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1、分子细胞遗传学技术第1页，此课件共62页哦基因诊断的中心问题是认识基因诊断的中心问题是认识遗传变异遗传变异、基因突变基因突变及与及与表型表型之间的关系之间的关系第2页，此课件共62页哦一、分子细胞遗传学技术一、分子细胞遗传学技术第3页，此课件共62页哦荧光原位杂交技术荧光原位杂交技术（fluorescence in site fluorescence in site hybridization,FISHhybridization,FISH）：用荧光物质标记特异性）：用荧光物质标记特异性DNADNA探针，与探针，与中期细胞染色体或间期细胞核杂交，鉴别和确定出生缺陷、中期细胞染色体或间期细胞核杂交
2、，鉴别和确定出生缺陷、肿瘤细胞染色体异常，分辨率可达肿瘤细胞染色体异常，分辨率可达5050500 kb.500 kb.第4页，此课件共62页哦荧光原位杂交技术荧光原位杂交技术（Fluorescence in site Fluorescence in site hybridization,FISHhybridization,FISH）的特异性）的特异性DNADNA探针探针基因座特异性探针基因座特异性探针：克隆扩增获得。在基因制图方面的努力，越来：克隆扩增获得。在基因制图方面的努力，越来越多的这方面探针可以使用越多的这方面探针可以使用着丝粒重复序列探针着丝粒重复序列探针：这些特异性的探针可在中期染
3、色体和间：这些特异性的探针可在中期染色体和间期细胞核中产生强烈信号，可以鉴别特异性染色体。期细胞核中产生强烈信号，可以鉴别特异性染色体。全染色体涂染探针全染色体涂染探针：通过对来自：通过对来自特异性染色体分检库特异性染色体分检库或仅含一条或仅含一条人类染色体的人类染色体的杂种细胞杂种细胞DNA扩增制备。这种扩增制备。这种DNA序列的混合序列的混合物与一条染色体上的多个位点同源。因此在中期核内，整条物与一条染色体上的多个位点同源。因此在中期核内，整条染色体得以被涂染。通过使用不同的荧光素，在一个中期染染色体得以被涂染。通过使用不同的荧光素，在一个中期染色体涂片上可以鉴别几条不同的染色体。色体涂片
4、上可以鉴别几条不同的染色体。第5页，此课件共62页哦应用应用1515号染色体一基因特异性探针号染色体一基因特异性探针（红色）杂交确定其是否缺失；绿（红色）杂交确定其是否缺失；绿色探针鉴定色探针鉴定1515号染色体着丝粒。号染色体着丝粒。2424种不同染色体涂染探针杂交得到种不同染色体涂染探针杂交得到的彩色染色体的彩色染色体第6页，此课件共62页哦染色体技术的染色体技术的应用应用1 1inv(14)(p12q24)t(2;11)(2q34;11q13)第7页，此课件共62页哦细胞遗传学研究中染色体技术的细胞遗传学研究中染色体技术的应用应用FISHFISH技术检出技术检出t(2;14)t(2;14
5、)第8页，此课件共62页哦染色体技术的染色体技术的应用应用2 2inv(9)(p12q13)第9页，此课件共62页哦分子细胞遗传学：分子细胞遗传学：DMD基因第基因第46号外显子缺失号外显子缺失第10页，此课件共62页哦细胞遗传学研究中染色体技术的应用细胞遗传学研究中染色体技术的应用9 9号染色体涂染探针杂交。箭头示号染色体涂染探针杂交。箭头示易位到易位到1010号染色体上的来自号染色体上的来自9 9号染号染色体的片段色体的片段2121号染色体涂染探针号染色体涂染探针FISHFISH杂交，显杂交，显示示2121三体三体第11页，此课件共62页哦比较基因组杂交（比较基因组杂交（comparati
