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1、关于螺旋霉素提取关于螺旋霉素提取第1页，讲稿共20张，创作于星期三螺旋霉素理化性质及结构螺旋霉素（spiramycin）是十六碳大环内酯类抗生素，是由生二素链霉菌（S.ambofaciens）所产生的。螺旋霉素是多组分的抗生素，其主要成分有螺旋霉素、。其化学结构如图1所示。第2页，讲稿共20张，创作于星期三图1第3页，讲稿共20张，创作于星期三抗生素提取工艺提取的过程就是浓缩和纯化的过程，因为发酵液体积大，抗生素浓度低，用一步操作往往是不能满足要求的，因此提取常分几步进行。其中以第1步最为重要，因为第1步处理的体积最大，浓度最低。以后几步处理的体积小，浓度也高，操作易控制。在提取前，需进行发酵
2、液的预处理，便于以后的提取。第4页，讲稿共20张，创作于星期三抗生素常用提取方法溶酶萃取法、离子交换法、吸附法、沉淀法。一般采用溶酶萃取法，通过对发酵液的预处理，过滤再离心分离得到BA萃取液，洗净再提取分离得到磷酸缓冲液，再过滤结晶，真空干燥最后得到抗生素成品。第5页，讲稿共20张，创作于星期三螺旋霉素提取方法螺旋霉素发酵液的提取采用溶酶萃取法，步骤如下：发酵液净化液滤液水提液水洗液水提液脱溶液结晶液湿晶体干燥成品包装入库。第6页，讲稿共20张，创作于星期三螺旋霉素的提取过程1.发酵液预处理：将发酵液加1.0%1.5%的硫酸铝并调节pH值4.55.0，搅拌，静止，使蛋白质充分沉淀。2.过滤：发
3、酵液首先通过板框过滤机过滤。各板框机的进料压力相同，过滤压力最初不得超过0.03 MPa，待每个出料嘴都出料后可以提高至0.05 MPa，滤速减慢，至0.100.15 MPa，整批过滤完后，用3.54.0 m3/次的水顶洗，用30%（V/V）低单位（400 U/mL以下）酸水顶洗。接着过滤液由水输送至滤液贮池，滤液再通过泵送至混合萃取罐。第7页，讲稿共20张，创作于星期三 3.醋酸丁酯提取：用5moL/L NaOH调过滤液pH值8.59.0，将醋酸丁酯泵入混合萃取罐。启动搅拌机搅拌（80100r/min）混合后静置分层。若干小时后，如出现乳化层，则用高速离心机将丁酯相和水相分开。第8页，讲稿共
4、20张，创作于星期三 4.水洗：丁酯提取液由萃取罐泵送到水洗罐。然后用40、50%（V/V）无盐水洗涤2次，每次洗涤均间歇搅拌（转速80100r/min）1 min，重复3次，静置分层4060 min，当放水至乳化层为白色时为止。第9页，讲稿共20张，创作于星期三 5.水提：水洗后再泵入水提灌。按水提液为3000050000 U/mL计算无盐水。用量：用1moL/L氯化氢和0.05mmoL/L磷酸二氢钠缓冲液调pH值为2.02.5，与丁酯提取液混合搅拌1min，重复3次，静置分层4060 min，分2次提取，合并2次水液，用真空泵抽到脱溶罐。第10页，讲稿共20张，创作于星期三 6.脱丁酯：水
5、提液通过真空泵缓缓输入脱丁酯罐。用1moL/L氢氧化钠回调pH值5.05.5，加碱液要慢，防止局部结膜，用0.02 MPa干净空气和真空彻底去除，至无丁酯味为止，防止跑料。第11页，讲稿共20张，创作于星期三 7.结晶：晶体成核可分为初级成核（没有待结晶物质以晶体形式存在）和二次成核（已有待结晶的物质以晶体形式存在）两类。螺旋霉素晶核大小测量困难，因为结晶过程中成核和晶体生长总是相耦合的，并且没有合适的条件可以保存它。光散射提供了一种估计核大小的有效方法，这种方法简便易行。利用光散射测量单分散性球形颗粒的粒径。第12页，讲稿共20张，创作于星期三 螺旋霉素颗粒的真密度可以使用比重瓶法测量，因为
6、螺旋霉素在正辛烷中的溶解度很小，而且正辛烷的密度较小，因此正辛烷可作为测量的流体介质，通过试验测得螺旋霉素的真密度为 1.10g/cm3。第13页，讲稿共20张，创作于星期三 8.干燥包装：将颗粒在真空干燥箱内真空度为99990Pa以下，水温80，每 2 h翻料1次，如有结块必须压碎。干燥时间10 h左右，当水分达到15%以下时停止。干燥后进入最后包装阶段，将干粉分装于8 kg的木桶或3 kg的铁桶内，桶内用3层包装，塑料袋外层为1层牛皮纸，最内一层仍为塑料袋，用绳扎好。第14页，讲稿共20张，创作于星期三结语在发酵液中，螺旋霉素的浓度很低，杂质浓度反而比其高出几十、几百倍，还有某些杂质及其结
7、构与抗生素极为相似，这就更增加了提取的难度。发酵液中常含有残蛋白质、脂肪、无机盐、菌丝等，此外还有预处理时加入的硫酸铝、草酸等，成分极其复杂，因此抗生素的提取非常不易。合理地利用提取工艺，不仅可以降低螺旋霉素的生产成本，而且能够有效地提高螺旋霉素的产量。第15页，讲稿共20张，创作于星期三抗生素结晶的几种常用方法1)蒸发结晶。使溶液在加压、常压或减压下加热蒸发除去一部分溶剂，以达到或维持溶液过饱和度，使晶体长大。2)化学反应结晶。加入反应剂或调节pH产生新物质,当该新物质的浓度超过它的溶解度时就有结晶析出。第16页，讲稿共20张，创作于星期三 3)过饱和冷却结晶。使溶液冷却降温以维持一定过饱和度，不用除去溶剂,优点是能耗小设各构造及操作较简单，但生产速率和产率相应较低，难以自动控制。4)盐(溶)析结晶。加一种物质于溶液中，以便溶质的溶解度降低形成过饱和溶液而结晶。第17页，讲稿共20张，创作于星期三 抗生素结晶体系介稳区抗生素结晶体系介稳区第18页，讲稿共20张，创作于星期三 谢谢观看！再见！李义明 辛明 谢平 雷文君第19页，讲稿共20张，创作于星期三感感谢谢大大家家观观看看第20页，讲稿共20张，创作于星期三