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1、关于探究酵母菌种群数量的变化实验第1页，此课件共21页哦探究：培养液中酵母菌种群数量的变化探究：培养液中酵母菌种群数量的变化目的要求目的要求1、学习利用血球计数板进行微生物计数的方法、学习利用血球计数板进行微生物计数的方法2、实验探究培养液中酵母菌种群数量的变化、实验探究培养液中酵母菌种群数量的变化3、注意样方法的应用、注意样方法的应用4、体会影响种群数量变化的因素、体会影响种群数量变化的因素第2页，此课件共21页哦1、酵母菌的繁殖方式主要是、酵母菌的繁殖方式主要是:2、酵母菌的呼吸方式是、酵母菌的呼吸方式是:兼性厌氧兼性厌氧(可进行有氧呼吸和无氧呼吸可进行有氧呼吸和无氧呼吸)回顾思考回顾思考
2、:出芽生殖出芽生殖3、酵母菌的培养条件要注意那些问题、酵母菌的培养条件要注意那些问题?比如要用适宜的温度培养比如要用适宜的温度培养,调节好调节好PH值值,溶溶氧量的控制等。氧量的控制等。酿酒和做面包都需要酵母菌。这些酵母菌可酿酒和做面包都需要酵母菌。这些酵母菌可以用液体培养基（培养液）来培养。培养液中酵以用液体培养基（培养液）来培养。培养液中酵母菌种群的增长情况，与发酵食品的制作有密切母菌种群的增长情况，与发酵食品的制作有密切关系。关系。第3页，此课件共21页哦培养液中酵母菌种群数量开始一段时间是培养液中酵母菌种群数量开始一段时间是“J”型增长，由于营养型增长，由于营养物质的消耗，有害代谢产物
3、的积累，物质的消耗，有害代谢产物的积累，PH值的改变，种群数量呈值的改变，种群数量呈“S”型增长。型增长。探究：培养液中探究：培养液中酵母菌种群数量的变化酵母菌种群数量的变化问题问题：培养液中酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的？培养液中酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的？温温度会影响酵母菌的生长吗？营养成分会影响酵母菌的生长吗？度会影响酵母菌的生长吗？营养成分会影响酵母菌的生长吗？作出假设作出假设 根据前面所学的知识，针对这一问题作出假设：根据前面所学的知识，针对这一问题作出假设：讨论探究思路讨论探究思路 探究所需要的菌种和无菌马铃薯培养液或肉汤培养液、试管、探究所需要的菌种和无菌马铃薯培养液
4、或肉汤培养液、试管、血球计数板（血球计数板（2mm2mm2mm2mm方格）、滴管、显微镜等，都由老师提供。方格）、滴管、显微镜等，都由老师提供。在制订计划前，你需要思考以下问题，并与同学讨论。在制订计划前，你需要思考以下问题，并与同学讨论。第4页，此课件共21页哦实验设计实验设计将将9支试管分成支试管分成ABC三组，每组三组，每组3支。支。A组为实验组，组为实验组，装培养液装培养液10mL，酵母菌母液，酵母菌母液0.1mL,环境温度环境温度28。B组组装培养液装培养液10mL，酵母菌母液，酵母菌母液0.1mL,环境温度环境温度5，与，与A组形成温度条件对照。组形成温度条件对照。C组不装培养液，
5、只装无菌水组不装培养液，只装无菌水10mL,酵母菌母液酵母菌母液0.1mL,环境温度环境温度28，与，与A组形成营养组形成营养条件对照。条件对照。第5页，此课件共21页哦实验操作：实验操作：(1)、配制无菌马铃薯、配制无菌马铃薯培养液培养液和和酵母菌母液酵母菌母液；(2)、预先设计分装预先设计分装。先每次用。先每次用10mL刻度吸管吸取刻度吸管吸取10mL培养液到培养液到A组组和和B组试管，用另一支组试管，用另一支10mL刻度吸管吸取刻度吸管吸取10mL无菌水到无菌水到C组试管。组试管。待分装完毕，每支试管加塞后把试管扎成捆后，然后用记号笔待分装完毕，每支试管加塞后把试管扎成捆后，然后用记号笔
