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1、第03章定量分析样品前处理第1页，本讲稿共132页一、含卤素有机药物的分析一、含卤素有机药物的分析 含卤素有机药物系指药物分子结构中含卤素有机药物系指药物分子结构中所含卤素直接与芳环或脂肪链相连者，而所含卤素直接与芳环或脂肪链相连者，而不包括某些有机药物的卤酸盐或氢卤酸盐不包括某些有机药物的卤酸盐或氢卤酸盐结构特点：结构特点：CX第2页，本讲稿共132页（一）卤原子的活泼性（一）卤原子的活泼性1.1.卤原子与碳原子直接相连，卤原子卤原子与碳原子直接相连，卤原子的活泼性和它直接相连的烃基的结构有的活泼性和它直接相连的烃基的结构有很大关系很大关系第3页，本讲稿共132页（1）乙烯型卤和芳卤）乙烯型
2、卤和芳卤 不活泼不活泼第4页，本讲稿共132页（2）烯丙型卤和苄卤）烯丙型卤和苄卤 活泼活泼（3）卤代烷型）卤代烷型 介于两者之间介于两者之间第5页，本讲稿共132页2.分子中所含卤原子的个数分子中所含卤原子的个数 分子中所含卤原子的个数越多，活分子中所含卤原子的个数越多，活泼性越强，特别是同一碳上含多个卤原泼性越强，特别是同一碳上含多个卤原子或一个苯环上含多个卤原子时，活泼子或一个苯环上含多个卤原子时，活泼性增强更加明显性增强更加明显第6页，本讲稿共132页3.卤素的种类卤素的种类IBrClF常见的含卤素有机药物常见的含卤素有机药物第7页，本讲稿共132页三氯叔丁醇三氯叔丁醇六氯对二甲苯六氯
3、对二甲苯第8页，本讲稿共132页泛影酸泛影酸第9页，本讲稿共132页胆影酸胆影酸第10页，本讲稿共132页碘他拉酸碘他拉酸第11页，本讲稿共132页碘番酸碘番酸第12页，本讲稿共132页碘苯酯碘苯酯I第13页，本讲稿共132页盐酸胺碘酮盐酸胺碘酮第14页，本讲稿共132页诺氟沙星诺氟沙星第15页，本讲稿共132页醋酸氟轻松醋酸氟轻松第16页，本讲稿共132页磺溴酞钠磺溴酞钠第17页，本讲稿共132页（二）含卤素有机药物的分析（二）含卤素有机药物的分析直接回流后测定法直接回流后测定法碱性或酸性还原后测定法碱性或酸性还原后测定法氧瓶燃烧分解后测定法氧瓶燃烧分解后测定法第18页，本讲稿共132页1.
4、直接回流后测定法直接回流后测定法 本法是将含卤素有机药物溶于适当溶剂本法是将含卤素有机药物溶于适当溶剂（如乙醇）中，加入氢氧化钠溶液（或一（如乙醇）中，加入氢氧化钠溶液（或一定量过量的硝酸银滴定液）后，加热回流定量过量的硝酸银滴定液）后，加热回流使其水解，将有机结合的卤素转变为无机使其水解，将有机结合的卤素转变为无机的卤素离子，然后采用银量法（的卤素离子，然后采用银量法（Volhard法）法）测定。测定。第19页，本讲稿共132页 本法适用于含卤素有机药物结构中本法适用于含卤素有机药物结构中卤素原子结合不牢固的药物（如卤原子卤素原子结合不牢固的药物（如卤原子和脂肪碳原子相连者）。和脂肪碳原子相
5、连者）。第20页，本讲稿共132页 原原理理 三三氯氯叔叔丁丁醇醇在在氢氢氧氧化化钠钠溶溶液液中中加加热热回回流流水水解解，氯氯元元素素全全部部转转变变成成氯氯化化钠钠，然然后后用用剩剩余余滴滴定定法法，即即于于水水解解液液中中加加硝硝酸酸酸酸化化，再再加加入入定定量量过过量量的的硝硝酸酸银银滴滴定定液液，使使Cl-生生成成AgCl沉沉淀淀，过过量量的的硝硝酸酸银银，以以Fe3+为指示剂，用硫氰酸铵液回滴定。为指示剂，用硫氰酸铵液回滴定。例三氯叔丁醇的测定例三氯叔丁醇的测定 ChP（2000）第21页，本讲稿共132页CCl3-C(CH3)2-OH+4NaOH 回流回流(CH3)2-CO+3N
6、aCl+HCOONa+2H2ONaCl+AgNO3 AgCl+NaNO3 AgNO3+NH4SCNAgSCN +NH4NO3（淡棕红色）（淡棕红色）(Ksp=1.561010)(Ksp=1.010-12)Fe3+SCN Fe(SCN)2+第22页，本讲稿共132页测定方法测定方法 取本品约取本品约0.1g，精密称定，精密称定，加乙醇加乙醇5ml溶解后，加溶解后，加20%氢氧化钠溶液氢氧化钠溶液5ml，加热，加热回流回流15min，放冷至室温，加水放冷至室温，加水20ml与硝酸与硝酸5ml，精密加硝酸银滴定液，精密加硝酸银滴定液(0.1mol/L)30ml，再加，再加邻苯二甲酸二丁酯邻苯二甲酸二
