临床检验概论精选PPT.ppt

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1、关于临床检验概论第1页,讲稿共50张,创作于星期一第一节 血液生理概要 血液的组成 血液主要理化性质 血液功能第2页,讲稿共50张,创作于星期一血液的组成血液的组成血浆=血清+凝血因子第3页,讲稿共50张,创作于星期一第4页,讲稿共50张,创作于星期一血液理化性质血量血量:占体重6%-8%,小儿成人,男性女性,女性妊娠期间可增加23%-25%(血浆增加量大于红细胞增加量)。颜色颜色:红色(血红蛋白),动脉鲜红色(HbO2高),静脉暗红色(Hbred高),脂血 乳白色,严重贫血患者颜色变浅。CO或氰化物中毒血液樱红色。悬浮稳定性:红细胞表面唾液酸根带负电荷,形成Zeta电位使红细胞相互排斥。粘滞

2、性粘滞性:主要取决于红细胞比容和血浆粘度,粘度受血浆中纤维蛋白原、球蛋白等大分子影响,其浓度越高,粘度越高。凝固性凝固性:数分钟内自行凝固。比密和渗透浓度pH 7.35-7.45第5页,讲稿共50张,创作于星期一考点2血液的功能运输功能 运送氧气、营养(葡萄糖、氨基酸、矿物质)、代谢产物(CO、尿素)协调功能 激素、酶维护机体内环境稳定 水电解质平衡、酸碱平衡、体温稳定防御功能 白细胞、抗体、补体、细胞因子、血小板、凝血因子第6页,讲稿共50张,创作于星期一第二节第二节 血液标本采集血液标本采集一、血液标本种类一、血液标本种类:全血全血=血细胞血细胞+血浆,血浆,用于:用于:临床临床血液学分析

3、血液学分析血浆血浆=全血全血-血细胞,血细胞,用于:用于:临床生化临床生化 凝血因子测定凝血因子测定 血清血清=血自然凝固后析出的液体血自然凝固后析出的液体 用于:用于:临床临床生化生化 临床临床免疫免疫学分析学分析第7页,讲稿共50张,创作于星期一二、采血方法二、采血方法静脉采血法静脉采血法F:临检视屏临检视屏静脉采血静脉采血1.flv动脉采血法动脉采血法皮肤采血法皮肤采血法采血方法采血方法第8页,讲稿共50张,创作于星期一(一)静脉采血法(一)静脉采血法1、适用:、适用:适用于绝大多数临床检验适用于绝大多数临床检验2、部位:、部位:体表的浅静脉均可体表的浅静脉均可肘部静脉肘部静脉最常用最常

4、用手背静脉手背静脉内踝静脉内踝静脉股股 静静 脉脉颈外静脉颈外静脉静脉采血部位静脉采血部位第9页,讲稿共50张,创作于星期一3、器材:、器材:注射器:注射器:不同型号(不同型号(510ml)容容 器:器:硅化处理玻璃试管硅化处理玻璃试管 塑料试管塑料试管压脉带压脉带消毒碘酒棉球消毒碘酒棉球4、优点:、优点:可满足绝大部分检验需要可满足绝大部分检验需要 第10页,讲稿共50张,创作于星期一第11页,讲稿共50张,创作于星期一5、注意:、注意:注射器和容器必须干燥注射器和容器必须干燥抽血不宜过快,以免产生气泡或溶血抽血不宜过快,以免产生气泡或溶血要拔掉针头再徐徐注入容器要拔掉针头再徐徐注入容器若遇

5、病人晕厥时勿惊慌,可采取:若遇病人晕厥时勿惊慌,可采取:平卧休息平卧休息 嗅芳香氨酊嗅芳香氨酊 指按指按“人中人中”“合谷合谷”等穴位等穴位措施措施第12页,讲稿共50张,创作于星期一(二)皮肤采血法(二)皮肤采血法(毛细血管采血法)(毛细血管采血法)1、适用:、适用:需血微量的检查需血微量的检查2、部位:、部位:手指耳垂 指足跟WHOWHO推荐:推荐:左手无名指指端内侧左手无名指指端内侧第13页,讲稿共50张,创作于星期一3、器材:、器材:采血针:采血针:一次性采血针一次性采血针75%75%酒精棉球和消毒干棉球酒精棉球和消毒干棉球微量吸管微量吸管(20(20微升微升)第14页,讲稿共50张,

