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1、中药鉴定的基本操作第1页，本讲稿共22页2第一节第一节 中药显微制片技术中药显微制片技术 中药显微制片技术是根据药材组织构造、细胞形中药显微制片技术是根据药材组织构造、细胞形状及内含物的特征制作相应制片，是显微鉴定的重要状及内含物的特征制作相应制片，是显微鉴定的重要环节，包括粉末制片、表面制片、横切片制作等。环节，包括粉末制片、表面制片、横切片制作等。第2页，本讲稿共22页3一、中药粉末制片一、中药粉末制片 中药的粉末制片对完整的、破碎的、粉末状的中药的粉末制片对完整的、破碎的、粉末状的各类药材、饮片及成药均适用，是中药显微鉴定最各类药材、饮片及成药均适用，是中药显微鉴定最常用的方法之一。常用
2、的方法之一。第3页，本讲稿共22页4（一）水（稀甘油）装片的制作（一）水（稀甘油）装片的制作 操作方法：操作方法：1.1.取一干净的载玻片和盖玻片，置于实验台上。取一干净的载玻片和盖玻片，置于实验台上。2.2.用镊子或解剖针取少量药材粉末置于载玻片中央。用镊子或解剖针取少量药材粉末置于载玻片中央。3.3.滴加蒸馏水滴加蒸馏水(或稀甘油或稀甘油)2)23 3滴，用解剖针搅拌均匀。滴，用解剖针搅拌均匀。4.4.左手持载玻片，右手将盖玻片边缘与材料左边水左手持载玻片，右手将盖玻片边缘与材料左边水液的边缘接触，并缓缓放下盖玻片，这样可使盖玻液的边缘接触，并缓缓放下盖玻片，这样可使盖玻片下的空气逐渐被水
3、挤掉片下的空气逐渐被水挤掉,以免产生气泡。以免产生气泡。5.5.盖玻片边缘若有多余水液，用吸水纸吸盖玻片边缘若有多余水液，用吸水纸吸去去。第4页，本讲稿共22页5注意事项：注意事项：装片时粉末不可挑取太多，适量即可。装片时粉末不可挑取太多，适量即可。供试品粉末一般需过四号筛（供试品粉末一般需过四号筛（6565目）。目）。若水液从盖玻片边缘溢出，用吸水纸吸去若水液从盖玻片边缘溢出，用吸水纸吸去多余水液。多余水液。第5页，本讲稿共22页6（二）透化片的制作（二）透化片的制作 操作方法：操作方法：1.1.取一干净的载玻片和盖玻片，置于实验台上。取一干净的载玻片和盖玻片，置于实验台上。2.2.用镊子或
4、解剖针取少量药材粉末置于载玻片中用镊子或解剖针取少量药材粉末置于载玻片中央。央。3.3.滴加水合氯醛液滴加水合氯醛液3 34 4滴，用解剖针搅拌均匀，滴，用解剖针搅拌均匀，置于酒精灯上小火微微加热（透化），用解剖针搅拌置于酒精灯上小火微微加热（透化），用解剖针搅拌均匀，重复均匀，重复2 23 3次。次。4.4.待冷却后待冷却后,滴加稀甘油滴加稀甘油1 12 2滴（防止析出水合滴（防止析出水合氯醛结晶），盖上盖玻片，用吸水纸吸去多余液体及氯醛结晶），盖上盖玻片，用吸水纸吸去多余液体及粉末。粉末。第6页，本讲稿共22页7注意事项：注意事项：加热透化时，应在火上来回移动载玻片加热透化时，应在火上来回
5、移动载玻片,以防加热不匀而使玻片爆裂以防加热不匀而使玻片爆裂,但勿使其沸腾，但勿使其沸腾，否则产生气泡否则产生气泡,妨碍观察。妨碍观察。http:/ 可观察表皮细胞、气孔、毛茸等表面特征，适可观察表皮细胞、气孔、毛茸等表面特征，适用于叶类、花类及全草类中药的鉴定。用于叶类、花类及全草类中药的鉴定。操作方法：操作方法：1.1.取一干净的载玻片和盖玻片，置于实验台上。取一干净的载玻片和盖玻片，置于实验台上。2.2.将供试品湿润软化后，以左手持材料，然后右将供试品湿润软化后，以左手持材料，然后右手持尖嘴镊子，镊子夹住材料表皮，向下撕取表皮，手持尖嘴镊子，镊子夹住材料表皮，向下撕取表皮，用刀片切取表皮
6、面积约用刀片切取表皮面积约4mm4mm2 2大小，一正一反置载玻片大小，一正一反置载玻片中央，滴加稀甘油中央，滴加稀甘油2 23 3滴，盖上盖玻片直接观察或透滴，盖上盖玻片直接观察或透化处理后观察。化处理后观察。注意事项注意事项：注意分清正、反面，最好分别封藏观察。：注意分清正、反面，最好分别封藏观察。第8页，本讲稿共22页9三、横切片制作三、横切片制作 操作方法：操作方法：1.1.取干净的载玻片和盖玻片，置于实验台上。取干净的载玻片和盖玻片，置于实验台上。2.2.选取经软化处理后的药材，切成选取经软化处理后的药材，切成3 35cm5cm的小段。的小段。3.3.以左手的拇指、食指及中指夹住材料
