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1、 动物细胞培养和核移植技术课时作业一、选择题1在动物细胞培养过程中，使用胰蛋白酶的目的是()A使动物组织分散为单个细胞B去掉细胞壁，使其成为原生质体C去掉细胞膜，暴露出原生质体便于细胞融合D促进蛋白质水解为多肽解析：在进行动物细胞培养前，先用胰蛋白酶使组织块中的细胞相互分散开，以增加与培养液的接触面积，便于培养。答案：A2一般来说，动物细胞体外培养需要满足以下条件()无毒的环境无菌的环境培养液中需加血浆温度与动物体温相近需要O2，不需要CO2加CO2维持培养液的pHABC D解析：动物细胞体外培养要求环境无菌、无毒，在细胞培养液中要添加血清、血浆等一些天然成分，培养温度一般与动物体温相近。动物
2、细胞培养还需要O2和CO2，O2是细胞代谢所必需的，CO2可维持培养液的pH。答案：D3以下有关动物细胞培养的表达，正确的选项是()A动物细胞培养的目的就是获得大量的分泌蛋白B对动物组织块和分散的细胞进行培养，效果是根本相同的C细胞遗传物质的改变发生于原代培养过程中D培养高度分化的动物体细胞一般不能发育成幼体解析：获得大量的分泌蛋白仅仅是动物细胞培养应用的一个方面。分散的动物细胞比组织块更容易培养。细胞遗传物质的改变发生在传代培养中。答案：D4用动植物成体的体细胞进行离体培养，以下表达正确的选项是()A都需用CO2培养箱B都需用液体培养基C都要在无菌条件下进行D都可表达细胞的全能性解析：动植物
3、成体的体细胞进行离体培养都要在无菌条件下进行。动物成体的体细胞离体培养用液体培养基，不能表达细胞的全能性；植物成体的体细胞离体培养不一定用液体培养基，能表达细胞的全能性。动物细胞培养需要用CO2培养箱，但植物细胞培养不需用CO2培养箱。答案：C5以下有关动物细胞培养的表达，不正确的选项是()A用于培养的细胞大都取自胚胎或幼龄动物的器官或组织B将所取的组织先用胰蛋白酶等进行处理使其分散成单个细胞C在培养瓶中要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离，制成悬浮液D动物细胞培养只能传50代左右，所培养的细胞就会衰老死亡解析：动物细胞培养的过程是：先制备培养液，然后取动物细胞，用于培养的细胞大都来自胚胎或出生
4、不久的幼龄动物的器官或组织；将组织取出后，用胰蛋白酶等处理使组织分散成单个细胞，将单个细胞配制成一定浓度的细胞悬浮液，再将悬浮液放入培养瓶中在培养箱中培养；细胞在培养瓶中贴壁生长，细胞的数目越来越多，需定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离下来，再配制成悬浮液，分到两个瓶中继续培养。50代以后生存下来的细胞的遗传物质发生了变化，也就是说细胞发生了癌变，癌细胞会无限增殖。答案：D6某研究小组对某种动物的肝肿瘤细胞(甲)和正常肝细胞(乙)进行培养，以下表达正确的选项是 ()A制备肝细胞悬浮液时先用剪刀剪碎肝组织，再用胃蛋白酶处理B肝细胞培养过程中通常在培养液中通入5%的CO2刺激细胞呼吸C为了防止培养过
5、程中杂菌的污染，可向培养液中参加适量的干扰素D用血球计数板计数的方法，可推断乙细胞比甲细胞增殖周期长解析：制备肝细胞悬浮液时先用剪刀剪碎肝组织，再用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理。肝细胞培养过程中通常在培养液中通入5%的CO2维持培养液pH。为了防止培养过程中杂菌的污染，可向培养液中参加适量的抗生素。答案：D7以下关于动物细胞培养的过程表达，错误的选项是()A制作细胞悬浮液时可以使用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理B悬浮液中分散的细胞很快贴附在细胞壁上，细胞贴壁表达了细胞的适应性C细胞进行有丝分裂数量增加到接触时，可以使用胃蛋白酶处理后分瓶培养D10代以内的细胞保持细胞正常的二倍体核型解析：胃蛋白酶在pH7
