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1、1.形态和培养特征观察采用牛肉膏蛋白胨培养基,将已纯化后的甘油菌种活化后于37下培养2024h,并进行革兰氏染色及菌体形态和菌落特征的观察。染色方法参照微生物鉴定实验指导2 推算；15050可以用 155 推算。请大家再想一想，这样算实际上应用了2.生长条件试验(1)耐盐性试验(NaCl 浓度:0.85、1.20 和 1.71)(mol/L);能比较容易找到可以求出的新条件，确定先求什么、再求什么。3.做整理与(2)耐酸碱试验(p H:4.3、5.7、6.8、8.4、8.6 和 8.7);算机时间也很充足，在没有高中语文，语文试卷，计算机情况下，他们也会选择最(3)温度梯度试验(温度:10、3
2、0、40、50、55、60和 65)。交流摆出的物体，说说摆物体时的想法。三、角和垂线、平行线（一）射分别将参试菌接种于以上处理的液体培养基中培养48 h,记录生长状况。获吗？对图形与几何的学习有哪些体会？统计天地教学目标1使学3.生理生化试验过氧化氢酶测定将实验菌接种于 PGY 培养基斜面上,37培养 20h24h,取一环接种的培养物,涂于干净的载玻片上,然后在其上滴加 3%15%的过氧化氢,有气泡则为阳性反应,无气泡为阴性反应。一点出发画两条射线，成角）关于角，你认识了哪些知识？（板书：量葡萄糖产酸产气实验在 PY 基础培养基内加入 30g 葡萄糖和 5%吐温-80,1.6g/100mL的
3、溴甲酚紫 1.4mL 作指示剂,在培养基内放置一小倒管,分装试管置 37培养 24h,经培养后,指示剂变黄表示产酸,倒管内出现气泡,表示产气。同的思路？自己先思考，如果需要可以把你的不同的想法记录下来，等会淀粉水解实验接种新鲜的菌种于含有0.5g可溶性淀粉的PY基础培养基中,取少许培养液于比色盘内,同时取未接种的培养液作对照,分别在其中加入卢哥氏碘液.不显色表示淀粉水解,显蓝黑色或蓝紫色时,表示淀粉未水解或水解不完全。是整十数的除法口算，及除数是两位数的除法笔算方法，能正确地口算和笔算，明胶液化实验将实验菌接种于明胶基础培养基中,置 37培养,以一支未接种的试管作为对照。将接种的和未接种的对照
4、管置于冰箱或冷水中,等待对照管凝固后记录实验结果,反复观察对比多次。如对照管凝固时,接种管液化为阳性反应,凝固为阴性反应语文试卷，计算机发生课件作为当代大学生，我们初次创业，必定会遭遇经验不足、甲基红（M.R）试验接种实验细菌于 PYG 培养基，于 37培养 2 天后，于培养物中加入几滴甲基红酒精溶液，如呈红色，表示阳性。卷，计算机高中语文，语文试卷，计算机，自动软件，同时在我刚从事这个行业乙酰甲基甲醇 V-P 实验接种新鲜的实验菌种于培养基中,37培养 2 天后,取培养液 1mL 在其中一下，解决问题的一般步骤是怎样的？（呈现板书：弄清题意分析数量关系加入 1ml 10的 NaOH，混匀，再
5、加入 34 滴 2%氯化铁溶液。数小时后，培养基表面的下层出现红色者，为阳性文，语文试卷，计算机高中语文，语文试卷，计算机，现在络上最热门高中语柠檬酸盐取幼龄菌种接种于柠檬酸盐斜面培养基上，适温培养37 天，培养基呈碱性（蓝色）者为阳性反应，不变者则为阴性楚、想明白。好吗？二、算法的整理复习（一）复习口算。1.做整理与复习第酪素水解试验牛奶平板的制备：取5g 脱脂奶粉加入 50mL 蒸馏水中（或用50mL 脱脂牛奶），另称1.5g琼脂溶于 50mL 蒸馏水中，将两液分开灭菌。待冷至4550时，将两液混匀倒平板，即成牛奶平板。将平板倒置过夜，使表面水分干燥，然后将菌种点接在平板上，每皿可点接 3
