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2、作中用到了限制酶、DNA 连接酶、运载体 考点限制酶细化: 限制酶主要从原核生物生物中分别纯化出来,这种酶在原核生物中的作用是识别 DNA 分子的特定核苷酸序列,并且使每条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。 限制酶的特性是识别特定核苷酸序列,切割特定切点。限制酶产生的末端有两种:粘性末端和平末端。 DNA 连接酶与 DNA 聚合酶的作用部位是磷酸二酯键,二者在作用上的区分为前者是恢复被限制性内切酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键,后者单个的核苷酸连接到DNA分子上。 作为基因工程的载体应当具备标记基因、多个限制性内切酶切点、能够在宿主细胞内复制和稳定存等特点。 常见的载体种类有质粒
3、、动植物病毒、噬菌体 (4)基因工程四步骤:目的基因的猎取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测和表达。 考点细化: 目的基因的猎取方法为依据基因的核苷酸序列、基因的功能、基因在载体上的位置、基因的转录产物、以及基因的表达产物蛋白质等特性来猎取目的基因。 基因文库、基因组文库、cDNA 文库的区分:含有某种生物不同基因的很多DNA 片段,导入受体菌的群体中储存,各个受体菌体分别含有这种生物的不同基因,称之为基因文库。假如含有一种生物全部基因,叫做基因组文库。只包含一种生物的一部分基因,这种基因文库叫做部分基因文库,如cDNA 文库。 基因重组操作中构建基因表达载体的目的是
4、将目的基因在受体细胞中稳定存在,并且遗传给下一代,同时目的基因能够表达和发挥作用。 一个完整的基因表达载体包括:目的基因、启动子、终止子、标记基因。 将目的基因导入植物细胞、动物细胞和微生物细胞的常用方法分别是脓杆菌转化法、显微注射法、Ca2+处理法。 基因工程的受体细胞选择,植物可以采纳体细胞,动物不能用体细胞,一般采纳受精卵细胞。由于受精卵具有全能性。 当受体细胞是大肠杆菌时常用Ca2+处理细胞,这样做的目的是使细胞处于一种能够汲取四周环境中的DNA分子的感受态细胞。 目的基因的检测:转基因生物的 DNA 是否插入了目的基因(DNA分子杂交技术); 目的基因是否转录出了 mRNA(分子杂交
5、技术); 目的基因是否翻译成蛋白质(抗原-抗体杂交); 个体生物学水平鉴定(直接观看和检测性状)。 目的基因的猎取、基因表达载体的构建、目的基因的检测和表达一般需要碱基互补配对。将目的基因导入受体细胞不需要碱基互补配对 3.基因工程的应用 (5)在农业生产上:主要用于提高农作物的抗逆力量(如:抗除草剂、抗虫、抗病、抗干旱和抗盐碱等),以及改良农作物的品质和利用植物生产药物等方面。 (6)基因治疗不是对患病基因的修复,基因检测所用的 DNA 分子只有处理为单链才能与被检测的样品,按碱基配对原则进行杂交。 4.蛋白质工程 (7)蛋白质工程的本质是通过基因改造或基因合成,对先有蛋白质进行改造或制造新
6、的蛋白质,所以被形象地称为其次代基因工程;基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质。 高三生物学问点总结 植物细胞工程 1.理论基础(原理):细胞全能性 2.植物组织培育技术(b) (1)过程:离体的植物器官、组织或细胞 愈伤组织 试管苗 植物体 (2)用途:微型繁殖、作物脱毒、制造人工种子、单倍体育种、细胞产物的工厂化生产。 A 植物繁殖 微型繁殖:可以高效快速地实现种苗的大量繁殖 作物脱毒:采纳茎尖组织培育来除去病毒(由于植物分生区四周的病毒极少或没有) 人工种子:以植物组织培育得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料,经人工薄膜包装得到的种子。优点:完全保持优良品种的遗传特性,不受季
7、节的限制;便利贮存和运输 B 作物新品种培育 单倍体育种: a过程:植株(AaBb)通过减数分裂得到花粉(AB、Ab、aB、ab四种类型);对花粉进行花药离体培育(技术是植物组织培育);得到单倍体植株;对其幼苗时期进行秋水仙素处理;得到了正常的纯合二倍体植株(AABB、AAbb、aaBB、aabb四种类型)。 b 优点:明显缩短育种年限 C 突变体利用:在组织培育中会出现突变体,通过从有用的突变体中选育出新品种筛选抗病、抗盐、含高蛋白的突变体) D 细胞产物的生产:通过能够产生对人们有利的产物的细胞进行组织培育,从而让它们能够产生大量的细胞产物。 (3)地位:是培育转基因植物、植物体细胞杂交培
8、育植物新品种的最终道工序。 3.植物体细 胞杂交技术 (1)过程: (2)诱导融合的方法:物理法包括离心、振动、电刺激等。化学法一般是用聚乙二醇(PEP和磷酸己糖旁路途径HMP)。 2. 蛙的红细胞增殖方式为无丝分裂。 3. 乳酸菌是细菌,全称叫乳酸杆菌。 4.XY是同源染色体,但其大小不一样(Y染色体短小得多),所携带的基因不完全相同(Y染色体上基因少得多)。 5. 酵母菌是菌,但为真菌类,属于真核生物。 6.一般的生化反应都需要酶的催化,可水的光解不需要酶,只是利用光能进行光解,这就是证明“并不是生物体内全部的反应都需要酶”的例子。 7.人属于需氧型生物,人的体细胞主要是进行有氧呼吸的,但
9、红细胞却进行无氧呼吸。 8.细胞分化一般不行逆,但是植物细胞很简单重新脱分化,然后再分化形成新的植株。 9. 高度分化的细胞一般不具备全能性,但卵细胞是个特例。 10. 细胞的分裂次数一般都很有限,但癌细胞又是一个特例。 11. 人体的酶发挥作用时,一般需要接近中性环境,但胃蛋白酶却需要酸性环境。 12. 矿质元素一般都是灰分元素,但N例外。 13. 双子叶植物的种子一般无胚乳,但蓖麻例外;单子叶植物的种子一般有胚乳,但兰科植物例外。 14. 植物一般都是自养型生物,但菟丝子、大花草、天麻等是典型的异养型植物。 15. 蜂类、蚁类中的雄性个体是由卵细胞单独发育而来的,只具有母方的遗传物质;雌性
10、个体由受精卵发育而来。 16. 一般养分物质被消化后,汲取主要是进入血液,但是甘油与脂肪酸则被主要被汲取进入淋巴液中。 17. 纤维素在人体中是不能消化的,但是它能促进肠的蠕动,有利于防止结肠癌,也是人体必需的养分物质了,所以也称为“第七养分物质”。 18. 酵母菌的呼吸方式为兼性厌氧型,有氧时进行有氧呼吸,无氧时进行无氧呼吸。 19. 高等植物无氧呼吸的产物一般是酒精,但是某些高等植物的某些器官的无氧呼吸产物为乳酸,如:马铃薯的块茎、甜菜的块根、玉米的胚等。 20. 化学元素“砷”是唯一可以使人致癌而不使其他动物致癌的致癌因子。 21. 体细胞的基因一般是成对存在的,但是,雄蜂和雄蚁就是孤雌生殖,只有卵细胞的染色体! 22. 体细胞的基因一般是成对存在的,植物中的香蕉是三倍体,进行无性生殖。 高三生物会考学问点2022