6、注明注明培养基的名称、组别、日期。培养基的名称、组别、日期。(3)、用高压蒸汽灭菌锅、用高压蒸汽灭菌锅灭菌灭菌；(4)、接种菌种接种菌种：用灭菌干净的：用灭菌干净的1mL刻度吸管每次吸取刻度吸管每次吸取0.1mL酵母菌母酵母菌母液，往每支试管中加入。（注意滴加量不要太多，避免初始菌数过液，往每支试管中加入。（注意滴加量不要太多，避免初始菌数过多。）多。）(5)、培养培养：将：将A、C试管置于试管置于28的恒温箱中培养。将的恒温箱中培养。将B试管置于试管置于5的恒温箱中培养。（的恒温箱中培养。（5的恒温箱可由某些型号冰箱保温室设定的恒温箱可由某些型号冰箱保温室设定5时代替。）时代替。）(6)、计
7、数和记录计数和记录：每天取样时间大体一致，每次每组按序号取一：每天取样时间大体一致，每次每组按序号取一支试管。计数过程中一定要遵守无菌操作规范，取样的吸管要干支试管。计数过程中一定要遵守无菌操作规范，取样的吸管要干净且分开使用，每次取样前要试管振荡摇匀。显微镜下进行细胞净且分开使用，每次取样前要试管振荡摇匀。显微镜下进行细胞计数后，立即将数据填到记录表格中。计数后，立即将数据填到记录表格中。第6页，此课件共21页哦分析结果，得出结论分析结果，得出结论将所得数值用曲线图表示出来，分析实验结果是否支持你所将所得数值用曲线图表示出来，分析实验结果是否支持你所做的假设。做的假设。酵母菌的种群数量在营养
8、条件有限的情况下是呈酵母菌的种群数量在营养条件有限的情况下是呈“S”型增长，但之后会下降。温度、营养成分会影响酵型增长，但之后会下降。温度、营养成分会影响酵母菌种群数量的变化。母菌种群数量的变化。探究的结论：探究的结论：第7页，此课件共21页哦一、怎样进行酵母菌的计数？一、怎样进行酵母菌的计数？提示：对一支试管中的培养液提示：对一支试管中的培养液(可定为可定为10ml)中的酵母菌逐个计数是非常困难的，可以采用中的酵母菌逐个计数是非常困难的，可以采用抽样检测抽样检测的方法：先将盖玻片放在计数室上，的方法：先将盖玻片放在计数室上，用吸管吸取培养液，滴于用吸管吸取培养液，滴于盖玻片盖玻片边缘，让边缘
9、，让培养培养液液自行渗入，多余培养液用滤纸吸去，稍待片自行渗入，多余培养液用滤纸吸去，稍待片刻，待酵母菌细胞全部刻，待酵母菌细胞全部沉降到计数室底部沉降到计数室底部，将，将计数板计数板放在载物台的中央，放在载物台的中央，计数计数一个小方格内一个小方格内的酵母菌数的酵母菌数量，再以此为根据，量，再以此为根据，估算估算试管中试管中的酵母菌总数。的酵母菌总数。第8页，此课件共21页哦介绍介绍:血球计数板的构造血球计数板的构造1、血球计数板：、血球计数板：是显微镜上的外挂物件，可用来测量细胞，是显微镜上的外挂物件，可用来测量细胞，细菌等一些微小物体的长度，还有就是测量数量，如单位体细菌等一些微小物体的
10、长度，还有就是测量数量，如单位体积细胞的数量。血球计数板是由一块比普通载玻片厚的特制积细胞的数量。血球计数板是由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的。玻片中有四条下凹的槽，构成三个平台，中间玻片制成的。玻片中有四条下凹的槽，构成三个平台，中间的平台较宽，其中间又被一短横槽隔为两半，每半边上面的平台较宽，其中间又被一短横槽隔为两半，每半边上面,刻有一个方格网。刻有一个方格网。第9页，此课件共21页哦化化放大后的方格网计数室放大后的方格网计数室 I H G F E D C B A251616252、方格网的构成：、方格网的构成：方格网上刻有方格网上刻有9个大方格，其中个大方格，其中只有只有中间的一个