7、丁酯5ml，密塞，强力振，密塞，强力振摇后，加硫酸铁胺指示液摇后，加硫酸铁胺指示液2ml，用硫氰酸胺滴，用硫氰酸胺滴定液定液(0.1mol/L)滴定，并将滴定的结果用空白滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每试验校正。每1ml硝酸银滴定液硝酸银滴定液(0.1mol/L)相相当于当于6.216mg的的C4H7Cl3O1/2H2O。第23页，本讲稿共132页反应摩尔比为13T滴定度，每1ml滴定液相当于被测组分的mg数c滴定液浓度，mol/LM被测物的摩尔质量，g/moln1mol样品消耗滴定液的摩尔数，常用反应摩尔比体现，即反应摩尔比为1n第24页，本讲稿共132页 2.碱性或酸性还原后测定法碱
8、性或酸性还原后测定法 本法是将含卤素有机药物在碱性或酸本法是将含卤素有机药物在碱性或酸性下，加还原剂（如锌粉）加热回流，性下，加还原剂（如锌粉）加热回流，药物产生还原裂解反应，使有机结合的药物产生还原裂解反应，使有机结合的卤素转变为无机的卤素离子，然后采用卤素转变为无机的卤素离子，然后采用银量法（银量法（Fajans法）测定。法）测定。第25页，本讲稿共132页 本法适用于测定结构中碘与苯环本法适用于测定结构中碘与苯环直接相连，且一个苯环上含多个碘原直接相连，且一个苯环上含多个碘原子的含卤素有机药物。子的含卤素有机药物。第26页，本讲稿共132页 （1）碱性还原后测定法碱性还原后测定法例例 泛
9、影酸的测定泛影酸的测定 ChP(2000)取本品约取本品约0.4g，精密称定，精密称定，加氢氧化钠溶液加氢氧化钠溶液30ml与锌粉与锌粉1.0g，加热回流，加热回流30min，放冷，冷凝管放冷，冷凝管用少量水洗涤，滤过，烧瓶与滤器用水洗涤用少量水洗涤，滤过，烧瓶与滤器用水洗涤3次，每次，每次次15ml，洗液与滤液合并，加冰醋酸，洗液与滤液合并，加冰醋酸5ml与曙红钠与曙红钠指示液指示液5滴，用硝酸银滴定液滴，用硝酸银滴定液(0.1mol/L)滴定。每滴定。每1ml硝酸银滴定液硝酸银滴定液(0.1mol/L)相当于相当于20.46mg的的C11H9 I 3N2O4。第27页，本讲稿共132页CO
10、OHINHCOCH3IIH3COCHN+11NaOH +Zn回流回流COONaN H2 H2N+3NaI +2CH3COONa+2Na2ZnO2 +H2O第28页，本讲稿共132页 USP(24)、BP（1998）ChP(2000)收收载载的的胆胆影影酸酸、碘碘番番酸酸、胆胆影影葡葡胺胺、泛泛影影葡葡胺胺、碘碘他他拉拉酸酸等等均均采采用同法测定。用同法测定。第29页，本讲稿共132页 （2）酸性还原后测定法酸性还原后测定法 取本品的干燥品约取本品的干燥品约0.4g，精密称定，精密称定，加锌粉加锌粉1g及及冰醋酸冰醋酸10ml，加热回流，加热回流30min，放冷，冷凝管用水放冷，冷凝管用水30m
11、l洗涤，用脱脂棉过滤，烧瓶与脱脂棉用水洗涤洗涤，用脱脂棉过滤，烧瓶与脱脂棉用水洗涤2次，每次次，每次20ml，洗液与滤液合并，加四溴酚酞乙酯，洗液与滤液合并，加四溴酚酞乙酯指示液指示液1ml，用硝酸银滴定液，用硝酸银滴定液(0.1mol/L)滴定。终滴定。终点时黄色沉淀变为绿色。每点时黄色沉淀变为绿色。每1ml硝酸银滴定液硝酸银滴定液(0.1mol/L)相当于相当于19.031mg的的C11H12 I 3NO2。例例 碘番酸的测定碘番酸的测定 JP(13)第30页，本讲稿共132页3.氧瓶燃烧分解后测定法氧瓶燃烧分解后测定法 （1）原理）原理 氧瓶燃烧法：氧瓶燃烧法：将有机药物放入将有机药物放
12、入充满氧气充满氧气的的密闭密闭燃烧瓶中进行燃烧瓶中进行燃烧燃烧，并将燃烧所产生的欲，并将燃烧所产生的欲测物质测物质吸收吸收于适当的吸收液中，然后根据欲于适当的吸收液中，然后根据欲测物质的性质，采用适宜的分析方法进行测物质的性质，采用适宜的分析方法进行鉴别、检查或含量测定鉴别、检查或含量测定第31页，本讲稿共132页 适用于含卤素、硫、氮、硒等有机适用于含卤素、硫、氮、硒等有机药物的分析药物的分析第32页，本讲稿共132页 本法特点是简便、快速、破坏完全，本法特点是简便、快速、破坏完全，尤其适用于微量样品的分析尤其适用于微量样品的分析第33页，本讲稿共132页 （2）仪器与材料仪器与材料 仪器装
