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1、关于体外受精和早期胚胎培养第1页，讲稿共71张，创作于星期一一、试管动物技术一、试管动物技术一、试管动物技术一、试管动物技术 是指通过人工是指通过人工操作使操作使卵子卵子和和精精子子在体外条件下在体外条件下成熟和受精，并成熟和受精，并通过培养发育成通过培养发育成早期胚胎后，再早期胚胎后，再经经移植移植产生后代产生后代的技术。的技术。第2页，讲稿共71张，创作于星期一一、试管动物技术一、试管动物技术1.1.概念概念:指通过指通过人工操作人工操作使卵子和精子在使卵子和精子在体外条件体外条件下下成熟和受精成熟和受精,并通过培养发育为并通过培养发育为早期胚胎早期胚胎后后,再再经移植产生后代的技术。经移
2、植产生后代的技术。2.2.对象：动物配子或早期胚胎。对象：动物配子或早期胚胎。3.3.应用的技术：体外受精、早期胚胎的培养和胚应用的技术：体外受精、早期胚胎的培养和胚胎移植。胎移植。4.4.意义：实现优良种畜的快速大量的繁殖。意义：实现优良种畜的快速大量的繁殖。第3页，讲稿共71张，创作于星期一二、体外受精二、体外受精概念：指哺乳动物的精子和卵子在体外人工控制的环境概念：指哺乳动物的精子和卵子在体外人工控制的环境中完成受精过程的技术；中完成受精过程的技术；包括包括卵母细胞的采集卵母细胞的采集精子的获能精子的获能获能精子和卵细胞的受精。获能精子和卵细胞的受精。第4页，讲稿共71张，创作于星期一卵
3、母细胞的采集和培养卵母细胞的采集和培养:1.1.采集方法：采集方法：小型动物如鼠、兔，以及家畜猪、羊等常采用小型动物如鼠、兔，以及家畜猪、羊等常采用超数超数排卵法排卵法，使其排出更多的卵子，然后从输卵管中冲取，使其排出更多的卵子，然后从输卵管中冲取大型动物如牛：大型动物如牛：从已屠宰母畜卵巢中采集卵母细从已屠宰母畜卵巢中采集卵母细胞胞从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞（超声波探测从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞（超声波探测仪、内窥镜或腹腔镜等。仪、内窥镜或腹腔镜等。第5页，讲稿共71张，创作于星期一2.2.采集后培养方法采集后培养方法:从输卵管中冲取的卵子可直接与获能的精子在体从输卵管中冲取的卵子可
4、直接与获能的精子在体外受精外受精;从卵巢中采取的卵母细胞需要在体外人工培养成从卵巢中采取的卵母细胞需要在体外人工培养成熟后才能与获能精子受精熟后才能与获能精子受精.精子的采集和获能精子的采集和获能1.1.采集方法采集方法假阴道法假阴道法:适用于大型家畜或动物适用于大型家畜或动物手握法手握法:适用于体型较小适用于体型较小,易于控制的动物如猪、犬易于控制的动物如猪、犬电刺激法：适用于野生或经济动物。电刺激法：适用于野生或经济动物。第6页，讲稿共71张，创作于星期一2.2.获能处理：获能处理：培养法培养法:即将取自附睾的精子即将取自附睾的精子,放入人工配置的获放入人工配置的获能液中能液中,培养一段时
5、间后培养一段时间后,精子即可获能。精子即可获能。适用于：啮齿动物、家兔和猪等适用于：啮齿动物、家兔和猪等化学诱导法：适用于牛、羊等家畜化学诱导法：适用于牛、羊等家畜即将精子放在一定浓度的肝素或即将精子放在一定浓度的肝素或GaGa2+2+载体载体A23187A23187溶溶液中，用化学药物诱导精子获能。液中，用化学药物诱导精子获能。3.3.受精：获能的精子和培养成熟的卵子，在获能受精：获能的精子和培养成熟的卵子，在获能溶液和专用的受精溶液中完成受精过程。溶液和专用的受精溶液中完成受精过程。第7页，讲稿共71张，创作于星期一 在在获能溶液获能溶液或或专用的受精溶专用的受精溶液液中完成受精中完成受精
6、过程过程。体外受精体外受精第8页，讲稿共71张，创作于星期一概括受精过程概括受精过程:卵母细胞卵母细胞MM期期精子获能精子获能体外受精体外受精受精卵受精卵第9页，讲稿共71张，创作于星期一三、胚胎的早期培养：三、胚胎的早期培养：1.1.培养液成分：（两盐、两素、两酸、血清）培养液成分：（两盐、两素、两酸、血清）水、无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸、水、无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸、血清血清培养液作用：用于受精卵的继续培养，以检查受精情培养液作用：用于受精卵的继续培养，以检查受精情况和受精卵的发育能力。况和受精卵的发育能力。3.3.胚胎去向胚胎去向 向受体移植向受体移
