食用菌、园林树木、花卉栽培技术gbwc.docx

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1、食用菌、园园林树木木、花卉卉栽培技技术目录第一部分分食用菌菌栽培技技术1第一章概概述1第一节食食用菌的的营养和和药用价价值1第二节食食用菌生生产的发发展前景景3第二章菌菌种生产产5第一节菌菌种生产产流程55第二节菌菌种生产产常用设设备仪器器6第三节培培养基质质配制技技术7第四节灭灭菌与消消毒100第五节菌菌种分离离和提纯纯14第六节菌菌种接种种与扩大大培养118第七节菌菌种保藏藏方法119第三章蘑蘑菇21第一节对对生活条条件的要要求211第二节栽栽培技术术22第四章草草菇277第一节草草菇对生生活条件件的要求求27第二节栽栽培技术术28第五章平平菇(凤凤尾菇)33第一节对对生活条条件的要要求3

2、33第二节平平菇栽培培料的配配制344第三节栽栽培技术术36第六章香香菇399第一节对对生活条条件的要要求399第二节栽栽培技术术40第七章食食用菌的的保鲜与与加工445第一节食食用菌的的保鲜贮贮藏455第二节食食用菌的的加工445第三节食食用菌产产品的分分级499第二部分分园林树树木花卉卉栽培技技术511第一章树树木的繁繁殖方法法51第二章植植树工程程施工554第三章常常见树木木的栽培培56第四章果果品生产产60第五章林林业生产产65第六章花花卉生产产68第一节花花卉概述述68第二节基基础知识识花卉卉分类771第三节花花卉与环环境因子子76第四节露露地花卉卉88第五节水水生花卉卉99第六节花

3、花卉植物物组织培培养1000第一部分分食用菌菌栽培技技术第一章概概述食用菌是是真菌中中能形成成大型子子实体或或菌核类类组织,并并能供食食用(兼兼有药用用)的种种类。在在真菌分分类学上上大多数数属于担担子菌亚亚门,少少数属于于子囊菌菌亚门。全世界在在25万种种真菌之之中,约约有1万余种种为大型型真菌,其其中有近近20000个种种基本上上可食用用的菌。但但目前约约有800个种驯驯化栽培培成功,其其中有220多种种具有商商品生产产价值。其其中只有有45种在在很多国国家中进进行工业业规模生生产。食食用菌生生产发展展迅速,栽栽培的国国家发展展到800多个,全全世界食食用菌年年生产鲜鲜菇量逐逐年递增增。我

4、国已成成为世界界食用菌菌生产的的主要国国家。11988819889年间间我国大大陆生产产鲜菇量量,平菇菇80万吨吨,木耳耳36万吨吨,香菇菇32万吨吨,双孢孢蘑菇117万吨吨,草菇菇11万吨吨,银耳耳10万吨吨,猴头头菇6万吨,金金针菇44万吨,滑滑菇3.2万吨吨。此外外还有金金耳、灰灰树花、竹竹荪等栽栽种培菌菌和松口口蘑、美美味牛肝肝菌、蒙蒙古口蘑蘑,羊肚肚菌等野野生菌。全全国食用用菌年产产量达到到2000万吨。我我国食用用菌产品品深加工工能力也也有较大大发展。近年来,随随着党在在农村的的一系列列方针政政策的落落实,食食用菌生生产正成成为一些些地方的的支柱产产业,并并成为广广大农村村脱贫致致

5、富的一一项重要要门路。因因此,大大力发展展食用菌菌生产,对对繁荣城城乡经济济,满足足市场需需要,增增加出口口商品,扩扩大对外外贸易,支支援国家家建设等等方面都都有着重重大的意意义。第一节食食用菌的的营养和和药用价价值一、蛋白白质世界各国国商业栽栽培的四四种食用用菌为双双孢蘑菇菇、香菇菇、平菇菇和草菇菇。它们们的蛋白白质含量量一般占占其子实实体鲜重重的1.753.663%,最最高为55.9%,然而而典型的的平均值值为3.54%,按按干重计计算蛋白白质含量量为19935%。食用用菌的蛋蛋白质含含量分别别比芦笋笋和卷心心菜高22倍;比比柑桔高高4倍,比比苹果高高12倍,虽虽低于动动物肉类类,但却却高

6、于其其它大多多数食物物甚至包包括牛奶奶。所以以食用菌菌有“素中之之荤”和“植物肉肉”的美称称。二、必需需氨基酸酸食用菌蛋蛋白质中中的氨基基酸组成成较全面面,如双双孢蘑菇菇含有119种氨氨基酸,香香菇、平平菇含有有18种氨氨基酸。人人体虽能能把某些些氨基酸酸转化为为另一些些氨基酸酸,但有有9种氨基基酸是人人体不能能自身合合成的,它它们被称称为必需需氨基酸酸,有赖赖氨酸、甲甲硫氨酸酸、色氨氨酸,苏苏氨酸、缬缬氨酸、亮亮氨酸、组组氨酸、异异亮氨酸酸和苯丙丙氨酸。通通常栽培培的食用用菌含有有人类所所必需的的9种氨基基酸,其其中赖氨氨酸含量量最丰富富,赖氨氨酸对促促进记忆忆,增进进智力有有独特的的作用,