6、时就会变性失活，而细胞培养的pH一般是7.27.4。答案：C8以下关于动物体细胞核移植技术和克隆动物的表达，正确的选项是()A目前科学家可以用类似植物组织培养的方法获得完整的动物个体B动物体细胞核移植技术可有选择地繁殖某一性别的家畜C用于核移植的供体细胞一般都选用传代50代以内的细胞D用体细胞核移植方法生产的克隆动物是对体细胞供体动物进行100%的复制解析：动物体细胞的全能性受到限制，不能经过培养获得动物个体；用于核移植的供体细胞一般是10代以内的细胞；克隆动物细胞核内的遗传物质来自供体细胞，其性别与提供细胞核的动物一致，因此可有选择地克隆某一性别的家畜；克隆动物细胞质内的遗传物质主要来自受体
7、卵母细胞，并不是对体细胞供体动物进行100%的复制。答案：B9乙马的卵细胞核被甲马的体细胞核置换后，这个卵细胞经过屡次分裂发育成重组胚胎，再植入丙马的子宫内发育，结果产下一匹小马。以下表达正确的选项是()A直接在体外对甲马的体细胞进行诱导也能培养出胚胎B小马的性状与甲马完全相同C此项技术可用于保护濒危物种D该过程可以很好地证明动物细胞的全能性解析：克隆过程中细胞质遗传物质来自一方，而细胞核中遗传物质来自另一方，所以小马的性状与甲马不完全一致。该过程只能说明动物细胞核具有全能性，而不能证明动物细胞的全能性。答案：C10中科院动物研究所与福州大熊猫研究中心合作，通过将大熊猫细胞核植入去核后的兔子卵
8、母细胞中，在世界上最早克隆出一批大熊猫早期胚胎，说明我国大熊猫人工繁殖研究再次走在世界前列。以下描述与克隆无关的是()A“复制 B无性繁殖C组织培养 D基因工程解析：克隆是一种无性繁殖方式。子代与亲本相同，因而也可以认为是由亲本“复制而来的；该过程需采用组织培养技术，但与基因工程无关。答案：D11生物技术的开展速度很快，已灭绝生物的“复生将不再是神话。如果世界上最后一只野驴刚死亡，以下提供的“复生野驴个体的方法中能够成功的是()A将野驴的体细胞取出，利用细胞培养技术，可培育成新个体B将野驴的体细胞两两融合，再经组织培养培育成新个体C取出野驴的体细胞核移植到母家驴的去核卵细胞中，经孕育培养成新个
9、体D将野驴的一个基因导入家驴的受精卵中，培育成新个体解析：野驴的体细胞的全能性已经受到限制，不能经过培养形成新个体；将野驴的一个基因导入家驴的受精卵中，培育成的是带有野驴基因的家驴；野驴的体细胞核中具有发育成野驴的全部基因，因此通过核移植技术，可使野驴“复生。答案：C12动物细胞体外培养时，通常要在培养基中补充一定浓度的某些物质。如图是血清对正常细胞和癌细胞培养影响的实验结果，从该图提供的信息不能获得的结论是()A正常细胞与癌细胞的增殖速率相同B有无血清对正常细胞培养的影响不同C培养基中补充血清有助于正常细胞的培养D培养基中是否补充血清对癌细胞的培养影响不大解析：从图中可以看出，随着培养时间的
10、延长，癌细胞的数量比正常细胞显著增多，因此正常细胞与癌细胞的增殖速率不同。从图中还可以看出，有无血清对正常细胞培养影响很大，而对癌细胞影响不大，因此在培养基中补充血清对正常细胞的培养有利，而对癌细胞的培养，有无血清其结果都一样，都是快速增殖。答案：A二、非选择题13科学家通过转基因技术获得了含有人生长激素基因的奶牛，如果要加速转基因奶牛的繁育，可以对此转基因奶牛进行克隆(如下图)。请结合图示答复以下问题：(1)在进行细胞培养时，要对取自转基因奶牛的组织细胞进行别离，形成单个细胞，这个过程中需要利用_酶处理。(2)用于核移植的供体细胞，一般都选用传代10代以内的细胞，原因是_。(3)在进行原代培
11、养时，细胞增殖的方式是_，此外，细胞增殖还表现出_和接触抑制等特点。(4)将进行培养的供体细胞注入去核的卵细胞中，去除卵母细胞细胞核的目的是_。(5)上述动物细胞工程中涉及的技术有_。转基因奶牛的克隆成功，说明了动物_具有全能性。解析：(1)实践中常用胰蛋白酶处理动物组织细胞使其别离开来。(2)传代10代以内的细胞代谢旺盛、分裂能力强，遗传物质没有发生改变，适于作为核移植的供体细胞。(3)在进行原代培养时，细胞以有丝分裂的方式进行增殖，同时表现出贴壁生长和接触抑制的现象。(4)去除卵母细胞细胞核的目的是使克隆出的动物个体的遗传物质几乎全部来自供体细胞。(5)该克隆动物的培育过程涉及核移植、动物