7、植冷冻保存冷冻保存注：牛、羊一般要培养到桑椹胚或囊胚阶段才进行移植；注：牛、羊一般要培养到桑椹胚或囊胚阶段才进行移植；小鼠、家兔等实验动物可在更早的阶段移植，人可在小鼠、家兔等实验动物可在更早的阶段移植，人可在8-8-1616个细胞阶段移植。个细胞阶段移植。为了提高胚胎发育率和妊娠率，实验为了提高胚胎发育率和妊娠率，实验中通常用囊胚阶段的胚胎。中通常用囊胚阶段的胚胎。第10页，讲稿共71张，创作于星期一目前由于无法进行全体外胚胎培养，目前由于无法进行全体外胚胎培养，胚胎移胚胎移植植成为胚胎工程中获得后代的唯一方法。成为胚胎工程中获得后代的唯一方法。（P74）胚胎工程中通过胚胎工程中通过 、和和
8、 等技术等技术获得的胚胎，都必须获得的胚胎，都必须 才能获得后代。才能获得后代。因此，因此，技术是胚胎工程其他技术的最后技术是胚胎工程其他技术的最后一道一道“工序工序”。转基因转基因核移植核移植体外受精体外受精移植给母体移植给母体胚胎移植胚胎移植第11页，讲稿共71张，创作于星期一四、胚胎移植四、胚胎移植1.1.概念：概念：指将雌性动物的指将雌性动物的早期胚胎早期胚胎，或者通过体外受精，或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的相同的雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术技术2.2.理
9、解理解胚胎来源：胚胎来源：雌性动物体内的早期胚胎雌性动物体内的早期胚胎通过体外受精和早期胚胎的培养获得通过体外受精和早期胚胎的培养获得通过哺乳动物体细胞核移植及培养获得通过哺乳动物体细胞核移植及培养获得通过转基因技术获得的胚胎通过转基因技术获得的胚胎第12页，讲稿共71张，创作于星期一对受体的要求：对受体的要求：同一物种的雌性动物同一物种的雌性动物与供体处于相同的生理状态与供体处于相同的生理状态实质：生产胚胎的供体和孕育胚胎的受体共同繁实质：生产胚胎的供体和孕育胚胎的受体共同繁殖后代的过程。殖后代的过程。地位：是胚胎工程的最后一道工序。地位：是胚胎工程的最后一道工序。（供体：（供体：提供胚胎的
10、个体；提供胚胎的个体；受体：受体：接受胚胎的个体；接受胚胎的个体；受体的条件：受体的条件：同种、生理状态相同同种、生理状态相同)第13页，讲稿共71张，创作于星期一胚胎移植的基本程序胚胎移植的基本程序供体：供体：遗传性能和生产性能优遗传性能和生产性能优秀的个体；秀的个体；受体：受体：健康和正常繁殖能力健康和正常繁殖能力的个体的个体处理：处理：同期发情同期发情具体做法：具体做法：注射相关激素。注射相关激素。同期发情技术：主要是借助外源激素剌激卵巢，使其按照预同期发情技术：主要是借助外源激素剌激卵巢，使其按照预定的要求发生变化，使处理母畜的定的要求发生变化，使处理母畜的卵巢生理机能都处于相同卵巢生
11、理机能都处于相同阶段阶段，从而达到同期发情。，从而达到同期发情。（1）对供体、受体进行选择）对供体、受体进行选择第14页，讲稿共71张，创作于星期一第15页，讲稿共71张，创作于星期一（2）采集卵母细胞）采集卵母细胞方法：方法：超数排卵超数排卵具体做法：具体做法：注射促性腺激素注射促性腺激素（3）配种或人工受精）配种或人工受精精子来源：精子来源：同种优良的雄性动物。同种优良的雄性动物。（4）胚胎的收集）胚胎的收集 在配种或输精后第在配种或输精后第7天，用特制的冲卵装置，天，用特制的冲卵装置，把供体母牛子宫内的把供体母牛子宫内的胚胎胚胎冲洗出来（冲洗出来（冲卵冲卵）。）。第16页，讲稿共71张，
12、创作于星期一（5）对胚胎进行质量检查）对胚胎进行质量检查 胚胎发育到胚胎发育到桑椹胚或囊胚桑椹胚或囊胚（6）胚胎的保存或移植）胚胎的保存或移植 -196OC的液氮保存的液氮保存（7）胚胎的移植）胚胎的移植方法一：手术法方法一：手术法方法二：非手术法方法二：非手术法（8）对受体母牛进行是否妊娠的检查）对受体母牛进行是否妊娠的检查（9）受体母牛产下胚胎移植的犊牛）受体母牛产下胚胎移植的犊牛第17页，讲稿共71张，创作于星期一选择选择供体母牛供体母牛受体母牛受体母牛同期发情处理同期发情处理超数排卵超数排卵供体公牛供体公牛配种配种冲卵冲卵质量检查、培养质量检查、培养胚胎移植胚胎移植妊娠检查妊娠检查分娩