7、对对婴幼儿儿和老年年人健康康十分重重要。三、脂肪肪不同食用用菌的脂脂肪含量量占其干干重的11.18.33%,平平均含量量为4%,基本本不饱和和脂肪酸酸至少占占总脂肪肪酸的772%。这这些非饱饱和脂肪肪酸主要要为亚油油酸,这这种脂肪肪酸在总总脂肪酸酸含量中中的比例例为:香香菇为776%,草草菇700%,双双孢蘑菇菇为699%。在在人们日日常饮食食中,非非饱和酸酸是必需需的营养养物质。动动物脂肪肪中所含含的大量量饱和脂脂肪酸,则则可能对对过多摄摄入的人人不利。四、维生生素食用菌中中含有多多种维生生素,如如含有硫硫氨素(维维生素BB1),核核黄素(维维生素BB3),泛泛酸(维维生素BB3),烟烟酸(

8、维维生素BB5),吡吡哆醇(维维生素BB6),叶叶酸(维维生素BB11),钴钴胺素(维维生素BB12),抗抗坏血酸酸(维生生素C),麦麦角甾醇醇(维生生素D原原),生生物素(维维生素HH)等。如如双孢蘑蘑菇每克克干子实实体中含含有硫胺胺素1.14毫毫克,核核黄素为为5.00毫克。食食用菌中中抗坏血血酸含量量以香菇菇为最高高达9.4毫克克(每II00克克干菇),凤凤尾菇77.4毫毫克双双孢蘑菇菇为1.8毫克克,草菇菇为1.4毫克克,麦角角甾醇(维维生素DD原)的的含量以以草菇为为最高(00.477%)其次是是香菇(00.277%)和和双孢蘑蘑菇(00.233%)银银耳含量量低(00.011%)。

9、经经紫外光光照射,食食用菌中中的麦角角甾醇可可转化为为维生素素D。五、碳水水化合物物与纤维维素戊糖、甲甲基戊糖糖、已糖糖,双糖糖氨基糖糖、糖醇醇、糖酸酸都是食食用菌多多糖的成成分,平平菇类的的多糖含含量为干干重的446.66811.8%,双孢孢蘑菇干干重的660%为为多糖。近近年来,发发现从食食用菌中中提取的的水溶液液性多糖糖成分可可抑制肿肿瘤的生生长。食用菌所所含的纤纤维素为为粗纤维维,包括括木质素素,半纤纤维素,多多缩戊糖糖和胶质质等,如如双孢蘑蘑菇为110.440%香香菇为111.55%112%。食食物纤维维素对人人体健康康很有益益,可以以减少胆胆盐的沉沉积和降降低血液液中胆固固醇的含含

10、量,从从而防止止胆结石石和高血血压等。六、核酸酸据测定,双双孢蘑菇菇的核酸酸含量在在每百克克干样品品中为22666克(其其中RNNA占有有2449克),凤凤尾菇为为4.006克(RRNA占占3885克),香香菇为33.733克(RRNA占占3.66克),草草菇为33.888克(RRNA占占3.559克)。双双孢蘑菇菇、香菇菇含有一一种特殊殊的双链链RNAA,称为为蘑菇核核糖核酸酸,能刺刺激机体体产生干干扰素,抑抑制病毒毒增殖,而而且有一一定抗肿肿瘤作用用。所以以经常食食用一些些香菇蘑蘑菇等食食用菌,可可以预防防流行性性感冒、麻麻疹,肝肝炎等。食用菌除除对身体体有营养养滋补作作用外,还还有很高高

11、的药用用价值,能能够调节节人体的的新陈代代谢,降降低血压压,减少少胆固醇醇,增进进人体的的健康。如如木耳有有润肺、通通便、治治痔、黑黑发和消消化纤维维的作用用;银耳耳能提神神生津,滋滋补强身身、润肺肺、滋阴阴养胃、益益气和血血、补脑脑强心等等;猴头头菌可治治疗消化化不良,消消化道溃溃疡和慢慢性胃炎炎等;马马勃鲜嫩嫩时可食食,老熟熟后可止止血,治治疗胃出出血;密密环菌能能治疗风风湿、腰腰膝痛、四四肢痉挛挛、小儿儿惊厥等等;发光光假蜜环环菌能治治疗急性性胆囊炎炎;茯苓苓有利尿尿、养身身等功效效。食用菌用用为一类类药源,已已引起各各国医药药工作者者的重视视,新的的“食用用菌药物物”正在在不断地地研制

12、出出来。已已经开发发的如云云芝肝泰泰、健肝肝片、云云芝多糖糖、猪苓苓多糖、香香菇多糖糖、猴菇菇菌片、灵灵芝糖浆浆、密环环菌糖浆浆、猴头头菌口服服液等。第二节 食用用菌生产产的发展展前景一、食用用菌生产产是发展展生态农农业的中中心环节节食用菌不不仅在自自然界能能促进生生物学降降解和物物质循环环,而且且在农业业生态系系统中,能能加速物物质再生生,增加加产品输输出,提提供人类类所需要要的营养养物质和和能量,使使生物界界形成良良性循环环。由于食用用菌分解解纤维素素,木质质素的能能力很强强能更更好地利利用木屑屑、秸杆杆、棉壳壳等农副副产品。收收获量营营养丰富富的食用用菌外,种种植食用用菌后的的培养料料(

