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1、实验五实验五 蛋黄中卵磷脂的提蛋黄中卵磷脂的提 取及鉴定取及鉴定【实验目的】【实验目的】1掌握从动物中提取有效成分的一般原掌握从动物中提取有效成分的一般原 理和方法。理和方法。2熟悉从蛋黄中提取卵磷脂的操作。熟悉从蛋黄中提取卵磷脂的操作。3了解卵磷脂水解后的产物，巩固对卵了解卵磷脂水解后的产物，巩固对卵 磷脂组成结构的认识。磷脂组成结构的认识。【实验原理】【实验原理】【实验步骤】【实验步骤】1 1卵磷脂的提取卵磷脂的提取 （1 1）取）取1 1个熟的鸡蛋黄，置于研钵中研细，加个熟的鸡蛋黄，置于研钵中研细，加 入入15mL 9515mL 95乙醇溶液，研磨，搅拌均匀。减乙醇溶液，研磨，搅拌均匀。
2、减压过滤，收集滤液。将漏斗的残渣移入研钵内，压过滤，收集滤液。将漏斗的残渣移入研钵内，加加15mL 9515mL 95乙醇溶液，研磨，过滤乙醇溶液，研磨，过滤(滤液应完滤液应完全透明全透明)，将两次滤液合并于蒸发皿内。，将两次滤液合并于蒸发皿内。（2）将蒸发皿置于沸水浴上蒸去乙醇，至）将蒸发皿置于沸水浴上蒸去乙醇，至 干，得到黄色油状物。干，得到黄色油状物。（3）冷却后，加入）冷却后，加入2mL3mL氯仿，搅拌使氯仿，搅拌使 油状物溶解。油状物溶解。（4）在搅拌下慢慢加入）在搅拌下慢慢加入10mL15mL丙酮，丙酮，即有卵磷脂析出，搅动使其成团粘附于即有卵磷脂析出，搅动使其成团粘附于 玻棒上，
3、溶液倒入回收瓶内。玻棒上，溶液倒入回收瓶内。2 2卵磺脂的水解及其组成鉴定卵磺脂的水解及其组成鉴定 （1 1）卵磺脂的水解）卵磺脂的水解 取一支干净试管，加入提取的卵磷脂和取一支干净试管，加入提取的卵磷脂和5mL105mL10氢氧化钠溶液，放入沸水浴中加热氢氧化钠溶液，放入沸水浴中加热10min10min，并用玻棒搅拌，使卵磷脂水解。冷却，并用玻棒搅拌，使卵磷脂水解。冷却后，在玻璃漏斗中用棉花过滤，得滤液（供以后，在玻璃漏斗中用棉花过滤，得滤液（供以下检查用）。下检查用）。（2）脂肪酸的检查）脂肪酸的检查 取棉花上沉淀少许，加取棉花上沉淀少许，加5mL水，搅水，搅拌，有无泡沫生成？过滤，得滤液
4、，以拌，有无泡沫生成？过滤，得滤液，以浓硝酸酸化后加入数滴浓硝酸酸化后加入数滴10醋酸铅溶液，醋酸铅溶液，观察有何现象观察有何现象?（3 3）甘油的检查）甘油的检查 取小试管一支，加入取小试管一支，加入1 1滴滴5 5硫酸铜溶液，硫酸铜溶液，2 2滴滴1010氢氧化钠溶液，振摇，有氢氧化铜沉氢氧化钠溶液，振摇，有氢氧化铜沉淀生成。加入水解液，沉淀溶解后，得深蓝色淀生成。加入水解液，沉淀溶解后，得深蓝色甘油铜溶液。甘油铜溶液。（4 4）胆碱的检查）胆碱的检查 取取1mL1mL滤液，滴加浓硫酸中和滤液，滴加浓硫酸中和(以蓝色石蕊以蓝色石蕊试纸检查试纸检查)，加克劳特试剂，加克劳特试剂1 1滴，有砖红色沉淀滴，有砖红色沉淀生成。生成。（5）磷酸的检查）磷酸的检查 取一支干净试管，加入取一支干净试管，加入10滴滤液和滴滤液和5滴滴95%乙醇溶液，用硝酸酸化，加乙醇溶液，用硝酸酸化，加1mL钼酸铵试剂，观察有何现象产生？最后钼酸铵试剂，观察有何现象产生？最后直接用火加热直接用火加热5min10min，观察有无黄，观察有无黄色磷钼酸铵沉淀生成？色磷钼酸铵沉淀生成？注意事项注意事项 乙醇、氯仿、丙酮用量一定要控制好乙醇、氯仿、丙酮用量一定要控制好 思考题思考题 加丙酮之前为何要加少量的氯仿？加丙酮之前为何要加少量的氯仿？