13、（胚胎移植的犊牛）分娩（胚胎移植的犊牛）胚胎移植的基本程序胚胎移植的基本程序同期发情技术：同期发情技术：主要是借助外主要是借助外源激素剌激卵源激素剌激卵巢，使其按照巢，使其按照预定的要求发预定的要求发生变化，使处生变化，使处理母畜的卵巢理母畜的卵巢生理机能都处生理机能都处于相同阶段，于相同阶段，从而达到同期从而达到同期发情。发情。第18页，讲稿共71张，创作于星期一3.3.胚胎移植的基本程序胚胎移植的基本程序第19页，讲稿共71张，创作于星期一4.4.胚胎移植的生理学基础胚胎移植的生理学基础同种动物排卵后，不管是否妊娠，一段时间内同种动物排卵后，不管是否妊娠，一段时间内供受体生殖器官的生理变化
14、时相同的供受体生殖器官的生理变化时相同的为移入的胚胎提供了相同的生理环境；为移入的胚胎提供了相同的生理环境；早期胚胎处于游离状态早期胚胎处于游离状态为胚胎的收集提供了可能；为胚胎的收集提供了可能；受体对移入子宫的胚胎不发生免疫排斥受体对移入子宫的胚胎不发生免疫排斥是胚胎存活的条件；是胚胎存活的条件；供体胚胎可与受体子宫建立正常的生理和组织联供体胚胎可与受体子宫建立正常的生理和组织联系，但其遗传物质不受影响。系，但其遗传物质不受影响。第20页，讲稿共71张，创作于星期一供体和受体共同繁殖后代有供体和受体共同繁殖后代有什么好处？什么好处？可以充分发挥雌性优良个体的繁殖能力可以充分发挥雌性优良个体的
15、繁殖能力供体的主要职能：供体的主要职能：产生具有优良遗传特性的胚胎，大大缩短了供体本产生具有优良遗传特性的胚胎，大大缩短了供体本身的繁殖周期身的繁殖周期受体的职能：受体的职能：担任繁重而漫长的妊娠和育仔的任务担任繁重而漫长的妊娠和育仔的任务受体的条件：受体的条件：健康的体质及正常的繁殖能力健康的体质及正常的繁殖能力同种的生理状态相同的其他雌性动物同种的生理状态相同的其他雌性动物第21页，讲稿共71张，创作于星期一准备移植的胚胎，移植到任何一头动物子宫准备移植的胚胎，移植到任何一头动物子宫内都能发育吗内都能发育吗?胚胎移植一般应在同种的雌性供体和受体之间进胚胎移植一般应在同种的雌性供体和受体之间
16、进行，因为同种动物之间的生理特征相近，进行胚行，因为同种动物之间的生理特征相近，进行胚胎移植易于成功。胎移植易于成功。.供体和受体之间进行胚胎移植时会不会发生免供体和受体之间进行胚胎移植时会不会发生免疫排斥反应疫排斥反应?同种动物之间基本上不排斥同种动物之间基本上不排斥第22页，讲稿共71张，创作于星期一能否直接从母体子宫内进行胚胎收集能否直接从母体子宫内进行胚胎收集?为什么？为什么？能。因为哺乳动物的早期胚胎形成后，在一定时间能。因为哺乳动物的早期胚胎形成后，在一定时间内不会与母体子宫建立组织上的联系，而是处于游内不会与母体子宫建立组织上的联系，而是处于游离状态。离状态。.移植的胚胎能否保留
17、供体双亲的特性移植的胚胎能否保留供体双亲的特性?胚胎虽然与受体有生理和组织上的联系胚胎虽然与受体有生理和组织上的联系,但遗但遗传特性不受受体的影响传特性不受受体的影响第23页，讲稿共71张，创作于星期一2.2.胚胎移植成功与否的条件有哪些胚胎移植成功与否的条件有哪些?（1 1）胚胎移植一般应在同种的雌性供体和受体）胚胎移植一般应在同种的雌性供体和受体之间进行。之间进行。（2 2）进行胚胎移植的供体和受体的生理状态要）进行胚胎移植的供体和受体的生理状态要相同。相同。1.1.胚胎移植成功的标志是什么胚胎移植成功的标志是什么?移植的胚胎在受体内能正常发育并分娩移植的胚胎在受体内能正常发育并分娩第24
18、页，讲稿共71张，创作于星期一思考与讨论思考与讨论:1、在胚胎移植操作中，怎样才能使胚胎在移植前后、在胚胎移植操作中，怎样才能使胚胎在移植前后所处的生理环境保持一致？例如，供、受体的发情时间所处的生理环境保持一致？例如，供、受体的发情时间要一致吗？供体胚胎移入受体子宫的位置，应与在供体要一致吗？供体胚胎移入受体子宫的位置，应与在供体内的位置相同或相似吗？内的位置相同或相似吗？答案：答案：应对供体和受体母畜进行应对供体和受体母畜进行同期发情处理同期发情处理，使它，使它们的生理条件达到同步后一致，这样才能使供体们的生理条件达到同步后一致，这样才能使供体的胚胎移入受体后有相同或相似的生存条件，这的胚