13、菌渣渣),还还可以多多层次利利用,或或用为猪猪牛等家家畜的饲饲料添加加剂,或或作为肥肥料肥田田,或用用为培养养甲烷细细菌产生生沼气的的原料等等等。所所以在农农业生态态系统中中,有了了食用菌菌生产这这一环节节,就可可以建立立一个生生物能量量和物质质的良性性循环网网(图111)。肥料农业生产农副产品牲畜饲料畜牧水产业食用菌排泄物种菇后的培养料沼气池能源图111 食食用菌在在农业生生态系统统中的作作用这样,食食用菌在在农业生生态系统统中,起起了桥梁梁和纽带带的作用用,把农农、林、牧牧、副、渔渔各行各各业紧密密联系起起来,互互相促进进,形成成了一个个无废料料生产,变变废为宝宝,多层层次利用用物质和和能

14、量的的生产体体系,从从而大大大地提高高了整个个生态系系统的生生产能力力。二、食用用菌生产产的发展展前景食用菌是是人类开开发蛋白白质资源源的一项项重要产产业。随随着现代代生物技技术的发发展和应应用,食食用菌在在人类生生活和国国民经济济中的地地位和作作用日益益显著,从从而引起起世界广广泛的关关注和重重视,许许多国家家都采取取措施积积极加以以发展。据据有关资资料报导导,目前前全世界界食用菌菌产量正正以每年年10%的幅度度增长,推推动食用用菌日益益成为重重要的国国际性产产业。特特别是随随着人类类食物结结构的改改变和生生活水平平的提高高,对低低脂肪高高蛋白的的食用菌菌,更是是越来越越广泛地地受到人人们的

15、喜喜爱,需需求量与与日俱增增,欧美美不少国国家甚至至把人平平均食用用菌的消消费量,作作为衡量量生活水水平高低低的一个个重要标标准。所所以发展展食用菌菌生产是是富有生生命力的的,前途途极为广广阔。为了进一一步发展展我国食食用菌生生产,开开发新种种,增加加用途,扩扩大国内内外市场场,提高高产值,要要求发展展新技术术来扩大大生产,提提高质量量。新技技术的发发展,不不仅需要要于优质质野生菌菌的驯化化栽培,开开发资源源潜力,提提高选种种,育种种和栽培培效果,保保证高产产优质,也也需要在在产后的的加工精精制,开开发食用用菌的食食品、饮饮料、调调味品、化化妆品以以及药用用菌有效效成分的的提取和和精制,提提高

16、经济济效益。复习思考考题:1什么么叫食用用菌?发展食食用菌生生产有何何重大意意义?2为什什么食用用菌有“素素中之荤荤”和“植植物肉”的的美称?3食用用菌含有有哪些防防癌抗癌癌的成分分?4用图图表示食食用菌在在农业生生态系统统中的作作用?第二章 菌种种生产在自然界界中,食食用菌繁繁衍后代代依靠孢孢子,孢孢子借助助风力传传播到适适宜的环环境中,萌萌发成菌菌丝体。菌菌丝体生生长繁衍衍达到生生理成熟熟后,在在一定的的环境下下,就可可形成子子实体。菌种,相相当于农农作物的的种子,是是食用菌菌生产最最基本最最重要的的生产资资料,是是指供繁繁殖而分分级制作作的菌丝丝体培养养物。第一节 菌种种生产流流程一、菌

17、种种生产类类型根据菌种种来源和和生产目目的,通通常将菌菌种分为为母种、原原种、栽栽培种三三级。(一)母母种实验室内内,经过过孢子分分离或组组织分离离提纯出出来的菌菌株,它它是生产产其他菌菌种类型型的原始始种。母母种俗称称一级种种,是生生产上作作为扩大大培养的的母株,一一般用玻玻璃试管管作为容容器,按按不同配配方制成成斜面培培养基上上进行接接种,经经过培养养筛选提提纯,转转管扩大大培养的的过程。(二)原原种俗称二级级种。原原种来自自母种的的扩大培培养,待待母种培培育好后后,接入入瓶装的的原种培培养基上上繁育,称称为原种种。(三)栽栽培种俗称三级级种,是是由原种种扩大而而来,待待原种培培育好后后,

18、接入入瓶装或或塑料袋袋的栽培培种培养养基上繁繁育,称称为栽培培种。二、菌种种生产流流程母种、培养基制备分离高压灭菌接种培养筛选原始母种确定母种中试后转管扩接保贮原种、培养基制备常压或高压灭菌接种培养原种栽培种、培养基制备常压或高压灭菌接种培养栽培种第二节 菌种种生产常常用设备备仪器一、制种种设备(一)接接种室与与接种箱箱1接种种室应设在厂厂房中心心的背风风干燥处处,体积积以57m33为宜。接接种室外外面应设设一小间间缓冲室室,门不不宜对开开,要求求装推拉拉门,必必要时安安装一个个双层小小型玻璃璃橱窗,便便于内外外物品传传递,减减少进出出接种室室的次数数。接种种室与缓缓冲室安安装300瓦紫外外灯

