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1、Good is good, but better carries it.精益求精,善益求善。如果发现ABO正反定型不一致应该怎么办-如果发现正反定型不一致应该怎么办?如果发现正反定型不一致应该怎么办?如发现正反定型不一致,首先要重复做试验一次。严格执行操作规程,使用质量合格的试剂以及细心观察和解释试验结果,就可以解决问题。对一些疑难问题必须进一步研究。初步的检查步骤包括:(1)另从受检者取1份新鲜血液标本,这样可以纠正因污染或搞错标本造成的不符合。(2)将红细胞洗涤数次,配成的35盐水细胞悬液用抗、抗、抗1、抗、及抗做试验可以得到其他有用的信息。(3)对受检红细胞做直接抗球蛋白试验,结果呈阳性
2、表明红细胞已被抗体致敏。(4)用1、型红细胞及自身红细胞检查受检血清,如果怀疑是抗,用型(或相和的)脐血红细胞检查。(5)如果试验结果未见凝集,应将红细胞及血清试验在室温(1822)或4放置30分钟用显微镜检查核实。(6)如疑为抗原或抗原减弱,则可将受检红细胞与抗或抗血清做吸收及放散试验,以及受检者唾液做、血型物质测定。(7)如试验结果红细胞呈缗钱状排列,加等渗盐水1滴混合,往往可使缗钱状消失。(8)如受检者为型血而以为有类抗原时,可用下列方法进行鉴别:观察细胞与抗及抗的凝集强度,与抗的反应要比与抗的反应强,这种区别用玻片法试验更为明显。用受检者红细胞与自身血清做试验,血清中的抗不凝集自身红细
3、胞上的类抗原。检查唾液中是否有、物质,如果是分泌型,可检出物质而无物质。核对病人的诊断,类抗原的形成与结肠癌、直肠癌、革兰氏阴性细菌感染有关。(9)如发现多凝集现象,应考虑有遗传产生的Cad抗原活性:被细菌酶激活的或受体或产生机制不大明了的Tn受体所引起。多凝集红细胞具有以下特点:能被人和家兔的许多血清凝集。能与大多数成年人血清凝集,不管有无相应的同种抗体。不被脐带血清凝集。通常不与自身血清凝集。如有条件可用外源凝集素加以鉴别。ABO正反定型不符结果分析作者:不详来源:本站发布时间:2006-3-1810:40:17点击数:287字号选择大中小一.实验者操作错误1.假阴性结果:1)试管中没有加
4、入抗体试剂或血清。2)没能认识溶血也是阳性反应。3)血清或试剂与红细胞比例太小。4)抗体失效或错误的抗体/红细胞试剂。5)没能正确记录和解释结果2.假阳性结果:1)试剂,红细胞和盐水受到细菌污染。2)加样时交叉污染。3)加错样本。二.红细胞标本本身问题1)病人近期接受了大量ABO血型相容但不同型的红细胞,如非O型人接受了O型红细胞,或骨髓移植,病人血循环中多于一个ABO型别的红细胞。2)某些ABO亚型红细胞和白血病或其他恶性疾病的病人红细胞ABO抗原太弱。3)红细胞获得性或遗传性异常,如获得性B抗原红细胞或红细胞Tn/T多凝集红细胞。4)血清血浆中还有高浓度的A或B血型物质,中和了抗体试剂。出
5、现假阴性。5)血清血浆中含有针对抗-A,抗-B试剂中成分的抗体,引起假阳性。6)严重致敏的红细胞,发生自身凝集。三.血清标本问题1)当纤维蛋白去除不完全时,会造成红细胞假性凝集。2)血清中高分子蛋白增多,引起的非特异凝集。如骨髓瘤的病人M蛋白增多。3)血清中含有抗-A,抗-B以外的其他红细胞抗体,如抗-M也可在盐水中反应。4)血清中含有高效价的冷凝集素抗体,抗-I。5)4-6月龄的婴儿血清中ABO抗体是阴性或很弱,故一般不对其检测ABO抗体反定型,且婴儿抗体经常是来自母体的抗体。6)由于血清中异常高效价的补体分子,和红细胞膜上的补体结合位点结合,遮蔽了红细胞A和B抗原位,以致使凝集反应不能发生
