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1、实验八化学药剂对微生物的影响第1页，本讲稿共16页一、实验目的一、实验目的 了解化学因素对微生物生长的影响 化学实验教学中心化学实验教学中心Chemistry Lab Center 工程微生物学实验教学多媒体课件工程微生物学实验教学多媒体课件2第2页，本讲稿共16页 抑制或杀死微生物的化学因素种类极多，用途广抑制或杀死微生物的化学因素种类极多，用途广泛，性质各异。其中表面消毒剂和化学药剂最为常见。泛，性质各异。其中表面消毒剂和化学药剂最为常见。表面消毒剂在极低浓度时，常常表现为对微生物细胞表面消毒剂在极低浓度时，常常表现为对微生物细胞的刺激作用，随着浓度的逐渐增加，就相继出现抑菌的刺激作用，随
2、着浓度的逐渐增加，就相继出现抑菌和杀菌作用，对一切活细胞都表现活性。化学药剂主和杀菌作用，对一切活细胞都表现活性。化学药剂主要包括一些抗代谢物，例如磺胺类药物，以及抗生素，要包括一些抗代谢物，例如磺胺类药物，以及抗生素，例如青霉素、利福平等。例如青霉素、利福平等。二、实验原理二、实验原理 化学实验教学中心化学实验教学中心Chemistry Lab Center 工程微生物学实验教学多媒体课件工程微生物学实验教学多媒体课件3第3页，本讲稿共16页 化学药剂（消毒剂）抑制或杀灭微生物，其化学药剂（消毒剂）抑制或杀灭微生物，其效应强弱与试剂类型、浓度、作用时间以及作用效应强弱与试剂类型、浓度、作用时
3、间以及作用对象有关，有些药剂在浓度极低的情况下仍然有对象有关，有些药剂在浓度极低的情况下仍然有较强的作用。杀菌剂的浓度、作用时间应试验确较强的作用。杀菌剂的浓度、作用时间应试验确定。定。二、实验原理二、实验原理 化学实验教学中心化学实验教学中心Chemistry Lab Center 工程微生物学实验教学多媒体课件工程微生物学实验教学多媒体课件4第4页，本讲稿共16页三、实验预习三、实验预习1.1.了解了解HgCl2、CuSO4、石碳酸、青霉素、石碳酸、青霉素对细对细菌的抑制作用菌的抑制作用2.2.回顾无菌操作技术回顾无菌操作技术 化学实验教学中心化学实验教学中心Chemistry Lab C
4、enter 工程微生物学实验教学多媒体课件工程微生物学实验教学多媒体课件5第5页，本讲稿共16页1.1.菌种：菌种：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌四、供试材料四、供试材料 4.4.其他物品：其他物品：培养皿、无菌圆滤纸片、镊子、无菌水、无菌滴管、玻璃涂棒 3.3.药品：药品：HgCl2 1g/L;CuSO4 5g/L;石碳酸 50g/L;青霉素 1000U2.2.培养基：培养基：牛肉膏蛋白胨培养基(NA)化学实验教学中心化学实验教学中心Chemistry Lab Center 工程微生物学实验教学多媒体课件工程微生物学实验教学多媒体课件6第6页，本讲稿共16页五、实验方法及步骤五、实验方法及步骤无菌
5、培养皿倒平板制备菌悬液滴加菌样涂平板药剂处理培养观察结果（一）实验流程（一）实验流程 化学实验教学中心化学实验教学中心Chemistry Lab Center 工程微生物学实验教学多媒体课件工程微生物学实验教学多媒体课件7第7页，本讲稿共16页 1.倒平板：将融化的牛肉膏蛋白胨培养基（50）倾注入无菌平皿，冷凝成平板。五、实验方法及步骤五、实验方法及步骤 化学实验教学中心化学实验教学中心Chemistry Lab Center 工程微生物学实验教学多媒体课件工程微生物学实验教学多媒体课件8第8页，本讲稿共16页 2.制备菌悬液：取培养1820 h的大肠杆菌和金黄色葡萄球菌平板各2皿，分别加入4
6、5m1无菌水，用涂布器将菌苔轻轻刮下，制成均匀的菌悬液。3.接种：用无菌吸管吸取少量菌悬液，在牛肉膏蛋白胨培养基平板上接种12滴，用无菌刮铲将菌液涂布均匀。五、实验方法及步骤五、实验方法及步骤 化学实验教学中心化学实验教学中心Chemistry Lab Center 工程微生物学实验教学多媒体课件工程微生物学实验教学多媒体课件9第9页，本讲稿共16页 化学实验教学中心化学实验教学中心Chemistry Lab Center 工程微生物学实验教学多媒体课件工程微生物学实验教学多媒体课件10第10页，本讲稿共16页 4.加滤纸：取圆滤纸片3张，一张沾无菌水，其余两张分别沾一种药剂，风干后在平板上分
7、区放置（正三角形），并在平皿皿底作标记药剂名、浓度、组号。5.培养：将平板倒置于28-30培养2-3日五、实验方法及步骤五、实验方法及步骤 化学实验教学中心化学实验教学中心Chemistry Lab Center 工程微生物学实验教学多媒体课件工程微生物学实验教学多媒体课件11第11页，本讲稿共16页 6.观察结果:观察平板是否有抑菌圈，并通过抑菌圈直径大小推断药剂的抑菌作用的强弱，并记录抑菌圈的直径。五、实验方法及步骤五、实验方法及步骤 化学实验教学中心化学实验教学中心Chemistry Lab Center 工程微生物学实验教学多媒体课件工程微生物学实验教学多媒体课件12第12页，本讲稿共
8、16页(二二)药剂的配制药剂的配制五、实验方法及步骤五、实验方法及步骤 化学实验教学中心化学实验教学中心Chemistry Lab Center 工程微生物学实验教学多媒体课件工程微生物学实验教学多媒体课件17 HgCl2 1g/L 0.1%CuSO4 5g/L 0.5%石碳酸 50g/L 5%青霉素 1000U第13页，本讲稿共16页六、实验结果及处理六、实验结果及处理记录测量结果，并分析比较各药剂的杀菌效能 化学实验教学中心化学实验教学中心Chemistry Lab Center 工程微生物学实验教学多媒体课件工程微生物学实验教学多媒体课件19药品药品抑菌圈直径抑菌圈直径注：用直尺测量抑菌
9、圈的直径大小记录入表格第14页，本讲稿共16页七、注意事项和问题七、注意事项和问题（一）注意事项（一）注意事项1.注意无菌操作2.分析不同化学药剂的作用范围 化学实验教学中心化学实验教学中心Chemistry Lab Center 工程微生物学实验教学多媒体课件工程微生物学实验教学多媒体课件20第15页，本讲稿共16页（二）问题（二）问题 化学药剂对微生物所形成的抑菌圈未长菌部分是否说明微生物细胞已被杀死？七、注意事项和问题七、注意事项和问题 化学实验教学中心化学实验教学中心Chemistry Lab Center 工程微生物学实验教学多媒体课件工程微生物学实验教学多媒体课件21第16页，本讲稿共16页