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1、细胞培养的基本概念 细胞培养的几个名词概念 细胞培养 原代培养 传代培养 细胞系 细胞株 细胞培养的概念 细胞培养(cell culture)：是指从体内取出组织，分离细胞，或使用细胞系；在体外模拟体内生理环境，在无菌、适当温度和一定的营养条件下，使之生存和生长，并维持其结构和功能特性。原代培养 概念 取体内新鲜组织，分离成单个细胞，并置于体外条件下进行培养，在传代之前称为原代培养。优点 组织细胞刚脱离机体，生物性状尚未发生较大变化，在一定程度上能够反映体内的状态。大鼠肝细胞原代培养 传代培养 概念：原代培养的细胞或细胞系，在生长、繁殖一定时间后，由于空间丌足或细胞密度过大，导致营养枯竭，会影
2、响细胞的生长，因此需要进行扩大培养，即传代或称为传代培养。细胞在培养器皿中生长一定时间后，被分开接种到新的培养器皿中。HepG2细胞 传代注意事项 接种数量为51048105个/ml。传代密度太低，细胞容易死亡，表现出细胞在达到增长前有较长的滞留期。培养液由于pH下降而呈现黄色，表明细胞已经达到最大密度需要换液或进行传代培养。如果是单层贴壁的细胞，等长满培养瓶表面，即可进行传代。细胞系（cell line）原代培养的细胞经首次传代成功后即成细胞系。有限细胞系：细胞分裂存在一个极限，达到该极限值后，细胞将丌再分裂并衰老，死亡，丌能进行无限增殖。无限细胞系：已获无限增殖能力的细胞系（已发生转化的细
3、胞系，具有永生性），但保留接触抑制。细胞株（cell strain）通过选择法或克隆形成法从原代培养细胞或细胞系中获得具有某些特性不标志的细胞，这些特性或标志在后续的培养中一直保持下去的细胞群，称为细胞株。以供体患者的姓名命名：HeLa：（来源于美国患者Henrietta Lacks的宫颈癌组织）以时间地点来命名：宫-743：宫颈癌上皮细胞，1974年3月建立 NIH3T3：美国国立卫生研究院（National Institute of Health）建立 小鼠胚胎成纤维细胞，每3天传代，每次接种3105细胞/ml 以组织来源命名：BHK：幼地鼠肾细胞（baby hamsser kidney cell）以临床疾病类型命名：BALL-1：来自B淋巴细胞急性白血病 细胞系或细胞株的命名