6、。7)病人接受了ABO血型不同但配型相容的骨髓移植,其血清中的ABO抗体与红细胞抗原不一致。比如,A型人接受了O型人的骨髓后,血循环中有O型红细胞,但血清中只有抗B。8)病人近期输用了大量异型血浆,可使正反定不符。文章来自中华检验医学网(),原文地址:正反定型不符及疑难血型鉴定处理分析咸阳市红十字中心血站检验科(陕西712046)范乃权准确的血型鉴定是临床安全、有效输血的重要基础保证,是使交叉配血实验顺利进行的前提,随着临床输血技术规范的实施,标准血型鉴定操作越来越为大家重视,不再以简单的红细胞肉眼玻片法抗原鉴定来确定被检者血型,而是以正定型和反定型双相结果来综合判断。使输血安全向前迈进了一步
7、。但也会经常遇到一些正反定型不符的病例,经过一些特殊实验,如抗人球蛋白实验、吸收放散实验血型物质的测定,基因分型等方法,最终确定了血型,现将各种疑难病例分为7类,总结报告如下:1对象与方法1.1检测对象自2001年5月2008年5月来我站自愿无偿献血者8000名中,共检出血型正反不符者82例。1.2试剂、仪器仪器:日本以保田普通离心机,达亚美卡式离心机、温浴箱;试剂:抗人球蛋白试剂(上海市血液中心),标准谱细胞(上海市血液中心),凝聚胺法试剂(珠海贝索),Coombs卡(达亚美)。标准血清抗A抗B抗A1血清、A1、A2红细胞(长春博德生物制品公司),抗D(上海血液生物医药有限公司)1.3实验方
8、法正反定型及抗体筛查鉴定方法均按照临床输血与输血技术学实验指导;抗人球蛋白实验方法按照临床输血与输血技术学实验指导;血清浓缩法:即在观察完原来实验结果的基础上再次离心,弃掉上清液,再次加入血清(试剂或标本)离心后再观察结果,还可以反复进行以上操作;吸收放散实验:按照临床输血与输血技术学实验指导;亚型血型鉴定实验:方法同血型鉴定,试剂为抗A1血清、A1、A2红细胞;唾液血型物质测定:包括被检者唾液的留取,抗血清标化和血型物质测定均按照临床输血与输血技术学实验指导。2结果将正反定型不符结果分类如表正反定型不符结果分类编号抗A抗B抗A+B抗DRBCARBCBRBCO自身对照结果例数原因14+04+4
9、+000ARh+21小儿、老人抗体弱24+04+4+0+ARh+8大量输液30混合视野2+4+4+00BRh+1B型人误输O型血4+4+4+4+000AB3亚型54+1+4+4+1+00AB9癌症病人抗原减弱64+2+4+4+2+4+4+A28非特异性抗体74+4+4+4+4+4+4+AB12特异性抗体3讨论血型不符的输血一旦发生,会导致严重的并发症1,Linden等2报道在美国每年因溶血反应死亡的病例中,约10例是输血失误引起的。SaZamn3报道,在输血相关死亡病例报告中,51%是由于输入了ABO不相溶的血液制品导致急性溶血反应致死的。因此,正确的血型鉴定,尤其是ABO血型是正确配血,安全
10、输血的基础。若血型鉴定准确无误,大部分配血是安全顺利的。过去,由于条件和观念所限,许多地方医院仅凭简单的玻片法的的红细胞抗原测定(正定型)就确定患者血型,进而给患者输注同型血液,使输血中的人为错误率很高。2001年后卫生部临床输血技术规范实施后,人们安全输血的意识不断提高,血型鉴定技术也规范为正反定型技术,有些医院还在正定型中添加被检者RBC与抗A+B(O型血清)的反应结果的观察,以对与抗A抗B反应进行质量控制,在反定型中添加被检者血清与O型红细胞的反定结果,以排除ABO以外的抗体影响定型实验结果,从多方面控制实验结果的准确性。在我们日常工作中遇到的各种情况的处理中发现,添加这些检查很有必要。