13、置仪器装置 燃烧瓶为燃烧瓶为500、1000或或2000ml无色、磨口、厚壁、无色、磨口、厚壁、硬质玻璃锥型瓶；瓶塞硬质玻璃锥型瓶；瓶塞空空心，底部熔封铂丝一根，下心，底部熔封铂丝一根，下端呈螺旋状或网状端呈螺旋状或网状第34页，本讲稿共132页称样用材料及称样称样用材料及称样 A.固体样品固体样品 无灰滤纸无灰滤纸 B.液体样品液体样品 纸袋纸袋 C.软膏类样品：将适量样品置不含被软膏类样品：将适量样品置不含被测成分的蜡油纸中包裹严密，外层再用测成分的蜡油纸中包裹严密，外层再用无灰滤纸包裹无灰滤纸包裹第35页，本讲稿共132页第36页，本讲稿共132页吸收液吸收液 A.作用：吸收液的作用是将
14、样品经作用：吸收液的作用是将样品经燃烧分解所产生的各种价态的卤素、硫、燃烧分解所产生的各种价态的卤素、硫、氮、硒等，定量地吸收并转变为一定的氮、硒等，定量地吸收并转变为一定的便于测定的价态便于测定的价态氧气氧气第37页，本讲稿共132页B.吸收液的选择吸收液的选择氟氟 水水 氯氯 NaOH溶液溶液溴溴 H2O2-NaOH NaOH-硫酸肼饱和溶液硫酸肼饱和溶液碘碘 NaOH硫酸肼饱和溶液硫酸肼饱和溶液硫硫 NaOH或或H2O2 硒硒 硝酸溶液硝酸溶液第38页，本讲稿共132页（3）操作方法）操作方法燃烧瓶燃烧前的准备燃烧瓶燃烧前的准备 用洗液洗净后，按各药品项下的规定加用洗液洗净后，按各药品项
15、下的规定加入吸收液，将瓶口用水湿润，小心急速地通入吸收液，将瓶口用水湿润，小心急速地通入氧气入氧气1min，立即用表面皿覆盖瓶口。，立即用表面皿覆盖瓶口。样品的准备样品的准备 取样品适量，精密称定后按规定方法包裹，取样品适量，精密称定后按规定方法包裹，固定于铂丝下端的网内或螺旋处。固定于铂丝下端的网内或螺旋处。第39页，本讲稿共132页样品的燃烧样品的燃烧 点燃包有供试品的滤纸尾部，迅速放入点燃包有供试品的滤纸尾部，迅速放入燃烧瓶中，按紧瓶塞，加水少量封闭瓶口，燃烧瓶中，按紧瓶塞，加水少量封闭瓶口，俟燃烧完毕（应无黑色碎片），充分振摇，俟燃烧完毕（应无黑色碎片），充分振摇，使生成的烟雾完全吸入
16、吸收液中，放置使生成的烟雾完全吸入吸收液中，放置15min，用水少量冲洗瓶塞及铂丝，合并洗，用水少量冲洗瓶塞及铂丝，合并洗液及吸收液，同法另做空白试验。然后按各液及吸收液，同法另做空白试验。然后按各药品项下规定的方法进行鉴别、检查或含量药品项下规定的方法进行鉴别、检查或含量测定。测定。第40页，本讲稿共132页根根据据被被燃燃烧烧分分解解的的样样品品量量选选用用适适宜宜大小的燃烧瓶。大小的燃烧瓶。（4）注意事项注意事项 ChP（2000）规规定定的的燃燃烧烧瓶瓶体体积积为为500、1000或或2000ml三三种种，采采用用常常量量或半微量分析或半微量分析第41页，本讲稿共132页 待分解样品量
17、待分解样品量 燃烧瓶的体积燃烧瓶的体积 35mg（微量分析）（微量分析）150250ml 2030mg（半微量分析）（半微量分析）300500ml 5060mg 1000ml 0.60.7g或更多或更多 2000ml或特殊结或特殊结构的燃烧瓶构的燃烧瓶第42页，本讲稿共132页 正正确确选选用用燃燃烧烧瓶瓶的的目目的的在在于于：样样品品能能在在足足够够的的氧氧气气中中燃燃烧烧分分解解完完全全；有有利利于于将将燃燃烧烧分分解解产产物物较较快快地地吸吸收收到到吸收液中；防止爆炸的可能性。吸收液中；防止爆炸的可能性。第43页，本讲稿共132页测定含氟有机药物时，用石英制测定含氟有机药物时，用石英制燃
18、烧瓶燃烧瓶铂丝燃烧时起催化作用铂丝燃烧时起催化作用应同时做空白试验应同时做空白试验燃烧时要注意防爆燃烧时要注意防爆燃烧要完全燃烧要完全燃烧产生的烟雾完全被吸收燃烧产生的烟雾完全被吸收第44页，本讲稿共132页（5）应用）应用例例 磺溴酞钠的含量测定磺溴酞钠的含量测定 ChP(2000)第45页，本讲稿共132页燃烧分解燃烧分解O2HBr+S2-+SO4+HBr+S2-NaBr+Na2SO4+H2O NaOH,H2O2第46页，本讲稿共132页溴溴 取本品约取本品约0.2g，照氧瓶燃烧法（附录，照氧瓶燃烧法（附录 C）进行有机破坏，选用进行有机破坏，选用1000ml燃烧瓶，以燃烧瓶，以0.4%氢
19、氧氢氧化钠溶液化钠溶液10ml，浓过氧化氢溶液，浓过氧化氢溶液0.5ml与水与水10ml作为吸收液，俟生成的烟雾完全吸入吸收液后，作为吸收液，俟生成的烟雾完全吸入吸收液后，用水稀释至用水稀释至100ml，煮沸，煮沸5分钟，放冷，加稀硝酸分钟，放冷，加稀硝酸使成酸性，精密加硝酸银滴定液（使成酸性，精密加硝酸银滴定液（0.1mol/l）20ml，摇匀，再加硫酸铁胺指示液，摇匀，再加硫酸铁胺指示液2mL，用硫氰酸胺，用硫氰酸胺滴定液滴定液(0.1mol/L)滴定，并将滴定的结果用空白滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每试验校正。每1mL硝酸银滴定液硝酸银滴定液(0.1mol/L)相当相当于于7.9