19、及日日光灯各各一盏。有有条件的的可在接接种室内内放一台台超净工工作台,这这样接种种效果更更好,2接种种箱主要用木木材和玻玻璃制成成,有单单人操作作与双人人操作箱箱两种。一一般以双双人相对对操作的的接种箱箱为好。箱箱长1445cmm,宽885cmm,高1160ccm。箱箱内顶部部安装一一支200瓦日光光灯和一一支300瓦紫外外灯。如如图21。图211接种箱箱3超净净工作台台是一种局局部层流流(平行行流)装装置。它它能在局局部造成成高洁度度的工作作环境。使使用超净净工作台台进行接接种分离离有效可可靠,操操作方便便,使人人感到舒舒适。(二)培培养室培养室是是培养菌菌种的场场所,房房间要严严实,每每间

20、不宜宜过大,以以培养55000060000瓶瓶为宜,室室内应设设能开关关的高低低窗,并并装有纱纱窗,以以便调节节空气,防防止害虫虫进入。室室内装多多层培养养架,以以充分利利用空间间。装有有控温设设备,以以满足菌菌种生长长的要求求。(三)灭灭菌设备备1高压压蒸汽灭灭菌锅目前工厂厂生产的的灭菌锅锅有手提提式、直直立式、卧卧式三种种。2常压压蒸汽灭灭菌锅(土土蒸锅)用土蒸锅锅灭菌时时,要注注意防止止漏气及及锅内水水分烧干干,要定定时注入入开水。(四)电电热烘干干箱用于璃璃璃器具的的干热灭灭菌和测测定基质质的含水水量,需需制作盛盛装培养养皿的铁铁质带盖盖的盒子子盒的的大小以以能容88100套培养养皿为

21、宜宜。(五)电电热恒温温箱主要用于于培养母母种。(六)冰冰箱用于低温温保存菌菌种。二、仪器器(一)显显微镜用于观察察、鉴别别菌丝和和孢子的的形态和和特征。(二)天天平一般用架架盘天平平(感量量0.110.5克)。要要求精确确称量时时则用台台式扭力力天平或或万分之之一的电电动分析析天平。(三)温温湿度计计观察培养养室与栽栽培室温温度和湿湿度用。1最高高最低温温度计可以表示示出一天天中最高高与最低低的温度度。2干湿湿球温度度计用于观察察培养室室的温度度和空气气相对湿湿度。3自动动温湿度度计可以在纸纸上记录录24小小时或一一周内温温湿度的的变化。(四)电电炉用于加热热溶解琼琼脂等培培养基原原料,可可

22、设置220000瓦电炉炉一个。第三节 培养养基质配配制技术术一、母种种培养基基的配制制(一)培培养基的的配方1广泛泛采用基基础配方方为马铃铃薯、葡葡萄糖、琼琼脂培养养基(PPDA)或或将葡萄萄糖改为为蔗糖即即PSSA培养基基。其成成分如下下:马铃薯2200克克,葡萄萄糖或蔗蔗糖200克,琼琼脂188255克,水水10000毫升升。根据据菌类腐腐解类型型用1%盐酸、乳乳酸或氢氢氧化钠钠调节PPH值。2培养养香菇、黑黑木耳、草草菇、平平菇,猴猴头、凤凤尾菇、蘑蘑菇、银银耳等食食用菌的的较适宜宜的培养养基。(1)马马铃薯2200克克,蔗糖糖20克克,玉米米粉300克,黄黄豆粉110克,酵酵母膏22克

23、,磷磷酸二氢氢钾1.5克,硫硫酸镁00.5克克,琼脂脂20克克,水110000毫克。PPH值自自然。(2)马马铃薯2200克克,蔗糖糖20克克,玉米米粉500克,石石膏100克,磷磷酸二氢氢钾1.5克,硫硫酸镁00.5克克,琼脂脂20克克,水110000毫升。PPH值55.5。制作时应应注意,加加入黄豆豆粉的应应与马铃铃薯同煮煮沸300分钟,待待煮至225分钟钟时才能能加入玉玉米粉,以以免起糊糊,影响响过滤,加加入石膏膏的应在在过滤后后分装时时加入,不不要参加加煮沸过过滤,以以免影响响培养基基的凝固固。(3)马马铃薯2200克克,蔗糖糖20克克,琼脂脂20克克,麦芽芽糖100克,栓栓皮栎木木屑

24、200克,水水10000毫升升。PHH值6。(4)马马铃薯2200克克,黄豆豆粉200克,蔗蔗糖200克,麦麦芽糖115克,味味精0.5克,维维生素BB1 110毫克克,琼脂脂20克克,水110000毫升。本配方适适合黑木木耳、平平菇、草草菇生长长。(5)马马铃薯2200克克,蔗糖糖20克克,黄豆豆粉200克,石石膏100克,琼琼脂200克,磷磷酸二氢氢钾1克克,硫酸酸镁0.5克,琼琼脂200克,水水10000毫升升。PHH值自然然。本配方适适合香菇菇、蘑菇菇生长。(6)麸麸皮500克,米米糠500克,甘甘薯2000克,黄黄豆粉220克,蔗蔗糖200克,琼琼脂200克,水水10000毫升升。P

