便排出体外可随粪便排出体外 有些虫体可在肛周产卵,有些虫体可在肛周产卵,绦绦虫虫孕孕节节主主动动从从肛肛门门逸逸出出过过程程中中被被挤挤破破、虫卵可散落在肛周,虫卵可散落在肛周,所以,采用粪便检查或肛门周围检查寄生虫所以,采用粪便检查或肛门周围检查寄生虫 注意:注意:保证粪便新鲜,一般不超过保证粪便新鲜,一般不超过2424小时小时盛粪便的容器须干燥、洁净,
2、无污染;盛粪便的容器须干燥、洁净,无污染;容器外贴有标签,容器外贴有标签,受检粪量一般为受检粪量一般为5 510g10g,或不少于,或不少于30g30g,要严格按照粪检程序进行操作,以免漏检。要严格按照粪检程序进行操作,以免漏检。1.1.1.1.直接涂片法直接涂片法直接涂片法直接涂片法用用用用以以以以检检检检查查查查蠕蠕蠕蠕虫虫虫虫卵卵卵卵、原原原原虫虫虫虫的的的的包包包包囊囊囊囊和和和和滋滋滋滋养养养养体体体体。方方方方法法法法简简简简便,连续作便,连续作便,连续作便,连续作3 3 3 3次涂片,可提高检出率。次涂片,可提高检出率。次涂片,可提高检出率。次涂片,可提高检出率。(1 1 1 1
3、)蠕蠕蠕蠕虫虫虫虫卵卵卵卵检检检检查查查查:滴滴滴滴一一一一滴滴滴滴生生生生理理理理盐盐盐盐水水水水于于于于洁洁洁洁净净净净的的的的载载载载玻玻玻玻片片片片,用用用用棉棉棉棉签签签签棍棍棍棍或或或或牙牙牙牙签签签签挑挑挑挑取取取取绿绿绿绿豆豆豆豆大大大大小小小小的的的的粪粪粪粪便便便便块块块块,在在在在生生生生理理理理盐盐盐盐水水水水中中中中涂涂涂涂抹抹抹抹均均均均匀匀匀匀;涂涂涂涂片片片片的的的的厚厚厚厚度度度度以以以以透透透透过过过过涂涂涂涂片片片片约约约约可可可可辨辨辨辨认认认认书书书书上上上上的的的的字字字字迹迹迹迹为为为为宜宜宜宜。一一一一般般般般在在在在低低低低倍倍倍倍镜镜镜镜下下
4、下下检检检检查查查查,如如如如用用用用高高高高倍倍倍倍镜镜镜镜观观观观察察察察,需需需需加加加加盖盖盖盖片片片片。应应应应注注注注意意意意虫虫虫虫卵卵卵卵与与与与粪粪粪粪便便便便中中中中异异异异物物物物的的的的鉴鉴鉴鉴别别别别。虫虫虫虫卵卵卵卵都都都都具具具具有有有有一一一一定定定定形形形形状状状状和和和和大大大大小小小小;卵卵卵卵壳壳壳壳表表表表面面面面光光光光滑滑滑滑整整整整齐齐齐齐,具具具具固固固固有有有有色色色色泽泽泽泽;卵卵卵卵内含卵细胞或幼虫。内含卵细胞或幼虫。内含卵细胞或幼虫。内含卵细胞或幼虫。(2 2 2 2)原虫检查)原虫检查)原虫检查)原虫检查 活活活活滋滋滋滋养养养养体体
5、体体检检检检查查查查:涂涂涂涂片片片片应应应应较较较较薄薄薄薄,方方方方法法法法同同同同查查查查蠕蠕蠕蠕虫虫虫虫卵卵卵卵。气气气气温温温温愈愈愈愈接接接接近近近近体体体体温温温温,滋滋滋滋养养养养体体体体的的的的活活活活动动动动愈愈愈愈明明明明显显显显。必必必必要要要要时时时时可用保温台保持温度。可用保温台保持温度。可用保温台保持温度。可用保温台保持温度。包包包包囊囊囊囊的的的的碘碘碘碘液液液液染染染染色色色色检检检检查查查查:直直直直接接接接涂涂涂涂片片片片方方方方法法法法同同同同上上上上,以以以以一一一一滴滴滴滴碘碘碘碘液液液液代代代代替替替替生生生生理理理理盐盐盐盐水水水水。如如如如碘碘