20、90mg的溴的溴(Br)。第47页，本讲稿共132页例例 碘苯酯的含量测定碘苯酯的含量测定 ChP（2000）原原理理 碘碘苯苯酯酯系系有有机机碘碘化化物物，用用氧氧瓶瓶燃燃烧烧分分解解，转转变变为为碘碘化化物物，继继而而氧氧化化为为游游离离的的碘碘，并并被被定定量量地地吸吸收收于于吸吸收收液液中中，和和氢氢氧氧化化钠钠反反应应，生生成成碘碘化化物物与与碘碘酸酸盐盐，加加入入溴溴-醋醋酸酸溶溶液液，使使全全部部转转变变为为碘碘酸酸盐盐，过过量量的的溴溴以以甲甲酸酸及及通通空空气气去去除除。加加入入碘碘化化钾钾，使使与与碘碘酸酸盐盐反反应应析析出出游游离离碘碘，用用硫硫代代硫硫酸酸钠钠液液滴滴定
21、定，碘碘与与淀淀粉粉结结合合所所显显的的蓝蓝色色消消失失即即为为终终点点 第48页，本讲稿共132页 取取本本品品约约20mg，精精密密称称定定，照照氧氧瓶瓶燃燃烧烧法法进进行行有有机机破破坏坏，用用氢氢氧氧化化钠钠试试液液2ml与与水水l0ml为为吸吸收收液液，待待吸吸收收完完全全后后，加加溴溴醋醋酸酸溶溶液液(取取醋醋酸酸钾钾10g，加加冰冰醋醋酸酸适适量量使使溶溶解解，加加溴溴0.4ml，再再加加冰冰醋醋酸酸使使成成1000m1)l0ml，密密塞塞，振振摇摇，放放置置数数分分钟钟，加加甲甲酸酸约约lml，用用水水洗洗涤涤瓶瓶口口，并并通通入入空空气气流流约约35min以以除除去去剩剩余余
22、的的溴溴蒸蒸气气，加碘化钾加碘化钾2g，密塞，摇匀，用硫代硫酸钠滴定液，密塞，摇匀，用硫代硫酸钠滴定液(0.02Mol/L)滴滴定定，至至近近终终点点时时，加加淀淀粉粉指指示示液液，继继续续滴滴定定至至蓝蓝色色消消失失，并并将将滴滴定定的的结结果果用用空空白白试试验验校校正正。每每 lml的的 硫硫 代代 硫硫 酸酸 钠钠 滴滴 定定 液液(0.02mol/L)相相 当当 于于1.388mg的的C19H29IO2。第49页，本讲稿共132页滴定度的计算滴定度的计算 放大反应放大反应2mol碘苯酯碘苯酯1molI21molI21molNaIO+1molNaI1molNaIO1/3molNaIO3
23、+2/3molNaImolNaI+Br2molNaIO3即即2mol碘苯酯碘苯酯2molNaIO3第50页，本讲稿共132页2mol NaIO3+10I-6molI2即即2mol碘苯酯碘苯酯1molI2 6molI212molI12molNa2S2O3反应摩尔比为反应摩尔比为1 6第51页，本讲稿共132页98：140.氧瓶燃烧法中的装置有A.磨口硬质玻璃锥形瓶B.磨口软质玻璃锥形瓶C.铂丝D.铁丝E.铝丝第52页，本讲稿共132页96：133（99x：138）选择氧瓶燃烧法所必备的实验物品A.磨口硬质玻璃锥形瓶B.铂丝C.普通滤纸D.氢气 E.无灰滤纸第53页，本讲稿共132页99：76氧瓶
24、燃烧法测定含氯有机药物时所用的吸收液多数为A.H2O2溶液B.H2O2NaOH溶液C.NaOH溶液D硫酸肼饱和液E.NaOH硫酸肼饱和液第54页，本讲稿共132页99：134.氧瓶燃烧法可用于A.含卤素有机药物的含量测定B.醚类药物的含量测定C.检查甾体激素类药物中的氟D.检查甾体激素类药物中的硒E.芳酸类药物的含量测定第55页，本讲稿共132页二、含金属有机药物的分析二、含金属有机药物的分析 含金属的有机药物：含金属的有机药物：金属原子不与碳原金属原子不与碳原子直接相连，通常为有机酸及酚的金属盐子直接相连，通常为有机酸及酚的金属盐或配位化合物或配位化合物 如如酒石酸锑钾、葡萄糖酸锑钠、富酒石
25、酸锑钾、葡萄糖酸锑钠、富马酸亚铁马酸亚铁第56页，本讲稿共132页 有机金属药物有机金属药物：金属原子直接与碳原：金属原子直接与碳原子以共价键相连，结合比较牢固子以共价键相连，结合比较牢固 如如卡巴胂、醋酸苯汞、汞撒利卡巴胂、醋酸苯汞、汞撒利第57页，本讲稿共132页酒石酸锑钾酒石酸锑钾第58页，本讲稿共132页硬脂酸镁硬脂酸镁富马酸亚铁富马酸亚铁第59页，本讲稿共132页葡萄糖酸锑钠葡萄糖酸锑钠第60页，本讲稿共132页卡巴胂卡巴胂醋酸苯汞醋酸苯汞第61页，本讲稿共132页汞撒利汞撒利第62页，本讲稿共132页含金属有机药物定量分析前的处含金属有机药物定量分析前的处理方法理方法 不经有机破坏
