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1、精选优质文档-倾情为你奉上II型糖尿病家兔模型的建立一、 摘要： 糖尿病是一组由于遗传和环境因素相互作用，胰岛素相对或绝对缺乏以及靶组织对胰岛素敏感性降低（胰岛素抵抗）引起的碳水化合物、脂肪及蛋白质代谢紊乱的综合征，是一种持续高血糖为特征的、慢性、全身性代谢性疾病。其按病因学分为1型、2型、其他特殊类型糖尿病和妊娠型糖尿病;以2型为主，且其发病率呈逐年上升趋势，,病程缓慢，预防治疗仍不完善。所以动物模型在2型糖尿病研究中发挥了重要作用, 对于深入研究糖尿病的发病、治疗、预防及其并发症的转归有重要意义。动物模型可以有诱导型动物模型、自发性遗传动物模型、胰腺部分切除动物模和转基因动物模型等几种常见
2、的2型糖尿病动物模型的建立模型，本文主要就诱导型方法中的脂毒模型进行综述和评价。二、 作者单位：湘南学院三、 作者姓名：杨某，张某、谢某、李某四、 关键字：诱导型II STZ脂毒模型五、 正文：1、 前言： 2型糖尿病发病率呈逐年上升趋势，已严重威胁到人类健康，但其预防治疗仍不完善。因此，建立理想的糖尿病模型对于深入研究糖尿病的发病、治疗、预防及其并发症的转归有重要意义。化学物质诱导糖尿病动物模型，是应用化学物质损伤胰腺B细胞，从而引起动物发生糖尿病。目前常用药物有四氧嘧啶（allocan,AL)和链脲佐菌素（streptozotocin,STZ),其作用机制都是选择性损伤胰腺B细胞，引起细胞
3、坏死，导致血胰岛素不同程度下降伴血糖升高。因此主要用于复制1型糖尿病。但是研究发现用STZ处理的新生小鼠在成年后可呈现2型糖尿病的表现，血清中胰岛素水平可以不降低甚至增高，而主要表现为胰岛素抵抗和能量代谢紊乱。5天龄ICR小鼠，按100mg/kg体重腹腔注射STZ，5天后再补注STZ 60mg/kg体重，待小鼠断乳后，给予正常饲料喂养。4周后剪鼠尾采血，用罗氏血糖仪测血糖在1015mmol/L之间，并且小鼠的肝糖原和肌糖原均降低1。另外有作者利用雄性2天龄Wistar大鼠腹腔注射STZ160mg/kg，8周后尿糖阳性者作为研究对象2进行2型糖尿病炎症反应的研究。因此，链脲佐菌素（strepto
4、zotocin,STZ)也可以用于家兔，并制备II模型。我们的设想就是用高脂毒模型进行II模型制备，并综述、分析。2、 研究对象与方法：家兔;灌胃给药法；数据统计法以及空白对照法。3、 研究原理：单纯高脂高热量饮食：由于2型糖尿病是遗传因素和环境因素共同作用的结果，因此近年的研究中重视了饮食的重要性，尤其是高脂、高热量的不合理的饮食结构对代谢性疾病的发生发展起着推动作用。利用脂毒性原理使对胰岛素敏感性降低（IR）的形式，再用STZ联合CFA对胰岛B细胞的损害形成胰岛素分泌不足伴IR及高血糖、高血脂。高血压的II模型。4、步骤及说明：1） 长期高脂肪喂养家兔，建立脂毒性模型：取20只大小相似，年
5、龄相近，体重相当且健康的家兔为一组，组成脂肪喂养组。用脂肪乳剂以20ml/kg灌胃,一天三次(于喂饲料前)；另设6只为对照组，其体质与实验组一致，以等量蒸馏水灌胃。2） 灌胃后，两组均进食标准颗粒饲料（蛋白质占21.5%，脂肪31.2%，碳水化合物52.1%）, 每周称体重（BW),l连续4周后，测兔子血压 收缩压（SBP）取耳缘静脉血测甘油三酯量（TG）.3） 做高胰岛素正常血糖钳夹实验两组对照测定是否存在胰岛素抵抗。4） 筛选出10只成功胰岛素抵抗的家兔进行腹腔STZ联合CFA静脉注射，此10只为高脂肪组的，空腹6小时后静脉注射STZ30mg/kg,次日注射CFA0.45ml/kg; 14
6、天后，进行耳缘静脉采血，用血糖仪进行随机血糖测定，若多次血糖11.1mol/l,则为T2OM.不达标者，重复三次试验，否则，停止试验。5） 空白对照组只在相同条件下注射0.11%柠檬酸缓冲液0.25ml/100g,取耳缘静脉血测随机血糖，进一步确定模型是否成功制备。4、 结果分析:本动物模型易制备，且无外伤（如切除胰腺带来的创伤）带来的干扰，因而误差小，结果较准确。实验组与对照组均在同一条件下进行，因此II模型制备结果可靠。适合于学术研究或实验验证。因此，建立大鼠钳夹技术，证明了大鼠胰岛素敏感性已下降，已成功复制了胰岛素抵抗的动物模型。5、结论与建议：此动物模型易于制备且结果可靠，因而可行。建
7、议耐心按照计划饲养家兔，成功完成最后实验。六、 实验准备：1、 试剂：STZ试剂；0.11%柠檬酸缓冲液；胰岛素诊断试剂盒等。2、 仪器：动物血压测量仪，血糖测定仪或葡萄糖氧化酶法试剂盒等；3、 脂肪乳剂制备：称花生油220g于相应仪器中加热至80C搅拌制成油相，同时往另一容器中加140g水，60g全脂奶粉，100g蔗糖，4g食盐和18.14g丙二醇搅拌加热至60c,加入4g脱氧胆酸钠，充分搅拌加热制成水相；将水相加入油相中，混元，冷却，加入复合维生素0.18g,复合微量元素0.14g充分混匀，制成脂肪乳剂（脂肪75%,碳水化合物5%，蛋白质10%），将制成的乳剂于4冷藏，每天在实验前经40水
8、浴，充分搅拌后使用。七、 注意事项：1、 严格按照规定给药，注射量准确。2、 家兔灌药时速度合适，量不宜超过150ml,插管查放部位为胃。3、 实验途中注意安全，防止家兔抓伤、咬伤。4、 灌胃不成功时应适时让家兔休息。八、 参考文献：1、 Life;sci 2006 79(17:1100-7.I2)2、 Fisf Afl:liated hospital of xiang Nan Univesity Hu Nan.web.3、 B1994-2009 china lfcutemic Jounal nublishing.4、 Biolchen 1998 273(6)3547.505、 Clinrest,2002,32(3)6、 人教版 内科 第7版。7、 朱明德、石应康。临床医学概要 20108、 动物实验机能学 兴国出版社 九、 小组成员：杨某、张谬（第十组）专心-专注-专业