11、大方格为中间的一个大方格为计数室，计数室通常有两种规格：一种是大方格内分为计数室，计数室通常有两种规格：一种是大方格内分为16中格，每一中格又分为中格，每一中格又分为25小格；另一种是大方格内分为小格；另一种是大方格内分为25中格，每一中格又分为中格，每一中格又分为16小格。但是不管计数室是哪一种构造，小格。但是不管计数室是哪一种构造，它们都有一个共同的特点，即它们都有一个共同的特点，即每一大方格都是由每一大方格都是由1625=2516=400个小方格组成。个小方格组成。第10页，此课件共21页哦3、使用方法、使用方法:将血球计数板用将血球计数板用擦镜纸擦镜纸擦净，在中央的计数室上加盖专擦净，
12、在中央的计数室上加盖专用的盖玻片，将稀释后的酵母菌悬液，用吸管吸取一滴置于用的盖玻片，将稀释后的酵母菌悬液，用吸管吸取一滴置于盖玻片的边缘，使菌液缓缓渗入，多余的菌液用吸水纸吸取，盖玻片的边缘，使菌液缓缓渗入，多余的菌液用吸水纸吸取，稍待片刻，使酵母菌全部沉降到血球计数室内，加盖盖玻片。稍待片刻，使酵母菌全部沉降到血球计数室内，加盖盖玻片。第11页，此课件共21页哦5、单位换算、单位换算:以以1mm1mm为为例，大方格的长和宽各为例，大方格的长和宽各为1mm，深度为深度为0.1mm，其体积为，其体积为0.1mm3。换算为。换算为1mL：1000/0.1=104即即1mL是是104个个0.1mm
13、3。4、计数室的规格：、计数室的规格：计数室长计数室长宽有：宽有：1mm1mm,2mm2mm,3mm3mm等等深度均为深度均为0.1mm。第12页，此课件共21页哦如果使用规格为如果使用规格为16格格25格的计数室，要按对格的计数室，要按对角方位，取左上、右上、左下、右下角方位，取左上、右上、左下、右下4个中格个中格(即即100个小格个小格)的酵母菌数。的酵母菌数。如果使用规格为如果使用规格为25格格16格的计数室，除了取格的计数室，除了取其其4个对角方位外，还需再数中央的一个中格个对角方位外，还需再数中央的一个中格(即即80个个小方格小方格)的酵母菌数（五点取样法）。的酵母菌数（五点取样法）
14、。出芽的酵母菌，芽体达到母细胞大小一半时，即可作为两出芽的酵母菌，芽体达到母细胞大小一半时，即可作为两个菌体计算。个菌体计算。6、如何计数呢？、如何计数呢？第13页，此课件共21页哦规格为规格为25格格16格的计数室，五点取样法格的计数室，五点取样法第14页，此课件共21页哦7、盖玻片下的培养液厚度为、盖玻片下的培养液厚度为0.1mm，请推算出将一个小，请推算出将一个小方格范围内的酵母菌数，换算成方格范围内的酵母菌数，换算成10ml培养液中酵母菌总培养液中酵母菌总数的公式。数的公式。每每1ml菌液中所含的酵母菌个数计算公式菌液中所含的酵母菌个数计算公式（以（以1mm1mm为例）：为例）：（1）
15、16格格25格的血球计数板计算公式格的血球计数板计算公式酵母细胞数酵母细胞数/ml=(100小格内酵母细胞个数小格内酵母细胞个数/100)400104稀释倍数稀释倍数即：一小方格内酵母菌个数即：一小方格内酵母菌个数4106稀释倍数稀释倍数（2）25格格x16格的血球计数板计算公式格的血球计数板计算公式酵母细胞数酵母细胞数/ml=(80小格内酵母细胞个数小格内酵母细胞个数/80)400104稀释倍数稀释倍数即：一小方格内酵母菌个数即：一小方格内酵母菌个数4106稀释倍数稀释倍数第15页，此课件共21页哦课本中大方格的长和宽各为课本中大方格的长和宽各为2mm，深度为，深度为0.1mm，其体，其体积