7、，使之固定不动。为防止以左手的拇指、食指及中指夹住材料，使之固定不动。为防止刀伤，拇指应略低一些，并使材料上端高出手指刀伤，拇指应略低一些，并使材料上端高出手指2 23 3毫米。毫米。4.4.右手大拇指和食指捏住刀片一角，刀口向内，并与药材垂直。右手大拇指和食指捏住刀片一角，刀口向内，并与药材垂直。左手保持不动，用右手使刀口向内侧右后方拉切，同时观察切左手保持不动，用右手使刀口向内侧右后方拉切，同时观察切片的进展情况。材料要一次切下，切好后片的进展情况。材料要一次切下，切好后，用毛笔将切片轻轻移，用毛笔将切片轻轻移入培养皿的清水中备用。入培养皿的清水中备用。第9页，本讲稿共22页105 5.挑
8、选薄而平的切片，置于载玻片中央，滴加蒸馏水挑选薄而平的切片，置于载玻片中央，滴加蒸馏水2 23 3滴，取盖玻滴，取盖玻片，使盖玻片一边接触液体边缘，待液体沿边缘扩散后缓缓放下盖片，使盖玻片一边接触液体边缘，待液体沿边缘扩散后缓缓放下盖玻片，以防止产生气泡。装片后，用吸水纸吸去流溢到盖玻片以外玻片，以防止产生气泡。装片后，用吸水纸吸去流溢到盖玻片以外的多余液体。的多余液体。注意事项：注意事项：1.1.切片时要注意拇指，以防刀伤。切片时要注意拇指，以防刀伤。2.2.切片时保持刀片与药材垂直。切片时保持刀片与药材垂直。3.3.切片中途不要停顿，更不能用拉锯方式进行切片。切片中途不要停顿，更不能用拉锯
9、方式进行切片。第10页，本讲稿共22页11第二节第二节 显微测微技术显微测微技术显微测量尺是用来测量显微镜下所能见物显微测量尺是用来测量显微镜下所能见物体长度和大小的标尺，包括目镜测微尺和载台体长度和大小的标尺，包括目镜测微尺和载台测微尺。测微尺。目镜测微尺目镜测微尺载台测微尺载台测微尺第11页，本讲稿共22页12仪器与设备仪器与设备：生物显微镜、测微尺。：生物显微镜、测微尺。操作方法操作方法：一、目镜测微尺的标定：一、目镜测微尺的标定：1.1.取下目镜，旋下目镜上的透镜，将目镜测微尺放入目镜的取下目镜，旋下目镜上的透镜，将目镜测微尺放入目镜的中隔板上，使有刻度的一面朝下，再旋上透镜，并装入中
10、隔板上，使有刻度的一面朝下，再旋上透镜，并装入镜筒内。镜筒内。第12页，本讲稿共22页132.2.将物镜测微尺置于显微镜的载物台上，使有刻度的一面朝将物镜测微尺置于显微镜的载物台上，使有刻度的一面朝上，同观察标本一样，使具有刻度的小圆圈位于视野中央；上，同观察标本一样，使具有刻度的小圆圈位于视野中央；3.3.先用低倍镜观察，对准焦距，待看清物镜测微尺的刻度先用低倍镜观察，对准焦距，待看清物镜测微尺的刻度后，转动目镜，使目镜测微尺的刻度与物镜测微尺的刻后，转动目镜，使目镜测微尺的刻度与物镜测微尺的刻度相平行度相平行,并使两尺的左边第一条线相重合，再向右寻并使两尺的左边第一条线相重合，再向右寻找两
11、尺的另外一条重合线。找两尺的另外一条重合线。第13页，本讲稿共22页144.4.记录二条重合线间的目镜测微尺的格数和记录二条重合线间的目镜测微尺的格数和物镜测微尺的格数，根据二条重合线间小物镜测微尺的格数，根据二条重合线间小格数的比值，计算目镜测微尺在物镜下每格数的比值，计算目镜测微尺在物镜下每小格的数值小格的数值(m)(m)。计算方式：。计算方式：目镜测微尺每格长度目镜测微尺每格长度=两个重叠刻度间物镜测两个重叠刻度间物镜测微尺格数微尺格数10/10/两个重叠刻度间目镜测微尺两个重叠刻度间目镜测微尺格数。格数。测微尺的标定测微尺的标定第14页，本讲稿共22页15二、测量方法：二、测量方法：将