6、创作于星期一4、优缺点:、优缺点:优点:优点:方便,快捷方便,快捷末梢循环受多种因素影响末梢循环受多种因素影响(血液末梢循环、温度、采血情况、局部感染)标本混有组织液标本混有组织液采血量受限采血量受限疼痛明显疼痛明显缺点缺点第15页,讲稿共50张,创作于星期一5、注意:、注意:1.穿刺部位消毒酒精干后方可穿刺穿刺部位消毒酒精干后方可穿刺2.烧伤病人应选择皮肤完整处采血烧伤病人应选择皮肤完整处采血3.拭去第一滴血液拭去第一滴血液4.血流不畅时,自采血部位远端向指尖稍加压力,切血流不畅时,自采血部位远端向指尖稍加压力,切勿用力挤压皮肤,防止组织液混入勿用力挤压皮肤,防止组织液混入5.一人一针一人一

7、针第16页,讲稿共50张,创作于星期一(三)动脉采血法(三)动脉采血法1、适用:、适用:用于血气分析用于血气分析2、部位:、部位:股动脉等股动脉等3、器材:、器材:专用采血器专用采血器4、注意:、注意:采血后立即封闭针头,采血后立即封闭针头,避免与空气接触,避免与空气接触,及时送检,及时送检,最好在最好在30分钟内检测分钟内检测第17页,讲稿共50张,创作于星期一(四)真空采血法(四)真空采血法(负压采血法)(负压采血法)1、适用:、适用:适用绝大多数临床检验适用绝大多数临床检验 尤其适宜于病房和野外流动采血尤其适宜于病房和野外流动采血2、部位:、部位:全身浅静脉全身浅静脉真空采血装置真空采血

8、装置 套筒式套筒式 头皮静脉式头皮静脉式真空采血管:真空采血管:压脉带压脉带消毒碘酒棉球消毒碘酒棉球3、器材、器材第18页,讲稿共50张,创作于星期一真空采血装置真空采血装置套筒式套筒式头皮静脉式头皮静脉式第19页,讲稿共50张,创作于星期一真空采血管真空采血管第20页,讲稿共50张,创作于星期一第21页,讲稿共50张,创作于星期一4、优点:、优点:封闭:封闭:减少医务人员感染减少医务人员感染 减少容器间转移减少容器间转移 减少交叉污染减少交叉污染 保护环境保护环境减少溶血减少溶血保证标本质量保证标本质量第22页,讲稿共50张,创作于星期一【方法学评价】【方法学评价】皮肤采血法皮肤采血法开放式

9、静脉采血法开放式静脉采血法真空采血法真空采血法第23页,讲稿共50张,创作于星期一【质量控制】【质量控制】要注意影响标本质量的因素要注意影响标本质量的因素(quality control)1.患者饮食、运动和精神状态(结果假性偏高)患者饮食、运动和精神状态(结果假性偏高)2.勿挤压皮肤勿挤压皮肤勿挤压皮肤勿挤压皮肤3 3压脉带使用时间应少于压脉带使用时间应少于 1 1 1 1 分钟分钟(浓缩、瘀浓缩、瘀滞、缺氧滞、缺氧)4.4.4.4.避免溶血(避免溶血(避免溶血(避免溶血(ASTASTASTAST、K+K+K+K+)5.5.5.5.一侧一侧一侧一侧手臂静脉输液时应从对侧手臂取血手臂静脉输液时

10、应从对侧手臂取血6.6.二侧二侧二侧二侧手臂同时进行静脉输液,应选择输液手臂同时进行静脉输液,应选择输液穿刺点的远心端取血穿刺点的远心端取血第24页,讲稿共50张,创作于星期一第25页,讲稿共50张,创作于星期一5、血标本处理:、血标本处理:尽快检验、生物安全尽快检验、生物安全唯一标识、接收拒收唯一标识、接收拒收合适的条件保存(合适的条件保存(一般置于4,1个月(-20),3个月以上(-70),标本存放需加塞加塞,防止水分挥发)6、实验结果分析:、实验结果分析:影响因素影响因素结合临床结合临床及时与临床沟通及时与临床沟通第26页,讲稿共50张,创作于星期一巩固血浆与血清区别?严重贫血从血外观怎

