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1、发育生物学原始生殖细胞第1页，本讲稿共24页在不同动物类别原生殖细胞的形成差异很大.一、无脊椎动物的原生殖细胞 研究发现许多无脊椎动物在胚胎发育过程中,大部分细胞中的部分染色质(体)发生了不同程度的消失或减少的现象.因而细胞中的染色体组不能保持在原来数目的水平.而只有一小部分细胞内染色质(体)的数目不变.结果:有染色质消减的细胞发育成-体细胞;无染色质消减的细胞发育成-生殖细胞.第2页，本讲稿共24页1.马蛔虫早期卵裂中染色体消减例证正正常常分分裂裂离离心心处处理理第3页，本讲稿共24页实验证明不同种蛔虫的染色体消减的量很不一致.马蛔虫体细胞染色体消减中失去 80%以上的 DNA.人蛔虫体细胞
2、染色体消减中失去约 27%的DNA.第4页，本讲稿共24页2.昆虫发育中的染色体消减例证卵室一端的极细胞在发育中因有极质(生殖质)存在,而不发生染色体消减,极细胞则发育成生殖细胞.其它细胞内无极质,发生染色体消减,发育成了体细胞.极细胞（卵母细胞）06级14次第5页，本讲稿共24页 极细胞（卵母细胞）第6页，本讲稿共24页极质的作用:(1)支持极细胞的形成;(2)阻止染色质消减.极质的成分是核酸或核酸蛋白复合体(母体 mRNA),在极细胞分裂时释放出来,参与特异蛋白质的合成.总之,在无脊椎动物的原生殖细胞中存在特殊的物质-生殖质(极质),它决定了原生殖细胞的性质.原生殖细胞随胚胎发育而进入生殖
3、腺中形成生殖细胞.第7页，本讲稿共24页二、脊椎动物的原生殖细胞(一)两栖类的原生殖细胞 细胞大细胞大,界限清晰界限清晰;核大核大,核膜明显核膜明显,常偏于一常偏于一侧侧;核仁明显核仁明显;含卵黄颗粒含卵黄颗粒,脂滴脂滴,色素颗粒色素颗粒;迁移期呈变形运动迁移期呈变形运动,有伪足有伪足.1.一般细胞学特征第8页，本讲稿共24页2.无尾两栖类原生殖细胞的起源、迁移第9页，本讲稿共24页生殖质成分的确定：生殖质成分的确定：利用组织化学技术利用组织化学技术,以以“焦宁焦宁(派若宁派若宁)”染料染料(RNA特异染料特异染料),对受精卵或囊胚细胞染色对受精卵或囊胚细胞染色,可见生殖质颗粒着色可见生殖质颗
4、粒着色.如果利用如果利用RNA 酶处理后酶处理后,再以焦宁染色再以焦宁染色,生殖质颗粒消失生殖质颗粒消失.结论:生殖质的成分是RNA;生殖质在卵母细胞发生的过程中合成;生殖质在卵母细胞中以颗粒的形式存在(贮存);生殖质随胚胎发育分配到部分细胞中,并逐渐转译表达,指导合成特异性蛋白质,从而确定了其生殖细胞的性质.原生殖细胞起源于卵母细胞植物极的特殊细胞质-生殖质,并随胚胎发育逐渐迁移到生殖原基,形成生殖细胞.第10页，本讲稿共24页(二)鸟类的原生殖细胞1.一般细胞学特征 细胞大细胞大;细胞核大细胞核大,常偏于一侧常偏于一侧;早期内含大量的卵早期内含大量的卵黄和脂滴及少量糖原黄和脂滴及少量糖原;
5、随胚胎发育随胚胎发育,卵黄和脂滴减少卵黄和脂滴减少,糖糖原增多原增多,植入生殖原基后糖原逐渐减少植入生殖原基后糖原逐渐减少.在鸟类的原生殖细胞中始终没有找到类似生殖质的一类特殊细胞质物质及结构.第11页，本讲稿共24页2.鸟类原生殖细胞的起源和迁移 移植鹌鹑上胚层与鸡下胚层组成嵌合体胚移植鹌鹑上胚层与鸡下胚层组成嵌合体胚,并使其发育至并使其发育至 一定时期一定时期,而后检查。而后检查。(鹌鹑原生殖细胞鹌鹑原生殖细胞有特殊异染色质核有特殊异染色质核,在观察中容易识别在观察中容易识别)。在发育至一定时期的嵌合体胚下胚。在发育至一定时期的嵌合体胚下胚 层中找到了鹌鹑的原生殖细胞层中找到了鹌鹑的原生殖
6、细胞,说明它来源于上胚层。说明它来源于上胚层。(1)起源起源:研究证明鸟类原生殖细胞来自上胚层研究证明鸟类原生殖细胞来自上胚层.第12页，本讲稿共24页通过在体外分别培养早期鸡胚的上胚层或下胚层也可证明通过在体外分别培养早期鸡胚的上胚层或下胚层也可证明.第13页，本讲稿共24页实验研究证明鸟类原生殖细胞来自上胚层第14页，本讲稿共24页PAS反应(过碘酸-Schiff 反应)可以使糖原特异性着色,呈紫红色.过碘酸过碘酸 Schiff Schiff 反应反应 HIOHIO4 Schiff Schiff 试剂（无色）试剂（无色）多糖多糖 多醛多醛 紫红色沉淀紫红色沉淀 （氧化）（氧化）（无色碱性品
7、红）（无色碱性品红）（PAS PAS 阳性）阳性）甲基绿复染第15页，本讲稿共24页(2)原生殖细胞的迁移原生殖细胞的迁移第16页，本讲稿共24页孵化48小时鸡胚血流中的 PGCs第17页，本讲稿共24页胚血涂片血流中的 PGCs第18页，本讲稿共24页生殖嵴中的 PGCs 第19页，本讲稿共24页生殖嵴中的 PGCs 第20页，本讲稿共24页第21页，本讲稿共24页微血管腔PGC第22页，本讲稿共24页PGCs 的迁移路径的迁移路径:上胚层上胚层下胚层下胚层 下胚层生殖新月下胚层生殖新月中胚层生殖新月中胚层生殖新月胚外血岛胚外血岛血管血管血液循环血液循环肠系膜小动肠系膜小动脉管壁脉管壁肠系膜肠系膜生殖嵴生殖嵴生殖腺生殖腺生殖细胞生殖细胞.第23页，本讲稿共24页PGCs 的迁移形式的迁移形式:(1)被动迁移被动迁移:上胚层上胚层 下胚层生殖新月下胚层生殖新月;(2)主动迁移主动迁移:下胚层生殖新月下胚层生殖新月 生殖嵴生殖嵴.迁移方式:(1)变形虫样运动;(2)通过血液循环.迁移机制不详 (可能有生殖原基的趋化性引力)关于哺乳类的 PGCs 问题,意见分歧很多.故略第24页，本讲稿共24页