19、胎移入受体后有相同或相似的生存条件，这是胚胎移植成功与否的关键。因此，必须做到供、是胚胎移植成功与否的关键。因此，必须做到供、受体母畜的发情时间一致。同时还要做到移入受受体母畜的发情时间一致。同时还要做到移入受体子宫胚胎的位置应该与其在供体内的体子宫胚胎的位置应该与其在供体内的位置相同或位置相同或相似相似，移入胚胎一侧的受体子宫对应的卵巢必须有黄体，移入胚胎一侧的受体子宫对应的卵巢必须有黄体存在。存在。第25页，讲稿共71张，创作于星期一2、胚胎移植实质上是早期胚胎在相同生理、胚胎移植实质上是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移。你认为这样的环境条件下空间位置的转移。你认为这样的概括正确
20、吗？概括正确吗？正确。正确。第26页，讲稿共71张，创作于星期一5.5.胚胎移植的意义：胚胎移植的意义：充分发挥了雌性优良个体的繁殖潜力充分发挥了雌性优良个体的繁殖潜力（缩短了供体本身的繁殖周期，增加了供体一生繁殖后代的数量）加速育种工作和品质改良加速育种工作和品质改良一胎多产一胎多产保存品种资源和濒危物种保存品种资源和濒危物种大量节省购买种畜的费用大量节省购买种畜的费用第27页，讲稿共71张，创作于星期一胚胎分割胚胎分割1.1.概念概念:指采用指采用机械方法机械方法将早期胚胎切割成将早期胚胎切割成2等等份、份、4等份或等份或8等份等，经移植获得同卵双胎等份等，经移植获得同卵双胎或多胎的技术。
21、或多胎的技术。胚胎分割胚胎分割优势优势:可成倍增加胚胎数量，可以快速繁殖良种畜可成倍增加胚胎数量，可以快速繁殖良种畜。第28页，讲稿共71张，创作于星期一2.特点：特点：来自同一胚胎的后代具有来自同一胚胎的后代具有相同的相同的遗传遗传物质（因此胚胎分割可以看做动物物质（因此胚胎分割可以看做动物无性繁殖无性繁殖或克隆或克隆的方法之一）的方法之一）3、理论基础、理论基础 动物胚胎细胞的动物胚胎细胞的全能性全能性。物质基础：物质基础：每个细胞核具有相同的遗传物质每个细胞核具有相同的遗传物质4.胚胎分割的时期为：胚胎分割的时期为：囊胚或桑椹胚囊胚或桑椹胚。第29页，讲稿共71张，创作于星期一4、选择的
22、胚胎：、选择的胚胎：发育良好的发育良好的,形态正常的桑椹胚或囊胚。形态正常的桑椹胚或囊胚。5、使用的主要仪器：、使用的主要仪器：实体显微镜实体显微镜和和显微操作仪显微操作仪。6、具体操作、具体操作 用用分割针分割针或或分割刀片分割刀片将胚胎切开，吸出将胚胎切开，吸出其中的半个胚胎，注入预先准备好的空透明其中的半个胚胎，注入预先准备好的空透明带中，或直接将裸半胚移植给受体。带中，或直接将裸半胚移植给受体。第30页，讲稿共71张，创作于星期一7 7、操作注意事项、操作注意事项：对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要将内对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要将内细胞团均等分割细胞团均等分割。目的：有利于分割后的胚胎
23、的恢复和进一步发目的：有利于分割后的胚胎的恢复和进一步发育。育。原因：内细胞团一般到囊胚阶段才出现，它是原因：内细胞团一般到囊胚阶段才出现，它是发育为胚胎本身的基础细胞，其他细胞为滋养细胞，发育为胚胎本身的基础细胞，其他细胞为滋养细胞，只为胚胎和胎儿发育提供营养。若分割时不能将内只为胚胎和胎儿发育提供营养。若分割时不能将内细胞团均等分割，会出现含内细胞团多的部分正常细胞团均等分割，会出现含内细胞团多的部分正常发育的能力强，少的部分发育受阻或发育不良，甚发育的能力强，少的部分发育受阻或发育不良，甚至不能发育等问题。至不能发育等问题。第31页，讲稿共71张，创作于星期一 胚胎分割的份数越多，操作的
24、难度会越胚胎分割的份数越多，操作的难度会越大，移植的成功率也越低大，移植的成功率也越低。早期胚胎的体积很小，只有在显微镜早期胚胎的体积很小，只有在显微镜下才能看到；再者，细胞数目是有限的。下才能看到；再者，细胞数目是有限的。分割的份数越多，不但难以做到均等分割，分割的份数越多，不但难以做到均等分割，每一份的细胞数会越少，而且作为囊胚期每一份的细胞数会越少，而且作为囊胚期的胚胎内细胞团细胞所受的影响会更大。的胚胎内细胞团细胞所受的影响会更大。因此，分割的份数越多，技术的难度会越因此，分割的份数越多，技术的难度会越大，移植后的恢复和发育的难度会越大，大，移植后的恢复和发育的难度会越大，移植成功率自