11、反定型时增加O管检查是检出ABO以外抗体的有效方法之一,因为正常情况下O型红细胞上不存在ABO抗原的,若O管发生凝集,很可能存在ABO以外抗体。提示我们进行抗体筛查和鉴定来进一步确定抗体的性质。在我们实验中40例O管凝集标本中,通过抗体筛查抗体鉴定,发现28例为非特异性抗体(大多为RBC直接Coombs试验阴性的病人和冷凝集病人),12例为特异性抗体,包括抗M、抗E、抗D等盐水抗体,因此O管反定型十分必要。通常情况下,红细胞上的抗原是不变的,而且用来检测抗原的标准血清效价较高。因此正定型的错误率很低。反定型则是检测被检者的血清中抗体,由于人血清中抗体强弱差异较大,尤其是老人小孩或免疫功能低下者
12、及大量输液病人,血清中抗体较弱使得反定型检出率降低。在这种情况下,通常用血清浓缩的方法来使实验更加清晰,即通过增加血清抗体的浓度和比例,使抗原完全结合,使弱凝集转强供肉眼观察,我们用这种方法对29例弱抗体患者进行实验,效果很明显,只有3例患者反复浓缩无效,后用家系调查确证了血型,此类病人体内确无抗体,属免疫缺陷病。在正反定型不符问题的解决中,家系调查也是可以帮助我们确定疑难血型的有效方法之一,在一些疾病如癌症肿瘤或亚型血型中,抗原减弱或消失时有发生,往往会影响被检血型的准确判断。我们有5例血液病及肿瘤患者,红细胞上抗原已经完全消失用浓缩法无法确定,3例血清抗体缺失病人,将其父母、兄弟、配偶及子
13、女的血型鉴定出来和被检者的实验结果综合起来加以分析判断,也可以得出正确的血型,此外,基因分型也是取得正确血型的方法之一。在血型鉴定中尤其是亚型的鉴定时,唾液的血型物质鉴定和血液的吸收放散实验也是一种必不可少的检测手段,因为红细胞抗原还少量存在于唾液等体液中,检测到唾液中的血型抗原,亦可以帮助确定血型。因为微量抗原可以通过吸收放散实验才能检出,血液中抗原减弱无法检出时,可以借助吸收放散实验来检测以帮助抗原确定。3例亚型和2例肿瘤病人的血型用此方法得以确定。只是此方法操作有些繁琐,需要较长时间,不适合急诊情况下的处理。此外,人源性血清在弱抗原检出方面优势相当明显,因为多个人份新鲜抗血清混合应用效价
14、很高,确实可以使不易观察的弱凝集变得清晰可见。另外,我们在工作中发现:在ABO血型一时还不能确定的情况下,病人急需输血,输注O型洗涤红细胞确实为一种可行有效的方法,因为有些血型鉴定需要花费很多时间进行很多实验来综合分析判定结果,为了不因此而延误病情,先给病人输注O型洗涤红细胞应急,待血型确定后再输入同型血液是较好的解决方法。参考文献1魏小斌,输血人为误差和输血安全,中国输血杂志2005.6.18(3).2LindenJV,TouraultMA,ScribnerCL.(letter)Decreaseinfre-quencyoftransfusionfatalities.Transfusion,1