11、样辨认?静脉采血最常用采血部位?末梢采血最常用采血部位?皮肤采血法缺点?末梢采血时为什么切勿用力挤压?静脉采血时为什么避免溶血?静脉采血时为什么不能在输液端采血?第27页,讲稿共50张,创作于星期一思考?为什么末梢采血推荐左手无名指指尖内侧?第28页,讲稿共50张,创作于星期一松驰的琴弦,松驰的琴弦,永远奏不出时代的强音永远奏不出时代的强音。谢谢大家第29页,讲稿共50张,创作于星期一第三节第三节 抗凝剂选择抗凝剂选择l常用的抗凝剂有常用的抗凝剂有EDTA草酸盐草酸盐肝素肝素枸橼酸盐枸橼酸盐抗抗 凝凝用物理或化学方法除去或抑制血用物理或化学方法除去或抑制血 液中的某些凝血因子的活性,阻液中的某

12、些凝血因子的活性,阻 止血液凝固。止血液凝固。抗凝剂抗凝剂能够阻止血液凝固的物质。能够阻止血液凝固的物质。第30页,讲稿共50张,创作于星期一第31页,讲稿共50张,创作于星期一1 1)抗凝原理:)抗凝原理:与血中钙离子结与血中钙离子结合成螯合物,使合成螯合物,使CaCa2+2+失去凝血作失去凝血作用,从而阻止血用,从而阻止血液凝固。液凝固。1 1、乙二胺四乙酸盐、乙二胺四乙酸盐(EDTA-NaEDTA-Na2 2,EDTA-K,EDTA-K2 2)第32页,讲稿共50张,创作于星期一2 2)应用:)应用:适用:适用:多项血液学检查,多项血液学检查,尤其是血小板计数尤其是血小板计数 特别适用于

13、特别适用于 全血细胞分析全血细胞分析 血细胞比容测定血细胞比容测定 不适用:不适用:凝血象检查和血小板功能检查凝血象检查和血小板功能检查 因为:因为:EDTAEDTA影响血小板聚集影响血小板聚集 第33页,讲稿共50张,创作于星期一2 2、草酸盐、草酸盐1 1)抗凝原理:)抗凝原理:溶解后解离的草酸根与血中钙离子结合溶解后解离的草酸根与血中钙离子结合 成草酸钙沉淀,使成草酸钙沉淀,使CaCa2+2+失去凝血作用。失去凝血作用。2 2)应用:)应用:溶解度好、价廉溶解度好、价廉 适用:一般血液学检查适用:一般血液学检查 不适用:不适用:凝血象检查凝血象检查 因为:因为:对凝血对凝血V V因子保护

14、差因子保护差 形成的草酸盐沉淀影响自动凝血仪形成的草酸盐沉淀影响自动凝血仪 第34页,讲稿共50张,创作于星期一3 3、肝素、肝素1 1)抗凝原理:抗凝机制复杂)抗凝原理:抗凝机制复杂 与与T-T-结合抑制凝血活酶的形成结合抑制凝血活酶的形成 抑制血小板聚集与释放反应抑制血小板聚集与释放反应 灭活丝氨酸蛋白酶灭活丝氨酸蛋白酶,抑制凝血酶形成抑制凝血酶形成 2 2)应用:)应用:适用:适用:适用于绝大多数检查适用于绝大多数检查 (不影响细胞体积(不影响细胞体积,不易溶血)不易溶血)尤其是细胞培养和红细胞渗透脆性实验尤其是细胞培养和红细胞渗透脆性实验 不适用:不适用:不适合血液学一般检查不适合血液

15、学一般检查 因为:因为:易引起白细胞聚集易引起白细胞聚集 血涂片罗氏染色有蓝色背景血涂片罗氏染色有蓝色背景第35页,讲稿共50张,创作于星期一4 4、枸橼酸盐、枸橼酸盐1 1)抗凝原理:)抗凝原理:与钙离子结合成螯合物,从而阻止血液凝固。与钙离子结合成螯合物,从而阻止血液凝固。2 2)应用:)应用:适用:适用:血沉测定(血沉测定(1:41:4)凝血功能测定(凝血功能测定(1:91:9)输血保养液输血保养液第36页,讲稿共50张,创作于星期一含含有有K K+、NaNa+的的抗抗凝凝剂剂不不能能用用于于测测定定K K+、NaNa+的的标标本;本;EDTAEDTA、氟氟化化物物、草草酸酸盐盐等等不不