25、HH值自然然。本配方适适合香菇菇、蘑菇菇生长。(7)麸麸皮1000克,麦麦芽糖110克,蔗蔗糖100克,蛋蛋白质22克,磷磷酸二氢氢钾1克克,硫酸酸镁0.5克,过过磷酸钙钙1克,琼琼脂300克,水水10000毫升升,PHH值自然然。本配方适适合银耳耳芽孢萌萌发菌丝丝体。(8)麸麸皮500克,米米糠500克,蔗蔗糖200克,硫硫酸铵11克,琼琼脂200克,水水10000毫升升。本配方适适合黑木木耳、猴猴头,灵灵芝、金金针菇、蜜蜜环菌及及安络小小皮伞菌菌丝生长长。(二)此此外,还还有众多多培养基基配方,制制作过程程基本相相同,大大致为:原料称取取(溶解解马铃薯薯切片,加加10000毫升升水煮)过滤

26、滤液添加琼琼脂溶解加糖糖及其他他分分装试管管塞塞棉塞高压压灭菌凝固固成斜面面1溶液液的配制制按配方要要求称出出原料以以常用配配方为例例。将马马铃薯切切片,厚厚度0.5厘米米,加清清水10000毫毫升,加加热煮沸沸,直到到马铃薯薯片能用用指头戳戳破,用用二层纱纱布过滤滤,取其其滤液继继续加热热添加琼琼脂边加加边搅拌拌,再过过滤添加加葡萄糖糖等,然然后调试试溶液的的PH值值。2装管管母种培养养基煮成成后,趁趁热倒入入分装的的漏斗中中,然后后分装试试管。装装管时要要使培养养基直接接流入管管内。不不得沾污污上段试试管壁,以以免浸湿湿棉塞,引引起污染染。试管管选用口口径1.822.0厘厘米长约约1820

27、厘厘米,培培养基在在试管中中的分装装为管长长度的四四分之一一为宜。3塞棉棉塞试管装好好培养基基后要立立即塞好好棉塞,用用普通干干净棉花花制棉塞塞。对棉棉塞的要要求:棉塞要要求两头头光滑。没没有毛茬茬;棉棉塞要紧紧贴管壁壁,松紧紧适度;长短短适度,棉棉塞长度度以34厘米米为宜,应应将其三三分之二二旋入管管口内,然然后捆成成把,外外包一层层报纸再再放入灭灭菌锅进进行灭菌菌。4高压压蒸气灭灭菌一般采用用手提式式高压灭灭菌锅,蒸蒸汽压11.1公公斤厘厘米2,1211温度度经330分钟钟即可达达到灭菌菌目的。5摆斜斜面灭菌后试试管内培培养基冷冷却500一600左右右时将将试管倾倾斜为试试管长度度的三分分

28、之二,待待凝固后后,方可可直立保保存。二、原种种、生产产种培养养基的制制法(一)培培养基的的配方:1木屑屑 麸麸皮(或或米糠)培培养基锯木屑(阔阔叶树)778%,麸麸皮(或或米糠)220%,糖糖(蔗糖糖)1%,石膏膏粉1%,含水水量655%适用于香香菇、黑黑木耳、猴猴头、金金针菇、银银耳。2棉籽籽壳培养养基(1)棉棉壳877%,过过磷酸钙钙1%,石石膏1%,石灰灰1%,水水适量。适用于平平菇、凤凤尾菇。在在其中再再加入22%的石石灰则适适用于草草菇。(2)棉棉壳877%,糠糠10%,碳酸酸钙1%,石灰灰2%,水水适量。适用于草草菇(3)棉棉壳888%,糠糠10%,过磷磷酸钙11%,磷磷酸二氢氢

29、钾0.2%,尿尿素0.4%,石石膏1%,硫酸酸镁0.05%,水适适量。适用金针针菇。3稻草草米糠培培养基稻草(切切碎长111.5寸)778%,细细米糠(或或麸皮)220%,石石膏1%,石灰灰1%,水水适量。适用于平平菇、凤凤尾菇,在在其中再再加入22%石灰灰适用于于草菇。4粪草草培养基基(适用用于制作作蘑菇菌菌种)(1)粪粪草(粪粪草比例例644堆积发发酵155200天)889%,米米糠100%,石石膏1%,水适适量。(2)稻稻草(切切成11.55寸长,用用新鲜的的猪牛尿尿浸一夜夜,沥干干水,含含水量665%),石石膏1%,过磷磷酸钙11%。5废棉棉、稻草草培养基基(适用用于制作作蘑菇菌菌种)

30、(1)稻稻草(111.5寸长长)300%,棉棉壳或棉棉纺屑668%,复复合肥与与石膏各各1%,发发酵3天天,含水水量600%(2)棉棉纺屑888%,米米糠100%,石石膏1%,复合合肥1%,发酵酵3天,含含水量660%6谷粒粒培养基基麦粒877%,石石膏粉11%,碳碳酸钙22%,木木屑100%,含含水量660%(用用于木腐腐生菌)麦粒877%,石石膏粉11%,碳碳酸钙33%,发发酵的牛牛粪粉110%,含含水量660%(用用于草腐腐生菌)以小麦、大大麦、高高粱、小小米等谷谷物作原原料适用用于蘑菇菇,凤尾尾菇、毛毛木耳菌菌种(一一瓶麦粒粒种需麦麦粒2000克,蔗蔗糖5克克碳酸酸钙6克克,水5500