26、的分析方法不经有机破坏的分析方法 直接测定法直接测定法;经水解后测定法经水解后测定法;经还原经还原-汞齐化后测定法汞齐化后测定法 经有机破坏的分析方法经有机破坏的分析方法 湿法破坏湿法破坏(硝酸硝酸-高氯酸法高氯酸法;硝酸硝酸-硫酸硫酸法法;硫酸硫酸-硫酸盐法等硫酸盐法等););干法破坏干法破坏第63页，本讲稿共132页（一）不经有机破坏的分析方法（一）不经有机破坏的分析方法1.直接测定法直接测定法 适用于金属原子不直接与碳原子相连适用于金属原子不直接与碳原子相连的含金属有机药物或某些的含金属有机药物或某些CM键结合不键结合不牢固的有机金属药物。牢固的有机金属药物。第64页，本讲稿共132页富
27、马酸亚铁的含量测定富马酸亚铁的含量测定 ChP (2000)取本品约取本品约0.3g，精密称定，精密称定，加稀硫酸加稀硫酸 15ml，加热溶解后，加热溶解后，放冷，加新沸过的放冷，加新沸过的冷水冷水50ml与邻二氮菲指示液与邻二氮菲指示液2 滴，立即用滴，立即用硫酸铈滴定液硫酸铈滴定液(0.1mol/L)滴定，并将滴定滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每的结果用空白试验校正。每1ml硫酸铈滴硫酸铈滴定液定液(0.1mol/L)相当于相当于16.99mg 。第65页，本讲稿共132页原理原理Fe2+Ce4+Ce3+Fe2+Fe2+e-Fe3+红色红色浅蓝色浅蓝色OOCCHOHCCO+Fe2+第
28、66页，本讲稿共132页 例例 葡萄糖酸葡萄糖酸锑钠锑钠的的测测定定 ChP（2000）取取本本品品约约0.3g，精精密密称称定定，置置具具塞塞锥锥形形瓶瓶中中，加加水水100ml、盐盐酸酸15ml与与碘碘化化钾钾试试液液10ml，密密塞塞、振振摇摇后后，在在暗暗处处静静置置10min，用用硫硫代代硫硫酸酸钠钠滴滴定定液液(0.1mol/L)滴滴定定，至至近近终终点点时时，加加淀淀粉粉指指示示液液，继继续续滴滴定定至至蓝蓝色色消消失失，并并将将滴滴定定的的结结果果用用空空白白试试验验校校正正。每每lml的的硫硫代代硫硫酸酸钠滴定液钠滴定液(0.1mol/L)相当于相当于6.088mg的的Sb。
29、第67页，本讲稿共132页第68页，本讲稿共132页如枸如枸橼橼酸酸铁铵铁铵的的测测定定 ChP（2000）取取本本品品约约0.5g，精精密密称称定定，置置具具塞塞锥锥形形瓶瓶中中。加加水水15ml溶溶解解后后，加加硫硫酸酸lml，加加热热至至溶溶液液由由暗暗棕棕色色变变成成淡淡黄黄色色，放放冷冷至至约约15，滴滴加加高高锰锰酸酸钾钾试试液液至至溶溶液液显显粉粉红红色色并并持持续续5s，加加盐盐酸酸15ml与与碘碘化化钾钾试试液液15ml，密密塞塞，静静置置3min，加加水水50ml稀稀释释后后，用用硫硫代代硫硫酸酸钠钠滴滴定定液液(0.1mol/L)滴滴定定至至近近终终点点时时，加加淀淀粉粉
30、指指示示液液2ml，继继续续滴滴定定至至蓝蓝色色消消失失，并并将将滴滴定定的的结结果果用用空空白白试试验验校校正正。每每lml的的硫硫代代硫硫酸酸钠钠滴滴定定液液(0.1mol/L)相当于相当于5.585mg的的Fe。第69页，本讲稿共132页2.用硫酸水解后测定法用硫酸水解后测定法例例 硬脂酸镁的测定硬脂酸镁的测定 ChP（2000）取本品约取本品约0.1g，精密称定，精密加硫酸滴定，精密称定，精密加硫酸滴定液液(0.05mol/L)50ml，煮沸至油滴澄清，继续，煮沸至油滴澄清，继续加热加热10min，放冷至室温，加甲基橙指示液，放冷至室温，加甲基橙指示液12滴，用氢氧化钠滴定液滴，用氢氧
31、化钠滴定液(0.1mol/L)滴定。每滴定。每1ml硫酸滴定液硫酸滴定液(0.05mol/L)相当于相当于2.016mg的的MgO。第70页，本讲稿共132页原理：原理：Mg(C17 H35COO)2+H2SO4 MgSO4 +2 C17 H35COOH2NaOH+H2SO4 Na2SO4 +2H2O 第71页，本讲稿共132页 某些含汞有机药物，由于某些含汞有机药物，由于CHg键键不牢固，在水溶液（冰浴）中滴加硫不牢固，在水溶液（冰浴）中滴加硫酸使其水解，将有机汞定量转化成硫酸使其水解，将有机汞定量转化成硫酸汞，再用硫氰酸铵滴定液滴定。酸汞，再用硫氰酸铵滴定液滴定。第72页，本讲稿共132页