6、ve genomic comparative genomic hybridization,CGHhybridization,CGH）近年在近年在FISHFISH技术基础上发展起来的一种新的分子细胞遗传学技术基础上发展起来的一种新的分子细胞遗传学技术（技术（19921992，KallioniemiKallioniemi）。其基本原理是用不同荧光物质分）。其基本原理是用不同荧光物质分别标记肿瘤细胞别标记肿瘤细胞DNADNA和正常人细胞和正常人细胞DNADNA，然后与正常人中期细胞，然后与正常人中期细胞染色体杂交。染色体杂交。通过检测染色体上两种荧光信号的相对比值，了解肿瘤细胞通过检测染色体上两种荧
7、光信号的相对比值，了解肿瘤细胞DNADNA拷贝数的变化，并可在染色体上定位。拷贝数的变化，并可在染色体上定位。这一技术已广泛这一技术已广泛应用于肿瘤基因组不平衡的检测应用于肿瘤基因组不平衡的检测。第12页，此课件共62页哦比较基因组杂交的原理比较基因组杂交的原理第13页，此课件共62页哦 待测待测DNADNA（肿瘤细（肿瘤细胞胞DNADNA，test DNA)test DNA)为绿色为绿色 参照参照DNA(DNA(正常细胞正常细胞DNADNA，reference DNAreference DNA）为红色）为红色 复染为蓝色复染为蓝色人食管鳞癌细胞株的比较基因组杂交人食管鳞癌细胞株的比较基因组杂
8、交第14页，此课件共62页哦A.A.中期染色体的中期染色体的DAPIDAPI的的 复染图复染图B.中期染色体比较基因组杂中期染色体比较基因组杂 交（交（CGHCGH）：红色区域表示）：红色区域表示 丢失，绿色区域表示扩增。丢失，绿色区域表示扩增。第15页，此课件共62页哦CGHCGH的优点：的优点：经一次染色体原位杂交实验即可在整条染色体或染色体区带水经一次染色体原位杂交实验即可在整条染色体或染色体区带水平对待检基因组平对待检基因组DNADNA序列拷贝数改变进行检测和定位。序列拷贝数改变进行检测和定位。无需进行染色体培养，对于不易制备良好分裂相的实体瘤尤为适用。无需进行染色体培养，对于不易制备
9、良好分裂相的实体瘤尤为适用。所需染色体所需染色体DNADNA可来自各种组织，如新鲜组织、福尔马林固定的组可来自各种组织，如新鲜组织、福尔马林固定的组织、石蜡包埋组织，可在很少量的基础上检测，利于做回顾性研究。织、石蜡包埋组织，可在很少量的基础上检测，利于做回顾性研究。第16页，此课件共62页哦CGHCGH的局限性：的局限性：难以检出以下异常：平衡易位，微小突变，基因难以检出以下异常：平衡易位，微小突变，基因重排，倍体水平改变。重排，倍体水平改变。结果可能受到一些因素影响：正常细胞存在，肿结果可能受到一些因素影响：正常细胞存在，肿瘤自身的遗传异质性，系统的波动。瘤自身的遗传异质性，系统的波动。灵
10、敏度：限于检测较大范围的缺失（灵敏度：限于检测较大范围的缺失（10 10 30MB 30MB）第17页，此课件共62页哦二、突变分析与分子诊断二、突变分析与分子诊断第18页，此课件共62页哦（一）基因突变类型（一）基因突变类型点点突突变变：只只有有一一个个或或几几个个核核苷苷酸酸的的改改变变，是是突突变变中中最多见的形式。最多见的形式。稳定突变稳定突变：传递中不改变原有的突变。：传递中不改变原有的突变。动动态态突突变变：传传递递中中不不断断改改变变自自己己，多多见见于于短短重重复复序序列列的突变，在一代代传递中重复次数发生明显变化。的突变，在一代代传递中重复次数发生明显变化。第19页，此课件共
