《药学专业毕业论文_采用高效液相色谱法测定当归苦参丸hgtk.docx》由会员分享，可在线阅读，更多相关《药学专业毕业论文_采用高效液相色谱法测定当归苦参丸hgtk.docx（19页珍藏版）》请在taowenge.com淘文阁网|工程机械CAD图纸|机械工程制图|CAD装配图下载|SolidWorks_CaTia_CAD_UG_PROE_设计图分享下载上搜索。
1、中南大学学药学专专业自考本科科生毕业业论文考 籍 号学生姓名名 指导教师师年 级 20005级 论文题目目 采用用高效液液相色谱谱法测定定当归苦参参丸中苦苦参碱及及氧化苦苦参碱的的含量完成时间间 20006年年12月月 1、 论文正文文：包括题目目、学生生姓名、指指导教师师姓名、中中文摘要要（或英英文摘要要）及关关键词、论论文正文文、参考考文献。2、湖南南省高等等教育自自学考试试毕业论论文（设设计）情情况登记记表湖南省高高等教育育自学考考试毕业论文文（设计计）情况况登记表表考 籍 号姓 名专 业 药 学 题 目 采用高高效液相相色谱法法测定当归苦参参丸中苦苦参碱及及氧化苦苦参碱的的含量通讯地址
2、址 湖南南怀化红红星中路路49号号邮政编码码 41880000 湖 南南 省省 教教 育育 考考 试试 院院 制制填 表表 说说 明明一、内内容提要要栏，由由考生本本人填写写。二、毕业业论文（设设计）成成绩评定定，根据据专业特特点，分分项评定定，每个个项目的的分数标标准由考考生所在在系确定定。总计计后按五五级记分分制（990分以以上为优优秀，88089分分为良好好，70079分分为中等等，60069分分为及格格，600分以下下为不及及格）记记入成绩绩评定栏栏内。三、一律律用蓝色色或和黑黑色墨水水的钢笔笔填写，字字迹要清清楚，内内容要简简明。采用高效效液相色色谱法测测定当归归苦参丸丸中苦参参碱及
3、氧氧化苦参参碱的含含量一、实验验材料1. 样样品来源源：当归苦参参丸由湖湖南汉森森制药有有限公司司提供，批批号：0051005，00512206，005122072. 仪仪器与试试剂：仪器：MMetttlerr AEE-2440电子子天平 超超声波清清洗仪 CG-3000(3000W，225KHHz)重蒸馏水水(自制制)；乙乙腈（色色谱纯），浙浙江临海海市浙东东特种化化学试剂剂厂其余试剂剂均为分分析纯苦参碱对对照品 中国药药品生物物制品检检定所提提供，供供含量测测定用，批号：110805-200306氧化苦参参碱对照照品 中中国药品品生物制制品检定定所提供供，批号号：11107880-2200
4、4405，供含量测测定用二、试验验方法 【含量测测定】采采用高效效液相色色谱法测测定苦参参中的苦苦参碱和和氧化苦参参碱的总总量。建建立了本本品的含含量测定定方法，并并进行了了方法学学考察，经试验结果表明，该方法检测灵敏度、准确度高，操作简便，缺苦参的阴性溶液无干扰，且样品分离效果好。采用HPLC法测定三批苦参药材的含量。参考中国药典2005年版苦参“本品含苦参碱和氧化苦参碱不得少于1.2%”，暂规定本品每丸含苦参以苦参碱和氧化苦参碱的总量计，不得少于20.0mg。方法学考察结果如下：1、检测测波长的的选择精密称取取苦参碱碱4.559mgg和氧化化苦参碱碱5.112mgg，分别别置500ml量瓶
5、瓶中，加加流动相相稀释至至刻度，摇摇匀，即即得对照照品溶液液，照紫紫外分光光光度法法（中国国药典220055年版一一部附录录A）于于20003990nmm波长范范围内扫扫描。结果表明明：苦参参碱和氧氧化苦参参碱溶液液均在2208nnm波长长处有最最大吸收收，故选选择2008nmm波长为为检测波波长，见见附图。 图1苦参碱碱对照品品溶液紫紫外扫描描图图2氧氧化苦参参碱对照照品溶液液紫外扫扫描图2、仪器器仪器：AAgillentt 11100ssysttem高高效液相相色谱仪仪；A099.033色谱工工作站3、色谱谱条件色谱柱：Pheenemmoneex CC18 (25004.66mm，5m)流
6、动相：乙腈0.11三氟氟醋酸（55:95）流速：11.0mml/mmin检测波长长：2008nmm柱温：3354、对照照品溶液液的制备备：取苦参碱碱和氧化化苦参碱碱对照品品，经五五氧化二二磷减压压干燥112小时时，各精精密称取取适量，加加10%乙醇制制成每11中中含苦参参碱0.05112mgg、氧化化苦参碱碱0.119244mg的的混合对对照品溶溶液。5、供试试品溶液液与阴性性溶液的的制备5.1 提取取溶剂的的选择取本品（0051005批），剪剪碎，取取约0.3g，精精密称定定，置225mll量瓶中中，分别别按表11中所列列溶剂加加入200ml，超超声处理理10分分钟使溶溶散，放放置过夜夜，超
7、声声处理330分钟钟，放冷冷，用各各溶剂稀稀释至刻刻度，摇摇匀，滤滤过，取取续滤液液，即得得。按上述色色谱条件件，精密密吸取对对照品溶溶液3l及供供试品溶溶液各115l，注注入液相相色谱仪仪，测定定，结果果见表11。表1提提取溶剂剂比较表表编号提取溶剂剂测定结果果（mg/丸）编号提取溶剂剂测定结果果（mg/丸）1水43.99450%乙乙醇34.55210%乙乙醇45.99570%乙乙醇20.11330%乙乙醇41.336乙醇不能溶散散结果表明明：以110乙乙醇为提提取溶剂剂的得率率高，故故选择110%乙乙醇为提提取溶剂剂。5.2提提取时间间的考察察取本品（0051005批），剪剪碎，取取约0.