32、例例 汞撒利的测定汞撒利的测定 取本品约取本品约0.5g，精密称定，加蒸馏水，精密称定，加蒸馏水10ml，置冰浴中，滴加硫酸，置冰浴中，滴加硫酸10ml，随滴随，随滴随搅拌，至产生的沉淀复溶解，再加蒸馏水搅拌，至产生的沉淀复溶解，再加蒸馏水50ml，硫酸铁铵指示液，硫酸铁铵指示液2ml，用硫氰酸铵滴，用硫氰酸铵滴定液定液(0.1mol/L)滴定。每滴定。每1ml硫氰酸铵滴定硫氰酸铵滴定液液(0.1mol/L)相当于相当于25.29mg的汞撒利的汞撒利。第73页，本讲稿共132页3.经还原经还原-汞齐化后测定法汞齐化后测定法 本本法法系系在在酸酸性性或或碱碱性性溶溶液液中中，加加锌锌粉粉、加加热
33、热回回流流，将将药药物物中中有有机机结结合合的的汞汞还还原原析析出出金金属属汞汞，并并与与过过量量的的锌锌生生成成锌锌汞汞齐齐。将将锌锌汞汞齐齐溶溶于于硝硝酸酸后后，选选用用适适当当的的方方法法测测定定汞汞的的含含量量，并并换换算算成成含含汞汞有有机药物的含量。机药物的含量。第74页，本讲稿共132页如醋酸苯汞的含量如醋酸苯汞的含量测测定定 取取本本品品约约0.5g，精精密密称称定定，置置100ml烧烧瓶瓶中中，加加水水15ml，甲甲酸酸5ml与与锌锌粉粉1g，附附回回流流冷冷凝凝器器，煮煮沸沸30min。放放冷冷，滤滤过过，滤滤纸纸和和锌锌汞汞齐齐用用蒸蒸馏馏水水洗洗涤涤至至洗洗液液对对石石
34、蕊蕊试试纸纸不不显显酸酸性性反反应应。将将锌锌汞汞齐齐溶溶解解在在稀稀硝硝酸酸(1 2)40ml中中，置置蒸蒸气气浴浴上上加加热热3min，加加尿尿素素0.5g和和足足够够的的高高锰锰酸酸钾钾试试液液至至显显桃桃红红色色。冷冷却却后后，加加过过氧氧化化氢氢溶溶液液脱脱色色，加加硫硫酸酸铁铁铵铵指指示示剂剂lml，用用硫硫氰氰酸酸铵铵滴滴定定液液(0.1mol/L)滴滴定定，即即 得得。每每 1ml硫硫 氰氰 酸酸 铵铵 液液(0.1mol/1)相相 当当 于于16.84mg的的C8H8O2Hg。第75页，本讲稿共132页（二）经有机破坏的分析方法（二）经有机破坏的分析方法 适用于金属原子与碳原
35、子结合牢固的适用于金属原子与碳原子结合牢固的有机金属药物。有机金属药物。第76页，本讲稿共132页1.湿法破坏湿法破坏 （1 1）硝酸硝酸-高氯酸法高氯酸法 本法适用于血、尿、组织等生物样品的本法适用于血、尿、组织等生物样品的破坏，有机金属药物经破坏后，得到的无机破坏，有机金属药物经破坏后，得到的无机金属离子一般呈高价态。金属离子一般呈高价态。本法不能用于含氮杂环药物的破坏本法不能用于含氮杂环药物的破坏第77页，本讲稿共132页 （2）硝酸硝酸-硫酸法硫酸法 本法适用于大多数有机物质的破坏，破本法适用于大多数有机物质的破坏，破坏得到的无机金属离子均为高价态。坏得到的无机金属离子均为高价态。本法
36、不能用于含碱土金属有机药物的本法不能用于含碱土金属有机药物的破坏破坏第78页，本讲稿共132页 （3）硫酸硫酸-硫酸盐法硫酸盐法 本法是往样品中加入浓硫酸作氧化剂，本法是往样品中加入浓硫酸作氧化剂，加入硫酸盐提高硫酸的沸点，增强硫酸的加入硫酸盐提高硫酸的沸点，增强硫酸的氧化破坏能力，且防止硫酸的分解损失。氧化破坏能力，且防止硫酸的分解损失。本法常用于含砷或锑有机药物的破坏，破本法常用于含砷或锑有机药物的破坏，破坏得到的无机金属离子多为低价态。坏得到的无机金属离子多为低价态。第79页，本讲稿共132页 （4）其它湿法其它湿法 硝酸硝酸硫酸硫酸高氯酸法高氯酸法 硫酸硫酸氧化剂法（过氧化氢法、高锰酸
37、氧化剂法（过氧化氢法、高锰酸钾）钾）破坏后，金属呈高价态破坏后，金属呈高价态第80页，本讲稿共132页2.干法破坏干法破坏 适用于湿法不易破坏完全的有机适用于湿法不易破坏完全的有机物以及某些不能用硫酸进行破坏的物以及某些不能用硫酸进行破坏的有机药物。不适用于含易挥发性金有机药物。不适用于含易挥发性金属（如汞、砷等）有机药物的破坏属（如汞、砷等）有机药物的破坏第81页，本讲稿共132页注意事项：注意事项：（1）加热或灼烧时，应控制温度在）加热或灼烧时，应控制温度在420以下以下（2）一定要灰化完全）一定要灰化完全（3）经本法破坏后，所得灰分往往不易）经本法破坏后，所得灰分往往不易溶解，但不要轻易
