《原位杂交实验方法.ppt》由会员分享，可在线阅读，更多相关《原位杂交实验方法.ppt（10页珍藏版）》请在taowenge.com淘文阁网|工程机械CAD图纸|机械工程制图|CAD装配图下载|SolidWorks_CaTia_CAD_UG_PROE_设计图分享下载上搜索。
1、1,原位杂交实验方法,2,mRNA 原位杂交前实验准备,1，无RNA酶水的处理2，无RNA酶载玻片的处理3，标本的防RNA酶的固定4，探针的稀释和保存5，DNA探针需变性,3,原位杂交溶液的配制,1，预杂交液和杂交液的配制2，20Xssc， 2Xssc， 0.2Xssc缓冲液的配制3，0.1mol PBS缓冲液的配制4，0.1mol 枸橼酸缓冲液的配制5，0.1mol TBS缓冲液的配制6，复合消化液的配制7，组织细胞打孔液的配制8，杂交漂洗液9，过氧化氢封闭液,4,探针设计方案,1，探针名称 ：2，适用种属：3，标记方式：3DIG 5FAM4，模板序列：5，探针序列：,5,探针杂交原理,1，
2、组织细胞的通透2，探针长度3 , 探针浓度和杂交时间4，杂交中的Tm值和杂交温度5，杂交严格度 6，预杂交原理7，杂交后处理,6,A-石蜡切片mRNA原位杂交步骤,一，过氧化物酶显色系统二，碱性磷酸酶显色系统三，荧光显色方法,7,B-冰冻切片mRNA原位杂交步骤,一，过氧化物酶显色系统二，碱性磷酸酶显色系统三，荧光显色方法,8,C-细胞爬片或涂片mRNA原位杂交步骤,一，过氧化物酶显色系统二，碱性磷酸酶显色系统三，荧光显色方法,9,附录,1，DAB的配制和使用方法2 NBT/BCIP的配制和使用方法3，苏木素的配制和使用方法4，核固红的配制和使用方法,10,流式细胞仪,D-悬浮细胞的mRNA原位杂交细胞流式细胞仪步骤,