25、然会降低。移植成功率自然会降低。第32页，讲稿共71张，创作于星期一8、胚胎分割技术的缺陷、胚胎分割技术的缺陷（1）刚出生动物的体重偏低，毛色和）刚出生动物的体重偏低，毛色和斑纹还存在差异；斑纹还存在差异；（2）采用胚胎分割技术产生同卵多胎）采用胚胎分割技术产生同卵多胎的可能性是有限的。的可能性是有限的。第33页，讲稿共71张，创作于星期一胚胎干细胞胚胎干细胞2.2.特点特点:1)1)形态形态:体积小体积小.细胞核大细胞核大,核仁明显核仁明显2)2)功能功能:具有发育的具有发育的全能性全能性，可分化为成年动物体内，可分化为成年动物体内任何一种组织细胞任何一种组织细胞3 3）在）在体外体外培养的
26、条件下，培养的条件下，ESES细胞可以细胞可以增殖而不发生分增殖而不发生分化化。对它可以进行冷冻保存，也可以进行遗传改造。对它可以进行冷冻保存，也可以进行遗传改造。1.1.概念概念:简称简称ESES或或EKEK细胞细胞,是由是由早期胚胎或原始性腺早期胚胎或原始性腺中分中分离出来的一类细胞。离出来的一类细胞。第34页，讲稿共71张，创作于星期一3.3.干细胞分类干细胞分类全能干细胞：可分化为全身各种细胞，并进全能干细胞：可分化为全身各种细胞，并进一步形成机体的所有组织、器官等（一步形成机体的所有组织、器官等（胚胎干细胞胚胎干细胞）多能干细胞：能分化为多种细胞或组织，但多能干细胞：能分化为多种细胞
27、或组织，但不能发育成完整个体（不能发育成完整个体（如：造血干细胞如：造血干细胞）专能干细胞：只能分化为一种类型或功能密专能干细胞：只能分化为一种类型或功能密切相关的两种类型的细胞（切相关的两种类型的细胞（成肌细胞成肌细胞）第35页，讲稿共71张，创作于星期一3.3.意义意义ESES细胞的分离和培养成功是胚胎工程中的重细胞的分离和培养成功是胚胎工程中的重要成就之一。要成就之一。4.4.主要用途主要用途(1)(1)治疗人类的某些顽症治疗人类的某些顽症人类由于细胞坏死、退化或功能异常引起的疾人类由于细胞坏死、退化或功能异常引起的疾病，如帕金森综合症、少年糖尿病和老年痴呆病，如帕金森综合症、少年糖尿病
28、和老年痴呆等，利用等，利用ESES细胞可被诱导分化形成新的组织细胞细胞可被诱导分化形成新的组织细胞的特性，移植的特性，移植ESES细胞可使坏死或退化的部位得细胞可使坏死或退化的部位得以修复并恢复正常功能；目前已成功治愈糖尿以修复并恢复正常功能；目前已成功治愈糖尿病、肝衰竭、心衰竭和成骨发育不良等。病、肝衰竭、心衰竭和成骨发育不良等。第36页，讲稿共71张，创作于星期一(2)(2)培育出人造组织器官，用于器官移植培育出人造组织器官，用于器官移植(3)(3)是研究体外细胞分化的理想材料是研究体外细胞分化的理想材料ESES细胞在饲养层细胞上，或在添加抑制因子的培细胞在饲养层细胞上，或在添加抑制因子的
29、培养液中，能维持不分化的状态；养液中，能维持不分化的状态；分化诱导因子：诱导分化诱导因子：诱导ESES细胞向不同类型的组织细细胞向不同类型的组织细胞分化；如：牛黄酸、丁酰环腺苷酸等胞分化；如：牛黄酸、丁酰环腺苷酸等第37页，讲稿共71张，创作于星期一实验：胚胎干细胞培养实验：胚胎干细胞培养1.1.培养关键：需要一种能促进胚胎干细胞的生长大，培养关键：需要一种能促进胚胎干细胞的生长大，但抑制其分化的一种培养体系。但抑制其分化的一种培养体系。2.2.培养过程：培养过程：制备饲养层制备饲养层培养胚胎到内细胞团突出饲养层培养胚胎到内细胞团突出饲养层胰蛋白酶处理剥离内细胞团胰蛋白酶处理剥离内细胞团分散成
30、单个细胞分散成单个细胞加饲养层继续传代培养加饲养层继续传代培养第38页，讲稿共71张，创作于星期一胚胎干细胞培养胚胎干细胞培养第39页，讲稿共71张，创作于星期一（09江苏）下列关于哺乳动物胚胎发育和胚胎工程的叙述，正确的是A卵裂期胚胎中细胞数目和有机物总量在不断增加 B胚胎分割时需将原肠胚的内细胞团均等分割C胚胎干细胞具有细胞核大、核仁小和蛋白质合成旺盛等特点D胚胎干细胞是一类未分化细胞，可从早期胚胎中分离获取第40页，讲稿共71张，创作于星期一（09宁夏）右图为哺乳动物的胚胎干细胞及其分化的示意图。请回答：（1）胚胎干细胞是从动物胚胎发育至_期的内细胞团或胎儿 _ 的中分离得到的一类细胞。
31、囊胚原始性腺细胞第41页，讲稿共71张，创作于星期一（2）图中分化程度最低的干细胞是 。在体外培养条件下，培养液中加入 因子，可诱导该种干细胞向不同类型的组织细胞分化。（3)在机体内，皮肤干细胞分化成皮肤细胞是机体细胞中基因_的结果。（4）某患者不能产生正常的白细胞，通过骨髓移植可以达到治疗的目的，骨髓的治疗的实质是将上图的_细胞移植到患者体内。胚胎干细胞分化诱导选择性表达造血干第42页，讲稿共71张，创作于星期一（5）若要克隆某种哺乳动物，从理论上分析，上述红细胞、白细胞神经细胞中不能选用作为供体的细胞是成熟的_，其原因是_ _。（6）若某药物可抑制肝肿瘤细胞NDA的复制，使用该药物可使肝肿