8、3g，精精密称定定，置225mll量瓶中中，加110%乙乙醇200ml，超超声处理理10分分钟使溶溶散，浸浸渍1小小时，分分别超声声处理660、990分钟钟，放冷冷，用110%乙乙醇稀释释至刻度度，摇匀匀，滤过过，取续续滤液，即即得。按上述色色谱条件件，精密密吸取供供试品溶溶液各115l，注注入液相相色谱仪仪，测定定，结果果见表22。表2不同同提取时时间的含含量测定定结果比比较表提取时间间（分钟钟）6090测定结果果（mgg/丸）48.77747.998结果表明明：提取取60分分钟即可可。综合比较较表1、22的结果果，供试试品溶液液的制备备为：取取本品适适量，剪剪碎，取取约0.4，精精密称定定
9、，置225mll量瓶中中，加入入10乙醇220mll，超声声处理110分钟钟使溶散散，浸渍渍1小时时，超声声处理11小时，放放冷，加加10乙醇稀稀释至刻刻度，摇摇匀，滤滤过，取取续滤液液，即得得。阴性溶液液的制备备：按【处方方】取相相当于00.4gg样品的的除苦参参以外的的其余药药材，按按【制法法】制备备阴性样样品，按按上述供供试品溶溶液制备备方法制制成苦参参的阴性性对照溶溶液。6、测定定法分别精密密吸取对对照品溶溶液3l、阴性性对照溶溶液与供供试品溶溶液各115l，注注入液相相色谱仪仪，测定定，即得得。在选定的的色谱条条件下，经经HPLLC法测测定苦参参碱、氧氧化苦参参碱与样样品中其其它组份
10、份峰可达达基线分分离，且且与其它它相邻峰峰分离度度均大于于1.55，理论论板数按按氧化苦苦参碱峰峰计，不不低于550000，缺苦苦参的阴阴性对照照色谱在在与苦参参碱、氧氧化苦参参碱对照照品色谱谱峰相应应位置上上无干扰扰峰，见见附图。图3当当归苦参参丸的阴阴性样品品HPLLC色谱谱图图4当当归苦参参丸的对对照品HHPLCC色谱图图（RT 9.11：苦参参碱；RRT 115.44:氧化化苦参碱碱）图4当当归苦参参丸的供供试品HHPLCC色谱图图7、线性性关系考考察精密吸取取上述混混合对照照品溶液液1、22、3、44、5、77l进样样，测定定其峰面面积积分分值，以以进样量量为横坐坐标，峰峰面积积积分
11、值为为纵坐标标，绘制制标准曲曲线，线线性回归归方程分分别为：苦参碱碱 Y17771.8893X-00.4552，rr0.99990；氧氧化苦参参碱 YY17773.3766X-59.2799，r0.999999；结果果表明苦苦参碱在在0.0051220.35884g范围围内、氧氧化苦参参碱在00.199241.334688g范围围内具有有良好的的线性关关系。数数据见表表3、44。表3苦参参碱线性性关系考考察结果果表进样量（）0.0512 0.1024 0.1536 0.2048 0.256 0.3584峰面积值值96.817795 1844.8998711 2667.1175008 3355.
