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1、实 验 四动脉血压的神经体液调节v实验内容实验内容1.示教2.每组单独完成实验v时间安排时间安排10:00 看示教、完成家兔的麻醉、气管插管午饭 分离神经、血管完成实验v要求要求:1.实验后统一总结2.第四组值日3.每大组打印一份结果,写实验报告。v实验目的实验目的1.学习急性哺乳类动物实验的常规手术。2.观察家兔颈迷走神经、减压神经及去甲肾上腺素、乙酰胆碱等对心血管活动的影响。v实验思路实验思路记录心血管活记录心血管活动的改变动的改变电脑、采样条件电脑、采样条件设置设置(已备好)已备好)夹闭颈总动脉、电刺激夹闭颈总动脉、电刺激神经、静脉注射药物神经、静脉注射药物施加影响因素施加影响因素观察心
2、血管观察心血管 活动活动动脉血压、动脉血压、心率心率麻醉、气管插管麻醉、气管插管动脉插管等动脉插管等1.2.3.v实验方法与步骤实验方法与步骤(操作均需掌握)(操作均需掌握)1.称重、麻醉、固定家兔:用2戊巴比妥钠经耳缘静脉缓慢注射麻醉(2ml/kg体重),然后将家兔仰卧固定于兔手术台上。2.气管插管:3.分离神经、血管:拉开气管两旁的肌肉,暴露并分离出左右两侧的血管神经束(颈动脉鞘),细心辨别出减压神经(最细)、颈交感神经、迷走神经(最粗)和颈总动脉,用玻璃分针分离出左右减压神经、右迷走神经、左右颈总动脉(左侧分离2cm左右以备动脉插管)分别穿上不同颜色的线备用。3动脉插管:在左颈总动脉下穿
3、两条线。一条线结扎其远心端(尽可能靠近头端结扎),另一线在近心端,挽个松结备用,在松结下方用动脉夹将动脉夹闭。然后在动脉紧靠头端结扎处的近心侧用眼科剪作一斜形切口(注意:剪刀稍放平,切勿将动脉剪断)。将动脉插管(已充满肝素)由切口向心脏方向插入血管,将备用线的活结扎紧,余线可结扎固定于插管上的橡皮圈上,以防滑脱。v麻醉方法麻醉方法v1局部麻醉法局部麻醉包括表面麻醉、浸润麻醉和阻断麻醉等。其中,浸润麻醉最为常用。浸润麻醉方法:根据实验操作要求的深度,将1 2的盐酸普鲁卡因按皮下、筋膜、肌肉、腹膜或骨膜的顺序依次分别注入,阻断手术部位的神经冲动传导,使疼痛消失。适用于中型以上的动物。v2全身麻醉法
4、v(1)吸入麻醉法:先将蘸有乙醚的棉球放入玻璃罩内,然后投入待麻醉动物,经过12分钟左右,动物逐渐失去运动能力。使用该法麻醉时间不可太长,麻醉时要密切观察,防止动物缺氧、窒息或麻醉过深而死亡。该法适用于大、小白鼠的短时间麻醉。较大的动物也可用,但需要使用麻醉口罩等。v(2)注射麻醉:经腹腔或静脉注射麻醉,其操作简便,较常采用。腹腔给药麻醉法多用于小鼠、大鼠和豚鼠等动物。静脉给药麻醉法则多用于兔、狗等较大的动物。各种动物的静脉注射部位及方法见本章第四节内容。v动物麻醉的注意事项动物麻醉的注意事项v1准确计算麻醉剂量所有麻醉药使用过量均可引起中毒,故应特别注意麻醉药的使用剂量及用药途径。在严格按照
5、体重计算麻醉剂量的同时,还要考虑动物对药物耐受性的个体差异。v2缓慢注射,并随时观察动物情况注射过程中,注意观察肌肉紧张性、角膜反射、呼吸频率和夹痛反应等指标。当这些反应明显减弱或消失时,应立即停止注射。v3注意保温动物在麻醉期体温下降,要采取保温措施。为随时观察体温的变化,可在动物的肛门插入体温计。在寒冷的冬季做慢性实验时,在注射前应将麻醉剂加热至动物体温水平。v4万一麻醉过量,应积极抢救可根据不同情况,施行人工呼吸、注射呼吸兴奋剂或强心剂等抢救措施。v耳缘静脉注射法耳缘静脉注射主要用于家兔、豚鼠等。注射方法:固定兔耳,找到耳的外侧缘皮下静脉,拔去注射部位的毛,并用手指轻轻弹动该处(或先用一
6、动脉夹在静脉近心端夹闭静脉),使静脉充盈。然后左手持平耳缘部,右手持注射器从血管远端刺入(针头与血管呈近30夹角),沿血管平行方向进针约1cm,回一下血,放松对静脉近心端的压迫,缓慢推入药液。v观察项目观察项目(1)观察正常血压和心搏曲线,识别一级波和二级波,观察有无三级波(2)夹闭颈总动脉提起右颈总动脉的备用线,用动脉夹夹闭颈总动脉510秒,观察血压与心搏的变化。(3)用备用线结扎迷走神经,于结扎处的头端剪断之。然后用刺激电极刺激迷走神经的外周端,观察血压、心搏的变化。(4)持备用线轻轻提起右侧减压神经,将其搭在保护电极(刺激电极)上,刺激减压神经,观察血压、心搏的变化。(5)耳缘静脉注射1
7、/10 000去甲肾上腺素,观察血压心搏的变化。(6)耳缘静脉注射1/10 0000乙酰胆碱,观察血压、心搏的变化。v注意事项注意事项1.麻醉时,进针应由耳缘静脉远端开始,推注麻醉药物时要缓慢,并随时观察动物的反应,防止动物死亡。2.手术操作要小心准确,避免损伤神经、血管。分离神经血管时,应尽量保持其解剖关系的正常,最先分离减压神经。3.实验前应检查动脉插管口斜面是否光滑,检查压力换能器、三通开关是否畅通,有无漏水等。4.每进行一个项目后,须待心搏与血压恢复正常后方可进行下一项目。5.实验过程中应随时注意动物的状态(如麻醉深度),动脉插管的位置是否扭转、有无漏血等。心迷走心迷走中中 枢枢心交感
8、心交感中中 枢枢缩血管缩血管中中 枢枢心心 脏脏血血 管管窦窦弓弓压压力力感感受受器器+血血 压压交交感感缩缩血血管管N N心心交交感感N N心心迷迷走走N N心心跳跳V舒舒张张A舒舒张张回回心心血血量量外外周周阻阻力力每每搏搏输输出出量量每每分分输输出出量量血血 压压+孤孤束束核核电刺激减压神经电刺激迷走神经反跳现象 rebound phenomenon v亦称反冲现象。作用终止后生物体所表现的相反反应。特别是在神经系统中,兴奋后继续引起抑制,抑制后继续引起兴奋是常见的。v对脊髓反射进行研究的谢林顿(,1906)发现,在同一肢体发生强烈屈曲反射后,出现交叉伸展反射的强度有明显亢进等现象。许多反跳现象被认为是由复杂的兴奋,抑制两条回路的干涉所引起其他如血压和血糖水平的调节等,与生物体控制机制的活动有关的反跳现象也常可看到。