32、瘤细胞停留在细胞周期的_期。（7）在制备单克隆抗体过程中的细胞融合阶段，用_细胞与骨髓细胞融合，经多交筛选最终得到能分泌_的杂交瘤细胞。红细胞细胞中无细胞核间间B淋巴特异性抗体第43页，讲稿共71张，创作于星期一对胚胎检查、培养或保存处理供体母畜课本课本P81P81思思考与探考与探究究第44页，讲稿共71张，创作于星期一（1）用文字完成流程图（少了哪几个）用文字完成流程图（少了哪几个步骤）步骤）对供、受体母畜进行选择，并进行同期发对供、受体母畜进行选择，并进行同期发情处理；情处理；配种或人工授精；配种或人工授精；收集胚胎；收集胚胎；胚胎移植；胚胎移植；对受体母畜进行是否妊娠的对受体母畜进行是否
33、妊娠的检查检查第45页，讲稿共71张，创作于星期一（2 2）应该怎样选择供体公、母牛和受体母牛？）应该怎样选择供体公、母牛和受体母牛？供体公、母牛应该是具有人类所需的优良遗传供体公、母牛应该是具有人类所需的优良遗传性状的个体，而受体母牛必须具有正常的孕育、生性状的个体，而受体母牛必须具有正常的孕育、生殖后代的能力殖后代的能力在在中，为什么要用促性腺激素处理供体母牛？中，为什么要用促性腺激素处理供体母牛？用促性腺激素处理供体母牛是为了引起超数排卵，用促性腺激素处理供体母牛是为了引起超数排卵，这样就可以获得较多的胚胎这样就可以获得较多的胚胎 在促性腺激素处理供体母牛前，为什么需要对供在促性腺激素处
34、理供体母牛前，为什么需要对供体和受体母牛进行同期发情处理？体和受体母牛进行同期发情处理？对供体和受体母牛进行同期发情处理，才能使对供体和受体母牛进行同期发情处理，才能使它们的生理条件达到同步或一致，使供体的胚胎移它们的生理条件达到同步或一致，使供体的胚胎移入受体后有相同或相似的生存条件入受体后有相同或相似的生存条件 第46页，讲稿共71张，创作于星期一（3）哪一步需要进行冲卵？冲卵是把母畜的卵子）哪一步需要进行冲卵？冲卵是把母畜的卵子冲出来吗？冲出来吗？第第步需要进行冲卵，冲卵是指将供体母畜体步需要进行冲卵，冲卵是指将供体母畜体内的内的受精卵（早期胚胎）受精卵（早期胚胎）冲出来，而不是把卵冲出
35、来，而不是把卵子冲出来。子冲出来。第47页，讲稿共71张，创作于星期一1.1.下列有关动物胚胎移植的叙述中，错误的是（下列有关动物胚胎移植的叙述中，错误的是（）A.A.受孕母畜体内的受精卵或胚胎均能移植受孕母畜体内的受精卵或胚胎均能移植B.B.受体母畜必须处于与供体母畜同步发情的状态受体母畜必须处于与供体母畜同步发情的状态C.C.超数排卵技术要使用一定的激素超数排卵技术要使用一定的激素D.D.试管婴儿只是受精及早期卵裂过程在试管中进行试管婴儿只是受精及早期卵裂过程在试管中进行第48页，讲稿共71张，创作于星期一2.下列对于优良种畜的胚胎移植的说法不下列对于优良种畜的胚胎移植的说法不正确的是正确
36、的是()A.供体母牛必须是同一物种的良种供体母牛必须是同一物种的良种B.受体母牛必须是同一物种的良种受体母牛必须是同一物种的良种C.供体公牛必须是同一物种的良种供体公牛必须是同一物种的良种D.受体母牛可以是同一物种的一般健康牛受体母牛可以是同一物种的一般健康牛第49页，讲稿共71张，创作于星期一3.3.供体的胚胎移植到受体后，游离的胚胎在发育过供体的胚胎移植到受体后，游离的胚胎在发育过程中形成胎盘与受体相连，并通过胎盘与受体的血程中形成胎盘与受体相连，并通过胎盘与受体的血液进行物质交换。以下说法正确的是液进行物质交换。以下说法正确的是()()A.A.受体是为供体胚胎提供发育的条件受体是为供体胚
37、胎提供发育的条件B.B.受体与胚胎血型应相同，否则会发生免疫排斥反应受体与胚胎血型应相同，否则会发生免疫排斥反应C.C.受体与胚胎血液混融在一起受体与胚胎血液混融在一起D.D.胚胎心肺功能都能正常运行胚胎心肺功能都能正常运行第50页，讲稿共71张，创作于星期一1 1、合子形成后开始发育，下列说法错误的是（、合子形成后开始发育，下列说法错误的是（）A.A.在输卵管内进行有丝分裂在输卵管内进行有丝分裂B.B.卵裂期细胞数目增加卵裂期细胞数目增加C.C.卵裂期胚胎的总体积不增加卵裂期胚胎的总体积不增加D.D.卵裂期每个细胞的体积不变卵裂期每个细胞的体积不变2 2、下列有关胚胎发育卵裂期的特点，描述正