12、56 4433.1004066 6445.5587559表4氧化化苦参碱碱线性关关系考察察结果表表进样量（） 0.1924 0.3848 0.5772 0.7696 0.962 1.3468峰面积值值 2280.440098 6226.3340558 9964.742255 113066.0448955 16441.4415 23331.66848818、精密密度试验验精密吸取取同一供供试品（0051005批）溶液15l，重复进样5次，测定苦参碱、氧化苦参碱峰面积积分值，其结果见表5、6。表5精密密度试验验结果表表（苦参参碱）峰面积积积分值4440.608858 4455.3557211 45
13、44.6441055 4558.1100777 4444.655549RSD（%） 1.664表6精密密度试验验结果表表（氧化化苦参碱碱）峰面积积积分值118166.7776255 18809.291102 118122.8000544 18116.8890887 18839.061165RSD（%） 00.644结果表明明：该方方法精密密度好。9、稳定定性试验验分别精密密吸取同同一供试试品（0051005批）溶液15l，于0、3、5、10、15小时进样，测定苦参碱、氧化苦参碱峰面积积分值，结果见表7、8。表7稳定定性试验验结果表表（苦参参碱）峰面积积积分值4440.608858 4544.6
14、441055 4444.6655449 4366.3446622 4435.546675RSD（%） 1.775表8稳定定性试验验结果表表（氧化化苦参碱碱）峰面积积积分值118166.7776255 18112.8800554 18839.061165 18116.997622 118422.1339655RSD（%） 00.766结果表明明，供试试品溶液液在配制制后的116小时时内基本本稳定。10、重重复性试试验取同一批批号样品品（0551055批），按按上述含含量测定定项下的的方法，分分别取55份样，依依法制备备供试品品溶液，依依法测定定并计算算，结果果见表99。表9重复复性试验验结果表表
15、编号12345平均RSD(%)苦参碱含含量（mg/丸）8.9999.1778.9779.1669.0449.0661.033氧化苦参参碱含量量（mgg/丸）38.6638.44639.66738.99339.33039.001.277总量（mg/丸）47.55947.66348.66448.00948.33448.0060.944结果表明明：本法法重复性性好。11、回回收率试试验取已知含含量的本本品（0051005批，每每g含苦苦参碱00.99963mmg、氧氧化苦参参碱4.28446mgg），剪剪碎，取取约0.2g，置置25mml量瓶瓶中，精精密称定定，精密密加入苦苦参碱对对照品溶溶液 (0
16、.004833mg/ml)和氧化化苦参碱碱对照品品溶液（00.33328mmg/mml）各各3ll，各加加入100%乙醇醇14mml，按按上述含含量测定定项下的的方法测测定含量量，结果果见表110、111。表10苦苦参碱回回收率测测定结果果表编 取样样量 样样品中苦苦参 加入入苦参 实测总总 回收收率 平均回回收 号 (g) 碱碱含量(mg) 碱量量(mg) 量(mmg) （%） 率（%） RRSD(%) 1 0.2200330.19995 0.3344441000.000 2 0.2200220.19995 00.33394 96.54 3 0.220322 00.200240.14449
17、00.344781100.34 98.73 1.91 4 0.11850000.18834 0.33256697.51 5 0.22011100.20003 0.3346551000.899 6 0.119022 0.18994 00.33301 997.110表11氧氧化苦参参碱回收收率测定定结果表表编 取样样量 样样品中苦苦参 加入入苦参 实测总总 回收收率 平均回回收 号 (g) 碱碱含量(mg) 碱量量(mg) 量(mmg) （%） 率（%） RRSD(%) 1 0.2200330.85882 11.85565999.998 2 0.2200220.85777 11.85590 100
18、0.299 3 0.220322 00.877060.99884 11.85523998.332 1100.14 1.96 4 0.11850000.79926 1.8829221033.822 5 0.22011100.86616 1.88459998.58 6 0.119022 0.81449 11.81118 999.885结果表表明，本本方法加加样回收收率好。11、成成品与药药材含量量测定结结果11.11 三批批成品含含量测定定结果按拟定的的含量测测定方法法测定三三批成品品中苦参参碱和氧氧化苦参参碱的总总量，结结果见表表12。表12样样品含量量测定结结果表批号0512205051220
19、60512207测定值（mg/丸丸）47.8848.3348.11参照中中国药典典20005年版版一部苦苦参的含含量限度度，暂规规定本品品限度为为每丸含含苦参以以苦参碱碱和氧化化苦参碱碱的总量量计，不不得少于于25.0mgg。三批批样品均均符合规规定。11.22 药药材含量量测定取苦参药药材粉末末（过二二号筛），取取约0.2g，精精密称定定，置550mll量瓶中中，加入入10乙醇440mll，超声声处理110分钟钟，浸渍渍1小时时，超声声处理11小时，放放冷，加加10乙醇稀稀释至刻刻度，摇摇匀，滤滤过，取取续滤液液，即得得。按成品的的含量测测定方法法测定，结结果见表表12。表12苦苦参药材材含
20、量测测定结果果表批号1号2号3号测定值（）2.92.72.6参考文献献：1 中国国药典220055年版一一部毕业论文文（设计计）分项项成绩项次分 项项 内内 容容分数标准准实得分数数1基础理论论与专业业知识的的掌握情情况202规定任务务完成情情况103论文（设设计）论论据是否否正确，论论点有无无创见154独立分析析问题和和解决问问题的能能力155设计、计计算（含含电算）、翻翻译及其其他基本本技能的的熟练程程度106文献资料料检索与与使用参参考资料料及工具具书的能能力107设计图纸纸与说明明书（或或论文）的的质量108答辩情况况10合计100指导教师师评语：指导教师师 评阅教教师 20006年 12 月 30 日答 辩辩 组组 长长 意意 见见签名 年 月 日成 绩绩 评评 定定 指导导教师 答辩组组长 年年 月 日日 年 月月 日日主持答辩辩系意见见盖 章章 年 月 日日主考院校校意见