6、碘碘液液液液过过过过多多多多,可可可可用用用用吸吸吸吸水水水水纸纸纸纸从从从从盖盖盖盖片片片片边边边边缘缘缘缘吸吸吸吸去去去去过过过过多多多多的的的的液液液液体体体体。若若若若同同同同时时时时需需需需检检检检查查查查活活活活滋滋滋滋养养养养体体体体,可可可可在在在在用用用用生生生生理理理理盐盐盐盐水水水水涂涂涂涂匀匀匀匀的的的的粪粪粪粪滴滴滴滴附附附附近近近近滴滴滴滴一一一一滴滴滴滴碘碘碘碘液液液液,取取取取少少少少许许许许粪粪粪粪便便便便在在在在碘碘碘碘液液液液中中中中涂涂涂涂匀匀匀匀,再再再再盖盖盖盖上上上上盖盖盖盖片片片片。涂涂涂涂片片片片染染染染色色色色的的的的一一一一半半半半查查查查
7、包包包包囊囊囊囊;末末末末染染染染色色色色的的的的一一一一半半半半查查查查活活活活滋滋滋滋养养养养体。体。体。体。二、厚涂片透明法(改良加藤法)二、厚涂片透明法(改良加藤法)二、厚涂片透明法(改良加藤法)二、厚涂片透明法(改良加藤法)取取取取约约约约5mg5mg5mg5mg(已已已已用用用用100100100100目目目目不不不不锈锈锈锈钢钢钢钢筛筛筛筛除除除除去去去去粪粪粪粪渣渣渣渣)粪粪粪粪便便便便,置置置置于于于于载载载载玻玻玻玻片片片片上上上上,覆覆覆覆以以以以浸浸浸浸透透透透甘甘甘甘油油油油孔孔孔孔雀雀雀雀绿绿绿绿溶溶溶溶液液液液的的的的玻玻玻玻璃璃璃璃纸纸纸纸片片片片,轻轻轻轻压压
8、压压,使使使使粪粪粪粪便便便便铺铺铺铺开开开开(2025mm2025mm2025mm2025mm)。置置置置于于于于3030303036363636温温温温箱箱箱箱中中中中约约约约半小时或半小时或半小时或半小时或25252525约约约约1 1 1 1小时。待粪膜稍干,即可镜检。小时。待粪膜稍干,即可镜检。小时。待粪膜稍干,即可镜检。小时。待粪膜稍干,即可镜检。玻玻玻玻璃璃璃璃纸纸纸纸准准准准备备备备:将将将将玻玻玻玻璃璃璃璃纸纸纸纸剪剪剪剪成成成成2230mm2230mm2230mm2230mm大大大大小小小小的的的的小小小小片片片片,浸浸浸浸于于于于甘甘甘甘油油油油孔孔孔孔雀雀雀雀绿绿绿绿溶
9、溶溶溶液液液液(含含含含纯纯纯纯甘甘甘甘油油油油100ml100ml100ml100ml、水水水水100ml100ml100ml100ml和和和和3 3 3 3孔孔孔孔雀雀雀雀绿绿绿绿1ml1ml1ml1ml的的的的水水水水溶溶溶溶液液液液)中中中中,至至至至少少少少浸浸浸浸泡泡泡泡24242424小小小小时时时时,至至至至玻玻玻玻璃璃璃璃纸纸纸纸呈呈呈呈现现现现绿色。绿色。绿色。绿色。使使使使用用用用此此此此法法法法需需需需掌掌掌掌握握握握粪粪粪粪膜膜膜膜的的的的合合合合适适适适厚厚厚厚度度度度和和和和透透透透明明明明的的的的时时时时间间间间。如如如如粪粪粪粪膜膜膜膜厚厚厚厚,透透透透明明明
10、明时时时时间间间间短短短短,虫虫虫虫卵卵卵卵难难难难以以以以发发发发现现现现;如如如如透透透透明明明明时时时时间间间间过过过过长长长长,则则则则虫卵变形,也不易辨认虫卵变形,也不易辨认虫卵变形,也不易辨认虫卵变形,也不易辨认。定量透明法定量透明法定量透明法定量透明法适适适适用用用用于于于于各各各各种种种种粪粪粪粪便便便便内内内内蠕蠕蠕蠕虫虫虫虫卵卵卵卵的的的的检检检检查查查查及及及及计计计计数数数数。此此此此法法法法系系系系应应应应用用用用改改改改良良良良聚聚聚聚苯苯苯苯乙乙乙乙烯烯烯烯作作作作定定定定量量量量板板板板,大大大大小小小小为为为为,模模模模孔孔孔孔为为为为一一一一长长长长圆圆圆圆