12、欲测量物体封于载玻片上，于显微镜下用已将欲测量物体封于载玻片上，于显微镜下用已校正的目镜测微尺，测量其长度或直径，然后乘以校正的目镜测微尺，测量其长度或直径，然后乘以每小格的每小格的mm数即得。数即得。注意事项注意事项：测微尺为易碎品，标定时防止压碎。：测微尺为易碎品，标定时防止压碎。第15页，本讲稿共22页16第三节第三节 显微化学分析技术显微化学分析技术 显微化学分析是将药材的切片、粉末或浸出物显微化学分析是将药材的切片、粉末或浸出物等置于载玻片上，加特定化学试剂后产生沉淀或结等置于载玻片上，加特定化学试剂后产生沉淀或结晶，在显微镜下观察其形状和颜色进行鉴别的一种晶，在显微镜下观察其形状和
13、颜色进行鉴别的一种方法。方法。第16页，本讲稿共22页17操作方法：操作方法：将切片、粉末或浸出物置于载玻片上，直接滴加将切片、粉末或浸出物置于载玻片上，直接滴加特定化学试剂，加盖玻片，置于显微镜下观察。特定化学试剂，加盖玻片，置于显微镜下观察。例如：黄连粉末滴加稀盐酸，可见针状、针簇状例如：黄连粉末滴加稀盐酸，可见针状、针簇状盐酸小檗碱结晶析出；丁香切片滴加碱液，油室内有盐酸小檗碱结晶析出；丁香切片滴加碱液，油室内有针状丁香酚钠结晶析出。针状丁香酚钠结晶析出。第17页，本讲稿共22页18第四节第四节 常用的定性分析技术常用的定性分析技术一、微量升华一、微量升华 微量升华是利用中药中所含的某些
14、化学成分，微量升华是利用中药中所含的某些化学成分，在一定温度下能升华的性质，获得升华物，在显微在一定温度下能升华的性质，获得升华物，在显微镜下观察其结晶形状、色泽，或取升华物加化学试镜下观察其结晶形状、色泽，或取升华物加化学试剂观察其反应作为鉴别特征。剂观察其反应作为鉴别特征。第18页，本讲稿共22页19操作方法：操作方法：取金属片放置在有圆孔（直径约取金属片放置在有圆孔（直径约2cm2cm）的石棉板）的石棉板上，金属片上放一小金属圈（高度约上，金属片上放一小金属圈（高度约0.8cm0.8cm），对准），对准石棉板上的圆孔，圈内加入中药粉末一薄层，圈上放石棉板上的圆孔，圈内加入中药粉末一薄层，
15、圈上放一载玻片，在石棉板下圆孔处用酒精灯徐徐加热数分一载玻片，在石棉板下圆孔处用酒精灯徐徐加热数分钟，至粉末开始变焦，去火待冷后可见有升华物凝聚钟，至粉末开始变焦，去火待冷后可见有升华物凝聚在载玻片上。将载玻片取下反转，在显微镜下观察结在载玻片上。将载玻片取下反转，在显微镜下观察结晶形状，并可加化学试剂观察其反应。晶形状，并可加化学试剂观察其反应。注意事项：注意事项：酒精灯火焰距板酒精灯火焰距板4cm4cm左右，不宜太靠近。左右，不宜太靠近。第19页，本讲稿共22页20二、荧光分析二、荧光分析 荧光分析是利用中药中所含的某些化学成分，荧光分析是利用中药中所含的某些化学成分，在紫外光或自然光下能
16、产生一定颜色的荧光的性质在紫外光或自然光下能产生一定颜色的荧光的性质进行鉴别。除另有规定外，紫外光灯的波长为进行鉴别。除另有规定外，紫外光灯的波长为365nm365nm，如用短波（，如用短波（254254265 nm265 nm）时，应加以说）时，应加以说明，因两者荧光现象不同。明，因两者荧光现象不同。第20页，本讲稿共22页21操作方法：操作方法：将中药材将中药材(或断面）直接放到紫外光灯下观察所产或断面）直接放到紫外光灯下观察所产生的荧光；或将中药材化学成分提取后，将提取液生的荧光；或将中药材化学成分提取后，将提取液点于滤纸上在紫外灯下观察所产生的荧光。必要时点于滤纸上在紫外灯下观察所产生的荧光。必要时喷特殊显色剂观察荧光。喷特殊显色剂观察荧光。注意事项：注意事项：某些中药本身不产生荧光，但以酸或碱处理或某些中药本身不产生荧光，但以酸或碱处理或经其他化学方法处理后，可使某些成分在紫外光灯经其他化学方法处理后，可使某些成分在紫外光灯下产生荧光。下产生荧光。第21页，本讲稿共22页22第五节第五节 常用的定量分析技术常用的定量分析技术水分测定技术水分测定技术 灰分测定技术灰分测定技术 挥发油测定技术挥发油测定技术浸出物测定技术浸出物测定技术 杂质测定技术杂质测定技术 第22页，本讲稿共22页