31、毫毫升)。先先将小麦麦粒用00.5%石灰水水浸泡112116小时时,捞出出投入沸沸水煮110115分钟钟,待麦麦粒从半半黄色转转为浅褐褐色,注注意不能能让麦粒粒煮开花花,否则则淀粉渗渗出,极极易感染染细菌,晾晾干表面面水趁热热拌碳酸酸钙,装装瓶时将将瓶口套套上漏斗斗,装毕毕后擦干干净瓶口口,塞棉棉塞。无无菌高压压灭菌比比普通培培养基延延长300分钟,常常压灭菌菌延长11小时。灭灭菌结束束后及时时取出,以以免在锅锅内被余余热烘干干。(二)制制作过程程1拌料料先根据培培养料成成分配方方和要做做的原种种和生产产种的数数量,计计算出各各种原料料的数量量,然后后称量,混混合,加加水拌料料(一般般加水量量

32、是原料料干重的的1.221.3倍)。拌拌时要求求均匀一一致,边边拌料边边加水,边边试含水水量,以以便控制制水分不不致过多多或过少少。2测含含水量料拌好后后,要测测一下含含水量,一一般要求求在600655%。测测法是将将培养料料握在手手中捏紧紧,手指指缝中有有水印但但无水滴滴流下即即可。3分装装,封瓶瓶口培养料配配制好后后,进行行分装,一一般装入入50007550毫升升的罐头头瓶或菌菌种瓶,装装瓶时随随装随压压紧,松松紧要适适当,过过紧通气气不良发发菌慢;过松,菌菌丝生长长稀疏无无力,装装量一般般占瓶容容量的445或或至瓶肩肩,最后后将料面面压平,如如是木屑屑培养基基,还要要用一根根锥形木木棒在

33、瓶瓶中打一一直达瓶瓶底的洞洞(洞直直径上部部1.55厘米,下下部1厘厘米)以以便菌丝丝生长繁繁殖,然然后洗净净瓶口瓶瓶壁,塞塞上棉塞塞,再包包上牛皮皮纸,也也可以不不用棉塞塞,用一一层聚丙丙烯薄膜膜(或耐耐压聚乙乙烯薄膜膜)上加加一层牛牛皮纸或或报纸,包包扎起来来封住瓶瓶口。4灭菌菌(1)高高压蒸汽汽灭菌,一一般采用用大型卧卧式或立立式高压压锅,需需1.441.5公斤斤厘米米2的蒸汽汽压1226,经经1.552小小时才可可达到彻彻底灭菌菌的目的的。(2)常常压蒸汽汽灭菌:利用一一般蒸笼笼或土消消毒锅,在在常压以以1000的温温度下持持续68小时时。第四节 灭菌菌与消毒毒空气、水水滴、沙沙土、尘

34、尘埃,各各种生物物体及物物表面或或孔隙内内,均存存在大量量的细菌菌。真菌菌孢子等等,为了了使培养养基质能能获得纯纯菌丝体体,就必必须采用用物理或或化学方方法等手手段进行行灭菌或或消毒。但但这两者者是不同同的概念念,往往往被人们们所混淆淆。消毒:采采用物理理、化学学的方法法除去物物品表面面上的病病原菌,是是一种不不彻底的的灭菌方方法。灭菌:采采用物理理、化学学的方法法,使附附着在物物体孔隙隙内的微微生物致致死。是是一种彻彻底的灭灭菌方法法。灭菌方法法:常用用灭菌方方式有热热力灭菌菌、过滤滤灭菌、化化学灭菌菌、辐射射灭菌等等四种。一、热力力灭菌(一)火火焰灭菌菌法将那些能能耐受高高温而不不破坏的的

35、器物,金金属用具具直接放放在火焰焰上烧灼灼,使随随着在物物体表面面的细胞胞和孢子子等烧焦焦,称为为火焰灭灭菌。火火焰灭菌菌适用于于接种铲铲、针、耙耙等移植植工具的的灭菌,野野外采集集工具如如小刀或或解剖刀刀刃部灭灭菌。(二)干干热灭菌菌法把能抗干干热的器器材物,如如待灭菌菌的吸管管、培养养皿、试试管、空空三角瓶瓶等玻璃璃器具及及不能与与蒸气充充分接触触的液体体石腊等等放入烘烘箱内在在1600以上上烘烤00.51小时时即可达达到灭菌菌目的,灭灭菌器物物入烘之之前必须须预先洗洗净,烘烘干,用用干净纸纸张或皮皮包好,玻玻璃培养养皿最好好装进密密封性能能较好的的金属罐罐内,并并注明灭灭菌日期期。(三)

36、湿湿热灭菌菌利用蒸蒸汽或沸沸水灭菌菌,称为为湿热灭灭菌。由于湿热热灭菌的的穿透力力比干热热灭菌大大,杀伤伤能力强强,蛋白白质,原原生质胶胶体在湿湿热条件件下容易易变性凝凝固,酶酶系统容容易被破破坏,蒸蒸汽进入入细胞内内凝结成成水,能能放出潜潜在热量量而提高高温度,更更加增强强杀菌力力,常用用的湿热热灭菌方方法有如如下几种种:1高压压蒸汽灭灭菌法利用高温温高压蒸蒸汽进行行灭菌的的方法。高高压蒸汽汽灭菌可可以杀死死一切微微生物。包包括细菌菌的芽孢孢,真菌菌的孢子子或休眠眠体等耐耐高温的的个体,灭灭菌的温温度随蒸蒸汽压力力增加而而升高,增增加蒸汽汽压力,灭灭菌的时时间可以以大大缩缩短,因因此它是是一