11、62页哦点突变的结果：点突变的结果：（1 1）同同义义突突变变（samesense samesense mutationmutation）：碱碱基基替替换换后后，虽虽然然密密码码子子发发生生改改变变，但但编编码码氨氨基基酸酸没没有有改改变变（遗遗传传密密码码的的兼兼并并性性），亦称亦称静止突变静止突变。（2 2）错错义义突突变变（missense missense mutationmutation）：碱碱基基替替换换，密密码码子子发发生生改改变后，编码氨基酸亦发生改变，编码另一个氨基酸。变后，编码氨基酸亦发生改变，编码另一个氨基酸。（3 3）无义突变无义突变（nonsense mutation
12、nonsense mutation）：碱基替换后，使编码氨基）：碱基替换后，使编码氨基酸的密码子变成一个终止密码子。酸的密码子变成一个终止密码子。（4 4）中性突变：包含两种情况，即）中性突变：包含两种情况，即“同义突变同义突变”和不改变蛋白和不改变蛋白质功能的质功能的“错义突变错义突变”第20页，此课件共62页哦基因突变形式基因突变形式碱基的插入和缺失碱基的插入和缺失碱碱基基的的插插入入和和缺缺失失：基基因因编编码码序序列列中中插插入入或或丢丢失失一一个个或或几几个个碱碱基基，其其结结果果是是突突变变点点下下游游碱碱基基序序列列发发生生移移码码，编编码码氨氨基基酸酸序序列列都都发发生生改改变
13、变，又又称称移移码码突突变变（frameshift frameshift mutmuta ationtion），并并可可在在突变点下游提前出现终止密码。突变点下游提前出现终止密码。第21页，此课件共62页哦碱基的插入和缺失的结果碱基的插入和缺失的结果：将导致：将导致移码突变移码突变（frameshift frameshift mutmuta ationtion），并可在突变点下游并可在突变点下游提前出现终止密码提前出现终止密码产生产生截短型蛋截短型蛋白白缺失突变缺失突变第22页，此课件共62页哦基因突变形式基因突变形式框框内内突突变变（inframe inframe mutationmutat
14、ion）：3 3个个或或是是的的倍倍数数的的碱碱基基缺缺失失或或插插入入导导致致的的突突变变，使使基基因因丢丢失失或或增增加加1 1个或几个氨基酸。个或几个氨基酸。DNA DNA 大大片片段段缺缺失失或或复复制制（large large deletion deletion or or duplication)duplication)：几几百百个个bpbp至至几几十十个个kbkb的的碱碱基基缺缺失失或或复制。复制。第23页，此课件共62页哦各种类型病理性突变的比例各种类型病理性突变的比例1.1.无义突变和移码突变：无义突变和移码突变：60602.2.稀有的错义突变：稀有的错义突变：20203.3
15、.DNADNA大片段缺失或重复大片段缺失或重复:2020另外：可能和疾病风险评估有关的大量的多态位点另外：可能和疾病风险评估有关的大量的多态位点微小突变微小突变第24页，此课件共62页哦（二）（二）目前常用的对目前常用的对已知已知点突变的分析技术点突变的分析技术限制性片段长度多态性（限制性片段长度多态性（RFLPRFLP）等位基因特异性（等位基因特异性（PCRPCR）扩增（）扩增（ASAASA）等位基因特异性寡核苷酸杂交（等位基因特异性寡核苷酸杂交（ASOASO）DNADNA芯片芯片第25页，此课件共62页哦1.1.限制性片段长度多态性（限制性片段长度多态性（RFLPRFLP）分析）分析当突变
16、影响到某一限制性内切酶位点时，当突变影响到某一限制性内切酶位点时，可通过酶切可通过酶切PCRPCR产物，电泳分析产物，电泳分析:限制性片限制性片段长度多态性（段长度多态性（RFLPRFLP）第26页，此课件共62页哦2.2.等位基因特异性（等位基因特异性（PCRPCR）扩增（）扩增（ASAASA）通过设计两个通过设计两个5 5端引物，一个与正常端引物，一个与正常DNADNA互补，一个与互补，一个与突变突变DNADNA互补。分别加入这两种引物及互补。分别加入这两种引物及3 3端引物进行端引物进行两个平行的两个平行的PCRPCR，分析结果，分析结果。第27页，此课件共62页哦3.3.等位基因特异性