38、确、下列有关胚胎发育卵裂期的特点，描述正确的是（的是（）A.A.细胞进行有丝分裂，所有细胞均具有全能性细胞进行有丝分裂，所有细胞均具有全能性B.B.每个细胞体积有所减小，胚胎的总体积增加每个细胞体积有所减小，胚胎的总体积增加C.C.胚胎有机物总量增加，细胞核胚胎有机物总量增加，细胞核DNADNA量不断减少量不断减少D.D.所有细胞的相对表面积减小所有细胞的相对表面积减小第51页，讲稿共71张，创作于星期一Av1.1.下列有关动物胚胎移植的叙述中，错误的下列有关动物胚胎移植的叙述中，错误的是（是（）A.A.受孕母畜体内的受精卵或胚胎均能移植受孕母畜体内的受精卵或胚胎均能移植B.B.受体母畜必须处
39、于与供体母畜同步发情的状受体母畜必须处于与供体母畜同步发情的状态态C.C.超数排卵技术要使用一定的激素超数排卵技术要使用一定的激素D.D.试管婴儿只是受精及早期卵裂过程在试管中进试管婴儿只是受精及早期卵裂过程在试管中进行行第52页，讲稿共71张，创作于星期一Cv2.2.利用胚胎干细胞治疗肝衰竭，实现此过程的利用胚胎干细胞治疗肝衰竭，实现此过程的重要原因是（重要原因是（）A.A.细胞分裂细胞分裂 B.B.细胞特化细胞特化C.C.细胞分化细胞分化 D.D.细胞增殖细胞增殖3.3.在胚胎移植中供体的主要职能（在胚胎移植中供体的主要职能（）A.A.提供优良的供体基因提供优良的供体基因 B.B.提供优良
40、遗传特性的胚胎提供优良遗传特性的胚胎C.C.提供卵细胞提供卵细胞 D.D.提供精子提供精子B B第53页，讲稿共71张，创作于星期一（多选）胚胎移植的受体必须符合以下哪些条件（多选）胚胎移植的受体必须符合以下哪些条件（）A.同种生物同种生物 B.生理状态相同生理状态相同 C.雄性动物雄性动物 D.雌性动物雌性动物ABD(多选多选)胚胎移植技术目前主要应用与胚胎移植技术目前主要应用与()A.解决某些不孕症者的生育问题解决某些不孕症者的生育问题 B.治疗某些遗传病治疗某些遗传病 C.提高良种家畜的繁殖力提高良种家畜的繁殖力 D.提高动物的抗病力提高动物的抗病力AC第54页，讲稿共71张，创作于星期
41、一1.1.判断正误判断正误(1)(1)哺乳动物的体外受精主要包括卵母细胞的采集和培养哺乳动物的体外受精主要包括卵母细胞的采集和培养,精精子的采集和获能及受精等步骤。子的采集和获能及受精等步骤。()()(2)(2)采集的卵母细胞需在体外培养使其分裂为卵细胞才能与获采集的卵母细胞需在体外培养使其分裂为卵细胞才能与获能的精子受精。能的精子受精。()()【分析分析】采集的卵母细胞需在体外培养使其处于减数第二次采集的卵母细胞需在体外培养使其处于减数第二次分裂中期才能与获能的精子受精。分裂中期才能与获能的精子受精。第55页，讲稿共71张，创作于星期一(3)(3)精子与卵子的体外受精必须在特定的受精溶液或获
42、能溶液精子与卵子的体外受精必须在特定的受精溶液或获能溶液中进行。中进行。()()(4)(4)不同动物胚胎移植时间相同。不同动物胚胎移植时间相同。()()【分析分析】牛、羊一般要培养到桑椹胚阶段或囊胚阶段才进行移牛、羊一般要培养到桑椹胚阶段或囊胚阶段才进行移植植;小鼠和家兔等实验动物可在更早的阶段移植小鼠和家兔等实验动物可在更早的阶段移植;人的体外受精人的体外受精胚胎胚胎,可在可在8 8个个1616个细胞阶段移植。个细胞阶段移植。2.2.问题思考问题思考试管婴儿是有性生殖还是无性生殖试管婴儿是有性生殖还是无性生殖?为什么为什么?提示提示:属于有性生殖。其过程是精子和卵子在体外受精形成受精卵属于有
43、性生殖。其过程是精子和卵子在体外受精形成受精卵,由受由受精卵形成的早期胚胎移植到受体中。精卵形成的早期胚胎移植到受体中。第56页，讲稿共71张，创作于星期一一、试管动物与克隆动物的比较一、试管动物与克隆动物的比较试管动物克隆动物技术原理或手段体外受精、早期胚胎培养、胚胎移植细胞核的全能性、核移植等实例试管牛多利羊第57页，讲稿共71张，创作于星期一试管动物克隆动物过程遗传特点继承了双亲(提供精子和卵子的个体)的遗传性状全部性状几乎与提供细胞核的亲本一致第58页，讲稿共71张，创作于星期一【典例训练典例训练1 1】良种试管牛的繁殖过程是良种试管牛的繁殖过程是:用激素促进甲牛多排卵用激素促进甲牛多
44、排卵,然后然后把卵子在体外与人工采集的乙牛的精子进行受精把卵子在体外与人工采集的乙牛的精子进行受精,在特定培养基中在特定培养基中培育成胚胎培育成胚胎,再把胚胎送入经过激素处理的丙牛的子宫内再把胚胎送入经过激素处理的丙牛的子宫内,孕育成试管牛。孕育成试管牛。下列相关叙述错误的是下列相关叙述错误的是()A.A.精卵结合前都需进行培养精卵结合前都需进行培养B.“B.“促进甲牛多排卵促进甲牛多排卵”的激素是孕激素的激素是孕激素C.C.甲牛、乙牛对试管牛核遗传物质的贡献相同甲牛、乙牛对试管牛核遗传物质的贡献相同D.D.该技术可应用于加快优良种畜的繁殖该技术可应用于加快优良种畜的繁殖【解析解析】选选B B
