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1、关于试验室检测及数据分析应用现在学习的是第1页,共73页Serology血清学What is serology?什么是血清学?What is it for?血清学的意义How to get the best serological results?怎样获得最佳的血清结果?How to interpret serology?broilersLayers and breeders怎样分析血清学结果?肉鸡蛋鸡和种鸡Samples and serum banks 采样和血清保存现在学习的是第2页,共73页What is serology?什么是血清学?Detection of antibodies 抗
2、体的检测现在学习的是第3页,共73页Types of antibodies抗体的类型IgAIgMIgEIgG现在学习的是第4页,共73页Qualitative Tests定性试验Answer is yes or no 回答“是”或者“不是”Results are“positive”or“negativo”结果为“阳性”或“阴性”Rapid Plate Agglutination test 快速平板凝集试验Agar Gel Precipitation test 琼脂凝胶沉淀试验现在学习的是第5页,共73页Semi Quantitative tests半定量试验Results expressed
3、in titres 结果用滴度表达Based on serial dilution 基于连续稀释Results expressed in 2x,10 x(2log,10log)结果表达为2x,10 x(2log,10log)HI,Serum neutralization HI,血清中和试验现在学习的是第6页,共73页Quantitative tests定量试验Results in absolute numbers 结果用绝对数表示Result is the colorimetric reaction of the substrate proportional to the quantitiy
4、of antibodies 结果是与抗体数量成比例的物质的比色反应ELISA 酶联免疫吸附试验现在学习的是第7页,共73页Sensibility敏感性Ability to determine minimal quantities of antibodies 敏感性是指能检测到的最小抗体的数量Avoid false negatives 避免假阴性False positives 假阳性Disease control and erradication 用于疾病控制和净化Example:SPA 举例:SPA现在学习的是第8页,共73页Specificity特异性Antibodies developed
5、 against a specific agent 由特异性抗原产生的抗体Avoid false positives 避免假阳性False negatives 假阴性Example:Imnmunofluorescence 举例:免疫荧光试验现在学习的是第9页,共73页Ideal理想状况现在学习的是第10页,共73页Calculations计算Sensibility:敏感性Real Positives/(Total number Infected)x 100真正的阳性/(合计感染数)x 100Sensibility=98/(98+2)x100=98%现在学习的是第11页,共73页Calculat
6、ions计算Especificity:特异性Real Negatives/Total number Infected x 100真正的阴性/合计感染数x 100specificity=80/(80+20)x100=80%现在学习的是第12页,共73页Calculations计算 Sensibility=98%specificity=80%敏感性98特异性80现在学习的是第13页,共73页Aplication in the field现场运用Farm with 10.000 birds某场10000羽鸡100%checked100进行检测500 positives出现500阳性490 true
7、positives10 false positives490真阳性 10假阳性现在学习的是第14页,共73页specificity and Sensibility特异性和敏感性Type of method 方法的类型Antigen used 使用的抗原Conditions of the technique 技术条件现在学习的是第17页,共73页Test commonly used in poultry家禽常用的检测方法RPA-Mycoplasma,SalmonellaAGP-IBV,IBD,Marek,ReoHI-ND,IBV,EDS,Mycoplasma,Coryza现在学习的是第18页,共
8、73页Test commonly used in poultry家禽常用的检测方法SN-IBV,IBD,all for research purposesELISA nearly all agents现在学习的是第19页,共73页Serology血清学Diagnostics 诊断Monitoring 监测INTERPRETATION 分析现在学习的是第20页,共73页Dogma o Paradigma?USUALLY THE HIGHER THE TITRE,THE BETTER THE PROTECTION通常滴度越高,保护力越高通常滴度越高,保护力越高现在学习的是第22页,共73页Basi
9、s for the interpretation分析的基础Presence of antibodiesInfectionDevelopment of the immunity 存在抗体 感染 免疫力的产生Absence of antibodiesThere is no infectionThe Infection was very recentThe immunity is in an early stage of development没有抗体:没有感染最近刚感染免疫力正在产生早期阶段现在学习的是第23页,共73页Interpretation:qualitative tests分析:定性试验
