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1、第二章植物组织培养设备及其使用第1页,本讲稿共16页1.灭菌设备灭菌设备:高压蒸气灭菌锅用于培养基、蒸馏水和接种器械的灭菌消毒。工作原理:工作原理:在密闭的蒸锅内,01MPa的压力下,锅内温度达121。在此蒸气温度下,可以很快杀死各种细菌及其高度耐热的芽孢。第2页,本讲稿共16页使用方法:使用方法:首先检查灭菌锅内是否有水,而且水刚好淹住加热器,然后放入灭菌材料,对称拧紧灭菌锅上的螺丝,关闭放气阀通电。待压力上升到005MPa时,打开放气阀,放出空气,待压力表指针归零后,再关闭放气阀。三次放气后,关阀再通电,压力表上升达01-015Mpa时,维持20min后,断电,待压力降至零时,打开入入气阀
2、,取出灭菌材料。注意事项:注意事项:对高压灭菌后不变质的物品,如无菌水、栽培介质、接种用具,可以延长灭菌时间或提高压力。而培养基要严格遵守保压时间,既要保压彻底,又要防止培养基中的成分变质或效力降低,不能随意延长时间;对于一些布制品,如实验服、口罩等也可用高压灭菌。洗净晾干后用耐高压塑料袋装好,高压灭菌20-30min;高压灭菌前后的培养基,其pH值下降0.2-0.3单位。因此,调PH值时,可适当调高0.0.3个单位。第3页,本讲稿共16页2.接种设备:接种设备:无菌超净工作台用于培养材料的消毒及接种。使用前,将超净工作台上面的排风和杀菌按钮开启,灭菌15min后,关闭杀菌按钮,打开照明按钮,
3、即可在上面进行操作。第4页,本讲稿共16页电炉电炉推车推车酒精灯酒精灯封口膜封口膜接种器具接种器具灭菌器灭菌器培养瓶培养瓶第5页,本讲稿共16页3.培养设备培养设备带日光灯的培养架,主要用于接种后材料的培养。第6页,本讲稿共16页恒温箱:又称培养箱,可用于原生质体和酶制剂的保温,也可用于组织培养材料的保存及暗培养。第7页,本讲稿共16页摇床与转床:在液体培养基中,可改善培养基中的培养材料的通气状况。如从疏松的愈伤组织中获得单个细胞。但注意要设定适合的温度及转速。第8页,本讲稿共16页4.驯化设备驯化设备温室温室 防虫网室防虫网室第9页,本讲稿共16页5、其它辅助设备、其它辅助设备培养基灌装机及
4、洗瓶机培养基灌装机及洗瓶机第10页,本讲稿共16页 除湿机除湿机:使培养室的湿度保持在定的范围内。空调机空调机:用于接种室和培养室温度的控制。第11页,本讲稿共16页烘箱烘箱:用于干燥洗净后的玻璃器皿,还可用80的温度烘干组织培养植物材料以测定干物质。冰箱冰箱:用于在常温下易变性或失效的试剂和母液的储藏,细胞组织和试验材料的冷冻保藏,以及某些材料的预处理。第12页,本讲稿共16页纯水机与蒸馏水发纯水机与蒸馏水发生器:生器:是实验室必备的仪器。第13页,本讲稿共16页天平和显微镜天平和显微镜:天平包括分析天平,电子天平,药物天平等,用于制备母液时培养基组成成分的称取。如一些需要量少的激素和微生素类物质,天平的精确度要到0.0001g,这就要求精确度更高的分析天平。第14页,本讲稿共16页显微镜包括解剖镜,生物显微镜,倒置显微镜等。如茎尖的分离则需要解借助解剖镜。第15页,本讲稿共16页酸度计酸度计:用于校正培养基和酶制剂的PH。第16页,本讲稿共16页