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1、营养器官培养第1页，本讲稿共10页第六章第六章 营养器官培养营养器官培养 p教学目的：教学目的：n掌握植物根、茎、叶培养的一般方法和技术，尤掌握植物根、茎、叶培养的一般方法和技术，尤其是茎段培养的方法及其特点，熟悉植物营养器其是茎段培养的方法及其特点，熟悉植物营养器官培养的应用技术。官培养的应用技术。p教学重点：教学重点：n1、根的培养；、根的培养；n2、茎的培养；、茎的培养；n3、叶的培养。、叶的培养。p教学难点：教学难点：n植物营养器官培养的应用。植物营养器官培养的应用。第2页，本讲稿共10页p营养器官培养：营养器官培养：n指指利利用用植植物物的的根根、茎茎、叶叶等等器器官官的的全全部部、
2、部部分分或或器器官官原原基基进进行行的的离离体体培培养养，在在无无菌菌的的人人工工环环境境中中经经过过培培养养发发育育最最终形成幼苗。终形成幼苗。第3页，本讲稿共10页第一节第一节 根的培养根的培养 p一、离体根培养的意义一、离体根培养的意义：n研究根系生理和代谢、器官分化与形态建成。研究根系生理和代谢、器官分化与形态建成。p二、离体根培养的技术二、离体根培养的技术：n1、根无性系的建立、根无性系的建立：改良：改良White培养基培养基p种子消毒种子消毒 发芽获得无菌种苗发芽获得无菌种苗 取取0.5-1.5cm的根的根尖尖 液体培养，液体培养，25黑暗条件黑暗条件 7-10d继代一次，继代一次
3、，取主根增殖取主根增殖n2、离体根培养的试验系统、离体根培养的试验系统：需特殊装置：需特殊装置p由液体培养和固体培养两部分构成，根尖部分处于液体培由液体培养和固体培养两部分构成，根尖部分处于液体培养基中，而根茎部分则插入含有机成分的固体培养基中。养基中，而根茎部分则插入含有机成分的固体培养基中。p三、培养示例：三、培养示例：n番茄、胡萝卜、蝴蝶兰离体根的培养。番茄、胡萝卜、蝴蝶兰离体根的培养。第4页，本讲稿共10页第二节第二节 茎的培养茎的培养 p一、茎培养的意义一、茎培养的意义：n1、用于无性系快速繁殖：、用于无性系快速繁殖：变异率低，增殖快。变异率低，增殖快。n2、用于脱除植物病毒：、用于
4、脱除植物病毒：提高植物产量和品质提高植物产量和品质n3、用于育种：、用于育种：茎尖遗传性稳定，可快速繁殖新品种，茎尖遗传性稳定，可快速繁殖新品种，加速优良品种推广加速优良品种推广 p传统的无性繁殖：繁殖系数一般为传统的无性繁殖：繁殖系数一般为1:10，推广慢；，推广慢；p离体繁殖：不受季节限制，繁殖系数为几十至几百倍，离体繁殖：不受季节限制，繁殖系数为几十至几百倍，推广快。推广快。n4、用于形态建成研究：、用于形态建成研究：取材便利，培养条件可严格取材便利，培养条件可严格控制，且可排除其它部位的影响，实验重复性强。控制，且可排除其它部位的影响，实验重复性强。第5页，本讲稿共10页二、茎培养的方
5、法二、茎培养的方法 p1、建立无菌材料、建立无菌材料：n（1）母体材料的选择）母体材料的选择：p母体的选择：欲脱毒材料的品种典型性；外植体健康程母体的选择：欲脱毒材料的品种典型性；外植体健康程度选择。度选择。p外植体的大小：根据不同植物材料及培养目的而定，快外植体的大小：根据不同植物材料及培养目的而定，快繁一般为繁一般为0.5-1.0cm，脱除病毒则要求，脱除病毒则要求0.01-1mm。n（2）茎尖培养再生植株）茎尖培养再生植株：外植体消毒：外植体消毒 茎尖剥茎尖剥离离 茎尖培养茎尖培养p外植体消毒：外植体消毒：70%酒精酒精+0.1%升汞升汞p茎尖剥离：一般在解剖镜下剥离带两个叶原基的茎尖茎