10、Negative阴性PositivoSample样品No infection 未感染Acute phase 急性期Low level of antibodies 抗体水平太低Re-test 2 weeks later 2周后重新检测Use a more sensitive test使用更敏感的试验Vaccine疫苗live no challenge活苗未攻毒killed vaccination failure灭活苗免疫失败Challenge test-verify protection 攻毒试验验证保护力Take samples at a later moment过一段时间再次采样现在学习的是
11、第24页,共73页Interpretation:(semi-)quantitative tests分析:半定量试验Negative or low titre阴性或低滴度PositivoSample样品No infection 未感染Acute phase 急性期Low level of antibodies 抗体水平太低Re-test 2 weeks later 2周后重新检测Use a more sensitive test使用更敏感的试验Vaccine疫苗live no challenge活苗未攻毒killed vaccination failure灭活苗免疫失败Challenge tes
12、t-verify protection 攻毒试验验证保护力Take samples at a later moment过一段时间再次采样现在学习的是第25页,共73页Interpretation:qualitative tests分析:定性试验NegativoPositive阳性Sample阳性Infection感染Sero-response to the antigen 对抗原血清学反应Confirmation确诊Use a test with a higher specificity 使用敏感性更高的试验Isolation of the agent病原分离Vaccine疫苗live fie
13、ld challenge or vaccine response活毒野毒感染或疫苗反应killed vaccine response灭活苗疫苗反应现在学习的是第26页,共73页Interpretation:quantitative tests分析:定量试验NegativoHigh titre高滴度Sample样品Vaccine疫苗live field challenge or vaccine response活毒野毒感染或疫苗反应killed vaccine response灭活苗疫苗反应Confirmation确诊Use a test with a higher specificity 使用
14、敏感性更高的试验Isolation of the agent病原分离Infection感染Sero-response to the antigen 对抗原血清学反应现在学习的是第27页,共73页Vaccine疫苗Good response to the vaccinationGood vaccine coverage接种后的良好反应Interpretation:(semi-)quantitative tests分析:半定量试验Low CV低CVNarrow distribution of titres 狭窄的滴度分布No infection没有感染Chronic Infection in th
15、e population鸡群内慢性感染Samples现在学习的是第28页,共73页Vaccine疫苗poor response to the vaccination.接种免疫反应差,免疫覆盖差Poor vaccination coverageInterpretation:(semi-)quantitative tests分析:半定量试验Wide CVCV值大A very wide range of titres滴度分布范围非常宽Acute Infection急性感染A chronic infection in some indivduals某些个体慢性感染samplesCheck the ba
16、tch检查批号Compare with field results与临床结果比较现在学习的是第29页,共73页Interpretation in broilers对肉鸡群的分析Levels of Maternally Derived Antibodies 母源抗体的水平Knowledge about the sanitary statusOutbreaks.Infections or challenge 关于卫生状况的知识 疾病爆发、感染、攻毒Check the vaccination programmesFixed dates检查免疫程序固定日期现在学习的是第30页,共73页Normal C
17、urve正态曲线现在学习的是第31页,共73页Comparing curves曲线比较现在学习的是第32页,共73页Interpretation chickens or live vaccines分析雏鸡或活苗血清学结果外表性能分析措施现在学习的是第33页,共73页Low titre+CV good+good performance低滴度良好的CV良好的性能=continue with the control programme继续控制程序现在学习的是第34页,共73页High Titre+good performance高滴度良好的性能=continue the control progra
18、mme andKeep an eye on the biosecurity!继续控制程序,注意生物安全!Watch out!注意Vaccinated flock免疫过的鸡群=Infection with protection 具保护力的感染=Vaccination with a hot strain 用强毒接种Non-vaccinated flock未免疫的鸡群=past infection 过去感染过=Infection with a mild strain 弱毒株感染过现在学习的是第35页,共73页High titre+narrow CV高滴度窄CVOld infectionGood va