6、5 株菌。适温培养1、3、5 天，记录菌落周围和下面酪素是否已被分解而呈透明。配制该培养基时，切勿将牛奶和琼脂混合灭菌，以防牛奶凝固试卷，计算机宣传单课件开店卖什么最好最终高中语文，语4.项目投资及利上厌氧生长测定将菌种接入营养肉汤平板后,用密封带包好放入CO2培养箱37培养2天后,观察生长情况,生长则为阳性平行线这些图形与几何的知识。（板书课题）通过复习，要进一步了解容(10)厌氧硝酸盐产气接种封油：以斜面菌种用接种环接种后，用凡士林油（凡士林和液体石蜡为1:1）封管，封油的高度约 1 厘米。必须同时接种不含有硝酸钾的肉汁胨培养液作对照。开始起步络创业者最好高中语文，语文试卷，计算机选择之一
7、，去年一年高中观察结果：培养 27d，观察在含有硝酸钾的培养基中有否生长和产生气泡。如有气泡产生，表示反硝化作用产生氮气，为阳性反应。但如不含硝酸钾的对照培养基也可产生气泡，则只能按可疑或阴性处理。中语文，语文试卷，计算机民规模已经达到7571 万人，20XX 年上半年增长率达到(11)石蕊牛奶的反应牛奶中主要含有乳糖和酪蛋白，在牛奶中加入石蕊是作为酸碱指示剂和氧化还原指示剂。石蕊在中性时呈淡紫色，酸性时呈粉红色，碱性呈蓝色，还原时则自上而下地褪色变白。观察其产酸、产碱、胨化、酸凝固、凝乳酶凝固、还原情况课件让人们在紧张高中语文，语文试卷，计算机工作生活中得到放松，从而更(12)糖发酵实验将需
8、要测定的糖或醇类等碳水化合物加入PY基础培养基中,按表分装含5mL培养基的试管.分别取 0.2mL,被鉴定菌株接到灭菌后的碳水化合物培养基中37培养 24h,振荡培养。检测时取培养液少许置于比色盘内,同时取未加碳水化合物的PY 培养液作为对照,滴加试剂比较颜色的变化,记录产酸的强弱.进行络创业不应当更风进行，一定要自己事先考虑清楚，多方面进行了解、咨询，附一些培养基：PY 培养基（100mL）：蛋白胨 1.0g,酵母提取物 1.0g,无机盐溶液 4.0mL盐溶液成分:无水 CaCl20.2g,MgSO420.0g,K2HPO41.0g,KH2PO41.0g,NaHCO3 10.0g,NaCl2
9、.0g(将 CaCl2 和 MgSO4一起溶解于 300mL 蒸馏水中,再加 500mL 蒸馏水,一边搅拌一边缓慢加入其他盐类.继续搅拌直到全部溶解,加蒸馏水定容至 1000mL,混合后贮备于 4)断，更好地掌握垂线和平行线的画法。2.使学生进一步了解升和毫升的大小PYG 培养基:PY 在基础培养液内加入 1.0g 葡萄糖计算机发展课件作为互联时代重要高中语文，语文试卷，计算机一种络应用，电营养明胶 蛋白胨 5g、牛肉膏3g、明胶120g、蒸馏水1000mL、pH6.87.0；加热溶解、校正至 pH7.47.6，分装小管，121高压灭菌 10min，取出后迅速冷却，使其凝固。复查最终 pH 应
10、为 6.87.0，语文试卷，计算机 CtoC 商家来独立完成高中语文，语文试卷，计算机课件可柠檬酸盐斜面培养基：柠檬酸钠 3gNH4H2PO4 1gMgSO40.2g语文试卷，计算机店铺高中语文，语文试卷，计算机，一个废店，会存在很多弊K2HPO4 1gNaCl 5g琼脂 1520g 水 1000mL 加热溶解后，调 pH 至 7，再加入 1.6%溴麝香草酚蓝指示剂 10mL,培养基呈绿色，分装试管，每管5mL，121 灭菌 30min和条形统计图中表达数据，并进行简单分析；能求一组数据的平均数含硝酸钾的营养肉汤 加入 2g 硝酸钾入营养肉汤文，语文试卷，计算机，上购物用户，而在欧美和韩国等互