38、弃去溶解，但不要轻易弃去第82页，本讲稿共132页第二节 药品质量标准分析方法验证 一、目的 证明所采用的分析方法适合于相应的检测要求，方法验证过程和结果均应记载在药品标准起草和修订说明中。第83页，本讲稿共132页二、用途（一）药品质量标准起草时，分析方法需经验证。（二）药物合成方法变更、制剂的组分变更、原分析方法进行修订时，分析方法需经验证。第84页，本讲稿共132页三、需验证的分析项目1.鉴别试验；2.杂质定量或限度检查；3.原料或制剂中有效成分含量测定；4.制剂中其它成分（降解产物、防腐剂等）的测定；5.溶出度、释放度等功能检查中的溶出量等的测试方法。第85页，本讲稿共132页 验证内
39、容有：准确度、精密度（重验证内容有：准确度、精密度（重复性、中间精密度和重现性）、专属性、复性、中间精密度和重现性）、专属性、检测限、定量限、线性、范围和耐用性检测限、定量限、线性、范围和耐用性四、验证内容 第86页，本讲稿共132页 （一）（一）准确度（准确度（accuracy）准确度是指用该方法测定的结果与真实准确度是指用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度，用百分回收率表值或参考值接近的程度，用百分回收率表示。示。测定回收率R（recovery）的具体方法可采用“回收试验法”和“加样回收试验法”。第87页，本讲稿共132页 回收试验 空白+已知量A的对照品（或标准品）测定，测定值为
40、M第88页，本讲稿共132页 加样回收试验 已准确测定药物含量P的真实样品+已知量A的对照品（或标准品）测定，测定值为M第89页，本讲稿共132页 数据要求 规定的范围内，至少用9次测定结果评价，如制备三个不同浓度样品各测三次。第90页，本讲稿共132页1.含量测定方法的准确度含量测定方法的准确度 原料药可原料药可用已知纯度的对照品或样品用已知纯度的对照品或样品进行测定，或用本法所得结果与已建立准进行测定，或用本法所得结果与已建立准确度的另一方法测定的结果进行比较。确度的另一方法测定的结果进行比较。第91页，本讲稿共132页 制制剂剂可可用用含含己己知知量量被被测测物物的的各各组组分分混混合合
41、物物进进行行测测定定，即即采采用用在在空空白白辅辅料料中中加加入入原料药对照品的方法。原料药对照品的方法。如如不不能能得得到到制制剂剂的的全全部部组组分分，可可向向制制剂剂中中加加入入已已知知量量的的被被测测物物进进行行测测定定，或或与与另另一一个个已已建建立立准准确确度度的的方方法法比比较较结结果。果。第92页，本讲稿共132页 中药分析的准确度一般用加样回收中药分析的准确度一般用加样回收试验衡量。中药回收率一般要求在试验衡量。中药回收率一般要求在95105%范围内，有些方法操作步骤繁多范围内，有些方法操作步骤繁多时，可要求在时，可要求在90110%范围内。范围内。RSD一般在一般在3%以内
42、。以内。第93页，本讲稿共132页2杂质定量测定的准确度杂质定量测定的准确度 可可向向原原料料药药或或制制剂剂中中加加入入已已知知量量杂杂质质进进行行测测定定。如如果果不不能能得得到到杂杂质质或或降降解解产产物物，可可用用本本法法测测定定结结果果与与另另一一成成熟熟的的方法进行比较。方法进行比较。第94页，本讲稿共132页 （二）（二）精密度（精密度（precision）精密度是精密度是指在规定条件下，同一个均匀样品，经多指在规定条件下，同一个均匀样品，经多次取样测定所得结果之间的接近程度。用次取样测定所得结果之间的接近程度。用偏差（偏差（d）、标准偏差）、标准偏差(SD)、相对标准偏、相对标
43、准偏差差(RSD)（变异系数，（变异系数，CV）表示。）表示。第95页，本讲稿共132页偏差（d）：测量值与平均值之差标准（偏）差（SD或S）第96页，本讲稿共132页相对标准（偏）差（RSD），也称变异系数（CV）第97页，本讲稿共132页 1.重复性重复性 在相同条件下，由同一个分在相同条件下，由同一个分析人员测定所得结果的精密度；在规定的析人员测定所得结果的精密度；在规定的范围内，至少用范围内，至少用9次测定结果评价，如制备次测定结果评价，如制备三个不同浓度样品各测三次或把被测物浓三个不同浓度样品各测三次或把被测物浓度当作度当作100%，至少测，至少测6次进行评价。次进行评价。第98页，
44、本讲稿共132页 2.中间精密度中间精密度 同一实验室，不同时间由同一实验室，不同时间由不同分析人员用不同设备所得结果的精密度。不同分析人员用不同设备所得结果的精密度。考察随机变动因素的影响。变动因素为不同考察随机变动因素的影响。变动因素为不同日期、不同分析人员、不同设备日期、不同分析人员、不同设备第99页，本讲稿共132页 3.重现性重现性 不同实验室，不同分析人不同实验室，不同分析人员测定结果的精密度。当分析方法将被员测定结果的精密度。当分析方法将被法定标准采用时，应进行重现性试验。法定标准采用时，应进行重现性试验。如建立药典分析方法时通过协同检验得如建立药典分析方法时通过协同检验得出重现