17、寡核苷酸杂交（等位基因特异性寡核苷酸杂交（ASOASO）设计两段寡核苷酸探针，其中包含发生突变的位设计两段寡核苷酸探针，其中包含发生突变的位点，点，一段与野生型链互补一段与野生型链互补，一段与突变型链互补一段与突变型链互补。杂交分析是否存在突变杂交分析是否存在突变第28页，此课件共62页哦4.4.基因芯片：基因芯片：SNP位点的检测位点的检测第29页，此课件共62页哦Microarray-based method for genotyping of functional single nucleotide polymorphisms using dual-color fluorescence
18、hybridization.Mutat Res.2004;548:97-105第30页，此课件共62页哦（三）目前常用的（三）目前常用的未知未知基因突变分析技术基因突变分析技术异源双链体形成分析（异源双链体形成分析（Heteroduplex analysis,HA）单单链链构构象象多多态态性性分分析析（Single-strand conformation analysis,SSCP）变变性性梯梯度度凝凝胶胶电电泳泳（denaturing gradient gel electrophoresis,DGGE）变变性性高高效效液液相相色色谱谱分分析析（Denaturing high performa
19、nce liquid chromatography,DHPLC）第31页，此课件共62页哦体外蛋白截短实验（体外蛋白截短实验（Protein truncation test,PTTPTT）定定量量多多重重PCRPCR技技术术（Quantitative Quantitative multiplex PCR,QM-PCR）多多重重探探针针连连接接依依赖赖性性扩扩增增技技术术（Multiplex Ligation-dependent Probe Amplifcation,MLPA)DNADNA序列分析（序列分析（DNA sequencing)第32页，此课件共62页哦1.1.异源双链体形成分析（异源
20、双链体形成分析（HAHA）由由突突变变型型和和野野生生型型DNADNA链链形形成成的的异异源源双双链链DNADNA在在其其错错配配处处形形成成一一个个凸凸起起，电电泳泳时时会会产产生生与与相相应应的的同同源源双双链链DNADNA不同的迁移率，从而使两者得以分离。不同的迁移率，从而使两者得以分离。技技术术路路线线：PCRPCR产产物物9595 C C变变性性5 5分分钟钟，3737 C C复复性性 1010分分钟。钟。10%10%聚丙烯酰胺凝胶电泳（聚丙烯酰胺凝胶电泳（0.2%0.2%硝酸银染色）硝酸银染色）第33页，此课件共62页哦2.2.变性梯度凝胶电泳（变性梯度凝胶电泳（DGGEDGGE）
21、利用不同利用不同DNADNA序列开始变性时对变性剂浓度的要求不同，在序列开始变性时对变性剂浓度的要求不同，在变性剂浓度梯度凝胶内电泳，野生型变性剂浓度梯度凝胶内电泳，野生型DNADNA和突变型和突变型DNADNA序列序列的差异所导致其变性点不同使两者的电泳迁移率出现的差异所导致其变性点不同使两者的电泳迁移率出现差异差异第34页，此课件共62页哦3.3.单链构象多态性分析（单链构象多态性分析（SSCPSSCP）单单链链DNADNA在在中中性性条条件件下下会会形形成成二二级级结结构构。这这种种二二级级结结构构依依赖赖于于其其碱碱基基的的序序列列。即即使使只只有有一一个个碱碱基基的的不不同同，也也会