11、孔孔孔孔,大大大大小小小小为为为为84mm84mm84mm84mm,两两两两端端端端呈呈呈呈半半半半圆圆圆圆形形形形,所所所所取取取取的的的的粪粪粪粪样样样样平平平平均均均均为为为为。操操操操作作作作时时时时将将将将大大大大小小小小约约约约44cm44cm44cm44cm的的的的100100100100目目目目尼尼尼尼龙龙龙龙网网网网或或或或金金金金属属属属筛筛筛筛网网网网覆覆覆覆盖盖盖盖在在在在粪粪粪粪便便便便标标标标本本本本上上上上,自自自自筛筛筛筛网网网网上上上上用用用用刮刮刮刮片片片片刮刮刮刮取取取取粪粪粪粪便便便便,置置置置定定定定量量量量板板板板于于于于载载载载玻玻玻玻片片片片上上
12、上上,用用用用一一一一手手手手的的的的两两两两指指指指压压压压住住住住定定定定量量量量板板板板的的的的两两两两端端端端,将将将将刮刮刮刮片片片片上上上上的的的的粪粪粪粪便便便便填填填填满满满满模模模模孔孔孔孔,刮刮刮刮去去去去多多多多余余余余粪粪粪粪便便便便。掀掀掀掀起起起起定定定定量量量量板板板板,载载载载玻玻玻玻片片片片上上上上留留留留下下下下一一一一个个个个长长长长形形形形粪粪粪粪样样样样,然然然然后后后后在在在在粪粪粪粪条条条条上上上上覆覆覆覆盖盖盖盖含含含含甘甘甘甘油油油油孔孔孔孔雀雀雀雀绿绿绿绿溶溶溶溶液液液液的的的的大大大大小小小小约约约约为为为为的的的的玻玻玻玻璃璃璃璃纸纸纸纸
13、条条条条,展展展展平平平平后后后后加加加加压压压压,使使使使玻玻玻玻璃璃璃璃纸纸纸纸下下下下的的的的粪粪粪粪便便便便铺铺铺铺成成成成长长长长椭椭椭椭圆圆圆圆形形形形。经经经经1 1 1 12 2 2 2小小小小时时时时粪粪粪粪便便便便透透透透明明明明后后后后置置置置镜镜镜镜下下下下计计计计数数数数。将将将将所所所所得得得得虫虫虫虫卵卵卵卵数数数数24242424,再乘上述粪便性状系数,即为每克粪便虫卵数。再乘上述粪便性状系数,即为每克粪便虫卵数。再乘上述粪便性状系数,即为每克粪便虫卵数。再乘上述粪便性状系数,即为每克粪便虫卵数。三三、浮浮浮浮聚聚聚聚法法法法:利利利利用用用用比比比比重重重重较
14、较较较大大大大的的的的液液液液体体体体,使使使使原原原原虫虫虫虫包包包包囊囊囊囊或或或或蠕蠕蠕蠕虫虫虫虫卵卵卵卵上上上上浮浮浮浮,集集集集中中中中于于于于液液液液体体体体表表表表面面面面。常常常常用用用用的的的的方方方方法法法法有有有有两两两两种:种:种:种:(1 1 1 1)饱饱饱饱和和和和盐盐盐盐水水水水浮浮浮浮聚聚聚聚法法法法:此此此此法法法法用用用用以以以以检检检检查查查查钩钩钩钩虫虫虫虫卵卵卵卵效效效效果果果果最最最最好好好好。用用用用竹竹竹竹签签签签取取取取黄黄黄黄豆豆豆豆粒粒粒粒大大大大小小小小的的的的粪粪粪粪便便便便置置置置于于于于漂漂漂漂浮浮浮浮杯杯杯杯(高高高高,直直直直径
15、径径径约约约约2cm2cm2cm2cm的的的的圆圆圆圆形形形形直直直直筒筒筒筒瓶瓶瓶瓶)中中中中,加加加加入入入入少少少少量量量量饱饱饱饱和和和和盐盐盐盐水水水水调调调调匀匀匀匀,再再再再慢慢慢慢慢慢慢慢加加加加入入入入饱饱饱饱和和和和盐盐盐盐水水水水到到到到液液液液面面面面略略略略高高高高于于于于瓶瓶瓶瓶口口口口,但但但但不不不不溢溢溢溢出出出出为为为为止止止止。此此此此时时时时在在在在杯杯杯杯口口口口覆覆覆覆盖盖盖盖一一一一载载载载玻玻玻玻片片片片,静静静静置置置置15151515分分分分钟钟钟钟后后后后,将将将将载载载载玻玻玻玻片片片片提提提提起起起起并并并并迅迅迅迅速速速速翻翻翻翻转转
