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1、实验二实验二 显微镜介绍及操作训练显微镜介绍及操作训练【实验目的】【实验目的】掌握显微镜的掌握显微镜的构造构造、使用方法使用方法及及镜下镜下绘图绘图。【实验材料】【实验材料】普通光学显微镜、石蜡油、擦镜纸、组织普通光学显微镜、石蜡油、擦镜纸、组织切片标本、切片标本、HB铅笔、红蓝两色铅笔、橡皮铅笔、红蓝两色铅笔、橡皮擦、直尺擦、直尺【实验内容与方法】【实验内容与方法】一、认识光学显微镜的结构一、认识光学显微镜的结构（一）物镜（一）物镜：镜头上标有镜头上标有4，10,40，100放大倍数。放大倍数。（二）目镜（二）目镜：常用常用10目镜目镜。显微镜的放大倍数。显微镜的放大倍数=目镜放大倍数目镜放
2、大倍数物镜放大倍数。物镜放大倍数。（三）光源（三）光源：分为自备光源和外部光源。分为自备光源和外部光源。（四）集光器（聚光器）：（四）集光器（聚光器）：聚集光线，增聚集光线，增强视野的亮度。可调节光圈的大小强视野的亮度。可调节光圈的大小。（五）镜座（五）镜座（六）镜臂（六）镜臂（七）载物台（七）载物台（八）物镜转换器（八）物镜转换器（九）调焦装置（九）调焦装置：包括粗调和微调。：包括粗调和微调。显微镜的类型（一）光学显微镜（一）光学显微镜普通光学显微镜普通光学显微镜倒置显微镜倒置显微镜相差显微镜相差显微镜荧光显微镜荧光显微镜激光扫描共聚焦显微镜激光扫描共聚焦显微镜显微镜的类型倒置相差显微镜倒置
3、相差显微镜荧光相差显微镜荧光显微镜激光扫描共聚焦显微镜（二）电子显微镜（二）电子显微镜透射电子显微镜透射电子显微镜内部结构内部结构扫描电子显微镜扫描电子显微镜外部形态外部形态透射电子显微镜 扫描电子显微镜 二、使用方法及注意事项二、使用方法及注意事项 （一）低倍镜与高倍镜的操作（一）低倍镜与高倍镜的操作 1、正确的移动、放置显微镜，规范的观察正确的移动、放置显微镜，规范的观察姿势姿势 2、开机、开机 3、调光、调光4、肉眼观察切片肉眼观察切片5、放置切片、放置切片6、调节瞳距、调节瞳距7、低倍镜观察、低倍镜观察8、高倍镜观察、高倍镜观察9、更换切片、更换切片10、关闭显微镜、关闭显微镜 （二）
4、油镜的操作规程（二）油镜的操作规程1、再把油镜转到工作位置上。、再把油镜转到工作位置上。2、在盖玻片上所要观察的位置滴一小滴香柏、在盖玻片上所要观察的位置滴一小滴香柏油（或石蜡油）。油（或石蜡油）。7、观察完后，下降载物台约、观察完后，下降载物台约1cm，先用干的，先用干的擦镜纸擦擦镜纸擦12次，再用二甲苯滴湿的擦镜次，再用二甲苯滴湿的擦镜纸擦两次，最后再用干擦镜纸擦一次。擦纸擦两次，最后再用干擦镜纸擦一次。擦拭时要细心，动作要轻，不可用力擦。拭时要细心，动作要轻，不可用力擦。实验三实验三 血液涂片制作及瑞氏染色血液涂片制作及瑞氏染色【实验目的】【实验目的】掌握血涂片的制作方法及涂片标本瑞氏染
5、色方法掌握血涂片的制作方法及涂片标本瑞氏染色方法。【实验材料】【实验材料】器材：医用一次性采血针、无菌棉签、镊子、洁净器材：医用一次性采血针、无菌棉签、镊子、洁净的载玻片和推片、显微镜、碘伏、滤纸的载玻片和推片、显微镜、碘伏、滤纸 试剂：瑞氏染液、蒸馏水试剂：瑞氏染液、蒸馏水切片类型涂片 血液涂片装片 植物装片切片 病理切片【实验步骤】【实验步骤】1、采血、采血 先按摩取血部位，再用碘伏消毒左先按摩取血部位，再用碘伏消毒左手无名指或中指的指腹，干后用采血针刺手无名指或中指的指腹，干后用采血针刺破指腹的皮肤。第一滴血用无菌干棉签擦破指腹的皮肤。第一滴血用无菌干棉签擦去不用。去不用。2、涂片、涂片
6、 将第二滴血置于载玻片的一端，再将第二滴血置于载玻片的一端，再取另一张边缘光滑的推片，斜置于血滴前取另一张边缘光滑的推片，斜置于血滴前方，先向后稍移动轻轻触及血滴，使血液方，先向后稍移动轻轻触及血滴，使血液沿玻片端展开成线状。然后将推片与载玻沿玻片端展开成线状。然后将推片与载玻片保持片保持3045角，平稳地向前匀速推进角，平稳地向前匀速推进至载片的另一端，载片上便留下一层薄厚至载片的另一端，载片上便留下一层薄厚适宜的血膜。推进时速度要一致，否则血适宜的血膜。推进时速度要一致，否则血膜成波浪形，厚薄不匀。膜成波浪形，厚薄不匀。血血 涂涂 片制片制 备备推片载玻片血液将推片匀速向前，勿停顿。涂片的
7、厚薄取决于速度和角度：快、大(厚)。慢、小（薄）一张满意的血涂片应厚薄均匀 头 体 尾鲜明涂片干燥后用铅笔在血涂片的头部写上姓名和编号李四B 1 2 33、染色、染色 待涂片在空气中完全干燥后，滴加待涂片在空气中完全干燥后，滴加35滴瑞氏染液盖满血膜为止，滴瑞氏染液盖满血膜为止，1min后按后按11或或12滴加蒸馏水，与染液混匀。室滴加蒸馏水，与染液混匀。室温下染色温下染色10min左右。用蒸馏水冲去染液，左右。用蒸馏水冲去染液，再将血涂片用自来水温和冲洗，至血膜呈再将血涂片用自来水温和冲洗，至血膜呈淡红色。自然干燥或用滤纸吸干后即可在淡红色。自然干燥或用滤纸吸干后即可在显微镜下观察。显微镜下观察。血血 涂涂 片片 染色染色勿冲洗勿冲洗混匀静置混匀静置10分钟分钟直接流水温和冲洗3-5分钟（切勿先倒掉染液）涂片经水洗干燥后用显微镜观察涂片李李四四涂片干燥后加瑞氏染色液涂片干燥后加瑞氏染色液3-5滴覆滴覆盖整个血膜盖整个血膜1分钟分钟四、镜下观察血涂片四、镜下观察血涂片1、低倍镜观察，分清红细胞、白细胞。、低倍镜观察，分清红细胞、白细胞。2、高倍镜：、高倍镜：中性粒细胞：中性粒细胞：嗜酸性粒细胞：嗜酸性粒细胞：淋巴细胞：淋巴细胞：单核细胞：单核细胞：血小板：血小板：嗜碱性细胞：嗜碱性细胞：中性杆状核粒细胞 嗜碱性粒细胞 单核细胞