16、为积为0.4mm3。换算为。换算为1mL：1000/0.4=2.5103，即，即1mL是是2.5103个个 0.4mm3。则：每则：每1ml菌液中所含的酵母菌个数计算公式（菌液中所含的酵母菌个数计算公式（2mm 2mm）：（1）16格格25格的血球计数板计算公式格的血球计数板计算公式酵母细胞数酵母细胞数/ml=(100小格内酵母细胞个数小格内酵母细胞个数/100)4002.5103稀释倍数稀释倍数即：一小方格内酵母菌个数即：一小方格内酵母菌个数106稀释倍数稀释倍数（2）25格格x16格的血球计数板计算公式格的血球计数板计算公式:酵母细胞数酵母细胞数/ml=(80小格内酵母细胞个数小格内酵母细
17、胞个数/80)4002.5103稀释倍数稀释倍数即：一小方格内酵母菌个数即：一小方格内酵母菌个数106稀释倍数稀释倍数第16页，此课件共21页哦使酵母菌混合均匀。使酵母菌混合均匀。不需要，因不同时间取样已形成对照。不需要，因不同时间取样已形成对照。需要。尽量减少误差。对每个样品计数三需要。尽量减少误差。对每个样品计数三次次,取其平均值。取其平均值。二、从试管中吸出培养液进行计数之前，建议二、从试管中吸出培养液进行计数之前，建议你将试管轻轻振荡几次。这是为什么？你将试管轻轻振荡几次。这是为什么？三、本探究需要设置对照吗？如果需要三、本探究需要设置对照吗？如果需要,请讨请讨论对照组应怎样设计和操作
18、，如果不需要，请论对照组应怎样设计和操作，如果不需要，请说明理由。说明理由。四、需要做重复实验吗？四、需要做重复实验吗？第17页，此课件共21页哦五、怎样记录结果？记录表怎样设计？五、怎样记录结果？记录表怎样设计？第18页，此课件共21页哦.只计数相邻两边及其顶角的酵母只计数相邻两边及其顶角的酵母细胞数细胞数稀释培养液。稀释的目的是便于酵母菌悬液的计数，以每小方格内含稀释培养液。稀释的目的是便于酵母菌悬液的计数，以每小方格内含有有4-5个酵母细胞为宜，一般稀释个酵母细胞为宜，一般稀释10倍即可。倍即可。八、血球计数板的清洁八、血球计数板的清洁血球计数板使用后，用自来水冲洗，切勿用硬物洗刷，洗后
19、自行晾血球计数板使用后，用自来水冲洗，切勿用硬物洗刷，洗后自行晾干或用吹风机吹干，或用干或用吹风机吹干，或用95%的乙醇、无水乙醇、丙酮等有机溶剂脱水的乙醇、无水乙醇、丙酮等有机溶剂脱水使其干燥。通过镜检观察每小格内是否残留菌体或其他沉淀物，若不干使其干燥。通过镜检观察每小格内是否残留菌体或其他沉淀物，若不干净，则必须重复清洗直到干净为止。净，则必须重复清洗直到干净为止。六、如果一个小方格内酵母菌过多，难以数清，应当采取怎六、如果一个小方格内酵母菌过多，难以数清，应当采取怎样的措施？样的措施？七、对于压在小方格界线上的酵七、对于压在小方格界线上的酵母菌，应当怎样计数？母菌，应当怎样计数？第19
20、页，此课件共21页哦表达和交流表达和交流1、向全班汇报本小组、向全班汇报本小组7天的数据，算出天的数据，算出每一天全班各组数据的平均值，根据平均每一天全班各组数据的平均值，根据平均值重新画酵母菌种群数量的增长曲线。将值重新画酵母菌种群数量的增长曲线。将这个增长曲线与本小组的曲线进行比较，这个增长曲线与本小组的曲线进行比较，分析其相似程度，并做出合理的解释。分析其相似程度，并做出合理的解释。2、根据各组平均数据画出的增长曲线有、根据各组平均数据画出的增长曲线有没有什么总趋势？如果有，作出说明。如果没有什么总趋势？如果有，作出说明。如果设计了无菌水的对照，也画出增长曲线。设计了无菌水的对照，也画出增长曲线。第20页，此课件共21页哦感谢大家观看第21页，此课件共21页哦