16、能能用用于于测测定定CaCa2+2+的的标本,因为标本,因为CaCa2+2+可与它们形成不溶性物质。可与它们形成不溶性物质。5 5、使用抗凝剂应注意:、使用抗凝剂应注意:第37页,讲稿共50张,创作于星期一严格掌握抗凝剂与血液的比例严格掌握抗凝剂与血液的比例l血血液液和和抗抗凝凝剂剂的的比比例例过过高高或或过过低低都会影响标本的质量。都会影响标本的质量。l血血液液比比例例过过高高高高时时 (采采血血过过量量),由由于于抗抗凝凝剂剂相相对对不不足足。血血浆浆中中出出现现微微凝凝血血块块的的可可能能性性增增加加,阻阻塞塞检检验验仪器,影响检验指标仪器,影响检验指标l血血液液比比例例过过低低低低 (

17、采采血血不不足足),抗抗凝凝剂剂相相对对过过剩剩对对许许多多检检验验指指标标会会造造成严重影响成严重影响第38页,讲稿共50张,创作于星期一 第四节第四节 血液涂片制备和细胞染色血液涂片制备和细胞染色 一、血液涂片制备一、血液涂片制备一、血液涂片制备一、血液涂片制备 F:F:临临临临检检检检视视视视屏屏屏屏 末末末末梢梢梢梢采采采采血血血血、血血血血涂涂涂涂片片片片制制制制备备备备.flv.flv临临临临检检检检视视视视屏屏屏屏 末末末末梢采血、血涂片制备梢采血、血涂片制备梢采血、血涂片制备梢采血、血涂片制备.flv.flv 二、血液细胞染色二、血液细胞染色二、血液细胞染色二、血液细胞染色 F

18、:F:临检视屏临检视屏临检视屏临检视屏 血涂片染色血涂片染色血涂片染色血涂片染色.flv.flv临检视屏临检视屏临检视屏临检视屏 血涂片染色血涂片染色血涂片染色血涂片染色.flv.flv第39页,讲稿共50张,创作于星期一一、血液涂片制备一、血液涂片制备 厚薄要适宜,厚薄要适宜,头体尾要明显,头体尾要明显,细胞分布要均匀,细胞分布要均匀,血膜边缘要整齐,血膜边缘要整齐,并留有一定的空隙并留有一定的空隙。第40页,讲稿共50张,创作于星期一引起血涂片分布不均的主要原因:引起血涂片分布不均的主要原因:m推片边缘不整齐,推片边缘不整齐,m用力不均匀,用力不均匀,m载片不清洁。载片不清洁。第41页,讲

19、稿共50张,创作于星期一染料染料碱性染料:为阳离子染料,能接受质子,与细胞内酸性成分结合,染成蓝色。主要用于细胞核染色。如美蓝/亚甲蓝、天青酸性染料:为阴离子染料,能释放质子,与细胞内碱性成分结合,染成红色。主要用于细胞质染色。如伊红第42页,讲稿共50张,创作于星期一二、血液细胞染色二、血液细胞染色(一一)瑞氏染色法瑞氏染色法瑞氏染色法瑞氏染色法(Wrights stain)1 瑞氏染料(复合染料)瑞氏染料(复合染料)酸性染料酸性染料伊红伊红(E-)碱性染料亚甲蓝碱性染料亚甲蓝(M+,又名,又名美蓝美蓝)美蓝容易氧化为一、二、三甲基硫堇等次级染料美蓝容易氧化为一、二、三甲基硫堇等次级染料(即

20、天青即天青)瑞士染液放置越久,染色效果越好。原因:越多亚甲蓝转化为天青B.甲醇的作用甲醇的作用:溶解美蓝和伊红,解离为溶解美蓝和伊红,解离为 M+和和E-;脱水作用,固定细胞形态,增强染色效果。脱水作用,固定细胞形态,增强染色效果。第43页,讲稿共50张,创作于星期一(一一一一)瑞氏染色法瑞氏染色法瑞氏染色法瑞氏染色法2 2 染色原理染色原理染色原理染色原理是染料透入被染物并存留其内部的一种过程,是染料透入被染物并存留其内部的一种过程,是染料透入被染物并存留其内部的一种过程,是染料透入被染物并存留其内部的一种过程,物理的吸附作用,物理的吸附作用,物理的吸附作用,物理的吸附作用,化学的亲和作用,