37、种最最有效的的,使用用最广泛泛的灭菌菌方法。蒸蒸汽压力力与蒸汽汽温度的的关系。见见表21:表211 蒸蒸汽压力力与温度度关系表表蒸汽压力力蒸汽温度度大气压公斤/厘厘米2磅/吋22;1.0001.3550.2000.2550.0003.7551001071.5000.5007.5001121.7550.75511.225115.52.0001.05515.0001212.2551.50022.0001283.0002.00030.000134.5高压灭菌菌所采用用的蒸汽汽压力与与灭菌时时间,应应报据具具体灭菌菌物质而而定,母母种,液液体培养养基灭菌菌时,一一般采用用1.11公斤厘米22压力,温温

38、度1221灭灭菌300分钟。原原种栽培培种等固固体培养养基灭菌菌时,通通常用作作1.55公斤/厘米22压力温度1128,灭菌菌1.552.0小时时,如制制备蘑菇菇栽培种种河泥粪粪料培养养基,灭灭菌时间间或灭菌菌压力要要有所增增加。通通常压力力为2公公斤/厘厘米2,灭菌菌时间为为222.5小小时。使用高压压蒸汽灭灭菌时,注注意以下下几点:(1)灭灭菌锅内内的冷空空气必须须排尽,冷冷空气的的热膨胀胀系数大大,若灭灭菌锅内内留有冷冷空气,当当灭菌锅锅密闭加加热时,冷冷空气受受热很快快膨胀,使使压力上上升,造造成灭菌菌锅内压压力与温温度不一一致,产产生假性性蒸汽压压,锅内内温度低低于蒸汽汽压表示示的相

39、应应的温度度,致使使灭菌不不彻底。排除冷空空气的方方法有两两种:缓缓慢排气气和集中中排气。缓缓慢排气气法,即即开始加加热灭菌菌时便打打开排气气阀门,随随灭菌锅锅内温度度逐渐上上升,锅锅内的冷冷空气逐逐渐排出出,当锅锅内温度度上升到到1000,大大量蒸汽汽从排气气阀中排排出时(可可看到蓝蓝色光带带)即可可关闭排排气阀,进进行升压压灭菌。集集中排气气法,即即在开始始加热灭灭菌时,先先关闭排排气阀,当当压力升升到0.5kgg/cmm2左右进进行,打打开排气气阀,集集中排出出空气,让让压力降降到零,并并有大量量蒸汽排排出时,再再关闭排排气阀进进行升压压灭菌。固固体培养养基灭菌菌时,可可采用集集中排气气

40、法。流流体培养养基灭菌菌时一般般不宜采采用,以以免液体体冲出瓶瓶口。(2)灭灭菌锅内内的培养养基必须须排列疏疏松,使使蒸汽畅畅通。灭灭菌锅内内蒸汽是是否畅通通,关系系到灭菌菌温度均均一。灭灭菌材料料放得过过多,过过密,会会妨碍蒸蒸汽的流流通,影影响温度度分布的的均一,造造成局部部地区温温度较低低,甚至至形成温温度“死死角”,达达不到彻彻底灭菌菌,常常常导致以以后杂菌菌污染。(3)灭灭菌完毕毕,应缓缓慢减压压。高压压蒸汽灭灭菌结束束后的排排气降压压不能太太快,若若排气太太快,瓶瓶内外的的压力差差就会增增大,引引起瓶塞塞冲出瓶瓶口;液液体培养养基灭菌菌时,液液体会突突然沸腾腾,弄脏脏瓶塞;塑料袋袋

41、培养料料灭菌时时,应让让其自然然冷却,当当压力降降到0.5kggcmm2左右时时,再打打开排气气阀以免免在减压压过程中中,袋内内外产生生压力差差,把塑塑料袋击击穿,导导致以后后杂菌污污染。(4)注注意棉塞塞防湿。用用棉塞塞塞的瓶口口或试管管,在高高压蒸汽汽灭菌锅锅中灭菌菌时,因因锅中热热蒸汽在在锅壁四四周和锅锅盖内侧侧容易产产生凝结结水,凝凝结水沿沿着锅壁壁和锅盖盖下流,弄弄湿棉塞塞。潮湿湿的棉塞塞在培养养过程中中,容易易生长链链孢霉或或其他霉霉菌,污污染培养养物,为为了防止止棉塞潮潮湿,灭灭菌时,瓶瓶子的棉棉塞不能能接触灭灭菌锅壁壁,瓶子子上面盖盖防水油油纸,灭灭菌结束束时,应应先排放放锅内