16、转转,镜检镜检镜检镜检 。(2)硫酸锌离心浮聚法:此法可用于检查原虫包囊,球虫卵囊和蠕虫卵。取粪便约1g,加1015倍的水,充分搅碎,按离心沉淀法过滤,反复离心34次,至水清为止,最后倒去上液,在沉渣中加入比重的硫酸锌液(33的溶液),调匀后再加硫酸锌溶液至距管口约1cm处,离心1分钟。用金属环取表面的粪液置于载玻片上,加碘液一滴,镜检。(3)蔗糖离心浮聚法:此法适用于检查粪便中隐孢子虫的卵囊。取粪便约5g,加水1520ml,以260目尼龙袋或4层纱布过滤。取滤液离心510分钟,吸弃上清液,加蔗糖溶液(蔗糖500g,蒸馏水320ml,石炭酸)再离心,然后如同饱和盐水浮聚法,取其表液膜镜检(高倍
17、或油镜)。卵囊透明无色,囊壁光滑,内有一小暗点和发出淡黄色的子孢子。隐孢子虫的卵囊在漂浮液中浮力较大,常紧贴于盖片之下,但1小时后卵囊脱水变形不易辨认,故应立即镜检。也可用饱和硫酸锌溶液或饱和盐水替代蔗糖溶液。浓聚法浓聚法 1 1沉沉淀淀法法:原原虫虫包包囊囊和和蠕蠕虫虫卵卵的的比比重重大大可可沉沉集集于于水水底底,有有助助于于提提高高检检出出率率。但但比比重重较较小小的的钩钩虫虫卵和某些原虫包囊则效果较差。卵和某些原虫包囊则效果较差。(1 1)重力沉淀法:取粪便)重力沉淀法:取粪便202030g30g、加水成混悬、加水成混悬液,经金属筛(液,经金属筛(40406060孔)或孔)或2 2、3
18、3层湿纱布过滤,层湿纱布过滤,再加清水冲洗残渣;过滤粪液在容器中静置再加清水冲洗残渣;过滤粪液在容器中静置2525分分钟,倒去上液,重新加满清水,以后每隔钟,倒去上液,重新加满清水,以后每隔15152020分钟换水一次(分钟换水一次(3 34 4次),直至上液清晰为止。次),直至上液清晰为止。最后倒去上液,取沉渣作涂片镜检。如检查包囊,最后倒去上液,取沉渣作涂片镜检。如检查包囊,换水间隔时间宜延长至约换水间隔时间宜延长至约6 6小时换一次小时换一次 (2 2)离心沉淀法:将上述滤去粗)离心沉淀法:将上述滤去粗渣的粪液离心(渣的粪液离心(150015002000rpm/min2000rpm/mi
19、n)1 12 2分钟,倒去上分钟,倒去上液,注入清水,再离心沉淀,如液,注入清水,再离心沉淀,如此反复沉淀此反复沉淀3 34 4次,直至上液澄次,直至上液澄清为止,最后倒去上液,取沉渣清为止,最后倒去上液,取沉渣镜检。镜检。(3 3)醛醚沉淀法:)醛醚沉淀法:置粪便置粪便1 12g2g于小容器内,加水于小容器内,加水101020ml20ml调匀,将粪便混悬液经调匀,将粪便混悬液经2 2层纱布(或层纱布(或100100目金属筛网)过滤,离心目金属筛网)过滤,离心(2000rpm/min2000rpm/min)2 2分钟;倒去上层粪液,分钟;倒去上层粪液,保留沉渣,加水保留沉渣,加水10ml10m
20、l混匀,离心混匀,离心2 2分钟;倒分钟;倒去上液,加去上液,加1010甲醛甲醛7ml7ml。5 5分钟后加乙醚分钟后加乙醚3ml3ml,塞紧管口并充分摇匀,取下管口塞,塞紧管口并充分摇匀,取下管口塞,离心离心2 2分钟,即可见管内自下而上分为分钟,即可见管内自下而上分为4 4层。层。取管底沉渣涂片镜检。如检查原虫包囊,取管底沉渣涂片镜检。如检查原虫包囊,可加卢戈氏液染色,加盖片镜检。可加卢戈氏液染色,加盖片镜检。六、钩蚴培养法六、钩蚴培养法 钩虫卵在适宜条件下可在短时间内孵出幼虫。钩虫卵在适宜条件下可在短时间内孵出幼虫。如冷开水约如冷开水约1ml1ml于洁净试管内(于洁净试管内(110cm1