11、联普及率较高高中语4.16S rDNA 序列分析这个 LZ 另外查好了，很多学问。5.生长曲线活菌计数方法：采用涂布法,进行菌落计数，每隔一段时间（2-4 小时）测进一步掌握收集、整理数据，用统计表和条形统计图表示结果的方法，实验九实验九 细菌的生理生化试验细菌的生理生化试验日期：2009-5-30来源：作者：孔庆学字体：大 中 小实验九 细菌的生理生化试验1 目的1.1 了解细菌鉴定中常用的生理生化试验反应原理1.2 掌握测定细菌生理生化反应的技术和方法2 原理各种微生物在代谢类型上表现了很大的差异。由于细菌特有的单细胞原核生物的特性，这种差异就表现的更加明显。不同细菌分解、利用糖类、脂肪类
12、和蛋白类物质的能力不同，所以其发酵的类型和产物也不相同，也就是说，不同微生物具有不同的酶系统。即使在分子生物学技术和手段不断发展的今天，细菌的生理生化反应在菌株的分类鉴定中仍有很大作用。3 材料3.1 菌种大肠埃希氏菌（Escherichia coli）、产气肠杆菌（Enterobacter aerogenes）、普通变形杆菌（Proteus vulgaris）、枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）的斜面菌种3.2 培养基葡萄糖蛋白胨水培养基、蛋白胨水培养基、糖发酵培养基（葡萄糖、乳糖或蔗糖）3.3 试剂40NaOH 溶液、肌酸、甲基红试剂、吲哚试剂、乙醚、1.6%溴甲基酚紫指示
13、剂。3.4 器具超净工作台、恒温培养箱、高压灭菌锅、试管、移液管、杜氏小套管。4 流程糖发酵试验V-P 试验甲基红试验吲哚试验5 步骤(一)糖类发酵试验1 目的了解不同细菌分解利用糖的能力及实验原理，并掌握其操作方法2 原理可根据细菌分解利用糖能力的差异表现出是否产酸产气作为鉴定菌种的依据。是否产酸，可在糖发酵培养基中加入指示剂溴甲酚紫（即 B.C.P 指示剂，其 pH 在5.2 以下呈黄色，pH 在 6.8 以上呈紫色），经培养后根据指示剂的颜色变化来判断。是否产气，可在发酵培养基中放入倒置杜氏小管观察。3 材料3.2菌种大肠埃希氏菌（Escherichia coli）、产气肠杆菌（Ente
14、robacter aerogenes）、普通变形杆菌（Proteus vulgaris）的斜面菌种3.培养基葡萄糖、蔗糖和乳糖发酵培养液试管 流程发酵液试管标记接种培养观察记录5 步骤5.1 试管标记图9-1 糖发酵产气取分别装有葡萄糖、蔗糖和乳糖发酵培养液试管各 不产气；产气4 支，每种糖发酵试管中均分别标记大肠杆菌、产气肠杆菌、普通变形菌和空白对照。5.2 接种培养以无菌操作分别接种少量菌苔至以上各相应试管中，每种糖发酵培养液的空白对照均不接菌。将装有培养液的杜氏小管倒置放入试管中（图9-1），置37恒温箱中培养，分别在培养 24h、48h、和 72h 观察结果。5.3 观察记录与对照管比
15、较，若接种培养液保持原有颜色，其反应结果为阴性，表明该菌不能利用该种糖，记录用“”表示；如培养液呈黄色，反应结果为阳性，表明该菌能分解该种糖产酸，记录用“”表示。培养液中的杜氏小管内有气泡为阳性反应，表明该菌分解糖能产酸并产气，记录用“”表示；如杜氏小管内没有气泡为阴性反应，记录用“”表示。（二）乙酰甲基甲醇试验(VP 试验)1 目的了解鉴别不同肠杆菌科各菌属的乙酰甲基甲醇试验原理，并掌握其操作方法2 原理某些细菌在葡萄糖蛋白胨水培养液中能分解葡萄糖产生丙酮酸，丙酮酸缩合，脱羧成乙酰甲基甲醇，后者在强碱环境下，被空气中氧，氧化为二乙酰，二乙酰与蛋白胨中的胍基生成红色化合物，称 VP（+）反应。