22、会形形成成不不同同的的二二级级结构并可引起非变性条件下的电泳迁移率的差异。结构并可引起非变性条件下的电泳迁移率的差异。技技术术路路线线：PCRPCR产产物物9595 C C变变性性5 5分分钟钟，立立即即置置冰冰上上。10%10%聚聚丙丙烯烯酰酰胺胺凝凝胶胶电电泳泳。条条件件：电电泳泳缓缓冲冲液液0.50.5 TBETBE，电电压压70v,70v,4 4 C C环环境境下电泳过夜（下电泳过夜（0.2%0.2%硝酸银染色）。硝酸银染色）。第35页，此课件共62页哦4.4.体外蛋白截短试验（体外蛋白截短试验（PTTPTT）从从蛋蛋白白质质水水平平检检测测基基因因的的突突变变。其其原原理理是是碱碱基
23、基缺缺失失和和插插入入导导致致的的移移码码突突变变、碱碱基基替替换换出出现现的的无无义义突突变变均均可可使使基基因因提提前前出出现现终终止止密密码码，从从而而截截短短mRNAmRNA翻翻译译的的蛋蛋白白质。质。技技术术路路线线：血血细细胞胞RNARNAcDNAcDNART-PCRRT-PCR体体外外蛋蛋白白质质合合成成电电泳泳分分析析截截短短了了的的蛋蛋白白质质相相应应基基因因片片段段的的序列分析序列分析第36页，此课件共62页哦上游引物上游引物5 5端均连接端均连接T7T7启动子序列启动子序列GGATCCTAATACGACTCACTATAGGGAGACCACCATGG GGATCCTAATA
24、CGACTCACTATAGGGAGACCACCATGG 3535SS甲硫氨酸，甲硫氨酸，T7 T7 体外转录体外转录/翻译体系（兔网织红翻译体系（兔网织红细胞提取物），细胞提取物），3030孵育孵育90 min90 min，完成体外蛋白质，完成体外蛋白质合成。合成。SDS-SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳聚丙烯酰胺凝胶电泳 第37页，此课件共62页哦5.5.变性高效液相色谱分析（变性高效液相色谱分析（DHPLCDHPLC）19951995年年Oefner and Underhill Oefner and Underhill 首次报道首次报道DHPLCDHPLC技术。其原理技术。其原理是在接近是在接近
25、DNADNA融解温度条件下进行离子对反相高效液相色谱分融解温度条件下进行离子对反相高效液相色谱分析。析。DHPLCDHPLC分分析析突突变变的的原原理理：在在DNADNA部部分分变变性性的的条条件件下下，变变异异型型和和野野生生型型DNADNA可可形形成成同同源源双双链链和和异异源源双双链链根根据据其其在在层层析析柱柱上上保保留留的的时时间间可可以分辨出变异性型以分辨出变异性型DNA.DNA.第38页，此课件共62页哦用离子对反相高效液相色谱检测用离子对反相高效液相色谱检测DNADNA变异是基于同时存变异是基于同时存在同源双链和异源双链。异源双链的检出取决于高效液在同源双链和异源双链。异源双链
26、的检出取决于高效液相色谱的温度。而色谱温度的选定与野生型相色谱的温度。而色谱温度的选定与野生型DNADNA融解温融解温度（度（TmTm）有关。）有关。DHPLCDHPLC与其它突变分析技术的比较与其它突变分析技术的比较:对单个核苷酸变异对单个核苷酸变异的检出率的检出率:SSCP:SSCP技术技术,约约75%75%；DHPLC,90%.DHPLC,90%.第39页，此课件共62页哦DHPLC的优点：的优点：灵敏，准确；灵敏，准确；分析速度快，单个样本的分析时间仅需几分钟；分析速度快，单个样本的分析时间仅需几分钟；容易实现自动化操作；容易实现自动化操作；适用于较大样本中基因突变的筛选。适用于较大样