19、ccine coveragewith the use of a strong vaccine strain使用了强的疫苗毒株,具有良好的疫苗覆盖性现在学习的是第36页,共73页High titre+wide CV高滴度宽CVAcute infection急性感染Poor vaccine coverage using a hot vaccine strain 使用了强毒疫苗,疫苗覆盖性差。现在学习的是第37页,共73页High titre+poor performance高滴度差性能Isolate and identify the agent.分离鉴定病毒Improve the control
20、programme.改进控制程序Improve the biosecurity改进生物安全。=fieldinfection Challenge and disease野毒感染和疾病现在学习的是第38页,共73页Low titre+poor performance低滴度差性能 acute infection no antibodies yet 急性感染还未产生抗体 other problems其它问题Retest 1 week later 1周后重新检测Look for other possible cause 寻找其它可能的问题现在学习的是第39页,共73页Interpretation by
21、Agent按病原分析现在学习的是第40页,共73页Interpretation in breeders or layers种鸡和蛋鸡的分析Knowledge of the sanitary statusOutbreaks,infection or challenge?卫生状况的知识爆发、感染、攻毒Check vaccination programmesPre-fixed dates检查免疫程序Comparison with production curves 比较生产曲线现在学习的是第41页,共73页High and low titres-how much?现在学习的是第42页,共73页It
22、is all is a matter of perspective现在学习的是第43页,共73页High or low titres-how high?How low?抗体滴度高和低的认识Base lines基准线现在学习的是第44页,共73页High or low titres-cuanto?滴度高或低多少?Base de datos数据的基准线现在学习的是第45页,共73页Curves-IBD(Real)IBD的抗体滴度曲线现在学习的是第46页,共73页Serology of the individual 个体血清学Serology of populations(flocks)群体血清学S
23、amples采样数量8Baseline-minimum 23,ideal 28 基准线最低23份,理想28份 8Monitoring-minimum 15 监测最低15份8Diagnostics-between 28 and 146 诊断(28146)份现在学习的是第47页,共73页Serum“banks”血清保存Research研究Pruebas comprobatoriasImportant for diagnostics诊断的重要性Security安全性Adequate storage of the serum avoid evaporation 正确存储血清,避免蒸发现在学习的是第48
24、页,共73页Collecting samples采集 样品Monitoring监测Consistence 时间安排Vaccination Programmes 免疫程序Mineral-oil vaccines 矿物油疫苗Feed 饲料Diagnostics诊断Paired samples双份采样SerotecaConditions under which the samples are taken-false positives 样品采集的环境条件(可能造成假阳性)Conditions under which the samples have been taken and the storag
25、e现在学习的是第49页,共73页ELISA titresELISA滴度A lot of variation depends on the author and the kit 根据不同的操作人员和试剂盒,ELISA滴度会有差异现在学习的是第50页,共73页ELISA-IDEXX现在学习的是第51页,共73页ELISA-KPL现在学习的是第52页,共73页ELISA-IDEXX现在学习的是第53页,共73页ELISA-KPL现在学习的是第54页,共73页ELISA-IDEXX现在学习的是第55页,共73页ELISA-KPL现在学习的是第56页,共73页Conclusion(any questio
26、ns?)现在学习的是第57页,共73页现在学习的是第58页,共73页The End现在学习的是第59页,共73页Ay ay ay ayeven more veterinarians!现在学习的是第60页,共73页现在学习的是第61页,共73页Curvas 现在学习的是第62页,共73页Interpretatin of resultsGMTCV现在学习的是第63页,共73页Mathematical problems in the calculation of the coefficient of variation For formula reasons low mean valueswill
27、result in high CV valuesJudge the histogramme现在学习的是第64页,共73页Distribution of titresGMT-igualesCV-narrowCV wideCV-wide现在学习的是第65页,共73页现在学习的是第66页,共73页现在学习的是第67页,共73页现在学习的是第68页,共73页现在学习的是第69页,共73页Curves birds in Production现在学习的是第70页,共73页Curve-Production现在学习的是第71页,共73页Curve-Production(2)现在学习的是第72页,共73页感谢大家观看现在学习的是第73页,共73页