15、997,37(2):243.3SazamaK.Reportsof355transfusion-associateddeaths:1976through1985.Transfusion,1990,30(7).四、血型知识(39-57)39、是谁第一个发现了血型?40、目前发现人类有哪些血型系统?41、与输血关系最大的是哪一个血型系统?42、哪一年世界卫生组织把ABO血型系统的血型正式向全世界统一命名为A、B、O、AB四种血型?43、血型系统是如何定型的?44、血型与红细胞上的抗原有什么关系?45、血型是由什么决定的?46、血型与输血有什么关系?47、血型鉴定的原理是什么?48、检测血型所用试剂和
16、材料有哪些?49、检测血型的方法有哪些?50、如何判断血型试验结果?51、正反定型不一致的原因有哪些?52、如果发现正反定型不一致应该怎么办?53、做交叉配血试验时应注意什么?54、型全血是万能的吗?55、还有什么血型系统与输血关系很大?56、为什么要检查Rh血型?57、Rh血型的分布情况如何?39、是谁第一个发现了血型?世界上第一个发现红细胞血型的人是奥地利维也纳大学助教Landsteiner,那是在1900年。这一划时代的发现,为以后安全输血提供了重要保证,为此,他获得了1930年的诺贝尔奖,并赢得了“血型之父”的美誉。开始时,他只发现了人类红细胞血型、三型。1902年他的学生Decast
17、ello和Sturli又发现了、之外的第4型。后来国际联盟卫生保健委员会将这4型正式命名为、型,这就是现在人们熟知的红细胞血型系统。在以后的数十年里,科学家又相继发现了几种血型。1940年Landsteiner和Wiener发现了Rh血型,到1995年,共发现23个红细胞血型系统,外加一个低频率抗原组、高频率抗原组和尚未形成体系的血型集合(collection),抗原总数193个。1958年法国的Dausset首先发现人类白细胞抗原(humanleucocyteanti-gen,),到1995年已公布表型特异性112种,等位基因已达503个。血小板血型抗原是在1957年后陆续被发现的。返回40
18、、目前发现人类有哪些血型系统?有血型系统、血型系统、血型系统、Rh血型系统、血型系统等二十多个血型系统。返回41、与输血关系最大的是哪一个血型系统?是血型系统。返回42、哪一年世界卫生组织把血型系统的血型正式向全世界统一命名为、四种血型?1921年。返回43、血型系统是如何定型的?血型系统是以人体红细胞上的抗原与血清中抗体而定型的。凡红细胞上含有抗原,而血清中含有抗抗体的称为型;红细胞上含有抗原,而血清中含有抗抗体的称为型;红细胞上含有和抗原,而血清中无抗、抗抗体的称为型;红细胞上不含有、抗原,而血清中含有抗和抗抗体称为型。返回44、血型与红细胞上的抗原有什么关系?凡红细胞上有抗原的为型;有抗
19、原的为型;有、抗原的为型;无、抗原的为型。返回45、血型是由什么决定的?人类的血型是由遗传决定的,子女的血型是由父母双亲的染色体遗传而来,人血中的红细胞、白细胞、血小板以及血浆蛋白等都分成不同的型。除单卵双生外,可以说世界上很难找到二位血型完全相同的人。返回46、血型与输血有什么关系?输血时一般情况下要同型相输,否则体内存在的抗体与输入的红细胞抗原相结合会引起严重的输血反应。例如:如果型血输入型人体内,型血红细胞上的抗原就会和型血清中的抗抗体发生凝集反应(抗原抗体反应),使红细胞大量破坏,产生一系列综合症状,并危及生命。所以正确的鉴定血型是安全输血必不可少的前提。返回47、血型鉴定的原理是什么