27、本中基因突变的筛选。第40页，此课件共62页哦DHPLC分析：（野生型）分析：（野生型）第41页，此课件共62页哦DHPLC分析分析:突变型（单个碱基改变）突变型（单个碱基改变）第42页，此课件共62页哦DHPLC分析分析:突变型（单个碱基改变）突变型（单个碱基改变）第43页，此课件共62页哦6.6.定量多重定量多重PCRPCR技术（技术（Quantitative multiplex Quantitative multiplex PCRPCR，Q-M-PCRQ-M-PCR）目目前前各各实实验验室室普普遍遍采采用用的的突突变变基基因因分分析析技技术术对对基基因因微微小小突突变变的的检检测测具具有
28、有较较高高的的敏敏感感性性，如如对对单单个个碱碱基基改改变变的的检检出出率率可可达达90%90%以以上上。但但对对于于较较大大的的DNADNA缺缺失失或或DNADNA重重复复产产生生的的突突变变，如如以以外外显显子子为为单单位位的的DNADNA缺缺失失，SSCPSSCP、DHPLCDHPLC等等均均难难以以将将其其检检出出。有有资资料料表表明明大大片片段段DNADNA缺失可占基因突变的三分之一缺失可占基因突变的三分之一第44页，此课件共62页哦定量多重定量多重PCRPCR技术要点技术要点：涉及至少涉及至少2 2个基因的多个外显子在一个反应管内同时个基因的多个外显子在一个反应管内同时进行进行PC
29、RPCR扩增，其中一个外显子作为参照外显子，扩增，其中一个外显子作为参照外显子，其余作为检测外显子；其余作为检测外显子；控制控制PCRPCR循环数循环数，使，使PCRPCR产物的增加处于对数增长曲线产物的增加处于对数增长曲线内；内；PCRPCR产物于产物于DNADNA测序仪电泳，其结果经测序仪电泳，其结果经GeneScanGeneScan软件软件处理；处理；第45页，此课件共62页哦以检测外显子以检测外显子PCRPCR产物与参照外显子产物与参照外显子PCRPCR产物的比产物的比值计算模版值计算模版DNADNA相对拷贝数，确定是否存在检测外显相对拷贝数，确定是否存在检测外显子的杂合性缺失；子的杂
30、合性缺失；检出的缺失经其它方法（长片段检出的缺失经其它方法（长片段PCRPCR或缺失断裂点测或缺失断裂点测序）确认。序）确认。第46页，此课件共62页哦7.MultiplexLigation-dependentProbeAmplifcationMLPADenaturedgenomicDNAishybridizedwithamixtureofmorethan40probes.EachMLPAprobeconsistsoftwooligonucleotides,onesyntheticandoneM13-derived.Thetwopartofhybridizedprobesareligated.
31、AllprobeligationproductsareamplifiedbyPCRusingonlyoneprimerpair.ElectrophoresisofPCRproductsonDNASequencerinGeneScanmodel.第47页，此课件共62页哦三、遗传性疾病的诊断三、遗传性疾病的诊断第48页，此课件共62页哦遗传性疾病的诊断：遗传性疾病的诊断：（一）临症诊断（一）临症诊断（二）症状出现前的诊断（二）症状出现前的诊断（三）产前诊断（三）产前诊断第49页，此课件共62页哦（一）（一）临症诊断临症诊断根据就诊患者的临床表现作出（初步）判断：疾病诊断，遗传方根据就诊患者的临床