45、性结果，协同检验的过程、重现出重现性结果，协同检验的过程、重现性结果均应记载在起草说明中。性结果均应记载在起草说明中。第100页，本讲稿共132页（三）（三）检测限（检测限（limit of detection，LOD）检测限系指试样中被测物能被检检测限系指试样中被测物能被检测出的最低量。是限度试验参数，无测出的最低量。是限度试验参数，无需定量测定。常用需定量测定。常用%、ppm、ppb表示。表示。第101页，本讲稿共132页1非仪器分析目视法非仪器分析目视法 用用已已知知浓浓度度的的被被测测物物，试试验验出出能能被被可可靠地检测出的最低浓度或量。靠地检测出的最低浓度或量。第102页，本讲稿共
46、132页 2信噪比法信噪比法 用于能显示基线噪音的分析方法（仪用于能显示基线噪音的分析方法（仪器分析方法），是把已知低浓度试样测器分析方法），是把已知低浓度试样测出的信号与空白样品测出的信号进行比出的信号与空白样品测出的信号进行比较，算出能被可靠地检测出的最低浓度较，算出能被可靠地检测出的最低浓度或量。一般以信噪比（或量。一般以信噪比（S/N）3 1或或2 1时时的相应浓度或注入仪器的量确定检测限。的相应浓度或注入仪器的量确定检测限。第103页，本讲稿共132页3数据要求数据要求 应附测试图谱，说明测试过程和检测应附测试图谱，说明测试过程和检测限结果。限结果。第104页，本讲稿共132页（四）
47、定量限（1imit of quantitation，LOQ）指样品中被测物能被定量测定的最低量，结果应具有一定准确度和精密度。常用%、ppm、ppb表示。第105页，本讲稿共132页 常用信噪比法确定定量限，一般以信噪比（S/N）为101时相应的浓度或注入仪器的量进行确定，也可用仪器所测空白背景响应标准差（SD）的10倍为估计值，再经试验确定。第106页，本讲稿共132页 （五）专属性（五）专属性（specificity）指有其他指有其他成分（杂质、降解物、辅料等）可能存成分（杂质、降解物、辅料等）可能存在情况下采用的方法能准确测定出被测在情况下采用的方法能准确测定出被测物的特性，能反映该方法
48、在有共存物时物的特性，能反映该方法在有共存物时对供试物准确而专属的测定能力。是指对供试物准确而专属的测定能力。是指该法用于复杂样品分析时相互干扰程度该法用于复杂样品分析时相互干扰程度的度量。的度量。第107页，本讲稿共132页（六）（六）线性线性 在设计的范围内，测试结果与试样中被在设计的范围内，测试结果与试样中被测物浓度直接呈正比关系的程度。测物浓度直接呈正比关系的程度。数据要求：应列出回归方程、相关系数据要求：应列出回归方程、相关系数和线性图。数和线性图。第108页，本讲稿共132页（七）范围（七）范围 指达到一定精密度、准确度和线性的指达到一定精密度、准确度和线性的条件下，测试方法适用的
49、高低限浓度或量条件下，测试方法适用的高低限浓度或量的区间。的区间。第109页，本讲稿共132页（八）（八）耐用性耐用性 指测定条件稍有变动时，指测定条件稍有变动时，结果不受影响的承受程度，为常规检验结果不受影响的承受程度，为常规检验提供依据。是衡量实验室和工作人员之提供依据。是衡量实验室和工作人员之间在正常情况下实验结果重现性的尺度。间在正常情况下实验结果重现性的尺度。（九）应用（九）应用 1.鉴鉴别别试试验验除除专专属属性性、耐耐用用性性外外，其其它它都不要求。都不要求。第110页，本讲稿共132页 2.杂质的限量检查除专属性、检测限、杂质的限量检查除专属性、检测限、耐用性外，其它都不要求。
50、杂质的定量测耐用性外，其它都不要求。杂质的定量测定除检测限外，其它都要求。定除检测限外，其它都要求。3.含量测定及溶出量测定除检测限、含量测定及溶出量测定除检测限、定量限外，其它都要求。定量限外，其它都要求。第111页，本讲稿共132页（十）各种含量测定方法对效能指标的（十）各种含量测定方法对效能指标的要求要求 1.1.容量分析法：用原料药精制品容量分析法：用原料药精制品(含含量量99.599.5)或对照品考察方法的精密度，或对照品考察方法的精密度，相对标准差一般应不大于相对标准差一般应不大于0.20.2；进行回；进行回收率试验。收率试验。回收率一般在回收率一般在99.799.7100.310