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1、化学性质实验报告有机实验报告糖、氨基酸和蛋白质的鉴定一、糖的鉴定糖类化合物：又称碳水化合物，是多羟基醛或多羟基酮及其缩聚物和某些衍生物的总称，一般由碳、氢与氧三种元素所组成。实验目的：（1）进一步了解糖的化学性质；（2）掌握鉴定糖的方法及其原理。（一）-萘酚试验（molish)糖类化合物一个比较普遍的定性反应是 molish 反应。即在浓硫酸存在下，糖与-萘酚(molish 试剂）作用生成紫色环。实验方法取 3 支试管，编号，分别加入 0.5 ml 0.5%的各待测糖水溶液，滴入 2 滴 molish 试剂（-萘酚的乙醇溶液），摇匀。把试管倾斜 450，沿管壁慢慢加入约 1ml 浓硫酸（切勿摇
2、动），小心竖直后仔细观察两层液面交界处的颜色变化。硫酸在下层,试液在上层 样品：葡萄糖、蔗糖及淀粉解释:糖被浓硫酸脱水生成糠醛或糠醛衍生物，后者进一步与-萘酚缩合生成紫红色物质，在糖液和浓硫酸的液面间形成紫色环。（二）fehling 试验（1）实验原理fehling 试剂：含有硫酸铜和酒石酸钾钠的氢氧化钠溶液。硫酸铜与碱溶液混合加热，生成黑色的氧化铜沉淀。若同时有还原糖存在，则产生黄色或砖红色的氧化亚铜沉淀。为防止铜离子和碱反应生成氢氧化铜或碱性碳酸铜沉淀，fehling 试剂中需加入酒石酸钾钠，它与 cu2形成的酒石酸钾钠络合铜离子是可溶性的络离 子。（2）操作方法取 4 支试管，编号，分别
3、加入 fehling 试剂 i 和 ii 各0.5ml。摇匀并置于水浴中微热后，分别加入 5 滴待测糖溶液，振荡后置于沸水浴中加热 2 3min，取出冷却，观察颜色变化及 有无沉淀析出。fehling 试剂 i：称取 3.5 g 硫酸铜溶于 100 ml 蒸馏水中,得淡蓝色的 fehling 试剂 i。fehling 试剂 ii：将 17g 酒石酸钾钠溶于 20ml 热水中，然后加入 20 ml 含5 g naoh 的水溶液，稀释至 100 ml 得无色透明的fehling 试剂 ii。样品：葡萄糖、果糖、蔗糖及麦芽糖解释:硫酸铜与碱溶液混合加热，生成黑色的氧化铜沉淀。若同时有还原糖存在，则产
4、生黄色或砖红色的氧化亚铜沉淀。（三）benedict 试验（1）实验原理：benedict 试剂是 fehling 试剂的改良。benedict 试剂利用柠檬酸作为 cu2+的络合剂。benedict 试剂：取 17.3 g 柠檬酸钠和 10 g 无水碳酸钠溶于 80 ml水中，再取 1.73 g结晶的硫酸铜溶解在 10 ml水中，慢慢将此溶液加入上述溶液，用水稀释至 100 ml 得benedict 试剂。（2）操作方法用 benedict 试剂代替 fehling 试剂 重复以上实验，取4 支试管，编号，分别加入 benedict 试剂0.5ml。摇匀并置于水浴中微热后，分别加入 5 滴待
5、测糖溶液，振荡后置于沸水浴中加 热 2 3min，取出冷却，观察颜色变化及有无沉淀析出。样品：葡萄糖、果糖、蔗糖及麦芽糖解释:硫酸铜与碱溶液混合加热，生成黑色的氧化铜沉淀。若同时有还原糖存在，则产生黄色或砖红色的氧化亚铜沉淀。（四）成脎试验（1）实验原理:单糖与过量的苯肼作用生成糖脎，糖脎是不溶于水的黄色晶体。不同的糖脎，其晶形、熔点及生成速度大都不同，所以可通过成脎试验区别不同的还原性糖。由于成脎反应是发生在 c1 和 c2 上，不涉及糖分子的其他部分，所以葡萄塘、果糖都能生成相同的脎。但由于成脎的速度不同，仍然是可以区别的。(2)操作方法在试管中加人 1 ml 5%的样品溶液，再加入 0.