21、10cm),将滤),将滤纸剪成与试管等宽但较试管稍长的纸剪成与试管等宽但较试管稍长的T T字型纸条,字型纸条,用铅笔书写受检者姓名或编号于横条部分。取粪用铅笔书写受检者姓名或编号于横条部分。取粪便约,均匀地涂抹在紧竖条纸条的上部便约,均匀地涂抹在紧竖条纸条的上部2 23 3处,处,再将纸条插入试管,下端浸泡在水中,以粪便不再将纸条插入试管,下端浸泡在水中,以粪便不接触水面为度。在接触水面为度。在20203030条件下培养。培养期条件下培养。培养期间每天沿管壁补充冷开水,以保持水面位置。间每天沿管壁补充冷开水,以保持水面位置。3 3天后肉眼或放大镜检查试管底部。钩蚴在水中常天后肉眼或放大镜检查试
22、管底部。钩蚴在水中常作蛇形游动,虫体透明。如未发现钩蚴,应继续作蛇形游动,虫体透明。如未发现钩蚴,应继续培养观察至第培养观察至第5 5天。气温太低时可将培养管放入天。气温太低时可将培养管放入温水(温水(3030左右)中数分钟后,再行检查。左右)中数分钟后,再行检查。五、肛门拭子检查法五、肛门拭子检查法适适用用于于在在肛肛周周产产卵卵(蛲蛲虫虫),或或常常在在肛肛门门附近发现带绦虫的虫卵检查。附近发现带绦虫的虫卵检查。1 1棉棉签签拭拭子子法法:先先将将棉棉签签浸浸泡泡在在生生理理盐盐水水中中,取取出出时时挤挤去去过过多多的的盐盐水水,在在肛肛门门周周围围擦擦拭拭,随随后后将将棉棉签签放放入入盛
23、盛有有饱饱和和盐盐水水的的试试管管中中,用用力力搅搅动动,迅迅速速提提起起棉棉签签,在在试试管管内内壁壁挤挤干干盐盐水水后后弃弃去去,再再用用饱饱和和盐盐水水法法,覆盖一载玻片,覆盖一载玻片,5 5分钟后取载玻片镜检。分钟后取载玻片镜检。2 2 可可将将擦擦拭拭肛肛周周的的棉棉签签放放在在盛盛清清水水的的试试管管中中,经经充充分分浸浸泡泡,取取出出,在在试试管管内内壁壁挤挤去去水水分分后后弃弃去去。试试管管静静置置1010分分钟钟,或或经经离离心后,倒去上液,取沉渣镜检。心后,倒去上液,取沉渣镜检。3 3透明胶纸法:用长约透明胶纸法:用长约6cm6cm,宽约,宽约2cm2cm的的透明胶纸粘擦肛
24、门周围的皮肤,取下胶纸,透明胶纸粘擦肛门周围的皮肤,取下胶纸,将有胶面平贴玻片上,镜检将有胶面平贴玻片上,镜检。八、淘虫检查法八、淘虫检查法 为考核驱虫疗效,常需从粪便中淘为考核驱虫疗效,常需从粪便中淘取蠕虫进行鉴定与计数。取患者服药取蠕虫进行鉴定与计数。取患者服药后后24247272小时的全部粪便,加水搅拌,小时的全部粪便,加水搅拌,用筛(用筛(4040目)或纱布滤出粪渣,经水目)或纱布滤出粪渣,经水反复冲洗后,倒在盛有清水的大型玻反复冲洗后,倒在盛有清水的大型玻皿内。检查混杂在粪渣中的虫体时,皿内。检查混杂在粪渣中的虫体时,应在玻皿下衬以黑纸。应在玻皿下衬以黑纸。带绦虫孕节检查法带绦虫孕节检查法绦绦虫虫节节片片用用清清水水洗洗净净,置置于于两两载载玻玻片片之之间间,轻轻轻轻压压平平,对对光光观观察察内内部部结结构构,并并根根据据子子宫宫分分支支情情况况鉴鉴定定虫虫种种。也也可可用用注注射射器器从从孕孕节节后后端端正正中中部部插插入入子子宫宫内内徐徐徐徐注注射射炭炭素素墨墨汁汁或或卡卡红红,待待子子宫宫分支显现后计数。分支显现后计数。卡红染液配制:钾明矾饱和液卡红染液配制:钾明矾饱和液100ml100ml,卡红,卡红3g3g,冰醛酸,冰醛酸10ml10ml。混合液置于。混合液置于3737温箱内过夜,过滤后即可应用。温箱内过夜,过滤后即可应用。