12、细胞培养和胚胎移植等技术，说明了高度分化的哺乳动物体细胞的细胞核仍具有全能性。答案：(1)胰蛋白(2)该种细胞代谢旺盛、分裂能力强，且遗传物质没有发生改变(3)有丝分裂贴壁生长(4)使克隆出的动物个体的遗传物质几乎全部来自供体细胞(5)核移植、动物细胞培养、胚胎移植技术体细胞的细胞核14(2022高考全国卷)以下图表示通过核移植等技术获得某种克隆哺乳动物(二倍体)的流程。答复以下问题：(1)图中A表示正常细胞核，染色体数为2n，那么其性染色体的组成可为_。过程表示去除细胞核，该过程一般要在卵母细胞培养至适当时期再进行，去核时常采用_的方法。代表的过程是_。(2)经过屡次传代后，供体细胞中_的稳
13、定性会降低。因此，选材时必须关注传代次数。(3)假设获得的克隆动物与供体动物性状不完全相同，从遗传物质的角度分析其原因是_。(4)与克隆羊“多莉(利)培育成功一样，其他克隆动物的成功获得也证明了_。解析：(1)哺乳动物的正常细胞核中性染色体的组成为XX(雌性)或XY(雄性)。卵母细胞在培养至减数第二次分裂的中期时，常采用显微操作法去除细胞核。过程是将早期胚胎移植到代孕个体的子宫中，即代表的是胚胎移植。(2)一般来说，动物细胞在传代培养到1050代时，局部细胞的细胞核型可能会发生变化，即遗传物质的稳定性会降低。因此，选材时一般选10代以内的细胞，以保证细胞正常的二倍体核型。(3)获得的克隆动物性
14、状与供体动物根本相同，但不完全相同，从遗传物质的角度分析，性状不完全相同的原因是：克隆动物细胞质中的遗传物质来自去核卵母细胞的细胞质，细胞质中的遗传物质会对克隆动物的性状产生影响。(4)高度分化的动物体细胞的全能性受到限制，但其细胞核的全能性在卵母细胞细胞质中某些物质的作用下仍能得以表达。故克隆羊“多莉(利)以及其他克隆动物的培育成功，证明了高度分化的动物体细胞的细胞核仍具有全能性。答案：(1)XX或XY显微操作胚胎移植(2)遗传物质(3)卵母细胞的细胞质中的遗传物质会对克隆动物的性状产生影响(4)动物已分化体细胞的细胞核具有全能性15现有甲、乙两种可能有一定致畸、致癌作用的化学物质，利用动物
15、细胞培养的方法能够鉴定它们是否有毒性，并比拟二者毒性的强弱，请完成以下实验报告。.实验材料：小白鼠胚胎。.药品用具：胰蛋白酶液、动物细胞培养液、动物细胞固定液、适宜浓度的龙胆紫溶液、滴管、培养皿、剪刀、锥形瓶、细胞培养箱、载玻片、盖玻片、光学显微镜、小白鼠正常体细胞有丝分裂高倍显微镜照片。.实验原理：_，根据这些变异细胞占全部培养细胞的百分数(以下称Q值)，可判断该化学物质的毒性。.实验步骤(1)制备细胞悬液：把小白鼠胚胎放在培养皿中剪碎，转入锥形瓶中，参加胰蛋白酶液处理，使胚胎组织离散成单个细胞，再参加动物细胞培养液，制成细胞悬液。(2)进行细胞培养取A、B、C三个洁净的培养瓶， _。_。_
16、。(3)制作临时装片当细胞繁殖到大约第8代左右时，同时从细胞培养箱中取出三个培养瓶，用胰蛋白酶液处理，使培养的细胞从瓶壁上脱落，再参加动物细胞固定液迅速固定细胞，将细胞固定在不同的分裂时期。静置一段时间后，分别从各培养瓶底部吸取适量的细胞悬液，滴在与培养瓶有相同编号的载玻片中央，加12滴一定浓度的_染色，35 min后，盖上盖玻片，制成临时装片。(4)镜检和统计：把临时装片放在显微镜下，寻找处于_期的细胞，并与_比照以确认发生上述变异的细胞，同时统计该期变异的细胞占细胞总数的百分数(Q值)。.实验结果培养瓶ABCQ值1.3%12.5%0.1%.实验结论：_。解析：有毒物质会引起细胞变异，物质的毒性越强，引起的细胞变异数目越多，依此可判断物质的毒性。实验可通过观察细胞染色体来判断。由实验结果可知，C组是对照组，A、B是实验组，在自然状态下，细胞也会发生变异，但频率较低。答案：.将有毒物质参加细胞培养液后，培养的动物细胞会发生染色体数量和结构变异(答出有毒物质使细胞发生变异).(2)分别参加等量的细胞悬液向A、B两个培养瓶中分别参加等量的化学物质甲、乙，并将培养瓶摇匀；C瓶不作处理，作为对照把三个培养瓶放在37 (或适宜温度)的细胞培养箱中培养(3)龙胆紫溶液(4)有丝分裂中小白鼠正常体细胞有丝分裂高倍显微镜照片.甲、乙两种化学物质均有一定毒性，且乙的毒性比甲的毒性大