6、5 ml 10%的苯肼盐酸盐溶液和 0.5 ml 15%的乙酸钠溶液，在沸水浴中加热并振摇，记录并比较形成结晶所需要的时间。并在低倍显微镜下观察脎的结晶形状。样品:葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、果糖注意:苯肼有较高毒性。取用时慎勿触及皮肤。若已发生皮肤沾染，先用稀醋酸洗，再 用清水洗净。解释:单糖与过量的苯肼作用生成糖脎，糖脎是不溶于水的黄色晶体。不同的糖脎，其晶形、熔点及生成速度大都不同，所以可通过成脎试验区别不同的还原性糖。（五）tollens 试验在洗净的试管中加入 1 ml tollens 试剂，在加入 0.5ml 5%糖溶液，在 50 oc 水浴中温热，观察有无银镜生成。样品：葡萄糖，果糖，
7、麦芽糖，蔗糖解释:（六）淀粉水解试验(1)实验原理:淀粉是葡萄糖的高聚体，在餐饮业又称芡粉，通式是(c6h10o5)n。淀粉在酸的催化作用下，能发生水解；淀粉的水解过程：先生成分子量较小的糊精（淀粉不完全水解的产物），糊精继续水解生成麦芽糖（双糖），最终水解产物是葡萄糖（单糖），其与 fehling试剂作用可发生显色反应。(2)操作方法:在试管中加入 3 ml 淀粉溶液,再加入0.5 ml 20%稀硫酸，将试管放在沸水中加热 5 min，然后取出试管冷却后用 10%naoh 溶液中和至中性。取2滴与fehling试剂 作用，观察有何现象发生？现象:产生砖红色沉淀解释：淀粉是葡萄糖的高聚体，淀粉
8、在酸的催化作用下，能发生水解；淀粉的水解过程：先生成分子量较小的糊精（淀粉不完全水解的产物），糊精继续水解生成麦芽糖（双糖），最终水解产物是葡萄糖（单糖），其与 fehling 试剂作用可发生显色反应。二、氨基酸及蛋白质的鉴定氨基酸：含有氨基和羧基的一类有机化合物的通称，是含有一个碱性氨基和一个酸性羧基的有机化合物。氨基酸是蛋白质的基本组成单位。蛋白质：是由氨基酸以酰胺键形成的复杂高分子化合物，是生物体的基本组成物质。实验目的：（1）了解构成蛋白质的基本结构单位及主要连接方式。（2）掌握蛋白质和某些氨基酸的显色反应原理。（3）学习几种常用鉴定蛋白质和氨基酸的方法。（一）茚三酮反应（1）实验原理
9、-氨基酸或含有游离氨基的蛋白质的水解产物与茚三酮水溶液共热，能生成蓝紫色化合物。这是-氨基酸特有的反应，因此常用于-氨基酸的定性或定量测定。(2)操作方法取 3 支试管，编号后分别加入 4 滴 0.5%的甘氨酸、酪蛋白和蛋白质 溶液，再加入 2 滴 0.1%的茚三酮-乙醇溶液，混合均匀后，将试管放在沸水浴中加热 12min，观察并比较 3 支试管显色的先后次序。样品：甘氨酸、酪蛋白和蛋白质解释：（二）双缩脲反应（1）实验原理：尿素加热至180左右，生成双缩脲并放出一分子氨。双缩脲在碱性 环境中能与 cu2+结合生成紫红色化合物，此反应称为双缩脲反应。由于蛋白质分子中有肽键，其结构与双缩脲相似，
10、因此也能发生此反应生成蓝色、紫色或红色的铜盐配合物。氨基酸因不含肽键，故除组氨酸外都不发生此反应。nh2conhconh2(双缩脲）(2)操作方法：取 1 支试管，加入 10 滴蛋白质溶液和15-20 滴 10%naoh 溶液，混合均 匀后，再加入 3-5 滴 5%硫酸铜溶液，边加边摇，观察有何现象。现象：变成蓝色溶液解释：尿素加热至 180左右，生成双缩脲并放出一分子氨。双缩脲在碱性环境中能与 cu2+结合生成紫红色化合物，此反应称为双缩脲反应。由于蛋白质分子中有肽键，其结构与双缩脲相似，因此也能发生此反应生成蓝色、紫色或红色的铜盐配合物。（三）黄色反应（1）实验原理：几乎所有的蛋白质与浓硝
11、酸作用产生黄色，黄色物质在碱性溶液中进一步形成橙红色。这是因为多数蛋白质分子都含有带苯环的氨基酸，产生黄色的硝化物。（2）操作方法：（a)取一支试管，加 4 滴蛋白质溶液和 2 滴浓硝酸（由于强酸作用，蛋白质出现白色沉淀），然后置于水浴中加热，沉淀变成黄色，冷却后，逐滴加入 10%naoh 溶液至溶液呈 碱性，观察颜色的变化。（b)取一支试管，加4 滴 0.1%苯酚溶液代替蛋白质，重复上述操作，观察颜色的变化。（c)取一支试管，加入少量指甲，再加入 5-10 滴浓硝酸，放置 10min 后，观察指甲的 颜色变化。（四）醋酸铅反应操作方法取一支试管，加 1 ml 0.5%醋酸铅溶液，再逐滴加入1%naoh 溶液，直到生成的沉淀溶解为止，摇动均匀。再加入5-10 滴蛋白质溶液，混合均匀，在水浴上小心加热，待溶液变成棕黑色时，将试管取出冷却，再小心加入 2 ml 浓盐酸。观察有何现象产生，并嗅其味，判断是什么物质。现象：产生大量白色，具有刺激性气味的气体。该气体是硫化氢气体解释：蛋白质分子中常含有半胱氨酸和胱氨酸，含硫蛋白质在强碱条件下，可分解形成硫化钠。硫化钠和醋酸铅反应生成黑色的硫化铅沉淀。若加入浓盐酸，就生成有臭味的硫化氢气体。r-sh+2naoh r-oh+nas+ho 22na2s+pb+2 pbs+2na+pbs+2hcl pbcl+hs 22化学性质实验报告