32、表现作出（初步）判断：疾病诊断，遗传方式式（1 1）症状、体征）症状、体征（2 2）系谱分析）系谱分析部分遗传性疾病的诊断主要依赖于症状、体征部分遗传性疾病的诊断主要依赖于症状、体征对于同时存在散发病例和遗传性病例的复杂性疾病，如肿瘤，建立对于同时存在散发病例和遗传性病例的复杂性疾病，如肿瘤，建立相应的临床可疑病例的判定标准相应的临床可疑病例的判定标准根据不同的遗传性疾病，选择适当的实验室技术分析确诊：根据不同的遗传性疾病，选择适当的实验室技术分析确诊：生化技术、细胞技术、分子技术生化技术、细胞技术、分子技术多用于对多用于对先证者先证者的诊断的诊断第50页，此课件共62页哦Pedigreeof
33、afamily第51页，此课件共62页哦遗传性疾病基因诊断程序遗传性疾病基因诊断程序临床诊断和确定分析对象临床诊断和确定分析对象确定分析的目标基因确定分析的目标基因以检测目标基因的结构确定分析的技术构成和分析过程：以检测目标基因的结构确定分析的技术构成和分析过程：基因微小变异筛查：基因微小变异筛查：SSCP,DGGE,DHPLC,PTT,DNASSCP,DGGE,DHPLC,PTT,DNA测序分测序分析析基因大片段变异（缺失或重复）的分析基因大片段变异（缺失或重复）的分析检出变异的性质评估和患者家族的遗传咨询。检出变异的性质评估和患者家族的遗传咨询。第52页，此课件共62页哦DHPLCDHPL
34、C突变分析突变分析第53页，此课件共62页哦体外蛋白截短试验体外蛋白截短试验（PTTPTT）HNPCC HNPCC遗传性突变遗传性突变第54页，此课件共62页哦DNADNA序列分析序列分析碱基替换碱基替换第55页，此课件共62页哦DNADNA序列分析序列分析移码突变移码突变第56页，此课件共62页哦DHPLCDHPLC外显子缺失外显子缺失第57页，此课件共62页哦APC APC 基因型和患者临床表型关系的研究基因型和患者临床表型关系的研究(1)APC(1)APC基因胚系突变与基因胚系突变与FAPFAP临床表型的相关临床表型的相关 :位于位于第第13091309位位密码子附近的突变，患者临床症密
35、码子附近的突变，患者临床症 状严重。状严重。(2)APC(2)APC基因体细胞突变与基因体细胞突变与CRCCRC生物学特征：生物学特征：APCAPC基因体细胞突变基因体细胞突变有转移有转移无转移无转移含含11141114密码子突变的密码子突变的CRCCRC患者患者 50未见未见11141114密码子突变的密码子突变的CRCCRC患者患者5（38.5%)8FisherFishers exact test:s exact test:P=0.03P=0.03 第58页，此课件共62页哦（二）症状出现前的诊断（二）症状出现前的诊断应用于发病年龄延迟的遗传性疾病。应用于发病年龄延迟的遗传性疾病。应用于已
36、知遗传性疾病家族的目前表型正常的个体。应用于已知遗传性疾病家族的目前表型正常的个体。单基因显性遗传病的杂合子个体。单基因显性遗传病的杂合子个体。动态突变的分析。动态突变的分析。结合于遗传咨询工作。结合于遗传咨询工作。第59页，此课件共62页哦对家庭其他人员进行症状出现前的基因分析对家庭其他人员进行症状出现前的基因分析A.A.异源双链体异源双链体形成分析（形成分析（HDHD）B.B.单链构象单链构象多态性分析多态性分析（SSCPSSCP）AB第60页，此课件共62页哦（三）产前诊断（三）产前诊断分析指征分析指征（1 1）夫妇之一存在染色体畸变，或曾生育染色体病患儿；）夫妇之一存在染色体畸变，或曾生育染色体病患儿；（2 2）有畸形儿生育史；）有畸形儿生育史；（3 3）有原因不明的习惯性流产孕妇；）有原因不明的习惯性流产孕妇；（4 4）夫妇之一有先天性代谢缺陷，或曾生育这类患儿；）夫妇之一有先天性代谢缺陷，或曾生育这类患儿；（5 5）X X连锁遗传病基因携带者孕妇连锁遗传病基因携带者孕妇（6 6）有遗传病家族史，有系近亲婚配的孕妇）有遗传病家族史，有系近亲婚配的孕妇出生缺陷监测出生缺陷监测第61页，此课件共62页哦Thanks!第62页，此课件共62页哦