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1、【目的与要求】【目的与要求】1 1、学习家兔颈部手术与分离主动脉神经的方法。、学习家兔颈部手术与分离主动脉神经的方法。2 2、学习直接测定家兔动脉血压的急性实验方法。、学习直接测定家兔动脉血压的急性实验方法。3 3、观察神经、体液因素对心血管活动的影响。、观察神经、体液因素对心血管活动的影响。实验十实验十 家兔动脉血压的神经、体液调节家兔动脉血压的神经、体液调节【实验原理】【实验原理】主动脉神经是主动脉弓压力感受器的传入神经,主动脉神经是主动脉弓压力感受器的传入神经,又称减压神经。神经传入冲动的频率,在一定范围内又称减压神经。神经传入冲动的频率,在一定范围内随主动脉血压的升高或降低而相应增加或
2、减少,从而随主动脉血压的升高或降低而相应增加或减少,从而使压力感受性反射增强或减弱,以维持动脉血压的相使压力感受性反射增强或减弱,以维持动脉血压的相对稳定。由于家兔主动脉神经独成一束,易于分离,对稳定。由于家兔主动脉神经独成一束,易于分离,故常用家兔为实验动物,进行主动脉神经冲动的引导故常用家兔为实验动物,进行主动脉神经冲动的引导与血压实验。与血压实验。在正常的生理情况下,人和高等动物的动脉血压在正常的生理情况下,人和高等动物的动脉血压是相对稳定的。这种相对稳定性是通过神经和体液因是相对稳定的。这种相对稳定性是通过神经和体液因素的调节而实现的,其中以颈动脉窦素的调节而实现的,其中以颈动脉窦-主
3、动脉弓压力感主动脉弓压力感受器反射尤为重要。此反射即可使升高的血压下降,受器反射尤为重要。此反射即可使升高的血压下降,又可使降低的血压升高,故有血压缓冲反射之称谓。又可使降低的血压升高,故有血压缓冲反射之称谓。家兔的主动脉神经在解剖上独成一支,易于分离与观家兔的主动脉神经在解剖上独成一支,易于分离与观察其作用。察其作用。本实验是应用液导系统直接测定动脉血压。既有本实验是应用液导系统直接测定动脉血压。既有动脉插管与压力感受器连通,其内充满抗凝液体,构动脉插管与压力感受器连通,其内充满抗凝液体,构成液导系统,将动脉插管插入动脉内,动脉内的压力成液导系统,将动脉插管插入动脉内,动脉内的压力及其变化,
4、可通过封闭的液导系统传递到压力传感器,及其变化,可通过封闭的液导系统传递到压力传感器,并由计算机采集系统记录下来。并由计算机采集系统记录下来。【实验动物及器材】【实验动物及器材】家兔、兔手术台,常用手术器械,止血钳、眼科家兔、兔手术台,常用手术器械,止血钳、眼科剪、支架、气管插管、动脉插管、三通管、动脉夹、剪、支架、气管插管、动脉插管、三通管、动脉夹、Pc-LabPc-Lab生物信号采集系统、压力传感器、保护电极、生物信号采集系统、压力传感器、保护电极、纱布、棉球、丝线、注射器(纱布、棉球、丝线、注射器(1ml1ml、5ml5ml、20ml20ml)、)、生理盐水、生理盐水、4%4%柠檬酸钠、
5、柠檬酸钠、20%-25%20%-25%氨基甲酸乙酯、肝氨基甲酸乙酯、肝素钠(素钠(200U/ml200U/ml)、肾上腺素()、肾上腺素(1 1:50005000)【实验步骤】【实验步骤】1 1、仪器连接:、仪器连接:打开打开Pc-LabPc-Lab生物信号采集系统,连接压力换能器生物信号采集系统,连接压力换能器在第一通道中,新建一个实验,找到动脉血压模块,在第一通道中,新建一个实验,找到动脉血压模块,输入实验相关信息,采样观察压力读数。输入实验相关信息,采样观察压力读数。2 2、制备液体传导系统:、制备液体传导系统:将压力换能器固定在支架上,压力换能器下方支将压力换能器固定在支架上,压力换能
6、器下方支管通过三通管连接动脉插管,上方支管连接一个三通管通过三通管连接动脉插管,上方支管连接一个三通管用来排放空气,先用装有管用来排放空气,先用装有4%4%柠檬酸钠的柠檬酸钠的20ml20ml注射器注射器通过下方支管连接的三通管向动脉插管中推注使其充通过下方支管连接的三通管向动脉插管中推注使其充满液体后,将动脉插管端关闭,然后继续向三通管中满液体后,将动脉插管端关闭,然后继续向三通管中推注,使上方支管中也充满液体,关闭上方支管的三推注,使上方支管中也充满液体,关闭上方支管的三通管,继续向三通管中推注,观察压力变化,当加压通管,继续向三通管中推注,观察压力变化,当加压到到120mmHg120mm