45、。对于大型动物采集的卵母细胞。对于大型动物采集的卵母细胞,都需经体外人工培养成熟都需经体外人工培养成熟后后,才具备受精能力才具备受精能力;精子也需要进行培养使其获能精子也需要进行培养使其获能,故故A A正确。促进动正确。促进动物多排卵的激素是促性腺激素物多排卵的激素是促性腺激素,故故B B错误。试管牛的核遗传物质一半错误。试管牛的核遗传物质一半来自甲牛的卵子来自甲牛的卵子,一半来自乙牛的精子一半来自乙牛的精子,故故C C正确。该技术可充分发挥母正确。该技术可充分发挥母畜的优良特性畜的优良特性,可用于加快优良种畜的繁殖可用于加快优良种畜的繁殖,故故D D正确。正确。第59页，讲稿共71张，创作于
46、星期一【变式训练变式训练】下列有关试管动物的说法中正确的是下列有关试管动物的说法中正确的是()A.A.试管牛所采用的技术中包含克隆技术和体外受精、胚胎移植试管牛所采用的技术中包含克隆技术和体外受精、胚胎移植B.B.对动物采卵时常用的激素是促性腺激素对动物采卵时常用的激素是促性腺激素C.C.试管婴儿技术能使不能产生精子或卵子的夫妇得到自己的孩子试管婴儿技术能使不能产生精子或卵子的夫妇得到自己的孩子D.D.从雌性动物体内采集的卵子或卵母细胞均需体外培养后从雌性动物体内采集的卵子或卵母细胞均需体外培养后,才能与获能的精才能与获能的精子受精子受精【解析解析】选选B B。试管动物所用到的技术是体外受精和
47、胚胎移植。试管动物所用到的技术是体外受精和胚胎移植,有精、有精、卵的结合过程卵的结合过程,属有性生殖属有性生殖,不属克隆技术不属克隆技术,所以不能产生精子或卵子所以不能产生精子或卵子的夫妇不能通过此方法得到自己的孩子的夫妇不能通过此方法得到自己的孩子,A,A、C C均错均错;从雌性动物体内输从雌性动物体内输卵管中冲取的卵子不需人工培养卵管中冲取的卵子不需人工培养,可直接与获能的精子受精可直接与获能的精子受精,故故D D错。错。第60页，讲稿共71张，创作于星期一【典例训练典例训练2 2】(2013(2013济南高二检测济南高二检测)关于牛体外受精胚胎的工厂化生产的叙述关于牛体外受精胚胎的工厂化
48、生产的叙述,正确的是正确的是()A.A.精子和卵子受精后即可移入母牛子宫精子和卵子受精后即可移入母牛子宫B.B.采集的卵母细胞应立即与精子共同放入培养液才能形成受精卵采集的卵母细胞应立即与精子共同放入培养液才能形成受精卵C.C.成熟卵子与收集来的精子相遇形成的受精卵成熟卵子与收集来的精子相遇形成的受精卵,需培养到一定阶段才可移植需培养到一定阶段才可移植D.D.体外受精胚胎的工厂化生产即受精过程和胚胎发育只需在体外进行体外受精胚胎的工厂化生产即受精过程和胚胎发育只需在体外进行【解析解析】选选C C。卵母细胞要在体外经人工培养成熟后。卵母细胞要在体外经人工培养成熟后,才能与获能的精子才能与获能的精
49、子受精受精,受精卵发育到桑椹胚阶段或囊胚阶段才能进行移植受精卵发育到桑椹胚阶段或囊胚阶段才能进行移植,移植入母体后继移植入母体后继续发育形成幼体产出。续发育形成幼体产出。第61页，讲稿共71张，创作于星期一2.2.胚胎早期培养液胚胎早期培养液(发育培养液发育培养液)成分与动物细胞培养液成分的比较成分与动物细胞培养液成分的比较:项目动物胚胎培养液动物细胞培养液盐类无机盐、有机盐无机盐、微量元素营养物质氨基酸、核苷酸糖、氨基酸调节物质维生素、激素促生长因子特有成分血清血清、血浆第62页，讲稿共71张，创作于星期一3.3.试管牛工厂化生产流程图试管牛工厂化生产流程图:第63页，讲稿共71张，创作于星
50、期一【易错提醒易错提醒】(1)(1)动物细胞培养与胚胎的早期培养所依据的原理不同动物细胞培养与胚胎的早期培养所依据的原理不同:前者依据细胞的生长和增殖前者依据细胞的生长和增殖,后者依据细胞的生长、增殖和分化。后者依据细胞的生长、增殖和分化。(2)(2)动物细胞培养与胚胎的早期培养的目的不同动物细胞培养与胚胎的早期培养的目的不同:前者的目的前者的目的:大规模生产重要的生物制品大规模生产重要的生物制品;用于检测有毒物质用于检测有毒物质;用于生理、病理、药理等方面的研究。用于生理、病理、药理等方面的研究。后者的目的后者的目的:检查受精状况和受精卵的发育能力检查受精状况和受精卵的发育能力;当胚胎发育到