42、热热水,然然后再慢慢慢排放放蒸汽降降压,看看棉塞潮潮湿。可可在锅内内烘烤一一定时间间再取出出来。2常压压灭菌法法采用自然然压力的的蒸汽灭灭菌的方方法。阿阿诺氏(AArnoo1d)流流通蒸汽汽灭菌器器是微生生物技术术中常用用的设备备。我国国食用菌菌菌种生生产过程程中,有有的利用用蒸笼灭灭菌,有有的利用用钢筋水水泥砌成成的大型型的流通通蒸汽灭灭菌灶。一一次可灭灭菌122千瓶原原种或栽栽培种培培养基。流流动蒸汽汽的温度度一般为为1000左右右,灭菌菌时间一一般为668小小时,这这种专用用流通蒸蒸汽灭菌菌灶的最最大优点点是:容容量大,结结构简单单,成本本低,可可自行建建造,缺缺点是:灭菌时时间长,能能

43、源消耗耗量大,稍稍不注意意就有灭灭菌不彻彻底的现现象发生生。3间歇歇灭菌法法指间歇一一定时间间,连续续消毒几几次达到到灭菌的的方法,此此方法适适用于不不耐高温温而其他他方法灭灭菌效果果都不好好时采用用。二、过滤滤灭菌细菌、真真菌及其其孢子,个个体虽小小,直径径也仅在在几毫微微米,如如用密孔孔过滤器器将溶液液过滤也也可将之之排除,常常用到一一些有机机营养成成分如维维生素、氨氨基酸、某某些抗菌菌素等,由由于不耐耐高温,前前述灭菌菌方法不不适宜,应应采用细细菌过滤滤器灭菌菌。此法法灭菌对对细菌过过滤器要要求很高高,每用用一次都都要用稀稀盐酸浸浸泡几天天再用浓浓盐酸洗洗滤,最最后用无无菌水清清洗至无无

44、酸迹,细细菌过滤滤器不能能将病毒毒完全除除去成为为无菌状状态,现现在常用用滤膜过过滤器代代替细菌菌过滤器器,可滤滤掉病毒毒。三、辐射射灭菌辐射,是是通过波波动或粒粒子在空空间高速速运行而而传递能能量的一一种物理理现象。利利用辐射射产生的的能量进进行灭菌菌的方法法,称之之辐射灭灭菌。辐辐射可分分电离辐辐射和非非电离辐辐射两种种,射射线,射线,射线线,射射线,中中子和质质子等属属电离辐辐射,紫紫外线、日日光为非非电离辐辐射。其其中紫外外线杀菌菌广泛应应用于工工业、农农业和医医疗卫生生等方面面。紫外外线波长长范围在在390001136AA之间,其其中波长长20000一330000A的紫紫外线具具有杀

45、菌菌作用,尤尤以2665026660A波波长杀菌菌力最强强,无菌菌室接种种室内安安装的人人工紫外外红灯管管,一般般照射220330分钟钟,即可可杀死空空气中的的微生物物。但紫紫外线穿穿透很弱弱,只适适用于空空气和物物体表面面的消毒毒。我国国蘑菇生生产中使使用的覆覆土,在在日光下下曝硒,就就是利用用日光及及其中的的紫外线线杀菌的的一种方方去。四、化学学灭菌与与消毒利用化学学药剂进进行灭菌菌或抑菌菌的方法法。一般般用于杀杀死微生生物的药药剂称消消毒剂;用于抑抑制微生生物生长长的药剂剂称抑制制剂或防防腐剂。实实际上两两者并无无严格的的区别,因因为消毒毒剂在低低浓度时时呈现抑抑菌作用用,防腐腐剂在高高

46、浓度时时呈现杀杀菌作用用,所以以统称为为消毒防防腐剂。杀菌的化化学药剂剂种类很很多,常常见的有有以下几几种:(一)重重金属盐盐类所有重金金属盐类类对微生生物有毒毒害作用用,如汞汞、银、铅铅、锌、铜铜等。微微生物浸浸在0.100.5%硝酸盐盐(AggNO33),升升汞(HHgCll2)等溶溶液中,几几分钟就就会死亡亡。蘑菇菇采种及及段木分分离菌种种时,常常用0.1%升升汞溶液液进行表表面消毒毒。升汞(HHgCll2)白色色结晶粉粉末,能能溶于水水,在盐盐酸或氯氯化钠存存在下,其其溶解度度提高,杀杀菌力提提高,常常配成00.1%升汞水水溶液,其其配制方方法:(11)升汞汞1克,食食盐0.5克,水水

47、10000毫升升;(22)升汞汞1克,浓浓盐酸22.5毫毫升加水水10000毫升升。(二)氧氧化剂常用的氧氧化剂有有0.11%高锰锰酸钾(KKMn004)、过过氧化氢氢(H2202)、臭臭氧(003)、过过氧乙酸酸(CHH3COOOOH)、漂漂白粉(CCaOCCl2)等。高高锰酸钾钾、过氧氧化氢常常用浓度度0.11%,过过氧乙酸酸为0.200.5%,漂白白粉0.511.2%,以上上药剂随随用随配配,稀释释液只能能存放33天。它它们的杀杀菌机制制是通过过强烈的的氧化作作用,破破坏微生生物的原原生质或或酶蛋白白质的结结构。(三)还还原剂甲醛(HHCH00)是常常用的还还原清毒毒剂商品品的原液液浓度为为40%,5%的福尔尔马林溶溶液用于于防腐和和

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