20、?血型鉴定的原理是根据红细胞上有或无抗原或和抗原,将血型分为型、型、型及型四种。可利用红细胞凝集试验,通过正(血清试验)反(细胞试验)定型准确鉴定血型。所谓正定型是用已知抗和抗分型血清来测定红细胞上有无相应的抗原或和抗原,所谓反定型是用已知细胞和细胞来测定血清中有无相应的抗或抗。返回48、检测血型所用试剂和材料有哪些?(1)抗(型)、抗(型)及抗、(型)分型血清,效价1:128。(2)35、及型试剂红细胞及抗、(型)分型血清,效价1:128。(3)受检者血清。(4)受检者35红细胞盐水悬液。返回49、检测血型的方法有哪些?有试管法和玻片法。(1)试管法:取洁净小试管3支,分别标明抗、抗和抗、,
21、用滴管分别加抗、抗和抗、分型血清各2滴于试管底部,再以滴管分别加入受检者35红细胞盐水悬液1滴,混合。另取洁净小试管3支分别标明,和型细胞,用滴管分别加入受检者血清12滴于底部,再分别以滴管加入、和型3试剂红细胞悬液1滴混匀。120g离心1分钟或1300g离心15秒。将试管轻轻摇动,使沉于管底的红细胞浮起,先以肉眼观察有无凝集(溶血)现象,如肉眼不见凝集,应将反应物倒在玻片上,再以低倍镜检查。观察结果时,既要看有无凝集,更要注意凝集强度,此有助于,亚型、类或cis的发现。(2)玻片法:清洁玻片一张(或白瓷版一块)。标明抗、抗和抗、,分别用滴管滴加抗、抗和抗、分型血清1滴,再加受检者35红细胞悬
22、液1滴,混合。另取洁净玻片一张(或白瓷板一块)。标明细胞、细胞和型试剂,分别加红细胞悬液1滴。将玻片(或白瓷板)不断轻轻转动(在室温1822),使血清与细胞充分混匀连续约15分钟,以肉眼观察有无凝集(溶血)反应。如以玻片试验时,也可用低倍镜观察结果。返回50、如何判断血型试验结果?血型正反定型结果返回分型血清+受检者红细胞受检者血型受检者血清+试剂红细胞抗、抗抗细胞细胞细胞+-+-+-+-+-51、正反定型不一致的原因有哪些?一般有技术问题或红细胞和血清本身问题,常见以下几种原因。(1)离心速度及时间不合适。(2)红细胞悬液过浓或过淡,抗原抗体比例不适当,使反应不明显误判为阴性反应。(3)受检
23、者红细胞上抗原位点过少(如亚型)或抗原性减弱(如白血病或恶性肿瘤)等。(4)受检者血清蛋白紊乱(高球蛋白血病)或试验时温度过高,常引起细胞呈缗钱状排列。(5)受检者血清中缺乏应有的抗或抗抗体,如丙种球蛋白缺乏症,(6)各种原因引起的红细胞溶解,误判为不凝集,部分溶血时,可溶性血型物质中和了相应的抗体。(7)有细菌污染或遗传因素引起多凝集或全凝集。(8)血清中有意外抗体,如自身抗,常干扰定型。(9)老年人血清中抗体水平大幅度下降。返回52、如果发现正反定型不一致应该怎么办?如发现正反定型不一致,首先要重复做试验一次。严格执行操作规程,使用质量合格的试剂以及细心观察和解释试验结果,就可以解决问题。
24、对一些疑难问题必须进一步研究。初步的检查步骤包括:(1)另从受检者取1份新鲜血液标本,这样可以纠正因污染或搞错标本造成的不符合。(2)将红细胞洗涤数次,配成的35盐水细胞悬液用抗、抗、抗1、抗、及抗做试验可以得到其他有用的信息。(3)对受检红细胞做直接抗球蛋白试验,结果呈阳性表明红细胞已被抗体致敏。(4)用1、型红细胞及自身红细胞检查受检血清,如果怀疑是抗,用型(或相和的)脐血红细胞检查。(5)如果试验结果未见凝集,应将红细胞及血清试验在室温(1822)或4放置30分钟用显微镜检查核实。(6)如疑为抗原或抗原减弱,则可将受检红细胞与抗或抗血清做吸收及放散试验,以及受检者唾液做、血型物质测定。(