7、Hg时即关闭所有通道,观察压力是否发生变化,时即关闭所有通道,观察压力是否发生变化,如无变化即可使用,如有压力下降需要重新检查,直如无变化即可使用,如有压力下降需要重新检查,直至无变化,然后将动脉插管端注入肝素钠溶液。至无变化,然后将动脉插管端注入肝素钠溶液。注意事项:注意事项:1 1)压力换能器要与家兔心脏在一个水平位置上。)压力换能器要与家兔心脏在一个水平位置上。2 2)液体传导系统中不能有气泡。)液体传导系统中不能有气泡。3 3)液体传导系统中不能有倒流的血液。)液体传导系统中不能有倒流的血液。4 4)液体传导系统中不能漏气。)液体传导系统中不能漏气。3 3、实验动物准备、实验动物准备
8、1 1)麻醉:)麻醉:取家兔一只称重,按取家兔一只称重,按4-5ml/Kg(1g/Kg)4-5ml/Kg(1g/Kg)耳缘耳缘静脉注射静脉注射20%-25%20%-25%氨基甲酸乙酯进行麻醉。氨基甲酸乙酯进行麻醉。2 2)固定剪毛:)固定剪毛:背位固定在兔手术台上,剪去颈部手背位固定在兔手术台上,剪去颈部手术视野中的被毛。术视野中的被毛。3 3)手术分离血管与神经)手术分离血管与神经 A A、颈部皮肤切口、颈部皮肤切口5-7cm5-7cm,分离皮下组织,分离皮下组织 B B、分离肌肉层:钝性分离、分离肌肉层:钝性分离 C C、行气管插管:倒、行气管插管:倒“T”“T”切口,插管固定切口,插管固
9、定 D D、分离血管与神经:、分离血管与神经:一侧:迷走神经一侧:迷走神经(1 1)、主动脉神经(、主动脉神经(2 2)、颈动脉()、颈动脉(1 1)另一侧:迷走神经另一侧:迷走神经(1 1)、颈动脉、颈动脉(3 3)(插管用)(插管用)4 4)引导减压神经放电活动)引导减压神经放电活动 5 5)行动脉插管:)行动脉插管:先将颈动脉靠头端结扎,然后在向心端用动脉夹先将颈动脉靠头端结扎,然后在向心端用动脉夹夹闭动脉,将食指放在颈动脉下方,用锋利的手术刀夹闭动脉,将食指放在颈动脉下方,用锋利的手术刀沿动脉方向切一纵向小口或用眼科剪沿动脉方向剪一沿动脉方向切一纵向小口或用眼科剪沿动脉方向剪一“V”“
10、V”型开口,用眼科镊夹起开口处动脉上壁,将动脉型开口,用眼科镊夹起开口处动脉上壁,将动脉插管经此口插向颈动脉向心端,将备用线结扎防插管插管经此口插向颈动脉向心端,将备用线结扎防插管脱落,松开动脉夹,即可看到动脉血与插管内液体混脱落,松开动脉夹,即可看到动脉血与插管内液体混合,并有波动。合,并有波动。注意事项:注意事项:A A、麻醉过程中,推注要慢,注射时先从耳缘静脉尽、麻醉过程中,推注要慢,注射时先从耳缘静脉尽可能远心端注射。可能远心端注射。B B、气管插管不可过深。、气管插管不可过深。C C、分离时应钝性分离,不可横向剪断肌肉。、分离时应钝性分离,不可横向剪断肌肉。D D、分离神经和血管时尽
11、量在原位分离。、分离神经和血管时尽量在原位分离。动脉插管头端务必要扎紧,以防渗血。动脉插管头端务必要扎紧,以防渗血。E E、插管时,应先从远心端开始剪口。、插管时,应先从远心端开始剪口。F F、插管方向应与颈动脉血管的方向一致,勿使插管、插管方向应与颈动脉血管的方向一致,勿使插管尖端砸破血管壁。尖端砸破血管壁。4 4、实验观察项目、实验观察项目 1 1)观察正常血压曲线:一级波及二级波。)观察正常血压曲线:一级波及二级波。2 2)夹闭对侧颈总动脉)夹闭对侧颈总动脉30s30s,观察血压曲线变化情,观察血压曲线变化情况。况。3 3)电刺激主动脉神经,观察血压变化情况。)电刺激主动脉神经,观察血压
12、变化情况。4 4)电刺激主动脉神经中枢端和外周端,观察血压)电刺激主动脉神经中枢端和外周端,观察血压变化情况。变化情况。5 5)电刺激迷走神经,观察血压变化情况。)电刺激迷走神经,观察血压变化情况。6 6)结扎并剪断双侧迷走神经,观察血压变化情况。)结扎并剪断双侧迷走神经,观察血压变化情况。7 7)分别电刺激双侧迷走神经外周端,观察血压变)分别电刺激双侧迷走神经外周端,观察血压变化情况。化情况。8 8)静脉注入肾上腺素,观察血压变化情况。)静脉注入肾上腺素,观察血压变化情况。注意事项:注意事项:1 1)注意及时做好实验标记。)注意及时做好实验标记。2 2)先做试验并记录,最后再选择性转换成)先做试验并记录,最后再选择性转换成word word 文档。文档。3 3)实验中要保持连续采样记录。)实验中要保持连续采样记录。4 4)刺激前后要有一段正常对照的血压曲线。)刺激前后要有一段正常对照的血压曲线。【实验结果】【实验结果】记录实验观察项目中的各项结果。记录实验观察项目中的各项结果。【分析讨论】【分析讨论】解释各项结果分析其机制或可能的原因。解释各项结果分析其机制或可能的原因。【结论】【结论】思考题:思考题:第第2 2题题