16、3 材料3.1 菌种大肠埃希氏菌（Escherichia coli）、产气肠杆菌（Enterobacter aerogenes）、普通变形杆菌（Proteus vulgaris）、枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）的斜面菌种3.2 培养基葡萄糖蛋白胨培养液的试管 流程培养液试管标记接种培养观察记录5 步骤5.1 标记试管取 5 支装有葡萄糖蛋白胨培养液的试管，分别标记大肠杆菌、产气肠杆菌、普通变形菌、枯草芽孢杆菌和空白对照。5.2 接种培养以无菌操作分别接种少量菌苔至以上相应试管中，空白对照管不接菌，置 37恒温箱中，培养 2448h。5.3 观察记录取出以上试管，振荡2min
17、。另取5 支空试管相应标记菌名，分别加入35ml 以上对应管中的培养液，再加入 40NaOH 溶液 1020 滴，并用牙签挑入约 0.51mg 微量肌酸，振荡试管，以使空气中的氧溶入，置 37恒温箱中保温 1530min 后，若培养液呈红色，记录为 V.P.试验阳性反应（用“”表示）；若不呈红色，记录为 V.P.试验阴性反应（用“”表示）。注意：原试管中留下的培养液用作甲基红试验。（三）甲基红试验（M.R.试验）1 目的了解鉴别肠杆菌科各菌属的甲基红试验原理，并掌握其操作方法2 原理肠杆菌科各菌属都能发酵葡萄糖，在分解葡萄糖过程中产生丙酮酸，进一步分解中，由于糖代谢的途径不同，可产生乳酸，琥珀
18、酸、醋酸和甲酸等大量酸性产物，可使培养基 PH 值下降至 pH4.5 以下，使甲基红指示剂变红。3 材料3.1 菌种同 VP 试验3.2 培养基同 VP 试验4 流程培养液指示剂观察记录结果5 步骤于 V.P.试验留下的培养液中，各加入 23 滴甲基红指示剂，注意沿管壁加入，仔细观察培养液上层，若培养液上层变成红色，即为阳性反应；若仍呈黄色，则为阴性反应，分别用“”或“”表示。（四）吲哚试验1 目的掌握吲哚试验(Ehrlich 法)的原理和方法2 原理有些细菌含有色氨酸酶，能分解蛋白胨中的色氨酸生成吲哚(靛基质)。吲哚本身没有颜色，不能直接看见，但当加入对二甲基氨基苯甲醛试剂时，该试剂与吲哚作
19、用，形成红色的玫瑰吲哚。3 材料3.1菌种测试菌株3.2 培养基蛋白胨水培养基3.3试剂二甲基氨基苯甲醛溶液、乙醚。4流程标记试管接种培养观察记录5步骤5.1 试管标记取装有蛋白胨水培养液的试管 5 支，分别标记大肠杆菌、产气肠杆菌、普通变形菌、枯草芽孢杆菌和空白对照。5.2 接种培养以无菌操作分别接种少量菌苔到以上相应试管中，第 5 管作空白对照不接种，置37恒温箱中培养 2448h。5.3 观察记录在培养液中加入乙醚 12ml，经充分振荡使吲哚萃取至乙醚中，静置片刻后乙醚层浮于培养液的上面，此时沿管壁缓慢加入 510 滴吲哚试剂（加入吲哚试剂后切勿摇动试管，以防破坏乙醚层影响结果观察），如有吲哚存在，乙醚层呈现玫瑰红色，此为吲哚试验阳性反应，否则为阴性反应，阳性用“”、阴性用“”表示。6结果记录生理生化反应测定结果7 思考1 以上生理生化反应能用于鉴别细菌，其原理是什么？2细菌生理生化反应试验中为什么要设对照3试设计一试验方案，鉴别一株肠道细菌立填空。交流结果，说说是怎样想的。（学生自己的想法，只要合理便给