25、7)如试验结果红细胞呈缗钱状排列,加等渗盐水1滴混合,往往可使缗钱状消失。(8)如受检者为型血而以为有类抗原时,可用下列方法进行鉴别:观察细胞与抗及抗的凝集强度,与抗的反应要比与抗的反应强,这种区别用玻片法试验更为明显。用受检者红细胞与自身血清做试验,血清中的抗不凝集自身红细胞上的类抗原。检查唾液中是否有、物质,如果是分泌型,可检出物质而无物质。核对病人的诊断,类抗原的形成与结肠癌、直肠癌、革兰氏阴性细菌感染有关。(9)如发现多凝集现象,应考虑有遗传产生的Cad抗原活性:被细菌酶激活的或受体或产生机制不大明了的Tn受体所引起。多凝集红细胞具有以下特点:能被人和家兔的许多血清凝集。能与大多数成年
26、人血清凝集,不管有无相应的同种抗体。不被脐带血清凝集。通常不与自身血清凝集。如有条件可用外源凝集素加以鉴别。返回53、做交叉配血试验时应注意什么?做交叉配血试验中发现不配合时,首先应考虑受血者和献血者的定型是否错误,必要时进行Rh血型鉴定及抗体筛检。其次应注意有无特异性同种抗体,或者病人的血清在室温、37或抗球蛋白血清中凝集所有的其他红细胞,造成交叉配血的困难,应进一步做有关试验进行鉴定。受血者和献血者的样本,在每次输血之后,在26保存37天,如果病人在输血后数天内发生迟发性、溶血性输血反应时,保存的病人和献血者的血样就可能要重做或追加试验,必要时从发生溶血性输血反应的病人重新采取血样与输血前
27、病人血样同时检查以资比较。返回54、型全血是万能的吗?人类的血型系统是最先发现的血型系统,因为具有规律的血型抗体,因此是最重要的血型系统,分为、及4型。其中,只有型人的红细胞上缺乏、抗原,故这种细胞可以输给型、型和型人。所以当受血者血型鉴定困难时,可输配血相合的型洗涤红细胞;再就是在抢救生命的紧急关头,同型血不足或缺乏时,亦可输少量型血以解燃眉之急。但是型血浆中含有抗、抗抗体,它能致敏或凝集、型红细胞,使之寿命缩短或立即破坏,属于输血禁忌。所以,曾把型全血称为“危险的万能血”。有人把“危险”二字忽略了,把型血称为“万能血”这是错误的。在小量异型输血时,如给型人输入1单位型全血,其型血浆中的抗、
28、抗,因被受血者的血浆稀释,使受血者红细胞致敏较轻,引起的受血者红细胞缩短现象,不为人们所发觉。随着异型输血量的增加,这种输血禁忌现象逐渐加重,严重时由于受血者的红细胞遭到破坏而导致溶血性输血反应。因此,在医疗条件较好的地方,应大力推广成分输血,不应再采用异型输血。当然把型全血看作万能血的观点更应该纠正。返回55、还有什么血型系统与输血关系很大?Rh血型系统与人的输血关系也很大。一个Rh阴性者,输入Rh阳性血之后,可以刺激机体产生抗体。当再次输入Rh阳性血之后,可产生严重的溶血性输血反应。虽然血型系统相合,但是Rh系统血型不合的反复输血也可以引起溶血性输血反应。尤其是欧洲人,Rh阴性者占人群15
29、,这种人在输血时一定要输用Rh阴性血,否则就会产生输血反应。返回56、为什么要检查Rh血型?Rh血型检查在临床上的重要性,仅次于系统而处于第二位。因为Rh血型不合的输血有可能危及病人的生命;母子Rh血型不合的妊娠,有可能发生死胎、早产、新生儿溶血症。如果Rh阴性的人输入Rh阳性的血液后(特别是多次输血),在其血清中可出现Rh抗体,若以后再输入Rh阳性血,即可发生凝集,造成溶血性输血反应;如果Rh阴性妇女怀孕Rh阳性胎儿时,胎儿的红细胞借机会进入母体,也可刺激母体产生Rh抗体,即使第一次输血,也可引起溶血性输血反应。返回57、Rh血型的分布情况如何?Rh血型在我国99以上是Rh阳性,白种人Rh阴性约占15,黑种人约占4。返回-