21、化学的亲和作用,化学的亲和作用,化学的亲和作用,嗜酸性颗粒嗜酸性颗粒嗜酸性颗粒嗜酸性颗粒碱性碱性碱性碱性与酸性染料与酸性染料与酸性染料与酸性染料粉红色;粉红色;粉红色;粉红色;细胞核蛋白细胞核蛋白细胞核蛋白细胞核蛋白酸性酸性酸性酸性与碱性染料与碱性染料与碱性染料与碱性染料紫蓝色或蓝色;紫蓝色或蓝色;紫蓝色或蓝色;紫蓝色或蓝色;中性颗粒中性颗粒中性颗粒中性颗粒等电状态等电状态等电状态等电状态与伊红和美蓝与伊红和美蓝与伊红和美蓝与伊红和美蓝染淡紫红色。染淡紫红色。染淡紫红色。染淡紫红色。第44页,讲稿共50张,创作于星期一瑞士染色原理 pI蛋白质pH+伊红伊红(E-)pH -亚甲蓝亚甲蓝(M+)3

22、 pH 3 pH 值的影响值的影响值的影响值的影响:细胞各种成分均属蛋白质(两性电解质)细胞各种成分均属蛋白质(两性电解质)细胞各种成分均属蛋白质(两性电解质)细胞各种成分均属蛋白质(两性电解质)最适最适最适最适pHpH(6.4-6.86.4-6.8)第45页,讲稿共50张,创作于星期一3 pH 3 pH 值的影响值的影响值的影响值的影响:染色所用玻片必须清洁,无酸碱污染。染色所用玻片必须清洁,无酸碱污染。染色所用玻片必须清洁,无酸碱污染。染色所用玻片必须清洁,无酸碱污染。配制瑞氏染液必须用优质甲醇,配制瑞氏染液必须用优质甲醇,配制瑞氏染液必须用优质甲醇,配制瑞氏染液必须用优质甲醇,稀释染液必

23、须用缓冲液,稀释染液必须用缓冲液,稀释染液必须用缓冲液,稀释染液必须用缓冲液,冲洗用水应近中性。冲洗用水应近中性。冲洗用水应近中性。冲洗用水应近中性。新新新新鲜鲜鲜鲜配配配配制制制制的的的的染染染染料料料料偏偏偏偏碱碱碱碱,须须须须在在在在室室室室温温温温贮贮贮贮存存存存一一一一定定定定时时时时间间间间,贮贮贮贮存存存存时时时时间间间间愈愈愈愈久久久久,染染染染色色色色效效效效果果果果愈愈愈愈好好好好。原因:越多亚甲蓝转化为天青B.DeamGilliland DeamGilliland 等采用吸光度比值等采用吸光度比值等采用吸光度比值等采用吸光度比值 作为瑞氏染液的质量规格。作为瑞氏染液的质量

24、规格。作为瑞氏染液的质量规格。作为瑞氏染液的质量规格。第46页,讲稿共50张,创作于星期一(二二)吉姆萨染色法吉姆萨染色法m吉姆萨染液由天青、伊红组成。吉姆萨染液由天青、伊红组成。m对对细胞核和寄生虫细胞核和寄生虫(如疟原虫等如疟原虫等)着色较好着色较好m 胞质和中性颗粒则染色较差。胞质和中性颗粒则染色较差。复合染色法复合染色法第47页,讲稿共50张,创作于星期一 质量控制质量控制 1 血涂片制备血涂片制备 血膜由厚到薄逐渐过度;血膜由厚到薄逐渐过度;血膜的体尾交界部位,红细胞分布血膜的体尾交界部位,红细胞分布 均匀,既不重叠又互相紧靠相连。均匀,既不重叠又互相紧靠相连。2 血液细胞染色血液细胞染色第48页,讲稿共50张,创作于星期一巩固针对血细胞比容高、血粘度高比容高、血粘度高/贫血贫血患者应该怎样制备血涂片?瑞士染液中甲醇的作用甲醇的作用?瑞士染液pHpH范围范围?血涂片染色后最佳观察位置最佳观察位置是?第49页,讲稿共50张,创作于星期一感谢大家观看第50页,讲稿共50张,创作于星期一

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