6、尖剥离：一般在解剖镜下剥离带两个叶原基的茎尖p茎尖培养：常采用茎尖培养：常采用MS基本培养基，配合一定的植物生长基本培养基，配合一定的植物生长调节剂。调节剂。第6页，本讲稿共10页二、茎培养的方法二、茎培养的方法 p2、茎尖的发育方向及其调节、茎尖的发育方向及其调节：n（1）茎尖的发育方向）茎尖的发育方向：p腋芽萌发；腋芽萌发；p脱分化后产生胚状体；脱分化后产生胚状体；p脱分化后直接产生不定器官；脱分化后直接产生不定器官；p脱分化后形成愈伤组织。脱分化后形成愈伤组织。n（2）茎尖发育方向的调节）茎尖发育方向的调节：p外植体大小：微型外植体或分生组织趋向于形成愈伤组外植体大小：微型外植体或分生组
7、织趋向于形成愈伤组织；织；p植物生长调节剂：细胞分裂素与生长素的比值。植物生长调节剂：细胞分裂素与生长素的比值。第7页，本讲稿共10页二、茎培养的方法二、茎培养的方法 p3、生根成苗及移栽、生根成苗及移栽：n（1）生根培养）生根培养：p茎尖培养物的生根是成苗的关键，一般胚状体可直接萌发茎尖培养物的生根是成苗的关键，一般胚状体可直接萌发成苗，但腋芽和不定芽则须转入生根培养基上培养成苗。成苗，但腋芽和不定芽则须转入生根培养基上培养成苗。n（2）促进试管苗生根的措施）促进试管苗生根的措施：p降低基本培养基无机盐的浓度，一般采用降低基本培养基无机盐的浓度，一般采用1/2MS培养培养基或改良基或改良Wh
8、ite基本培养基；基本培养基；p调节生长素浓度，采用调节生长素浓度，采用IBA或或NAA0.1-0.5mg/L可促可促进生根；进生根；p添加吸附剂，加入适量活性炭有利于生根；添加吸附剂，加入适量活性炭有利于生根；p减少琼脂用量，以支持小苗生长为度，可促进生根。减少琼脂用量，以支持小苗生长为度，可促进生根。n（3）生产用苗的培植）生产用苗的培植：p一般试管苗需经过炼苗、假植和定植等过程，以提高其对一般试管苗需经过炼苗、假植和定植等过程，以提高其对自然环境条件的适应性。自然环境条件的适应性。第8页，本讲稿共10页第三节第三节 叶的培养叶的培养p一、离体叶培养的意义一、离体叶培养的意义：n以叶原基为
9、外植体，可研究叶的形态发生、光合作以叶原基为外植体，可研究叶的形态发生、光合作用、叶绿素的形成及遗传转化等。用、叶绿素的形成及遗传转化等。p二、离体叶培养的技术二、离体叶培养的技术：n常用常用Heller培养基，且对光的依赖性强。培养基，且对光的依赖性强。n取幼叶消毒取幼叶消毒 切成切成1cm2左右接种（平置，最好左右接种（平置，最好叶背朝下）叶背朝下）诱导愈伤组织诱导愈伤组织 分化形成胚状分化形成胚状体、茎、叶、根等。体、茎、叶、根等。p三、培养示例：三、培养示例：n香石竹、长寿花、杨树、中华猕猴桃、绿巨人、蝴香石竹、长寿花、杨树、中华猕猴桃、绿巨人、蝴蝶兰叶的培养。蝶兰叶的培养。第9页，本讲稿共10页复习参考题：复习参考题：p1、简述根培养的一般技术及其意义。、简述根培养的一般技术及其意义。p2、简述茎培养的一般技术及其意义。、简述茎培养的一般技术及其意义。p3、促进试管苗生根的措施？、促进试管苗生根的措施？p4、简述叶培养的一般技术及其意义。、简述叶培养的一般技术及其意义。第10页，本讲稿共10页